CIENCIAS DE LA VIDA

Autor: ULLOA DARQUEA FAUSTO ALEXANDER.
Año: 2001.
Universidad: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: Fac.de Medicina, UAB. Hosp. del Mar..
Centro de realización: INSTITUT MUNICIPAL D'INVESTIGACIÓ MÈDICA.

Resumen: El benzil GalNAc fue descrito inicialmente como un inhibidor de la O-glicosilación de tipo mucina (Kuan et al., 1989). El tratamiento crónico de células mucosecretoras HT-29 M6 con este fármaco produjo una serie de efectos entre los que destacan: i) reducción de la proliferación, ii) inhibición de la secreción de mucinas, iii) acumulación de glicoproteínas apicales en vesículas citoplasmáticas electronlúcidas y, iv) reducción de la sialilación de glicoproteínas (Huet et al., 1998; (Hennebicq-Reig et al., 1998). El benzil GalNAc también inducía estos efectos sobre la población HT-29 parental y sobre otras poblaciones celulares derivadas de ésta, independientemente de su fenotipo. El benzil GalNAc es metabolizado a benzil GalNAc-Gal, el cual a su vez inhibe competitivamente la actividad a2,3 sialiltransferasa de células HT-29, la actividad sialiltransferasa mayoritariamente expresada en estas células. Como resultado de ésto, se sintetizan compuestos sialilados como benzil GalNAc-Gala2, 3Neu5Ac (huet et al., 1995); Delannoy et al., 1996). Por otro lado, el tratamiento con benzil GalNAc no afectaba sensiblemente a las células Caco-2, las cuales expresan fundamentalmente a 2.6 sialliltransferasas, enzimas que no son inhibidas por los metabolitos derviados del benzil GalNAc (Huet et al,1998). El objetivo de este trabajo ha sido determinar el factor(es) responsable(s) del origen del fenotipo de células HT-29 tratadas crónicamente con benzil GalNAc. Más concretamente, nos interesó determinar cómo un inhibidor de glicosilación produce tanto efectos diferentes y si el efecto de este inhibidor estaba restringido o no a células derivadas de HT-29. La hipótesis que se manejó inicialmente proponía que los efectos globales del tratamiento con benzil GalNAc podrían estar causados por lahiposialilación de glicoproteínas. Esta hipótesis se basaba en el supuesto de que el ácido siálico fuese requerido para el trasnporte/sorting de glicoproteínas apicales. En ausencia de ácido siálico estas glicoproteínas se acumularían en trasponrtadores exocíticos derivados del TGN, los cuales corresponderían a las vesículas citoplasmáticas electronlúcidas (vesículas-BG). De manera compatible con esta hipótesis, encontramos,mediante análisis con lectinas, que el ácido siálico ligado en posición a 2.3 se distribuía fundamentalmente en la membrana apical de células epiteliales en cultivo y en tejidos. Notariamente, el ácido siálico ligado en posición a 2.6 mostraba una distribución más amplia, pudiendo localizarse tanto en la membrana apical como en la basolateral. El estudio de los efectos del benzil GalNAc sobre un panel de líneas celulares mostró que la presencia y severidad de los mismos dependían deltipo celular pero no estaban restringidos a células HT-29. Así, en las celulas IMIM-PC-1 tratadas con benzil GalNAc se observaron efectos similares a los descritos en células HT-29. Notariamente, en estas células se acumulaban intracelularmente glicoproteínas apicales, como MUC1, y basolaterales, como b1 integrina. MUC1 y b1 integrina colocalizan parcialmente en las mismas vesículas, sugiriendo que éstas no pueden corresponder a estructuras exocíticas, puesto que glicoproteínas apicales y baslaterales se transportan en vesículas diferentes (Kellelr et al., 2001). El análisis del procesamiento de glicoproteínas en células HT-29 M6, mostró que el benzil GalNAc afectaba al procesamiento de glicoproteínas apicales y lisomales.Así, en células tratadas con este inhibidor se inducía un retraso en la maduración de la catepsina D y un bloqueo de lamaduración de la a-glucosidasa lisosomal (AAG) en un comportamiento acídico post-TGN. En células tratatas con benzil GalNAc, la AAG se procesaba hacia una forma aberrante que migraba entre las formas intermedia y madura esta enzima. Análisis a diferentes concentraciones y tiempos de tratamiento con el inhibidor, mostraron que condiciones experimentales que resultaban en la inhibición de la sialilación no implicaban necesarimente el aparecimiento del resto de efectos observados en estas células, indicando, contra lo inicialmente postulado, que lahiposialilación 8 de glico c3d proteínas no es la calusa del fenotipo global de células tratadas con benzil GalNAc. El tratamiento con benzil GalNAc afectaba a la urta endosomal en células IMIM-PC-1 y HT-29 M6. Así, el benzil GalNAc inducía una disminución de la endocitosis y la acumulación de material internalizado desde la membrana plasmática en células IMIM-PC-1. En células IMIM-PC-1, este material colocalizaba con las vesículas positivas para MUC1 o b1 integrina. Marcadores de endosomas tardíos como, Rab7 y LBPA, pero no de endosomas primarios (Rab5, EEA1) y de Golgi (GRASP65,TGN46), colocalizaban con la b1 integrina de las vesículas. El conjunto de los resultados obtenidos indica que las vesículas-BG corresponden a una población heterogénea de ensomas aberrantes, relacionados con endosomas tardíos. Las características fenotípicas de las células tratadas con benzil GalNAc reproducen parcialmente los defectos descritos en células de algunas enfermedades de depósito lisosomal (EDL), concretamente las que se producen por la acumulación de sacáridos en compartimentos degradativos. Así, la morfología de las vesículas-BG es similar a la de las que seoriginan en células tratadas con sacarosa (sacarosomas) y varias EDL como la sialidosis o la infantile sialic acid storage disease (ISSD). Análisis del procesamiento de la AAG en fibroblastos de pacientes con ISSD mostraron defectos similares a los encontrados en células HT-29 tratadas con benzil GalNAc. Además, las células tratadas con benzil GalNAc también acumulan LBPA y colesterol, hallazgos característicos de algunas EDL. Confirmando la idea de que el benzil GalNAc induce un fenotipo de depósito lisosomal, el tratamiento con sacarosa en células IMIM-PC-1 produjo cambios sobrela morfología de las células y la acumulación intracelular de MUC1 y b1 integrina, de manera semejante a lo observado en las células tratadas con benzil GalNAc. La sialilación de glicoproteínas en células IMIM-PC tratadas con sacarosa no estaba alterada, resultado queindica que la hiposialilación no es un requisito pra la acumulación intracelular de glicoproteínas de membrana. Dado que células tratadas con benzil GalNAc acumulan una gran cantidad de oligosacáridos derivados de esta droga, situación análoga a la que ocurre en células tratadas con sacarosa y algunas EDL, proponemos que la acumulación de estos metabolitos, y no la hiposialilación de glicoproteínas, es la que origina el fenotipo global de células HT-29 e IMIM-PC-1 tratadas con este fármaco.

Autor: PASCUAL PEÑA EMILIANA ESTHER.
Año: 2003.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA - UCM.

Resumen: Las úlceras crónicas de las extremidades inferiores suponen un importante reto sociosanitario debido a su elevada prevalencia, la dificultad de su tratamiento y sus altos costes sociales y económicos. El cierre definitivo mediante curas tópicas y postulares raramente es espontáneo, y suelen precisar injertos o colgajos que no siempre tienen buen resultado. Los cultivos de querantinocitos se presentan como una alternativa terapéutica. En este trabajo valoramos dos tipos de transportadores para epitelio cultivado: gasa vaselinaza y gel de fibrina. HIPÓTESIS Dado que el gel de fibrina aporta factores de crecimiento involucrados en la regeneración de heridas y tiene una mayor consistencia, su utilización como matriz transportadora del cultivo de queratinocitos debe mejorar la calidad de la cobrtura de úlceras crónicas en extremidades inferiores. OBJETIVOS 1,- Comparar los resultados clínicos del empelo de láminas de queratinocitos cultivados, transportadas en gasas vaslinadas y en el gel de fibrina, para la cobertura de úlceras crónicas en extremidades inferiores. 2,- Análisis de los tiempos de manipulación con los dos tipos de transportadores. 3,- Análisis coste-eficacia de los dos medios transportadores. RESULTADOS Los resultados en el grupo de fibrina indican que se necesita significativamente menos tiempo (p menor 0,001) que en el grupo de gasa para conseguir la curación comppleta de la lesión de un paciente. El índice 1 (I1) relaciona el tiempo de cierre con la superficie, para expresar cuánto tiempo es necesario para que cicatrice 1cm2 de la úlcera. El índice 2 (I2) relaciona el número de injertos con la superficie, y expresa cúantos injertos son ncesarios para la curación completa de 1cm2 de la lesión. Los resultados para ambos índices han demostrado diferencias estadísticamente significativas entre los dos tipos de tratamiento (p menor 0,002 en el I1 y p menor 0,001 en el I2), siendo el grupo de fibrina el que precisa de menos tiempo y menos injertos para la curación de 1cm2. El análisis coste-eficacia demuestra en nuestra población que se necesita un menor número de injertos y menos tiempo para cubrir 1cm2 de lesión en el grupo de tratamiento con fibrina. Además, los costes de producción son menores en el grupo de fibrina. Sin embargo la diferencia entre ambos grupos no es estadísticamente significativa. CONCLUSIONES Los resultados obtenidos permiten afirmar que la utilización del gel de fibrina como elemento transportador de láminas de queratinocitos cultivados para la curación de úlceras crónicas de extremidades inferiores: 1,- Aumenta la proliferación celular, obteniéndose antes los injertos listos para el cultivo. 2,- Elimina el tratamiento enzimático durante el proceso de separación de las láminas del frasco de cultivo. 3,- Reduce significativamente el tiempo de manipulación del cultivo. 4,- Disminuye significativamente el tiempo de curación de 1cm2 de úlcera crónica. 5,- Reduce significativamente los costes de producción de las láminas. 6,- Aumetna la eficacia, al ser necesarios menos injertos para cubrir los defectos cutáneos.

Autor: GONZÁLEZ HOYUELA ALONSO MARITZA CLARA.
Año: 2003.
Universidad: AUTÓNOMA DE MADRID.
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS, UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE MADRID.

Autor: CASES GONZÁLEZ CLARA ELISA.
Año: 2003.
Universidad: AUTÓNOMA DE MADRID.
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: La retrotranscriptasa(RT)del virus de la inmunodeficienciahumanatipo 1 (HIV-1)es una enzimamultifuncionalcon actividades ADN polimerasa dependiente de ADNy ARN,RNasa H, y transferencia y despazamiento de hebra. Es un heterodímero compuesto por dos subunidades, p66 y p51, que contienen los subdominios denominados "fingers, "thumb", "palm" y "connection", y un dominio RNasa Hen la subunidad mayor. Los resíduos Ala-114 y Tyr-115,junto con otros residuos como Asp-113 y Gln-151, forman el bolsillo que acomoda el grupo 3'-OHdel nucleótido entrante. El residuo Met-230se encuentra localizado en una región muy conservada denominada "primer grip", respondable del mantenimiento del extremo del iniciador en una posición apropiada para que se lleve a cabo el ataque nucleofílico sobre un dNTP entrante. En esta Tesis Doctoral se ha estudiado el efecto de mutaciones en las posiciones 114, 115 Y230 sobre la fidelidad de síntesis de ADNy la especificidad de nucleótido en diferentes condiciones, utilizando para ello ensayos bioquímicos de incorporación de nucleótido basados en gel así como un nuevo ensayo genético para medir la frecuencia de mutación G/A durante la síntesis de ARNdependiente de ADN.%&/Sustituciones no conservadas de la Tyr-115 provocan una disminución en la fidelidad de síntesis de ADNen presencia de Mgcomo cofactor. La presencia de Mntiene un efecto mutagénico en la polimerización de ADN,que opera principalmente a nivel de la extensión de extremos desapareados. Es necesario un aminoácido aromático en la posición 115 para discriminar frente a nucleótidos que contienen un grupo 2'-OH, participando la Tyr-115 como barrera estérica. Las sustituciones de Ala-114 no parecen influir sobre la fidelidad de la enzima,aunque este aminácido sí que contribuye en la discriminación frente a ddNTPs. Mutantes en la región del "primer grip", como M2301y M230L,se comportan como altamente mutagénicos en presencia de concentraciones desequilibradas de dNTPs, al utilizar un ensayo de fidelidad genético que mide la frecuencia de mutación G/A.

Autor: MORÁN GRACÍA JOSÉ M..
Año: 2003.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Autor: TAMAYO HURTADO MANUEL GABRIEL.
Año: 2003.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS DE LA EDUCACIÓN.
Centro de realización: CATÓLICA DEL MAULE, TALCA, CHILE..

Resumen: La evolución biológica da sentido a la Biología y permite explicar las características del mundo que nos rodea. Sin embargo, constituye una de las áreas más complejas y de mayor dificultad en un curso de Biología, y en diferentes países existen movimientos que han desencadenado una fuente oposición a su enseñanza, presión que ha llevado a reducirla progresivamente o a tergiversrla. Se examna esta situación en la educación media chilena. Se entrega una revisión de antecedentes acerca del origen de la biología evolutiva y su enseñanza, del conflicto religioso que generó y los principales hitos en la historia del la educación en Chile. Se revisó la información con el objeto de formar un panorama claro acerca de tres aspectos interrelacinados: Chile, para el último nivel de enseñanza secundaria o media, se evaluó la pugna entre posiciones evolucionistas y antievoucionistas reflejadas en los contenidos, se relacionó la ideología de los qutores con su posición frente al evolucionismo, se determino la importancia relativa dad al tema evolutivo en la enseñanza media, la contribución de los textos de estudio chilenos al desarrollo de las ideas evolucionista, el avance del conocimiento científico y su manifestación en la enseñanza de la evolución. Se compararon diversas edicinos de os textos para analizar los cambios introducidos ne los contenidos, se hizo una revisión de los temas de Biología Evolutiva considerados en textos publicados desde fines del período de la síntesis y se estimó la veracidad e las afimaciones. Se clasificaron los cientificos mencionados de acuerdo con su relevancia y en relación con las escuelas evolutivas que presentan. En algunos textos de estudio se encontraron razonamientos deterministas y explicaciones teleológicas y antropocéntrisa. A veces son escasas o faltan las conexiones entre la biología evolutiva y los fenómenos que pueden explicar. No se analizan, o se discuten superficialmente, los conceptos de hechos científicos y de teorías y las relaciones entre biología evolutiva y religión. El lenguaje puede contribuir a reforzar ideas lamarquistas o sobre la supuesta sobrevivencia de los más fuertes. Otros aspectos dificitarios son no relsiconar el lamarquismo con las concepcione de los estudiantes ni del fijismo con el creacionismo actual, no asociar la genética con la evolución, no hacer mención alguna a las ideas sinteticistas. En algunos casos se presentan dudas respecto a si la evolución abarca a todos los seres vivos. Ser revisaron las didicultades par la compresión de la teoría de la Evolución, las concepciones alternativas de los estudiantes, la confusión entre el lenguaje científico y el lenguaje común, el rechazo a la evolución biológica peor motivos religiosos y las razones que a veces en duda el carácter científico de la Teória de la Evolución. De acuerdo con los análisis efectuados, a los textos de estudio relativos al tema de la evolución biológica se les puede exigir el cumplimiento de ciertos aspectos, tales como definir evolución biológica adecuadamente, aclarar su campo de acción, aclarar el alcance del témino "teoría" en relación con la evolución, explicar adecuadamente las principales pruebas de la evolución, discutir los distintos tipos de "adaptación", explicar y ejemplificar adecuadamente el lamarquismo y el darvinimo, etc. Se realiza una propuesta de enseñanza de la Evolución Biologíca a partir del análisis del desarrollo histórico, según los textos publicados y los diferentes aspectos revisados.

Autor: López Lasala Beatriz.
Año: 2003.
Universidad: AUTÓNOMA DE MADRID.
Centro de lectura: Facultad de Ciencias.
Centro de realización: Facultad de Ciencias, Universidad Autónoma de Madrid / Facultad de Ciencias, Universidad de Chile.

Resumen: El objetivo principal de esta tesis fue evaluar si existía variación en la conducta de reconocimiento químico entre individuos del mismo sexo de la especie insular L.Z. ater y explicar las variaciones en un contexto filogeográfico. Para ello: 1) se determinaron las relaciones filogenéticas del grupo Nigromaculatus mediante análisis de secuencias del citocromo b del ADN mitocondrial; 2) se establecieron las relaciones filogeográficas de las poblaciones insulares de L.z. atrer de la IV región de Chile, utilizando el mismo marcador que en el caso anterior; 3) se analizaron los semioquímicos que forman parte de las secreciones precloacales de L.z. ater procedentes de las islas Tilgo, Totoralillo y Chungungo, cuando los individuos de cada población fueron enfrentados químicamente con individuos del sexo contrario, de su misma población y de otras poblaciones. Los análisis de secuencias de ADN mitocondrial confirman que la especie L. platei no pertenece al grupo Nigromaculatus. El origen de este grupo se establece en el Mioceno, aunque los procesos que dieron lugar a las especies actuales se habrían producido durante el Pleistoceno. El grupo Nigromaculatus estaría constituido por las especies L. atacamentsis, L. bisignatus, L. copiapoensis, L. silvai, L. nigromaculatus, L. kuhlmani y dos nevas especies: sp. nova 1 sp. nova 2. Así mismo, el estatus taxonómico de las especies L.Z. zapallarensis y L.Z. ater debe ser revisado. Sobre la base del análisis del citocromo b ambas subespecies constituyen dos especies distintas. La zona de contacto geográfico entre ambas especies se establecería alrededor de los 29,5º de latitud Sur para las poblaciones continentales, y en la isla Tilgo para las formas insulares. Ambas especies se habrían originado a partir de dos núcleos ancestrales independientes durante el Plioceno medio, que habrían colonizado las islas durante los periodos interglaciares pleistocénicos cuando las masas glaciares provocaron una disminución en el nivel del mar que permitió la conexión de estas islas con el continente. No ha sido posible establecer relación directa entre la historia filogeográfica del complejo insular Tilgo, Totoralillo y Chungungo con los resultados obtenidos del análisis de las secreciones precloacales y la conducta de reconocimiento químico. La composición química de las secreciones precloacales es similar a la caracterizada en otras especies de Liolaemus pero difiere en la ausencia de compuestos de bajo peso molecular y en la presencia de compuestos metilados. Estas diferencias estarían relacionadas con las condiciones ambientales del hábitat que permitirían una mejor detección de la señal química. La comparación interpoblacional de las secreciones precloacales sugiere que nos encontramos en estados iniciales de divergencia química. Estos datos iniciales se caracterizarián por presentar un número elevado de compuestos químicos y bajos niveles de diferenciación química. Entre las poblaciones de las islas Tilgo, Totoralillo y Chungungo existe concordancia entre los resultados obtenidos º del análisis de las secreciones precloacales y el análisis de la conducta. Los bajos niveles de diferenciación química detectados sugieren que es más la deriva que la selección, la principal fuerza responsable del cambio evolutivo, tanto en la composición como en la detección de las señales químicas. Bajo determinadas condiciones climáticas, como son la alta humedad relativa y una reducida radiación solar, los lagartos podrían aumentar la eficiencia en la captación de las señales químicas haciendo uso simultáneamente de los sistemas VNO y MO.

Autor: OUARDANI FATIMA EL.
Año: 2003.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMAICA UNIVERSIDAD DE GRANADA.

Resumen: Puesto a punto de técnicas para la diagnósis mediante caracteres anatómicos de 90 especies medicinales pertenecientes a 9 familias botánicaS: Apiaceae (3 especies), Asteraceae (29 especies). Elerberidaceae (1 especie), Caryophytlaceae (6 especies), Ericaceae (1 especie), Fabaceae (6 especies), Lamniaceae (37 especie), Rhamnaceae (3 espeices) y Rosaceae (4 especies). Aportamos una identificación y sistematización de los elementos anatómicos considerados clave para la diagnósis de los taxones y en base a estos elementos hemos presentado una propuesta de claves sistemáticas para la identificación del material vegetal sea cual sea el estado en que se encuentra. La memoria de 733 páginas es ilustrada con 90 figuras y 37 láminas en color.

Autor: JIMENEZ SEGOVIA EDUARDO TERENCIO.
Año: 2003.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: En el área Mediterránea, con altas temperaturas y elevada evapotranspiración en verano, la remolacha azucarera (B.vulgaris) se siembra en otoño (siembra otoñal) y se cosecha al final del período primaveral y comienzos del verano. En regiones templadas, el cultivo de la remolacha se siembra en primavera (siembra primaveral) y se cosecha en otoño. Con esta práctica agrícola la remolacha otoñal evita las altas temperaturas durante una etapa temprana de desarrollo. Por el contrario, sufre altas temperaturas y déficit hídrico durante el período de la cosecha. Este hecho provoca en la planta respuesta a estrés que están a menudo asociadas a altos niveles de compuestos como glucosa, fructosa, alfa-amonio, Na y K, que conllevan un descenso en la calidad de la raíz. En sta tesis se han estudiado aspectos fisiológicos relacionados con la pérdida de calidad en la remolacha de siembra otoñal. Se observa un aumento de los niveles deprolina en el período de recolección, siendo esto indicativo de la situación de estrés hídrico en la que se encuentra la planta. Durante este período también se produce acumulación de glucosa que está relacionada con un aumento de la actividad invertasa ácida (una enzima que hidroliza la sacarosa). En el período de cosecha se observa que altos niveles de nitrógeno en planta coinciden con aumentos de los niveles de glucosa y descenso del contenido de sacarosa en la raíz. Este hecho podría estar relacionado con un aumento de la actividad invertasa ácida y sacarosa sintasa respectivamente. Así, estos datos muestran que el estrés que sufre la remolacha en siembra otoñal reduce la calidad y la producción de azúcar en la raíz. El exceso de nitrógeno incrementa la superficie de la hoja, la transpiración y por tanto el estrés que sufre la planta. Este estrés tiene consecuencias dramáticas sobre la calidad y la producción de azúcar en el cultivo otoñal de la remolacha. En este trabajo se muestra que las variedades de "hoja estrecha", con una transpiración más reducida, sufren menos estrés presentando niveles de prolina y de azúcares reductores más bajos durante el período de recolección, lo que mejora la calidad de la raíz. Posteriormente se estudia el estado metabólico en el que se encuentra la remolacha de siembra otoñal frente al de la siembra primaveral, comparando los niveles de adenilatos que hemos determinado en la raíz de la siembra otoñal frente a niveles de adenilatos determinados en siembra primaveral. Los resultados muestran un estado metabólico más activo en las remolachas recolectadas en la siembra otoñal (verano), con fotoperíodos largos y altas temperaturas, frente a un estado metabólico menos activo en remolachas recolectadas en siembra primaveral (octubre-noviembre), donde la planta va a comenzar la dormición en respuesta a señales ambientales como fotoperíodos cortos y descenso de las temperaturas. Finalmente, se presentan una serie de nuevos tratamientos aplicados al cultivo de la remolacha de siembra otoñal orientados a interferir en las respuestas a estrés de la planta, principalmente acumulación de prolina y de azúcares reductores, que se producen en el período de recolección. Estos tratamientos innovadores podrían reducir la pérdida de calidad de la raíz de remolacha en los cultivos de siembra otoñal.

Autor: PRATS RUIZ M. TERESA.
Año: 2003.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: Se ha investigado la influencia de los principales efectores alostéricos (Ins-P5, ATP, 2,3-BPG, CO2, H+, Cl- y Tª) sobre la afinidad hemoglobina-oxígeno (Hb-O2) en dos tipos de vertebrados que utilizan modelos alostéricos particulares: 1,- La codorniz (Coturnix coturnix japonica) como modelo de ave, caracterizada por usar como regulador eritrocitario de la afinidad Hb-O2 un fosfato desligado de las principales vías energética de las células: el Ins-P5. 2,- La cabra (Capra pyrenaica hispánica), rumiantes y caso singular dentro de los mamíferos ya que sus eritrocitos carecen de fosfatos orgánicos reguladores de la afinidad Hb-O2 y modulan la afinidad por C1- al presentar sus cadenas beta sustituciones de aminoácidos que la hacen menos sensible a los fosfatos. Ambos grupos son de interés ya que presentna demandas metabólicos relativamente elevadas y han sido poco estudiados en lo que se refiere a la regulación molecular del transporte de O2 en dos modelos funcionales diferentes, como son las aves y los mamíferos, permite contrastar los aspectos diferenciales de ambos y ampliar la información existente para poder resolver algunas cuestiones pendientes de clarificar en la modulación alostérica de dichos tipos de Hbs. Para la realización del presente trabajo se han puesto a punto una serie e técnicas cromatográficas con el objetivo de: aislar, purificar y separar las diferentes Hbs, y aislar y purificar el Ins-P5, para su posterior utilización en los experimentos de modulación alostérica (Prats y Riera, 1994. Anal. Biochem. 221:335-339). Los estudios de afinidad Hb-O2 se han realizado mediante dos metodologías diferentes; método polarográfico (Neville, 1974; Hughes y cols. 1988) y métodos tonométrico (Giardina y Amiconi, 1981), éste último utilizado en una estancia en la universidad de Tor Vergata de Roma con los Dres. S. Condó y B. Giardina. También se ha tenido la oportunidad de caracterizar el transporte de oxigeno en sangre de dos especies salvajes y compararlos con sus homónimos domésticos: * Se han estudiado las posibles adaptaciones en el transporte de O2 en poblaciones de codorniz salvaje autóctonas (coturnix coturnix coturnix) durante su nomadismo desde zonas a nivel del mar hasta unos 1.200 m de altitud (Prats y cols. 1995. Physiol. Zool. 69(4): 912-929), comparándolas con las de la codorniz doméstica (Coturnix coturnix japonica). * Se han estudiado las posibles adaptaciones en el transporte de O2 en poblaciones de cabra salvaje autóctonas (Capra pyrenaica hispánica), comparándolas con las de la cabra doméstica (Capra hircus sp.). El presente trabajo aporta un conocimiento detallado y novedoso de la regulación molecular de la afinidad Hb-O2, que permitirá una mayor comprensión de los cambios observados en el transporte de oxígeno a nivel molecular en diferentes situaciones fisiológicas. También evidencia adaptaciones en el transporte de oxígeno de poblaciones de animales salvajes que se ven sometidas a un mayor grado de actividad y de influencia de diferentes factores ambientales y conductuales.

Autor: Armengol Barnils MMa. del Pilar.
Año: 2003.
Universidad: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: UNIVERSITAT AUTÃ’NOMA DE BARCELONA.
Centro de realización: Unitat Docent UAB Hosp. Germans Trias i Pujol.

Resumen: Malalties autoimmunitàries de la tiroide (AITD) és un terme que inclou diverses formes clíniques com la tiroïditis de Hashimoto (HT) i la malaltia de Graves-Basedow (GD). Un tret comú és la producció d'anticossos contra algun dels autoantígens principals específics de la tiroide (tiroglobulina (Tg), tiroperoxidasa (TPO) o receptor de la tirotropina (TSHR)). Histològicament la HT es caracteritza per una infiltració limfocitària que progressivament va substituint els fol.licles tiroïdals. Els infiltrats limfocitaris també són presents a la malaltia de GD però la majoria de la tiroide roman intacta i de vegades només s'observen signes d'hiperfunció glandular. Els infiltrats limfoides sovint s'organitzen com estructures similars als fol.licles limfoides secundaris (LFs) dels nòduls limfàtics que contenen centres germinals (GCs). Els LFs canònics amb GCs són estructures crucials en el desenvolupament de respostes immunitàries donat que són formacions en les que les cèls suporten hipermutacions somàtiques (SHM) i maduració per afinitat. Donat que la SHM i els reordenaments secundaris que tenen lloc als LFs poden generar cèls B autoreactives i que es requereixen mecanismes de tolerància per mantenir l'autoreactivitat sota control, hem estudiat la presència i el paper que juguen aquestes estructures en el manteniment de les AITDs. Demostrem que els limfòcits B presents a l'infiltrat tiroïdal no estructurat són principalment B-2 i expressen CD23, CD50 i CD54. A més, els LFs són presents al 50% dels teixits tiroïdals de GD i al 100% dels HT. El seu desenvolupament correlaciona amb el grau d'infiltració limfocitària i amb els títols sèrics d'autoanticossos. Els LFs ectòpics intratiroïdals contenen GCs interns (amb limfòcits B, T i cèls dendrítiques fol.liculars (FDC)) envoltats per una zona de mantell formada per limfòcits B, T i cèls dendrítiques madures. També demostrem la funcionalitat d'aquestes estructures analitzant la proliferació de centroblastes, els reordenaments secundaris dels gens de les Igs (V(D)J), l'apoptosi (TUNEL) i l'expressió de molècules relacionades amb el canvi d'isotip. D'acord amb els canònics, les cèls B i plasmàtiques intratiroïdals reconeixen específicament autoantígens tiroïdals i produeixen anticossos en cultiu contra aquestes dues molècules quan són immortalitzades. Com s'espera, els limfòcits B intratiroïdals són oligoclonals i els reordenaments de les seves Igs són dirigits per antigen. Les molècules i els corresponents receptors que se sap que estan involucrats en la formació i segregació de les cèls a l'interior dels LFs (CD50, CD54, LTa, LTb, IFNg, LTbR, CCL21-CCR7, CXCL12-CXCR4, CXCL13-CXCR5 i CCL22) també s'han estudiat per RT-PCR a temps real. Algunes com (LTa, IFNg, CXCL12 i CCL22) estan hiperexpressades a les glàndules amb autoimmunitat mentre que CXCL13 és d'expressió restringida a les que presenten LFs intratiroïdals. CXCL12 és secretat principalment pels tiròcits i la seva expressió està regulada per citocines pro-inflamatòries com IL1b, TNFa i IFNg. Finalment, i com a un dels resultats més interessants, es demostra una disminució de la proporció de cèls T CXCR4+ i CCR7+ circulants i una reducció menys marcada de limfòcits B CXCR5+ a les AITDs en malalts amb GCs ectòpics cosa que constitueix un marcador d'activitat de resposta immunitària contra antígens tiroïdals i pot ser útil pel seguiment clínic de les AITDs.

Autor: GARCÍA VILLADA LIBERTAD.
Año: 2004.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: Actualmente, el nivel de contaminación ambiental es una amenaza para el mantenimiento de los ecosistemas. Las microalgas son un grupo de productos primarios básico en el funcionamiento y la estructura de los ecosistemas acuáticos y edáficos. Estudios previos han demostrado que los contaminantes representan un riesgo para estos microorganismos. Sin embargo, se desconoce cuál es la capacidad de las microalgas para adaptarse a los actuales niveles de contaminación. En la presente tesis se ha investigado la capacidad y los mecanismos de adaptación de las poblaciones microalgales a fenómenos de contaminación aguda. Como modelos experimentales se utilizaron tres cepas de laboratorio, pertenecientes a las especies Dictyosphaerium chlorelloides (Cloroficeae) (DcG1wt), Scenedesmus intermedius (cloroficaea) (Si31Mwt) y Microcystis aeruginosa (Clanobacteira) (MaM1), y cuatro tóxicos: el herbicida 3-(3,4-diclorofenil)-1,1-dimetilurea (DCMU); una mezcla compleja de metales pesados procedentes del vertido de la mina de Aznalcóllar, el explosivo 2,4,6-trinitrotolueno (TNT), y el alguicida sulfato de cobre (CuSO4.5H2O). La herramienta básica utilizada en este estudio fue el análisis de fluctuación. Además, de este abordaje, también se investigó la utilidad del análisis de fluctuación para aportar especificidad a los biosensores microalgales. Los resultados obtenidos indican que las microalgas son capaces de resistir el efecto de concentraciones letales de contaminantes por medio de mutaciones espontáneas de gran efecto. La frecuencias estimadas de mutantes resistentes en equilibrio, unidas al tamaño que suelen presentar las poblaciones microalgales, sugiere que estas poblaciones puedne persitir tras un vertido tóxico pese al coste de las mutaciones. Aunque el problema abordado en el presente trabajo deber ser investigaco en mayor profundidad y mediante experimentos in situ, los resultados aportados sugieren que los contaminantes ambienta,les pueden estar atlerando la tasa evolutiva de las poblaciones microalgales. Por otro lado, el empleo de cepas sensibles y resistentes a un determinado contaminante ha demostrado ser una vía útil en el desarrollo de biosensores específicos. PALABRAS CLAVE: Adaptación, análisis de fluctuación, Aznalcóllar, bionsensor, DCMU, Dictyosphaerium chlorelloides, microalgas, Microcystis aeruginosa, Scendesmus intermedius, tasa de mutación, TNT.

Autor: GENESCÀ FERRER MERITXELL.
Año: 2004.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGIA.
Centro de realización: IIBB-CSIC (IDIBAPS).

Resumen: En la tesis , se han estudiado los mecanismos que desencadenan la activación de la apoptosis durante el síndrome de isquemia y reperfusión.Durante la isquemia tienen lugar una serie de acontecimientos bioquímicos que pueden modular el desarrollo de apoptosis.Uno de los primeros eventos que tienen lugar es la degradación del ATP.Esto induce la acumulación de sus productos catobólicos , sustancias quese modifican en función del tiempo de isquemia , como la adenosina y la xantina, las cuales a través del óxido nítrico y el superóxido respectivamente pueden inducir apoptosis.Por otra parte, otra de las principales consecuencias de la isquemia es la alteración del citoesqueleto.Recientemente , se ha observado que estas alteraciones pueden inducir el desarrollo de apoptosis en determinados tipos celulares. De este modo , el objetivo general de esta tesis ha sido caracterizar el papel de determinadas moléculas en relación al desarrollo de apoptosis durante la preservación de órganos , para poder modificar farmacológicamente y predecirla. Con los trabajos realizados en esta tesis hemos evidenciado que el desarrollo de la apoptosis durante la isquemia y reperfusión esta modulado por la adenosina y por la xantina y, que en el caso dela adenosina, esta inducción esta mediada por el óxido nítrico.La muerte celular por apoptosis puede ser minimizada mediante la adición de teofilina y fructosa-1, 6-difosfato a la solución de preservación,hecho que no solamente previene le desarrollo de apoptosis sino que además evita la traslocación bacteriana al trasplante.Por otra parte , el desarrollo de apoptosis en la reperfusión depende de las modificaciónes en el citoesqueleto de actina durante la preservación.Finalmete, y en relación con el estudio de marcadores de predicción de órganos puede ser una medida muy útil en este sentido , ya que permite discriminar durante la preservación entre los órganos que han sufrido un periodo de isquemia caliente y los que no.Además , uno de los parámetros derivados de esta medida parámetros a esta relacionado con las alteraciones del citoesqueleto producidas de forma previa al transplante.

Autor: ESPARZA GORDILLO JORGE.
Año: 2004.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: El sistema del complemento es un conjunto de proteínas lmpbcadas en la detensa dél organismo ftente infecciones. La eficacia de este mecanismo reside en su capacidad para activarse específicamente sobre los agentes patógenos, limitando el daño asociado a la activación incontrolada del complemento sobre los tejidos propios. Dicha especificidad se basa en la existencia de una serie de proteínas reguladoras, muchas de las cuales están codificadas por genes localizados. en la región genómica Iq32, dentro del agrupamiento génico RCA (Regulators ofComplement Activation). En la presente tesis doctoral he aplicado el método de descomposición de la varianza.para el análisis de los factores genéticos responsables de la variabilidad en los niveles plasmáticos de dos reguladores del complemento del RCA (C4BP y factor H). Además se evaluaron las posibles implicaciones patológicas asociadas a la variabilidad en estos fenotipos. La proteína C4b-Binding Protein (C4BP) tiene la capacidad de interferir en el sistema de la coagulación a través de su interacción con la proteína S (PS). En este trabajo se ha aplicado el modelo umbral o threshold con el fin de analizar la contribución de los fenotipos plasmáticos de C4BP y PS a la susceptibilidad a padecer trombosis. Además se ha estudiado el papel de las proteinas reguladoras del complemento del RCA en la predisposición al síndrome hemólítico urémico atípico (aHUS), una enfermedad ocasionada por la activación incontrolada del complemento sobre el endotelio renal como consecuencia de alteraciones funcionales en proteinas del RCA. En este contexto nuestro estudio se ha realizado considerando las variaciones .cuantitativas (niveles de expresión) y cualitativas (déficit funcional) genéticamente determinadas en proteínas del RCA.

Autor: TORRE MARTINEZ IRATXE.
Año: 2004.
Universidad: PAÍS VASCO.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGIA.

Resumen: El objetivo planteado en el presente trabajo de Tesis Doctoral, consiste en profundizar en el conocimiento de los mecanismos que conducen a la muerte de oligodendrocitos, tras la activación de los receptores glutamtérgicos y purinérgicos en el nervio óptico de rata adulta. Para abordar este estudio se han utilizado técnicas inmunohistoquímicas, bioquímicas y de biología molecular. Los resultados obtenidos indican que los oligodendrocitos de este tejido presentan receptores ionotrópicos de ácido glutámico AMPA y kainato, cuya activación prologada produce la muerte celular apoptótica, mediante un mecanismo que requiere la activación de la caspasa-3. Estas condiciones de excitotoxicidad disminuyen la expresión de la fosfatasa nuclear MKP-1 y aumentan la expresión de la fosfatasa citoplasmática MKP-3. Se comprobó que un breve estímulo excitotóxico también está implicado en la muerte celular, ya que sensibiliza a las células del nervio óptico al ataque del complemento. En estas condiciones se observó que disminuye la expresión de moléculas clave de la ruta de las MAP quinasas, así como de sus reguladores. Los resultados obtenidos indican que la muerte oligodendroglial apoptótica no sólo está mediada por receptores de ácido glutámico, sino que también está mediada por la activación prolongada de la subclase de receptores purinérgicos P2X7. En estas condiciones, se comprobó que la muerte oligodendroglial también requiere la activación de la caspasa-3. Por tanto, estos resultados sugieren que el conocimiento de los componentes intracelulares implicados en estos mecanismos de muerte celular y el papel que desempeña cada uno de ellos, es importante para poder desarrollar nuevos agentes terapéuticos para el tratamiento de enfermedades neurológicas que impliquen la pérdida de oligodendrocitos.

Autor: Núñez Naveira Laura.
Año: 2004.
Universidad: A CORUÑA.
Centro de lectura: Facultad de Ciencias.
Centro de realización: Facultad de Ciencias.

Resumen: Kluyveromyces lactis es una levadura de elevado interés biotecnológico que se diferencia de la levadura tradicional de estudio Saccharomyces cerevisiae en diversos aspectos de su metabolismo. Mientras que en condiciones de aerobiosis y con glucosa como fuente de carbono K. lactis posee un metabolismo fundamentalmente respirativo, S. cervisiae lo tiene fermentativo en el mismo contexto. Estas diferencias metabólicas podrían ser el reflejo de una diferente regulación transcripcional de aquellos genes relacionados con la respiración en estos organismos tan próximos evolutivamente. En la presente Tesis se estudiaron una serie de genes que se consideran fundamentales en este aspecto. ScHEM1 y ScHEM12 codifican respectivamente la delta-aminolevulinato sintasa y la uroprofirinógeno descarboxilasa que catalizan el primer y quinto paso de la ruta de biosíntesis de hemo. Este grupo estructural de hemoproteínas como los citocromos, que participan en los procesos de respiración. ScHAP1 codifica un factor trascripcional activado por hemo que regula la expresión de genes relacionados con la respiración, y además activa la expresión de ScROX1 que reprime genes hipóxicos en condiciones aeróbicas. ScSRB10 codifica una quinasa que participa en procesos tanto de activación como de represión trascripcional. En estos últimos se caracteriza por interaccionar con el complejo represor Ssn6-Tup1p tras ser reclutado hacia las regiones promotoras de los genes por diversos factores represores, entre los que se encuentra la proteína Rox1p. En este trabajo se han clonado los genes K1HEM12, K1SRB10 y K1HAP1 demostrando para los dos primeros su funcionalidad mediante complementación de mutaciones en genes homólogos en S. cerevisiae. K1HAP1 no ha demostrado ser funcional en S.cerevisiae al menos bajo control de su propio promotor. La expresión K1HEM12 ha resultado dependiente de cepa, además de sugrir una activación por fuente de carbono no fermentable mediante la participación del factor regulador Hap2/3/4/5p. El promotor puede considerarse como TATA-less con múltiples sitios de inicio de la trascripción sin preferencia definida por ninguno de ellos. Mediante análisis de primer extensión se han localizado diversos puntos de inicio del promotor de K1HEM1, siendo el de la posición -48 predominante. Se ha verificado la importancia del elemento rico en pirimidinas por ensayos de deleciones y mutagénesis dirigida hacia regiones concretas del promotor fusionado a lacZ. Este elemento es responsable de determinar elevados niveles de expresión tanto en condiciones aerobias como anaerobias. El sitio cis para la unión de Gcr1p tiene un efecto represor en medios con glucosa al 2% y el consenso para la unión de Buf1p, que en el promotor del gen homólogo de S. cerevisiae tiene un efecto represor, no muestra un claro papel regulador ni en condiciones aeróbicas ni hipóxicas. En la región situada entre las posiciones -558 a -443 se localiza una señal necesaria para la expresión hipóxica y la respuesta a hemo. Mediante alineamientos de K1Srb10p con otras proteín-quinasas relacionadas se pudo observar que en levaduras existían una serie de motivos altamente conservados. La funcionalidad de estos motivos se comprobó mediante deleciones de cada uno de ellos, tanto sobre la proteína Srb10p de K. lactis como sobre la de S. cerevisiae. Los motivos DC-I y DC-II y el motivo de unión a ATP son esenciales para la función de Srb10p in vivo como queda demostrado por los efectos de su delección sobre los fenotipos asociados y sobre la expresión trancripcional de los genes FLO11, CYC7 y SPI1. También se ha comprobado su participación directa o indirecta en la interacción entre la quinasa y su ciclina Srb1p, así como para la interacción con el represor Tup1p. Otro motivo también conservado, DC-Ala, cercano al extremo carboxilo terminalk, carece de relavancia funcional en la interacción con Srb11p, aunque tiene cierta influencia en la interacción con Tup1p. El motivo WRKY, únicamente presente en la proteína de K. lactis y cercano al extremo amino, no parece esencial en los fenotipos e interacciones analizados.

Autor: FERIA BOURRELLIER ANA BELEN.
Año: 2004.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: La fosfoenolpiruvato carboxilasa (PEPC; EC 4.1.1.31) es una enzima citosólica ampliamente distribuida tanto en organismos fotosintéticos tales como plantas y algas verdes, como en la mayoría de las bacterias y protozoos no fotosintéticos, sin embargo está ausente en hongos, levaduras y animales (Chollet et al., 1996). Catalizar la beta-carboxilación irreversible del fofoenolpiruvato (PEP) en presencia de HCO3- y Mg2+, para producir oxaloacetato (OAA) y Pi (Chollet et al., 1996), que es rápidamente transformado a L-Malato, participando éste en una gran variedad de contextos metabólicos. Trabajos previos realizados en nuestro laboratorio pusieron de manifiesto un aumento de la actividad PEPC durante la germinación de la semilla y la regulación de la enzima por fosforilación reversible (Osuna et al., 1996; González et al., 1998, 2002). A diferencia de las PEPC-quinasas estudiadas hasta la fecha, la activación de la PEPC-quinasa implicada en la germinación no dependía de síntesis proteica, sino que se encontraba ya presente en la semilla seca (Osuna et al., 1999), sugiriéndose que la síntesis de la PEPC-quinasa se realizaba durante la fase de desarrollo y maduración de la semilla. Los resultados de esta tesis muestran que en cebada durante el desarrollo de la semilla existen dos polipéptidos de PEPC de 103 y 108 kDa de los cuales, la subunidad de 103 kDa es constitutiva mientras que la de 108 kD se induce en la etapa final del desarrollo. Los resultados muestran que ambos polipéptidos son versiones completas y no contienen los extremos N- y C-terminal incluyendo los últimos 4 aa ANTG del C-terminal. Por otro lado se muestra que la PEPC-quinasa se acumula en la semilla de cebada a partir de los 30 PDA y queda acumulada en la semilla seca, sin embargo, durante este período y en la semilla seca, la PEPC está desfosforilada. Además los resultados obtenidos permiten concluir que es la relación Glucosa-6P/L-Malato, más que la concentración aislada de estos metabolitos o la cantidad de PEPC-quinasa acumulada en el tejido, la que determina in vivo la fosforilación dela PEPC durante el desarrollo y germinación de la semilla de cebada. En este sentido, éste es el primer contexto fisiológico que permite mostrar una regulación metabólica de la PEPC-quinasa in vivo en contraposición a la síntesis/activación clásica descrita para la regulación de la PEPC-quinasa, en todas las plantas y órganos estudiados hasta la fecha. Todo ello sugiere que en la aleurona/endospermo la PEPC compensa la inhibición ocasionada por los altos niveles de malato acumulado durante el desarrollo, con un incremento de actividad de hasta 12 veces, en base a la actividad total. Este incremento de actividad podría responder de la acumulación de L-Malato sin necesidad de recurrir a la fosforilación. Esto, está de acuerdo con un estadio de desarrollo de baja actividad metabólica, altos niveles de ADP y una relación Glucosa-6P/L-Malato baja que mantiene a la PEPc-quinasa, aunque abundante, esencialmente inactiva in vivo. Sin embargo, durante la germinación, la PEPC acumulada en la semilla se fosforila rápidamente estando completamente fosforilada a las 48h de imbibición. La suma de una alta cantidad de PEPC acumulada en la semilla, mas un alto nivel de fosforilación, posibilitado por la abundancia de PEPC-quinasa cumulada en la semilla durante el desarrollo y por la alta relación Glucosa-6P/L-Malato, sugieren que durante la germinación la PEPC debe alcanzar in vivo sus máximas cotas de actividad lo que vendría justificado por la ubicuidad, versatilidad y utilidad de su producto final el L-Malato. En el intento de esclarecer el posible papel del ABA en la regulación de la PEPC-quinasa y en al fosforilación de la PEPC, hemos visto que el ABA no estimula la síntesis de PEPC-quinasa sino que regularía su degradación incidiendo sobre la actividad de una PEPC-quinasa proteasa que está ya presente en la semilla seca. En este trabajo también se ha llevado a cabo la clonación y expresión de la PEPC C3 de trigo (WPPC1) y de la PEPC C4 de hojas de sorgo (PEPC311) en Escherichia coli como proteínas de fusión a una etiquet 8 a de His 5cb . La caracterización de sus propiedades inmunológicas, cinética sy de regulación y de la fosforilación del enzima, permiten concluir que son sustratos adecuados para cualquier tipo de estudios tanto cinéticos como de regulación por fosforilación. Los análisis de espectrometría de masas de péptidos de PEPCs obtenidos de distintos tejidos de trigo permiten concluir que; 1,- Los péptidos procedentes de WPPC1 poseen altos niveles de cobertura en todos los tejidos estudiados, sin embargo cabe destacar la presencia de la secuencia MALSAPGGGGK específica de WPPC1 en las raíces maduras. 2,- En el trigo la PEPC también está codificada por una familia multigénica de la que hemos identificado al menos 4 representantes: WPPC1, WCP21, WCP28 y WSOLTU. 3,- La existencia de un isoenzima homólogo a la PEPC4 (PEPC bacteriana de A.thaliana) en trigo. Además, representan la primera evidencia de que la proteína bacteriana es traducida, acumulándose diferencialmente en determinados tejidos y en respuesta a un patrón de desarrollo como en el caso de escutelos durante la germinación.

Autor: CASAÑAS ACOSTA NIEVES.
Año: 2004.
Universidad: LA LAGUNA.
Centro de lectura: INST.UNIVERSITARIO DE BIORGANICA ANTONIO GLEZ.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA.

Resumen: Se ha analizado la distribución, características y posibles funciones de las células astrogliales en la retina, nervio, quiasma y tracto óptico de Gallotia galloti, y para ello se han utilizado proteínas para identificar dichas poblaciones gliales, entre ellas la S-100, proteína gliofibrilar ácida (GFAP), vimentina y glutamina sintetasa (GS), y para marcar la población en proliferación se ha utilizado el antígeno nuclear de proliferación celular (PCNA). Se ha demostrado que en esta especie las células ganglionares de la retina son capaces de establecer de nuevo las conexiones con el techo óptico después de lesiones agudas del nervio. Teniendo en cuenta el importante papel que cumplen las células gliales en el mantenimiento del sistema nervioso central (SNC) y en la reparación del sistema en otros grupos como peces y anfibios, los resultados obtenidos son importantes para conocer las características de estas células gliales en el SNC de Gallotia galloti y resolver cuestiones planteadas en el modelo experimental lesionado.

Autor: ROIG NAVARRO IGNASI.
Año: 2004.
Universidad: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La meiosis es la división celular que ocurre durante la gametogénesis por la cual la dotación cromosómica se reduce a la mitad. La meiosis en mamíferos presenta diferencias de género, mientras que la masculina es continua y empieza en la vida del adulto, la femenina se inicia durante la vida fetal y se interrumpe antes del nacimiento. Así pues, el apareamiento y la sinpasis de los homólogos en ovocitos humanos sólo se puede estudiar en ovarios fetales. De este modo, la mayoría de lo que se sabe de la meiosis proviene de trabajos realizados en muestras masculinas. En este estudio, se han usado 33 muestras para realizar un análisis exhaustivo del apareamiento y sinapsis de los homólogos en ovocitos humanos. Los resultados obtenidos han permitido por primera vez relacionar la progresión de la profase meiótica a lo largo del desarrollo fetal en las mujeres. Se demuestra que el apareamiento empieza durante el estadio de leptoteno, cuando los ovocitos presentan la morfología de bouquet. Además, se indica la implicación de la dinámica telomérica en la sinapsis de los homólogos. Los resultados sugieren que el apareamiento y sinapsis son procesos muy eficientes tanto en ovocitos euploides, como en ovocitos cultivados, como en ovocitos aneuploides, presentando tasas de error del orden del 0,13%. Los resultados presentados también indican que la implicación del proceso de apareamiento en el origen de las aneuploidías no es tan importante como otros factores. El análisis de ovocitos euploides humanos ha revelado importantes diferencias respecto a la progresión de la meiosis entre hombres y mujeres que podrían ser responsables del alto origen materno de las aneuploidías en humanos. Además, se han encontrado diferencias importantes en la progresión meiótica entre humanos y ratones que podrían sugerir la búsqueda de otro modelo animal para estudiar la meiosis en humanos.

Autor: AYLLON GOMEZ FERNANDO.
Año: 2004.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD MEDICINA.

Resumen: En esta tesis se plantea el estudio de los diferentes patrones de flujo génico en poblaciones de salmónidos, en especial, de la trucha común y el salmón atlántico. Se estudió la estructura poblacional del salmón en las poblaciones del norte de España y sur de Francia determinándose la presencia de una única población panmíctica. Se analiza la contribución de las repoblaciones alóctonas en la determinación y mantenimiento de esta estructura genética y el éxito relativo de los diferentes stocks utilizados en repoblaciones. Para la trucha común se estudió el papel del flujo génico en el mantenimiento de poblaciones afectadas seriamente por la fragmentación de hábitat. Se determinó la existencia de elevados niveles de flujo génico entre poblaciones adyacentes. Gracias a la existencia de poblaciones experimentales en el Archipiélago de Kerguelen se estudiaron los patrones de flujo génico y colonización de diferentes stocks de trucha común, tanto de origen salvaje como criadas en cautividad. Por último, se investiga la posibilidad de flujo génico interespecífico entre la trucha común y el salmón atlántico, así como la simetría de las barreras reproductivas entre ambas especies.