BIOENERGETICA

Autor: VERAS PEIXOTO PABLO MARCO.
Año: 2005.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: El transporte de proteínas a través de las membranas mitocondriales es un proceso vital del que depende el 98% de las proteínas mitocondriales que están codificadas en el núcleo. Tres complejos transportadores, TOM en la membrana externa, TIM23 y TIM 22 en la membrana interna son los responsables de la distribución de estas proteínas en los cuatro su compartimento mitocondriales delimitados por las dos membranas. La existencia dos canales acuosos, uno relacionado con el funcionamiento de TOM y otro con el de TIM23, nos ha llevado a plantear la hipótesis de que también existiera una actividad de canal asociada a TIM22, el complejo responsable no del transporte, sino de la inserción de proteínas multiópicas en la membrana interna mitocondrial. Aplicando técnicas de pinzamiento de voltaje directamente sobre mitoplastos (mitocondrias desprovistas de membrana externa) y de membranas internas reconstituidas en liposomas, hemos determinado por primera vez las condiciones para la inducción de este canal. Sus características electrofisiológicas son muy semejantes alas descritas anteriormente para TOM y TIM23, pero su distinción es posible gracias al empleo de péptidos señal específicos. El canal de TIM22 está constituido por dos poros idénticos, cuya apertura es cooperativa. El radio de cada uno de esos poros es lo suficientemente grande como para acomodar hasta dos hélices transmembrana. La disección molecular del complejo TIM22 combinada con el empleo de técnicas electrofisiológicas y bioquímicas nos ha permitido determinar el papel de cada uno de los componentes del complejo en la estructura y funcionamiento de su canal. Así, hemos determinado que la proteína TIM 54 no participa ni en la estructura ni en el funcionamiento del canal. Por su parte, TIM22 es el componente esencial del canal, mientras que TIM 18 funcionaría como un receptor delas secuencias señal internas. Nuestros resultados establecen además que TIM22 es un canal dinámico, solamente abierto en presencia de la proteína en tránsito. La progresiva activación de este canal y el comportamiento cooperativo de sus múltiples niveles de conductancia son acorde con un canal latente, finamente regulado por el gradiente electroquímico. Asimismo, el funcionamiento cooperativo de sus poros permitiría la inserción de la proteína en la membrana interna mitocondrial, tras el posible desensambalaje del complejo.

Autor: GODOY RUIZ RAQUEL.
Año: 2006.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE GRANADA.

Resumen: Hemos estudiado el efecto de 27 mutaciones conservativas (Glutamato-Aspartato y Valina-Isoleucina) en la estabilidad termodinámica de tiorredoxina de E. coli. La mayoría de estas mutaciones son desestabilizantes, indicando que los ambientes de los grupos implicados pueden estar optimizados con un alto grado de especificidad, hasta el punto de discriminar entre D, E, I y V. Las correspondientes interacciones estabilizantes podrían quizás detectarse en alineamientos de secuencias. Ésto podría ser útil en la derivación de información estructural a partir de alineamientos de secuencias. Los resultados anteriores nos llevan a sugerir la posiblidad de racionalizar y quizás predecir efectos de mutaciones en la estabilidad de proteínas en base a 'modelos evolutivos'. Por 'modelo evolutivo' nos referimos a un modelo para los efectos de la mutación, sobre la estabilidad, en el cual se evalúan ciertas características del ambiente del residuo mutado, desde el punto de vista de cómo esos ambientes han sido seleccionados