CIENCIAS DE LA VIDA, 5

Autor: MARTÍNEZ DE PABLOS ROCÍO.
Año: 2004.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: La enfermedad de Parkinson afecta al 1% de las personas mayores de 50 años. Causada por la pérdida del neurotransmisor dopamina su patogénesis no se conoce bien, aunque se piensa que la inflamación podría estar implicada en el desarrollo de esta neurodegeneración. Con el fin de estudiar esta posibilidad nuestro grupo desarrolló un modelo animal de Parkinson por inflamación mediante la inyección del proinflamatorio lipopolisacárido. La estructura cerebral más sensible a este compuesto resultó ser la sustancia negra, estructura especialmente implicada en el Parkinson. En este estudio nos propusimos buscar las causas de esta especial sensibilidad, estudiando la posible influencia de la propia dopamina en el proceso degenerativo inducido por la inyección de lipopolisacárido: nuestros resalados muestran que la acción degenerativa del lipopolisacárido parece mediada por la dopamina endógena a través de un mecanismo de acción específico. El descubrimiento de este mecanismo es de gran importancia para el desarrollo de nuevos fármacos que nos permitan luchar contra este proceso degenerativo y por tanto contra la aparición de la enfermedad. Asimismo nuestro estudio proporciona una explicación al hecho de que uno de los tratamientos más utilizados en la actualidad, la levodopa, pueda acelerar la progresión de la degeneración neuronal.

Autor: GAMANE DJAMILA.
Año: 2004.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: En muchos países subdesarrollados, la judía (Phaseolus vulgaris) se considera un cultivo básico, por ser una fuente fundamental de diversas proteínas y de aminoácidos esenciales. A pesar de ser una planta extensamente cultivada en el mundo y de gran importancia para la nutrición humana, una de sus características particulares es su baja capacidad de fijar el nitrógeno de forma biológica. Las especies que se asocian simbióticamente con este cultivo son: Rhizobium leguminosarum bv.phaseoli, R.tropici, R.etil, R.giardinni bv.phaseoli y R.giardinii bv.gallicum, las cuales poseen diferentes plásmidos y uno de ellos, conocido como el pSym, es portador de los genes que están directamente relacionados con la fijación biológica de nitrógeno. El creciente análisis genómico, permite pensar de que hay evidencias directas de que la transferencia genética horizontal de genes ha tenido un papel fundamental en la evolución de los genomas bacterianos. Por ejemplo, la introducción del plásmido simbiótico pRL1JI de R.leguminosarum en una cepa de R.leguminosarum bv.trifolii y phaseoli hizo que estas últimas adquieran la capacidad de nodular en guisante (Dibb et al., 1984), asimismo, restaura el fenotipo Fix de un derivado Nod cuando se transferir en R.leguminosarum bv.viciae. Los objetivos planteados para el desarrollo de estas tesis doctoral han sido: marcar e identificación de los pSyms y construcción de cepas híbridas mediante la transferencia de plásmido simbiótico a diferentes fondos genéticos.

Autor: SÁNCHEZ-PORRO ÁLVAREZ CRISTINA.
Año: 2004.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: Los microorganismos halófilos moderados son capaces de crecer óptimamente en medios que contienen de 0,5 a 2,5 M de NaCl. Estos microorganismos son capaces de producir una serie de enzimas extracelulares de gran interés industrial, como proteasas, lipasas, DNAsas, amilasas, etc., que presentan gran estabilidad al estrés salino. En esta Tesis se ha estudiado en detalle un microorganismo halófilo moderado capaz de producir una proteasas extracelular. En primer lugar se realizó un screening en salinas del Sur de España que nos permitió aislar 892 bacteria halófilas moderadas capaces de producir enzimas extracelulares. De ellas se seleccionó la cepa CP76 como la mejor productora de una proteasas extracelular que se caracterizó en base a estudios genotípicos y fenotípicos y se clasificó como Pseudoalteromonas ruthenica CP76. Dicha proteasas, denominada haloproteasas CP1, ha sido purificada y caracterizada bioquímicamente. Se trata de un enzima de 38 kDa que presenta una actividad óptima a 55ºC, pH 8,5 y es capaz de actuar en un amplio rango de concentraciones de NaCl (0-4 M) con un óptimo entre 0-1 M. Mediante PCr inversa se ha amplificado el gen que codifica la haloproteasas CP1, denominado cp1. La haloproteasas CP1 consta de 733 aminoácidos y se sintetiza en forma de pre-proproteína. Se trata de una metalopróteasa de la familia de las termolisinas o M4. Junto al gen cp1 se ha encontrado otro gen, cp2, que codifica otra metaloproteasas extracelular, denominada CP2, que esta formada por 614 aminoácidos y pertenece a la familia M28. Por último, corriente debajo de cp2, se encuentra otro gen, denominado lipP, que aunque está incompleto codifica que proteína que presenta homología con esteasas de la familia de las a/betas hidrolasas. Por último se han realizado estudios sobre el mecanismo de secreción que utiliza Pseudoalteromonas ruthenica CP76 para secretar la haloproteasas CP1 al medio extracelular. Para ello se ha amplificado mediante PCR inversa el gen wmpD que codifica la proteína D. Dicha proteína D forma parte del mecanismo de secreción de tipo II, que es el más utilizado por bacterias Gram-negativas para secretar proteínas al exterior. La inactivación del gen wmpD mediante mutagénesis insercional interrumpe la secrección de la haloproteasas CP1.

Autor: PARADA IBÁÑEZ MARIBEL EUGENIA.
Año: 2004.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGÍA DE LA UNIVERSIDAD DE SEVILLA.
Centro de realización: DPTO. DE BIOQUÍMICA VEGETAL Y BIOLOGÍA MOLECULAR - UNIVERSIDAD DE SEVILLA.

Resumen: En esta Tesis se ha estudiado la importancia de dos polisacáridos superficiales de Sinorhizobium fredii HH103, el polisacárido capsular tipo antígeno K (KPS) y el exopolisacárido (EPS), en la simbiosis que eta bacteria establece on la soja y otras leguminosas hospedadoras. Para ello, se han aislado genes de S.fredii HH103 implicados en la producción de KPS (genes rkp) y de EPS (exoA) y se han generado mutantes de esta bacteria en genes rkp y/o en el gen exoA. Los mutantes en los genes rkp y exoA no produjeron, respectivamente, el KPS y el EPS de la estirpe silvestre. De este modo, se disponía de derivados de HH103 defectivos en la producción de cada uno de estos polisacáridos así como de un doble mutante EPS-KPS. Las propiedades simbióticas de estos mutantes fueron evaluadas en diversas leguminosas hospedadoras de S.fredii HH103. En estos ensayos se estudia por primera vez la implicación del KPS en simbiosis con leguminosas formadoras de nódulos determinados como la soja y Cajanus cajan. En estas interacciones el KPS de HH103 juega un papel importante aunque no esencial; por su parte, el EPS no parece desempeñar un papel destacado y, además, no reemplaza funcionalmente al KPS. En leguminosas que forman nódulos indeterminados, como Glycyrhiza uralensis, tanto el defecto en EPS como en KPS disminuyen las propiedades simbióticas de HH103. Sin embargo, un doble mutante de HH103 en ambos polisacáridos fue capaz de inducir la formación de algunos nódulos fijadores de nitrógeno en esta leguminosas. Este resultado está en clara contraposición a lo descrito en la simbiosis formadora de nódulos indeterminados Sinorhizobium meliloti-alfalfa, donde es estrictamente necesaria la presencia de al menos uno de estos dos polisacáridos, EPS o KPS, para la formación de nódulos fijadores.

Autor: MARTÍNEZ PITA INÉS.
Año: 2004.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: Este trabajo de investigación se ha centrado en el estudio de varios aspectos de la reproducción de las especies de opistobranquiso nudibranquios Polycera aurantiomarginata, Polycera quadrilineata, Berghia verrucicornis y Berghia columbina en la zona de El Portil, en la provincia de Huelva desde el año 2001 hasta el 2003. Las cuatro especies depositan sus huevos ya fecundados en lo que se denominan puestas, las de las dos especies de Polycera tienen forma de cinta que se adhiriere al sustrato por uno de sus bordes y son de color amarillo claro mientras que las de Berghia tienen forma de cordón que se dispone en espiral de hasta cuatro vueltas,. Cada huevo esta en el interior de una cápsula, aparece un único huevo por cápsula y en las dos especies de Polycera están unidas entre sí por un filamento gelatinoso denominado cápsula. La copulación es cruzada, recíproca y simultánea y no está asociada con el fotoperiodo, las puestas con depositadas horas después y esto sí está asociado con el fotoperiodo. La capacidad productiva de las especies varían entre los dos géneros, Polycera deposita hasta 8 puestas por pareja mientras que Berghia entre 1 y 2, no obstante en cada especie varía según el tamaño progenitor y su condición, a mayor tamaño del progenitor mayor es el número de puestas. Las puestas más largas las presenta P.aurantiomarginata con casi 50 mm y las más cortas P.quadrilineata con apenas 20 mm. Los huevos son esféricos y su diámetro oscila entre 65 micras en P.quadrilineata y 80 en B.verrucicornis, las cápsulas son ovaladas y las más grandes las presentan las dos especies de Berghia. Las cuatro especies presentna un desarrollo embrionario de tipo plactotrófico y suduración varia entre 6.8 días en P.quadrilineata y 8.4 en P.aurantiomarginata, las velígeres son transparentes y sin ningún tipo de pigmentación, la concha se enrolla en espiral y no está ornamentada, pertenece al tipo 1 de Thompson. Se ha analizado también la composición de ácidos grasos de las puestas al principio y al final del desarrollo, los mayores niveles los presentna los ácidos grasos poliinsaturados y dentro de este grupo dominan los de la serie 3 y los saturados se mantienen. A lo largo del año varían las poblaciones, las máximas abundancias aparecen en invierno y primavera con temperaturas moderadas del agua mientras que en verano, cuando la temperatura sobrepasa los 20ºC las poblaciones disminuyen hasta casi desaparecer. P.aurantiomarginata se reproduce durante todo el año mientras que las dos especies de Berghia lo hacen en primavera principalmente, la primera tiene un ciclo subanual mientras que las segundas son anuales.

Autor: MERCHÁN IGNACIO FRANCISCO.
Año: 2004.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: Las leguminosas constituyen una familia de plantas de gran importancia para la agricultura y el medioambiente, debido en parte a su capacidad de interactuar con bacterias del suelo de la familia Rhizobiaceae para formar unos órganos simbióticos fijadores de nitrógeno atmosférico denominados nódulos. Gracias a este proceso, las leguminosas adquieren fuentes de nitrógeno que les pueden permitir una cierta independencia del nitrógeno disponible en el suelo (fertilizantes, etc.) y facilitar colonizar determinadas tierras áridas. El estado fisiológico tanto de la leguminosa hospedadora como de la bacteria determina el establecimiento de una simbiosis efectiva. Muchos son los factores medioambientales que pueden limitar el crecimiento y la actividad fijadora de nitrógeno de las leguminosas. Uno de ellos es una elevada salinidad del suelo, problema que está en aumento y que afecta ya a una parte importante de las tierras cultivadas. Estudios previos han indicado que la salinidad afecta sobre todo a la planta, ya que los simbiontes bacterianos pueden tolerar mayores niveles de salinidad en el suelo. A pesar de ello, la existencia de diferentes variedades de una misma especie de leguminosa que presentan un amplio rango de sensibilidad frente al estrés salino, y la posibilidad e aumentar la tolerancia de las plantas a este estrés sobreexpresando ciertos genes, indican que un grupo pequeño de genes pueden conferir osmotelarancia a una planta sensible. En las leguminosas sin embargo, aún se conocen pocos marcadores moleculares y genes reguladores implicados en la respuesta a estrés salino. En base a los antecedentes comentados, en este estudio hemos concentrado nuestros esfuerzos en el análisis de la expresión génica en la raíz y en los nódulos de M.truncatula, leguminosa modelos para los estudios genéticos, en respuesta a distintos tipos de estrés abiótico. Entre los genes vegetales implicados en la respuesta a altos niveles de sal en el suelo, podemos distinguir dos grandes grupos, el formando por los genes que codifican los elementos efectores implicados en la adaptación de la planta (canales iónicos, enzimas metabólicas ..) y un segundo grupo que incluye aquellos genes que practican en la percepción, la señalización del estrés y la coordinación de las repuestas vegetales (quinasas, factores de transcripción, entre otros) (Seki et al., 2003). En nuestro laboratorio, hemos intentado aislar genes reguladores de la simbiosis siguiendo distintas estrategias. Así, hemos identificado dos genes potencialmente reguladores, MsAPK1 (Medicago sativa Ankyrin Protein Kinase) y MsZPT2-1 (Medicago sativa Zinc finger Petunia Transcription fctor) que codifican respectivamente, una proteína quinasa y un factor de transcripción. Nuestro trabaja ha permitido demostrar que estos dos genes podrían estar también implicados en la respuesta de M.truncatula ante el estrés salino. El gen MsAPK1 forma parte de una familia de genes intensificados previamente tanto en animales como en plantas y que codifican un nuevo tipo de proteína quinasa con un dominio ankirina en la región aminoterminal. En alfalfa, su expresión ha sido detectada en los nódulos y en estructuras similares que se forman en las raíces. Pero este gen no está ligado exclusivamente a la nodulación puesto que también se expresa en el resto de órganos vegetales, especialmente en la raíz durante la germinación. En el genoma de A.thaliana, existen al menos tres genes homólogos a MasAPK1 que conservan la misma distribución intrón/exón que éste. Por RT-PCR, hemos puesto de manifiesto para dos de ellos una expresión diferencial en los órganos de esta planta. En M.truncatula por el contrario, los distintos experimentos llevados a cabo han indicado que no existiría más que un homólogo del gen MsAPK1. Gracias al escrutinio de un banco genómico BAC de M.truncatula, hemos aislado y secuencia la región genómica donde se encuentra este gen. La homología entre A.thaliana y M.truncatula, hemos asilado y secuenciado la región genómica donde se encuentra este gen. La homología entre A.thaliana y M.truncatula en esta región genóm 8 ica no s 1104 e ciñe únicamente al gen MtAPK, sino que se extiende a genes próximos a éste lo que indica una elevada microsintenía entre las dos especies en esta región de su genoma. La inducción por el estrés salino de la expresión de MsAPK1 en raíces de M.sativa se produce en pocas horas tras el inicio del estrés, prolongándose durante al menos 48h, lo que sugiere que esta proteína desarrolla posiblemente un papel en la señalización de este estrés. El gen que codifica para el factor de transcripción MsZPT2-1 fue identificado por el Dr. Frugier durante un escrutinio diferencial de los genes de M.sativa que participan en el desarrollo de los nódulos, demostrando que era indispensable para el éxito de la simbiosis ya que las plantas transgéncias que expresan el gen en conformación antisentido forman nódulos no fijadores de nitrógeno. Partiendo de la base que además la transferencia de este gen a levaduras, confería osmotolerancia, hemos estudiado la relación de este gen con la respuesta al estrés salino. En la especie M. Truncatula, hemos identificado un homólogo de MsZPT2-1 y hemos puesto de manifiesto que tanto en esta planta como en M.sativa, estos genes se inducen en respuesta la estrés alino en raíces y en nódulos. En los distintos ensayos de nodulación realizados en presencia de sal, hemos podido determinar las condiciones de inhibición del proceso de nodulación en M.truncatual por este tipo de estrés. También hemos estudiado el proceso de recuperación de esta planta tras un periodo de estrés alino, estableciendo sus límites de tolerancia in vitro. Comparando en esas condiciones límites el crecimiento de la raíz de plantas silvestres y de plantas transgénicas As-MtZPT2-1, hemos obtenido datos que indican que estas últimas se recuperan más lentamente tras un estrés salino. Los resultados así obtenidos hacen de MtZPT2-1 un buen marcador molecular del estrés salino sugieren su participación en un programa transcripcional destinado a que M.truncatula pueda tolerar dicho estrés. Con el fin de identificar nuevos marcadores moleculares de estrés salino y el programa transcripcional donde está implicado MtZPT2-1, hemos empleado dos técnicas de genómica funcional. En primer lugar, basándonos en los límites de tolerancia de M.truncatula R108, hemos construido dos librerías SSH (substractive supperessive hybridation) con vistas a identificar esos marcadores moleculares y otros genes ligados al proceso de recuperación tras un estrés salino. Posteriormente, gracias a la información aportada por la secuenciación parcial de las SSH, hemos elaborado un macroarray para estudiar los perfiles de expresión de 384 genes y analizar las diferencias existentes entre los transcriptomas de las plantas silvestres y de las plantas antisentido As-MtZPT2-1, en respuesta a diferentes condiciones de estrés salino así como durante le proceso de recuperación de la planta. De esta forma, en base a los resultados obtenidos del macroarray y su confirmación mediante PCR cuantitativa, se han identificado al menos una veintena de genes desregulados en las plantas As-MtZPT2-1. Tres de estos candidatos han presentado los perfiles de expresión esperados en las raíces transgénicas que sobreexpresan MtZPT2-1, indicando que pueden estar directamente regulados por el factor MtZPT2-1. Finalmente, cabe destacar que el análisis de la respuesta al estrés salino en plantas de M.truncatula que hemos desarrollado en este trabajo, puede ayudar a la comprensión de los mecanismos que entran en juego en la alteración de la nodulación por estrés, y abre las puertas al estudio en otras leguminosas de mayor utilidad agroeconómica.

Autor: ANTUNES BARRADAS GONCALO.
Año: 2004.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: ESCUELA INGENIERÍA AGRARIAS.
Centro de realización: ESCUELA INGENIERÍAS AGRARIAS DE BADAJOZ.

Resumen: Con el presente trabajo se pretende contribuir para el estudio del crecimiento, producción y calidad de la fibra de Gossypium hirsutum L., cultivado en condiciones ecológicas en el perímetro de riego del Caia (Alentejo, Portugal). Con este objetivo instalamos un ensayo con 6 variedades, de ciclo medio-cuarto a medio-longo, sembradas en 3 fechas de siembra, en la Finca de Comenda (38º 54'N, 7º 03'W), en los años 2002 y 2003. Se han verificado diferencias entre las variedades en el porcentaje de germinación y en los testes frío (18ºC, 7 días) y standard (30ºC, 4 días), registrando las semillas de 'Celia' y 'Sonia' mayores índices de vigor. La tasa de crecimiento relativa presentó una marcada tendencia decreciente, justo desde los primeros estadios de desarrollo de las plantas, mientras que la tasa neta de asimilación presentó una tendencia creciente hasta finales de Julio, decreciendo después continuamente hasta el final del ciclo, con lo que incremento el índice de área folia (LAI) y la reducción de la temperatura y del número de horas de luz. No se han observado diferencias entre las variedades o fechas de siembra en los periodos del año en que se registraron los valores máximos de LAI y del índice de crecimiento del cultivo (CGR), observándose LAI máximo con un desfase de 10 a 31 días relativamente a CGR máximo. El nudo de inserción de la primera rama fructífera (NFFB) inferior se encontró en la variedad 'Celia' y en la fecha de siembra más precoz. El cutout (NAWF = 5) se verificó entre el 20 de Julio ('Celia' en la siembra precoz) y 19 de Agosto ('Flora' en la siembra tardía), reduciéndose con el retraso de la fecha de siembra, en todas las variedades, el número de días después siembra (DAS) hasta el cutout. Los daños provocados por Earias sp., y Heliothis/Helicoverps, plagas que determinaron una elevada pérdida precoz de formas fructíferas, resultaron en números de DAS hasta NWF=5 relativamente elevados, característicos de plantas en una carga fructífera suficiente para transferir los asimilados disponibles del crecimiento vegetativo. Esta circunstancia, asociada a condiciones térmicas poco favorables al crecimiento y maduración de las cápsulas formadas más tarde, resultaran en reducidos índices de cosecha y bajas retenciones, principalmente en las primeras posiciones de fructificación y en los simpódiso localizados más en bajo en la canópia. Se han observado diferencias significativas en la producción de algodón bruto entre variedades, con la variedad 'Celia', aquella que también evidenció más caracteres de precocidad, a atingir producciones más elevadas. Lo retraso dela fecha de siembra, aunque permita mejores condiciones para la emergencia y crecimiento inicial de las plantas, reduce la estación de crecimiento disponible, siendo al final un efecto negativo en la producción de algodón-bruto. Así, la producción de algodón en la región del Caia exige la utilización de variedades de ciclo corto y fechas de siembra precoces, siendo decisivo conseguir una elevada retención de cápsulas en las primeras posiciones y ramas simpodiales para que el periodo de crecimiento y maduración de las cápsulas coincida con condiciones ambientales más favorables. En general, las fibras serían clasificadas como Strict Low Midding, presentando una finura de normal a gruesa, maduración muy alta, fibras largas de elevado grado de uniformidad y bajo índice e fibras cortas, muy fuertes y con un alargamiento muy bajo.

Autor: ARJOL SERRANO JOSÉ LUIS.
Año: 2004.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD.
Centro de realización: ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD.

Resumen: Los programas para la mejora de la fuerza y velocidad del futbolista existentes en la bibliografía son a menudo difíciles de llevar cabo. El objetivo del presente estudio fue el de comparar los efectos de dos programas diferentes de entrenamiento para la mejora de la fuerza y velocidad del futbolista. PROGRAMA A Combinaba ejercicios con cargas y saltos. PROGRAMA B Sólo se utilizaron saltos diversos. Ambos programas incorporaban carreras submáximas y sprints, en mayor número para el programa B. Se incorporó un grupo C (control) que sólo realizó los entrenamientos habituales de fútbol. La duración del estudio fue de siete semanas, realizándose una valoración inicial y otra final, mediante test de salto (SJ, CMJ, Ablakov, Drop, Jump desde 40 cm, Rebound jump 15" y CMJ% con cargas 30%, 45% y 60% del peso corporal) y test de velocidad (30m sprint con tomas de tiempo en 15m y 5x10m carrera de ida y vuelta). Las características de los sujetos participantes (n=92 inicial y n=60 final) fuero (media +- DT) o para la edad 21,46+-3,38, 22,04+-3,50, 22,09+-3,73 (años); peso 75,05+-6,17, 75,67+-06,30, 75,73+-5,68 (Kg); talla 177,59+-6,13, 177,97+-5,00, 178,15+-5,92 (cm), para los grupos A, B y C respectivamente. Tests de saltos: ambos grupos A y B, mejoraron en todos ellos, pero de forma significativa (p menor 0,05), en ABK, DJ (con tendencia a un aumento del tiempo de contacto) y CMJ% con todas las cargas, para el grupo A y en SJ, DJ (con tendencia a la reducción del tiempo de contacto) y CMJ% con cargas del 30 y 60%, para el grupo B. El grupo C no varió significativamente (p mayor 0,05), en ninguno de ellos. Tests de velocidad, ambos grupos A y B, mejoraron en todas ellos, aunque de forma significativa (p menor 0,05), en el test 5x10m el grupo A, mientras que el grupo B lo hizo en todas ellas (tramos de 0-15m, 15-30m, 30m total y 5x10m). Un programa de entrenamiento a base de saltos diversos, específicos, puede mejorar la velocidad de desplazamiento del futbolista. Los programas de entrenamiento para futbolista, dirigidos a la mejora de la fuerza explosiva y velocidad, deberían incluir un alto número de sprints. Los tests más adecuados para valorar la fuerza explosiva y velocidad de los futbolistas serían el CMJ, ABK, DJ40, CMJ con cargas no superiores al 50% PC y los dos tests de velocidad 5x10m y 30m.

Autor: Galbis Martínez Liliana.
Año: 2005.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: Facultad de Biología. Universidad de Murcia.
Centro de realización: Facultad de Biología. Universidad de Murcia.

Resumen: Myxococcus xanthus es una bacteria Gram-negativa que responde a la luz azul produciendo carotenoides, pigmentos que protegen a las células de los efectos dañinos de la radiación luminosa. En este proceso se encuentran implicados una serie de genes que determinan tanto enzimas carotenogénicas como proteínas reguladoras. A este último grupo pertenece el producto del gen carF, identificado por primera vez en este trabajo, cuyos mutantes nulos son incapaces de producir carotenoides. CarF actúa, por tanto, como un regulador positivo de la carotenogénesis inducida por luz azul. Mutaciones en el gen carF no afectan, sin embargo, a otros procesos celulares distintos de la carotenogénesis. El análisis genético por epistasia indica que la proteína CarF ejerce su función reguladora en los primeros pasos del mecanismo de respuesta a la luz azul, actuando bien como receptor de la señal luminosa o bien como transductor de la misma. De alguna forma, CarF provoca la inactivación, mediada por la luz, de la proteína CarR, un factor anti-sigma. En la oscuridad, CarR inactiva a la proteína CarQ, un factor sigma perteneciente a la familia ECF (Extra-cytoplasmic function) que es necesario para la expresión de los genes estructurales de la carotenogénesis. Cabe destacar que en ensayos de doble híbrido en Escherichia coli, se observa interacción física entre CarR y CarF, así como entre CarR y CarQ. En este trabajo también se estudió la interacción entre moléculas de CarR o CarF. Los resultados obtenidos indican que ambas proteínas pueden unirse a sí mismas, abriendo la posibilidad de que CarR y CarF formen parte de algún tipo de macrocomplejo en el que participen formas homomultiméricas de una y otra proteína. Asimismo, se ha comprobado que CarQ interfiere, de alguna manera en la interacción observada entre las proteínas CarR y CarF. Mediante fusiones transcripcionales del gen lacZ a distintos fragmentos de carF, se delimitó la región promotora del gen, sus niveles de expresión y su regulación. Estos estudios revelaron que carF se expresa moderadamente e independientemente del estado de iluminación o fase de crecimiento de los cultivos de M. xanthus. Utilizando también fusiones al gen lacZ, se localizó un fragmento que contenía el terminador de la transcripción del gen carF. En la secuencia de aminoácidos predicha para la proteína CarF aparecen cuatro posibles regiones transmembranales. Que CarF se aloja en la membrana se pone de manifiesto por su detección en la fracción insoluble de extractos celulares y por ensayos de topología con fusiones traduccionales al gen lacZ. El análisis topológico indica que el primer y tercer dominio transmembranal están orientados hacia el espacio periplasmático, mientras que el segundo y cuarto quedarían orientados hacia el citoplasma celular. La proteína CarF es similar a una familia de proteínas denominada "Kua", de función desconocida, que aparecen tanto en organismos procarióticos como eucarióticos, siendo más parecida, de forma general, a las proteínas "Kua" de animales. El patrón de hidrofobicidad de CarF está conservado en el resto de proteínas "Kua", así como varios dominios ricos en residuos de histidina que ocupan posiciones yuxtamembranales. En este trabajo se han desarrollado experimentos de complementación de un mutante de M. xanthus en el gen carF, con los genes Kua de Homo sapiens, Drosophila melanogaster y dos de los identificados en Arabidopsis thaliana. Los ensayos de complementación también se llevaron a cabo con distintas versiones truncadas de la proteína CarF, así como con variantes con mutaciones puntuales en distintos residuos histidina, conservados o no, en el resto de las proteínas "Kua". Los distintos ensayos de complementación mostraron que tan sólo el fragmento C-terminal de 40 aminoácidos (de los distintos probados) es prescindible para la correcta actividad de CarF. La sustitución de varias histidinas conservadas en todas o algunas proteínas "Kua" por el aminoácido alanina producía formas inactivas de la proteína, 8 mientra 81e s que la sustitución de una histidina que sólo está presente en CarF, no afectaba a su actividad. Se ha llevado a cabo la purificación de la proteína CarF. Para ello se utilizaron extractos de E. coli que sobreexpresaban la proteína y columnas de afinidad formadas por iones Cobalto. CarF se une directamente a este metal, probablemente mediante su coordinación por los residuos histidina. La proteína CarF purificada se utilizó para la obtención de anticuerpos policlonales anti-CarF, utilizados para localizar subcelularmente a la proteína, mediante ensayos de Western-blot. También se llevaron a cabo técnicas de microscopía de fluorescencia para determinar la localización subcelular tanto de CarF como de CarR. El sistema CarF-CarR de transducción de la señal luminosa, podría estar mediado por un transporte electrónico, de manera similar a como ocurre en otros sistemas biológicos, en donde los electrones van reduciendo, principalmente, los residuos tirosina, triptófano y cisteína. La importancia funcional de un residuo tirosina C-terminal de CarR en este supuesto flujo de electrones, se analizó mediante su sustitución por los aminoácidos alanina y fenilalanina (similar a la tirosina, pero sin el grupo hidroxilo reactivo). Los resultados mostraron que este residuo no mediaba la transmisión de la señal luminosa desde CarF a CarQ.

Autor: López Serrano Daniel.
Año: 2005.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: Facultad de Biología.
Centro de realización: Facultad de Biología.

Resumen: Marinomonas mediterranea es una bacteria marina, Gram negativa, que sintetiza melaninas a partir de L-tirosina. Es el primer procariota descrito que expresa todas las actividades enzimáticas PPO caracterizadas hasta ahora. No obstante, las actividades enzimáticas típicas de tirosinasas como son cresolasa y catecol oxidasa son específicamente activadas en presencia de SDS en los extractos celulares. Tratamientos de la bacteria con el agente mutagénico nitrosoguanidina permitieron obtener mutantes afectados en las actividades enzimáticas típicas de tirosinasa activables por SDS pero que conservan las demás actividades (DMPO, SO, TH, DO). Estos mutantes, como la cepoa ng56 son incapaces de producir melanina. Posteriores ensayos bioquímicos purificaron ambas enzimas por separado. La tirosinasa presenta las actividades cresolasa y catecolasa típicas de las tirosinasas. Es activable por SDS. Esta enzima se encuentra mayoritariamente en la fracción soluble de los extractos celulares. Existe otra enzima PPO adicional asociada a membrana con una amplia afinidad por diferentes sustratos. Predomina en ella la actividad lacasa, aunque también posee cierto grado de actividades TH y DO no activables por SDS. Con el fin de intentar clonar el gen que codifica la tirosinasa se obtuvo un mutante de esta bacteria mediante transposición al que se denominó T101. El transposón truncó el gen que codificaba la enzima multipotente de membrana, lo que permitió la clonación y secuenciación de dicho gen. El gen se denominó ppoA, y fue el primer caso descrito de clonación de una lacasa bacteriana. El hecho de que el mutante T101 sea capaz de producir melanina indica que PpoA no es la principal enzima responsable de la melanogénesis en Marinomonas mediterranea. En esta tesis se ha obtenido un segundo mutante amelanogénico mediante transposición llamado T105 permitió clonar el gen (ppoB1) que codifica la enzima tirosinasa soluble activable por SDS. Este gen se encuentra formando un operón con otro gen (ppoB2). La expresión de los ambos genes es necesaria para la actividad tirosinasa y para la síntesis de melanina en Marinomonas mediterranea. ppoB1 se encuentra mutado en la cepa ng56, dando lugar a una truncación temprana de la traducción que ocasiona una tirosinasa no funcional y un fenotipo amelanogénico para esta cepa. ppoB2 está mutado en la cepa T105 por inserción de un transposón dando lugar a una cepa también amelanogénica en medios no enriquecidos con cobre. El alineamiento de la secuencia correspondiente al centro activo de PpoB1 con otras secuencias de tirosinasas y catecol oxidasas permite postular una extensión en la secuencia consenso para los centros de unión de cobre que amplia el número de residuos conservados incluyendo a las 6 histidinas que conforman los dos centros de cobre y algunos aminoácidos aromáticos esenciales para la actividad. ppoB2 codifica una proteína que muestra similitud con las proteínas del grupo COG5486, que predicen ser proteínas hipotéticas de membrana de unión a metales. La reconstitución de la actividad en el mutante T105 ha demostrado que se trata de una chaperona de cobre encargada de transferir cobre a PpoB1 cuando las concentraciones de cobre en el citoplasma son bajas. Así la tirosinasa puede reconstituir su centro activo y ser funcional. Mediante fusión a hemaglutinina y Western Blot contra ésta, se ha demostrado que PpoB2 es una proteína integral de membrana de Marinomonas mediterranea perteneciente al grupo COG5486, relacionada con la captación de metales. Se ha puesto a punto la técnica de complementación génica en Marinomonas mediterranea. Mediante el uso de transposones es posible complementar mutaciones en ppoB1 o ppoB2, introduciendo copias silvestres de los genes correspondientes 8 . Con es 36d ta técnica y mediante mutagénesis dirigida se ha demostrado que el extremo N-terminal rico en histidinas, el motivo MxxxMM y el motivo CxxxC son esenciales para la funcionalidad de PpoB2.

Autor: Camps Febrer Maria Carme.
Año: 2005.
Universidad: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: Hospital Santa Creu i de Sant Pau.
Centro de realización: Instituto de Bioquímica Clínica.

Resumen: La adrenoleucodistrofia ligada al X (X-ALD) es un desorden metabólico de origen genético que se caracteriza por una desmielinización progresiva del sistema nervioso central o periférico, según las diferentes formas clínicas, acompañada por una insuficiencia adrenocortical. Los pacientes muestran una acumulación de ácidos grasos saturados de cadena muy larga (AGCML), y en especial de C26:0, en plasma y tejidos diana. La acumulación de dichos compuestos se debe a un defecto en su proceso de beta-oxidación peroxisomal. La causa genética de esta enfermedad se halla en las mutaciones que afectan al gen ALD (ABCD1), que dan lugar a una pérdida de función de la proteína ALDP. ALDP es una proteína de tipo ATP-binding cassette localizada en la membrana peroxisomal. El fenotipo bioquímico de los pacientes sugiere que ALDP está implicada en el importe de AGCML al peroxisoma. En la membrana peroxisomal existe otra proteína, ALDRP, que posee un alto percetaje de identidad a nivel de aminoácido con ALDP. Esta proteina parece tener cierta redundancia funcional con ALDP debido a su capacidad para corregir los niveles de AGCML en fibroblastos de pacientes cuando se sobreexpresa. En consecuencia, se abren las puertas hacia una posible estrategia terapéutica para la X-ALD basadas en la sobreexpresión de dicha proteína. El trabajo realizado en esta tesis doctoral pretende aportar nuevos datos sobre los efectos de las sobreexpresión de ALDRP in vivo, así como del papel que desarrollan ALDP y ALDRP en el metabolismo de los ácidos grasos, utilizando ratones "knockout" y transgénicos como material de investigación. Los animales utilizados incluyen al ratón Ald ko (inactivación del gen ABCD1), el ratón Aldr ko (inactivación del gen ABCD2), el ratón Ald/aldr ko (inactivación del gen ABCD1 i ABCD2) el ratón Wt/tg (sobreexpresión del gen ABCD2, que conduce a un augmento de 5-10 veces del nivel de laproteína ALDRP en relación al WIld-type (Wt)) y el ratón Ald/tg (inactivación del gen ABCD1+ sobreespresión del gen ABCD2). La determinación de ácidos grasos en tejidos procedentes delratón Ald ko permite detectar aumentos de AGCML, y en especial de C26:0, en tejidos neurales y glándula adrenal. El ratón Ald/tg, en canvio, presenta unos valores normales o incluso disminuidos de C26:0 en estos mismos tejidos. Este resultado demuestra, por primera vez, que la sobreexpresión de ALDRP es operativa, in vivo, en la normalización de los niveles de AGCML. La determinación de ácidos grasos en tejidos procedentes de ratones Ald ko, Aldr ko y Ald/aldr ko ha permitido la identificación de sustratos específicos de ALDP y de ALDRP en las series de ácidos grasos saturados y omega9-mono-insaturados de 20 a 26 carbonos de longitud. El estudio de los efectos de la sobreexpresión de ALDRP a través de los ratones Wt/tg, se han detectado algunas alteraciones en los niveles de ácidos grasos de algunos tejidos procedentes de estos animales. Estas alteraciones, que afectan a ácidos grasos de las series omega 6 i omega3-poli-insaturados, sugieren la implicación de modificaciones en el proceso de síntesis de dichos compuestos. A través de estudios de RT-PCR quantitativa se han descartado alteraciones en la expresión a nivel de ARN mensajero de los genes que codifican para elongasas y desaturasas (enzimas que participan en la síntesis de los ácidos grasos) que puedan explicar los cambios detectados en los niveles de sustratos. Finalmente, el trabajo presentado en esta tesis doctoral incluye un estudio basado en la utilización de microarrays de cADN, con el fin de monitorizar la expresión génica en fibroblastos embrionarios de ratón. Se han utilizado muestras de cultivos con genotipo Wt o Ald ko para determinar diferencias en la expresión génica causadas por la ausencia de ALDP, y muestras de cultivos tratados /no tratados con C26:0 para estudiar el papel de este compuesto en el mecanismo fisio-patológico de esta enfermedad.

Autor: Garrido Ocaña Maria Elena.
Año: 2005.
Universidad: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: Facultat de Ciències.
Centro de realización: Autònoma de Barcelona.

Resumen: El hierro y el zinc son micronutrientes esenciales para el crecimiento normal de la gran mayoría de microorganismos, siendo los mecanismos de captación de estos cationes divalentes elementos fundamentales para que las bacterias patógenas sean capaces de promover un proceso infectivo. Además, las proteínas receptoras de hierro se localizan en la membrana externa de las bacterias Gram negativas, lo cual las hace candidatas a ser empleadas para el diseño de vacunas. En este marco, el objetivo de la presente tesis doctoral ha sido profundizar en el estudio de los mecanismos de captación de cationes divalentes de Pasteurella multocida, una bacteria patógena que afecta a una gran variedad de animales originando importantes pérdidas económicas en el sector ganadero. En este estudio se ha identificado un receptor de hierro de 60 kDa, al que se ha denominado HbpA, que presenta un mecanismo de regulación distinto al utilizado comúnmente por las bacterias, ya que es independiente del sistema Fur, determinándose que su regulación depende de Fe2+, Mn2+ y hemina. Se ha demostrado que el gen que codifica esta proteína presenta un corrimiento programado de lectura que da lugar a un derivado truncado de 40 kDa. Se ha caracterizado así mismo la función de esta proteína, determinándose que une tanto hemina como hemoglobina, y que la capacidad de unión a ambas se mantiene en el derivado truncado de la proteína. Además, se ha estudiado la antigenicidad de la proteína HbpA, así como su efecto inmunogénico, demostrándose que la proteína HbpA y su derivada truncada son antigénicas, pero no se obtiene protección cuando se administra dicha proteína entera en experimentos de enfrentamiento utilizándose un modelo experimental animal de ratón. Por lo que se refiere a los mecanismos de incorporación de zinc de P. multocida, desconocidos hasta el presente, se han caracterizado los genes de captación de zinc de alta afinidad (znuABC), determinándose que existe una separación de 820 kb entre los genes znuA y znuCB y que los genes znuC y znuB forman parte de una misma unidad transcripcional. A diferencia de lo que ocurre en Escherichia coli y en otras bacterias, en las cuales la proteína Zur regula la expresión de este sistema de captación de zinc, en P. multocida no se ha encontrado una proteína homóloga a dicha proteína Zur. No obstante, se ha podido establecer que en este patógeno es la proteína Fur la responsable de la regulación de las unidades transcripcionales znuA y znuCB, juntamente con los iones Zn2+ y Fe2+. Finalmente, mediante la construcción de mutantes znuA y znuC, también se ha demostrado que estos genes son imprescindibles para la virulencia de P. multocida.

Autor: Janer Gual Gemma.
Año: 2005.
Universidad: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: Centro Investigación y Desarrollo.
Centro de realización: IIQAB-CSIC.

Autor: FERNANDEZ ISERN GUERAU.
Año: 2005.
Universidad: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: HOSPITAL UNIV. GERMANS TRIAS PUJOL.
Centro de realización: AUTONOMA DE BARCELONA.

Resumen: La presente Tesis Doctoral ha tenido como objetivo principal el estudio de la variabilidad genética y fenotípica del virus de la inmunodeficiencia humana de tipo 1 (VIH-1). La alta variabilidad genética es la principal característica que distingue la evolución de los virus RNA del resto de organismos que poseen DNA como material genético. Esta alta variabilidad genética del VIH-1 origina que el virus esté sometido constantemente a un proceso de mutación, competición y selección de aquellos genomas adaptados a un determinado ambiente. La respuesta adaptatiba a un cambio ambiental no está conducida por un único tipo de genoma viral, sino por un conjunto de genomas relacionados pero no idénticos denominado cuasiespecie. El estudio exhaustivo de la variabilidad de diferentes poblaciones en el VIH-1 es esencial para comprender la evolución de la enfermedad y poder desarrollar estrategias para combatirla. En este trabajo se presentan dos estudios donde se pretende relacionar el genotipo de una región determinada (env o pol) con su fenotipo. El estudio del gen env se centra en la región V3-V5 de la glicoproteína gp120 a causa de su implicación fundamental en el tropismo celular. En el proceso de fusión, la glicoproteína gp120 interacciona con el receptor CD4 y con un receptor de quimiocinas, que actúa como coreceptor del virus y que principalmente son CCR5 o CXCR4. Las variantes víricas que utilizan el coreceptor CCR5 se denominan variantes R5 mientras que las que utilizan el coreceptor CXCR4 se denominan variantes X4. Las muestras de pacientes para este estudio fueron escogidas por su bajo numero de células T CD4+ ( menor que 200 cel./µl) ya que en este estadio de la enfermedad las presiones selectivas del sistema inmunitario del huésped han disminuido mucho y se desconocen las implicaciones reales en la evolución vírica de las variantes R5 y X4 en esta fase. Así mismo, mediante un cribaje genético basado en la utilización del bacteriófago lambda, se determinaron las actividades catalíticas de las proteasas del VIH-1 de tres poblaciones víricas que no habían sido tratadas anteriormente con inhibidores de la proteasa. El estudio de estas cuasiespecies adquiere importancia en la medida que esta proteína es una de las principales dianas del tratamiento antiretrovírico y esencial en la producción de partículas víricas maduras. La proteasa del VIH-1 es un buen modelo de estudio ya que con este sistema de cribaje, se pueden determinar un gran número de eficiencias catalíticas de una forma sencilla y reproducible y por lo tanto se pueden relacionar un gran espectro de genotipos con sus fenotipos correspondientes.

Autor: VIÑOLY ABREU RAQUEL.
Año: 2005.
Universidad: LA LAGUNA.
Centro de lectura: INSTITUTO DE BIORGANICA ANTONIO GONZALEZ.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA.

Resumen: Hemos estudiado la caracterización y localización de las células gliales del sistema visual (retina, nervio óptico, quiasma, tracto óptico y conus paillaris) del reptil Gallotia galloti durante la ontogenia. Realizamos técnicas inmunohistoquímicas utilizando anti-GS y la coexpresión con anti-GFAP como marcadores de células macrogliales y técnicas histoquímicas utilizando la lectina de tomate (Lycopersicon esculentum) como marcador de células microgliales. Hemos observado que la expresión de GS queda confinada en la retina a las células de muller como en el resto de vertebrados, confiriendo a dichas células un papel de protector neuronal y que la coexpresión con la GFAP queda limitada a los pies de dichas células. Por otro lado, en el nervio, quiasma y tracto óptico la expresión es maxima en el individuo adulto, dicha expresión puede ser necesaria para mantener los niveles de glutamato en condiciones no tóxicas para los oligodendrocitos del nervio tal y como ha sido descrito en mamíferos. Además, hemos observado tres subpoblaciones celulares distintas localizadas en distintas regiones, lo que sugiere una gran heterogeneidad glial. En cuanto a la población microglial existente durante la ontogenia, esta presenta distintas morfologías, iguales a las observadas en el cerebro de esta misma especie y similares a las observadas en el SNC de distintos vertebrados. Por otro lado discutimos que las posibles vías de entrada de la microglía a la retina y nervio óptico son similares a las descritas en mamíferos y aves y proponemos un origen mesodérmico.

Autor: ALVAREZ LOPEZ CARMEN MARIA.
Año: 2005.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: DEP. BIOQUMICA Y BIOLOGA MOLECULAR.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Los organismos vivos manifiestan ritmos que son controlados por relojes

Autor: COSTALES MARCOS LORENA.
Año: 2005.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGIA DE OVIEDO.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA DE OVIEDO.

Resumen: La osificación endocondral implica la formación de centros de osificación que sustituyen el cartílago por el tejido óseo. El desarrollo del centro de osificación secundario presenta similitudes con la osificación primaria de las diáfisis pero hay diferencias sustanciales entre ambos procesos. La formación del centro de osificación secundario comienza con el crecimiento invasivo de canales de cartílago a través del cartílago hialino no calcificado de la epífisis. Estos canales constituyen una vía para los vasos y las células precursoras osteogénicas. El crecimiento centrípeto de los canales está relacionado con la expresión de MMP-9, MMP-13 y MMP-14, y con la presencia de células de la línea de osteoclastos, pero no depende de VEGF. El clodronato es un conocido inhibidor de osteoclastos. Los animales tratados con el bisfosfonato no muestran alteraciones en los patrones de la osificación secundaria. Los efectos más evidentes son un retraso en el comienzo de la invasión y una acumulación de trabéculas en la cavidad medular. La inhibición de la reabsorción no implica la muerte de osteoclastos ni la pérdida de la expresión de MMPs.

Autor: ESCOBEDO LUCEA Ma. CARMEN.
Año: 2005.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: INSTITUTO VALENCIANO DE INFERTILIDAD - I.V.I..
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA E INSTITUTO UNIVERSITARIO IVI.

Autor: Sàbat Bofill Maria.
Año: 2005.
Universidad: GIRONA.
Centro de lectura: Facultad de Ciencias, Univesidad de Girona.
Centro de realización: Universidad de Girona.

Resumen: En esta tesis doctoral se describe la estructura gonadal, gametogénesis y ciclo anual de Scorpaena porcus, S. scrofa y S. elongata, para profundizar en el conocimiento de los diferentes grados de especialización dentro el oviparismo en peces. Se pretende resaltar aquellas características inusuales que difieren de las que se han descrito hasta ahora por la mayoría de las especies ovíparas de teleósteos, y relacionarlas con las estrategias reproductivas de las especies que las presentan. El muestreo se realizó de forma intensiva entre el año 2000 y el 2002, aunque se continuó recogiendo muestras hasta Agosto de 2004, de forma más o menos frecuente según la necesidad. En total se han obtenido 258 ejemplares de S. porcus, 119 de S. scrofa y 46 de S. elongata. S. porcus, S. scrofa y S. elongata son especies ovíparas ovulíparas especializadas, ya que su estructura ovárica presenta toda una serie de rasgos muy particulares i poco comunes al resto de peces ovíparos estudiados hasta ahora: posición central del raquis músculo-conjuntivo; presencia de pedúnculos en los oócitos en fase de crecimiento secundario; escasez y pequeño tamaño de los alvéolos corticales; zona radiata muy delgada; i secreción de una masa viscosa que engloba los huevos en el momento de la puesta. Todas estas características también se han observado en Scorpaena notata, sugiriendo que la especialización del oviparismo ovulíparo se da en todo el género Scorpaena. La estructura testicular i la espermatogénesis de estas especies también es muy particular. En primer lugar los testículos son del tipo lobular irrestricto, pero con algunas características como la ordenación parcial de los cistos según el estadio de maduración de las células germinales que contienen, y la ausencia de lumen central, que actualmente sólo se ha observado en testículos del tipo lobular restricto de las especies de la serie Aterinomorpha. Y en segundo lugar, la espermatogénesis es del tipo semicística, es decir, los cistos se abren antes de acabar todo el proceso i las células germinales acaban de desarrollarse a la luz del lóbulo. La puesta de estas especies es múltiple y consiste en una masa gelatinosa de huevos pelágica, que en el caso de S. porcus se liberan entre los meses de Junio y Agosto, y en S. scrofa, a partir del mes de Julio. La presencia de esta masa se ha relacionado con un apareamiento macho-hembra, de manera que el macho liberaría el esperma directamente sobre la masa de huevos, asegurando de esta forma la fertilización total de los mismos.

Autor: ROCA PÉREZ LUIS.
Año: 2005.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FACULTAD DE MATEMÁTICAS - UNIVESITAT DE VALÈNCIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: La biosíntesis de metabolitos secundarios en las plantas esta regulada por factores inherentes a la planta (genotipo y estado de desarrollo) y los procedentes del medio ambiente (abióticos y bióticos). De todos los factores abióticos la intensidad luminosa, las condiciones climáticas y la disponibilidad de nutrientes son los que condicionan principalmente la síntesis de estos productos naturales. La mayor o menor disponibilidad de nutrientes en el suelo queda reflejada en el estado nutricional de la planta, siendo el contenido en nutrientes minerales en los distintos órganos vegetales los que afectan de forma directa al metabolismo de la planta. Muchos de estos compuestos naturales, entre los que se incluyen los glucósidos cardiotónicos, producidos por las plantas tienen gran interés debido a su uso para la elaboración de fármacos. Por tanto, es necesario conocer aquellos factores que influyen en la síntesis de estos con el fin de mejorar su producción y obtener mayores rendimientos. En la presente Tesis Doctoral se ha estudiado la influencia de la biomasa y de las características del suelo sobre el contenido en nutrientes y la producción de cardenólidos en hojas de Digitalis obscura, asi mismo se ha analizado la variación estacional e interpoblacional en el contenido de nutrientes, cardenólidos y nivel de expresión del gen Dop5,8r en poblaciones naturales de D. obscura. Los resultados ponen de manifiesto la influencia del genotipo, el estado de desarrollo de la planta y las condiciones ambientales en la biosíntesis de estos productos naturales.