GENETICA HUMANA

Autor: CASALS SENENT TERESA.
Año: 2003.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA.

Autor: ALEGRET COLOMÉ JOSEP MARIA.
Año: 2003.
Universidad: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE POSTGRADO.

Autor: GALLARDO SAINZ DOMINGO.
Año: 2003.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Centro de realización: CENTRE DE TRANSFUSIÓ I BANC DE TEIXISTS.

Resumen: Se ha diseñado una técnica de secuenciación nucleotídica simplificada que permite el análisis de la totalidad de las regiones relevantes del gen FVIII de forma rápida y sensible. Ello ha permitido el desarrollo de un protocolo optimizado para el diagnóstico molecular directo de la hemofilia A que ha demostrado una gran robustez y fiabilidad, por lo que ha sido implantado en la rutina siguiendo la normativa ISO-9001:2000. Asimismo se ha puesto a punto un método rápido para el diagnostico molecular directo de la hemofília B basado en el análisis sistemático de las secuencias nucleotídicas relevantes del gen FIX. Se ha demostrado la sensibilidad del método tras ser aplicado con éxito a partir del material genético extraído de la raíz de un único cabello. Al igual que en el caso de la hemofilia A, este método ha sido implantado en el laboratorio según la normativa ISO-9001:2000 certificando así la calidad de la actividad diagnóstica. Estas nuevas estrategias han permitido la identificación de un total de 56 mutaciones en enfermos hemofílicos procedentes de la población española, 10 de las cuales corresponden a hemofilia B y 46 a hemofilia A. Estas últimas han sido enviadas al registro internacional de mutaciones de hemofilia A (HAMSTeRS). Se han descrito un total de 16 nuevas mutaciones, 2 asociadas a hemofilia B y 14 a hemofilia A. La mutación 2409delT ha sido la primer mutación publicada en una revista de ámbito internacional y registrada en la base de mutaciones HMATeRS por un grupo español. Por otra parte se ha puesto de manifiesto que la identificación de la mutación posibilita el diagnostico de un alto porcentaje de las familias afectadas de hemofilia mediante la aplicación de la técnica de PCR-RFLP (cerca del 75% en nuestro estudio). Finalmente ha sido caracterizada pro vez primera una mutación responsable de la aparición de una coagulopatía congénita originada como consecuencia de una recombinación homóloga desigual entre secuencias Alu. Dicha recombinación, mediada por elementos pertenecientes a familias Alu diferentes localizadas en intrones adyacentes del gen FVIII, originó una gran delección de unas 23 Kb que incluye la totalidad del exón 25. Dos son los posibles mecanismos implicados: recombinación por apareamiento intracromosómico o bien por alineamiento desigual entre cromátidas hermanas.

Autor: SALIDO OLIVARES MARINA.
Año: 2004.
Universidad: CÓRDOBA.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: OBJETIVO: Determinar si el polimorfismo del MHC se asocia con la respuesta al tratamiento con Infliximab en la AR. PACIENTESY MÉTODOS: Se incluyeron 78 pacientes con AR refractaria al tratamiento previo con otros FAMEs, que fueron tratados consecutivamente con infliximab del 2001 al 2002 en los servicios de Reumatologíadel Hospital Clínico San Carlos y La Paz de Madrid. Como grupo control se emplearon 342 individuos. Se recogieron variables clínicas y analíticas previo a la terapia y a los 3 meses de iniciarla. Se consideraba paciente respondedor (PR), si existía una mejoría igualo superior al 50 % del valor inicial del NAO, NAT Y de dos ó más de estos criterios: PCR, VSG, HAQ o VAS. Se consideraba también PR si presentaba un 25 % de mejoría del valor inicial absoluto del DAS 28. Al año se valoró el grado de respuesta mantenida. En el estudio bivariante de características basales se utilizó la prueba?2 y la t de Student, dependiendo de si la variable era cualitativa o cuantitativa respectivamente. En el estudio genético se utilizó la ?2 y la Odds Ratio,y la pruebaexactade Fisher en casos esperados menoresde 5. RESULTADOS: Presentaban una media de 56,88 años (22-88 años), predominio de mujeres (76,9%), duración media de la AR de 10 años y FR+ en un 84,62%. La mayoría tratadas con terapia combinada. Todos presentaban criterios de actividad al inicio. Tras la terapia se consideraron PR 41 Ycomo PNR 37. Al año mantenían la terapia56 pacientes (35 PR Y21 PNR). Los haplotipos microsatélites de TNF no presentaban diferencias, excepto TNF a11b4c1d3e3 (41% PR Y 16% PNR). Tampoco las presentaban los alelos del epítopo compartido y los microsatélites MICA, 06S2223 y BAT2. El único alelo incrementado en PNR fue 06S273_3 (p=0,04, OR=0,37). Este alelo se asocia al BAT2_2 en población control. En nuestro caso, esta asociación se mantenía en PNR (85%) pero no en PR (46%) con una p=0,02. En los PR se asociaban el 06S273- 4 con BAT2_2 (17 de los 37 versus 4 de los 35 PNR; OR=6,39 y p=0,001). Con respecto al grupo control sólo se asociaban a PR (OR=4,27 Y p=0,00002), y por tanto con la respuesta favorable a la terapia. Parece que existe un haplotipo más extenso en PR formado por 06S273_3, BAT2_2 y TNF a11b4c1d3e3 (OR =10,93;P = 0,009). Incluso parece asociarse a la presencia de ORB1*0404. CONCLUSIONES: No existen diferencias en la distribución de alelos del epítopo compartido, en los polimorfismos del promotor de TNFa o de los microsatélites MICA y 06S2223. El 06S273_3 es el único incrementado en PNR y está asociado con BAT 2_2 en población control. Los alelos BAT2_2 Y 06S273- 4 están incrementados exclusivamente en PR, forman haplotipo con TNF a11 b4c1 d3e3 y, por lo tanto, se asocia con una respuesta favorable al tratamiento con Infliximab. Existen marcadores en el MHC que pueden predecir la respuesta clínica al tratamiento con infliximab a corto plazo en pacientes con AR refractaria a otros FAME.

Autor: PRIEGO CUADRA TERESA.
Año: 2004.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA.
Centro de realización: FAC. DE MEDICINA.

Resumen: Durante la inflamación del eje somatotropo está inhibido. La administración de LPS se utiliza como modelo experimental de inflamación y sepsis. El LPS produce una disminución de los niveles séricos del factor de crecimiento similar a la insulina (IGF-I). El IGF-I está regulado por la hormona de crecimiento (GH) y por la proteína de unión a este en suero, la IGFBP-3. Durante la inflamación se activa el eje hipotálamo-hipófiso-adrenal (HHA) liberando gluccoritcoides y se induce la síntesis de otro regulador importante del proceso inflamatorio, el óxido nítrico (NO). Ambos compuestos pueden estar mediando la inhibición del IGF-I inducida por la administración de LPS. Por todo ello, los objetivos planteados fueron estudiar el efecto de la administración de LPS sobre el eje somatotropo y analizar el papel de la activación del eje HHA y del aumento del NO en dicho proceso. A nivel hipotalámico, la administración del LPS, activa la expresión el gen de la somatostatina. Este efecto estimulador del LPS sobre la somatostatina hipotalámica está mediado por el aumento de la liberación de NO. A nivel hipofisario, el LPS, a dosis bajas, tiene un efecto estimulador sobre la secreción de la GH. A dosis altas, disminuye la secreción hipofisaria de la GH. La administración del LPS tiene un efecto inhibitorio directo sobre la expresión hepática de los genes del receptor de la GH, del IGF-I y de la IGFBP-3. La disminución de la IGFBP-3 circulante contribuye a la disminución de los niveles séricos del IGF-I. El aumento del NO que se produce tras la administración de LPS ejerce un papel importante en la inhibición de la expresión hepática de los genes del IGF-I y de la IGFBO-3. El aumento de los glucorticoides tras la administración de LPS no media esta inhibición, sino que tiene un efecto protector.

Autor: MARTÍNEZ GARAY ISABEL.
Año: 2004.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIBLIOTECA DEL CAMPUS DE BURJASSOT.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.

Resumen: El retraso mental constituye un problema social y Sanitario que se agrava, en ambos sentidos, Cuando se trata de una condici6n hereditaria. Diversos estudios señalan desde hace años que, en Concreto, el retraso mental ligado al cromosoma X es una de las principales causas de deficit psiquico leve y moderado, Con una incidencia acumulada que se estima en 1 :300 a 1 :600 varones. En este trabajo se ha abordado el analisis de varias familias afectadas de retraso mentalligado al X, tanto de formas inespecificas como sindr6micas. El analisis se ha centrado principalmente en doS regiones: Xp22 en 10S casos inespecificos, y Xq11.4 en los sindrómicos, aunque tambien se han analizado dos genes en Xq24-q25. En Xp22 y Xp11.4 se han estudiado 13 genes respectivamente, habiendóse identificado en una de las familias un cambio en uno de ellos (FLl14503), que no esta presente en secuencias de las bases de datos ni en individuos sanos. Su analisis ha permitido clasificar a la proteina que codifica como una nueva proteina asociada a microtUbulos, pero su implicació en el retraso mental a(m no ha sido probada. En el Caso de la familia afectada por el sindrome de Lenz, se ha identificado la mutaci6n responsable en el gen PQBP 1, Situado en Xp 11.23. De esta forma se amplian tanto la heterogeneidad alelica de este gen, responsable de otros síndromes y de retraso mental inespecifico, como la heterogeneidad genica del sindrome de Lenz, por tratarse del tercer locus asociado a esta enfermedad. El analisis del caso esporadico de sindrome de Coffin-Lowry ha permitido identificar una inserción de un elemento LINE L 1 defectivo en el gen RPS6KA3 como la causa molecular de la patología presentada por el paciente. La inserción se ha producido cerca del sitio dador del intrón 3, provocando el skipping del exón 4, 10 que conlleva un desplazamiento de la pauta de lectura y la aparición de un codón de parada prematuro, obteniendose una proteina incompleta.

Autor: GONZÁLEZ CABO MARÍA PILAR.
Año: 2005.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: INSTITUTO DE BIOMEDICINA DE VALENCIA.
Centro de realización: INSTITUTO DE BIOMEDICINA DE VALENCIA.

Resumen: El deficit de frataxina es la causa principal de la ataxia de Friedreich, una enfermedad neurodegenerativa autos6mica recesiva. La función de la frataxina todavia no se conoce. En este trabajo nosotros mostramos que Yfh1p, el ortólogo de frataxina de Saccharomyces cerevisiae, interacciona fisicamente con succinato deshidrogenasa, concretamente con las subunidades Sdh1 p y Sdh2p, de la cadena de transporte electrónico mitocondrial de levadura, y tambien con las subunidades ETF(L y ETFj: de la flavoproteina transferidora de electrones Experimentos geneticos de interacción sintetica han confirmado una relación funcional entre el gen YFH1 y los genes de succinato deshidrogenasa SDH1 y SDH2 También hemos demostrado una interacción fisica entre la frataxina humana y las subunidades de la succinato deshidrogenasa humana, sugiriendo que frataxina tiene un papel en la cadena de transporte electrónico mitocondrial en humanos. Por lo tanto, sugerimos una participación directa de la cadenarespiratoria en la patogénesis de la ataxia de Friedreich, la cual proponemos que se puede considerar como una enfermedad OXPHOS.Desde el descubrimiento de la frataxina y su localizacipn como molecula de la matriz mitocondrial, la ataxia de Friedreich se ha convertido en el prototipo de enfermedad mitocondrial causada por un gen nuclear No obstante, no es la unica ataxia que se puede considerar como mitocondrial. Otro ejemplo es la anemia sideroblastica ligada al X asociada con ataxia cerebelosa (XLSA/A), causada por mutaciones en el gen del transportador mitocondrial ABC7. Esta enfermedad esta directamente relacionada con la homeostasis del hierro, al igual que la ataxia de Friedreich. Realizamos el aislamiento y caracterizaci6n del gen homólogo del ABC7 en Caenorhabditis efegans y posteriormente la generaci6n de un mutante transitorio, que presenta el siguiente fenotipo. letalidad embrionaria (Emb), retraso en el crecimiento (Gro), reducción en la puesta de huevos (Egi), defecación alterada y aumento en la longevidad. Este fenotipo es similar a otros fenotipos asociados a mutantes transitorios de genes relacionados con la biogenesis de los clusters Fe-S en levadura.

Autor: López Nieva María del Pilar.
Año: 2005.
Universidad: AUTÓNOMA DE MADRID.
Centro de lectura: Facultad de Ciencias.
Centro de realización: Facultad de ciencias.

Resumen: Los linfomas tímicos de ratón inducidos con radiación gamma constituyen una clase, relativamente heterogénea de linfomas linfoblásticos de tipo T formados por timocitos inmaduros (normalmente dobles negativos (DN) o dobles positivos (DP)). Las dificultades obvias del trabajo con muestras humanas hacen aconsejable el desarrollo de modelos animales, sobre todo cuando se trata de identificar genes menores de susceptibilidad. El análisis de una amplia colección de este tipo de linfomas inducidos en cepas susceptibles de ratón (C57BL/6J y BALB/cJ) nos ha permitido identificar nuevas alteraciones en varios genes mayores de susceptibilidad, como c-Myc, Notch y p21 que se sobre-expresan en la practica totalidad de los mismos. Utilizando cepas consómicas y cepas recombinantes congénicas, creadas entre una cepa altamente susceptible (C57BL/6J) y otra altamente resistente (SPRET o SEG/Pas), hemos identificado también dos regiones candidatas a contener genes menores de susceptibilidad (algunos de carácter modificador) en los cromosomas 16 (Tlyr2) y 19 (Tlyr1). Los genes que codifican para la DNA-PKcs y un ligando del sistema PD-1/PD-L1 podrían ser buenos candidatos en estas regiones.

Autor: ANTONELL BOIXADER ANNA.
Año: 2005.
Universidad: POMPEU FABRA.
Centro de lectura: DEPARTAMENTO DE CIENCIAS EXPERIMENTALES Y DE LA SALUD.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE CIENCIAS EXPERIMENTALES Y DE LA SALUD.

Resumen: En este trabajo se presenta la evolución molecular y estudio funcional de genes localizados en las duplicaciones segmentarias de la región 7q11.23, implicada en el Síndrome de Williams-Beuren (SWB). Cada una de estas duplicaciones está formada por tres bloques llamados A, B y C. Se ha datado la aparición de estas duplicaciones en los últimos 25 millones de años de evolución y caracterizado en detalle la región 7q11.23 humanas y las ortólogas en otros primates (chimpanzé, gorila, orangután y macaco). Cada bloque ha evolucionado de manera independiente, siendo el bloque B exclusivamente duplicado en humanos. Además se ha propuesto un modelo evolutivo con reordenamientos específicos (mayoritariamente inversiones) y mecanismos de generación. Se han detectado secuencias Alu en todos los extremos de los bloques de duplicaciones segmentarias, lo que sugiere que fenómenos de recombinación homóloga no alélica entre estos han mediado la generación y expansión local de las duplicaciones. La extraordinaria tasa de cambio evolutivo de esta región, extrapolable a otras regiones del genoma ricas en duplicaciones segmentarias, hace que exista una variación genómica importante entre especies de primates hominidos, la cual podría se relevante funcionalmente y predisponer a enfermedad. Correlaciones clínico-moleculares en los pacientes con el SWB han permitido determinar que la haploinsuficiencia por NCF1, un gen localizado en las duplicaciones y variablemente delecionado en los pacientes, es un factor protector por hipertensión. Se ha propuesto un modelo patogénico para explicar esta asociación, implicando la oxidasa NAD(P)H y estrés oxidativo. La haploinsuficiencia para el gen de la elastina presente en todos los pacientes con SWB se sabe que conduce a estenosis vascular i predispone a hipertensión arterial, y junto con la no deleción del gen NCF1 y por tanto una capacidad normal de generar estrés oxidativo, hace que los pacientes desarrollen hipertensión arterial con muchas más probabilidades que si tienen deleción del gen NCF1. También se ha sugerido que nuevas estrategias terapéuticas podrían ser utilizadas. Finalmente, se ha caracterizado parcialmente la función de GTF2lRD2, otro gen localizado en las duplicaciones GTF2lRD2 interacciona con otros factores de transcripción relacionados, tiene una localización subcel.lular variable y no se une a DNA. Estos resultados contribuyen a conocer mejor los mecanismos mutacionales y patogénicos del SWB.

Autor: GÓMEZ ABAD CRISTINA ISABEL.
Año: 2005.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FACULTAD DE CC. QUÍMICAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS.

Resumen: La enfermedad de Lafora es una Epilepsia Mioclónica Progresiva cuyo inicio se produce durante la adolescencia y va acompañado de un deterioro neurológico progresivo de evolución rápida hacia un estado vegetativo terminal. Los pacientes suelen fallecer en un intervalo que varía entre 5 y 10 años tras el comienzo de la enfermedad. El rasgo característico de la enfermedad es la presencia de cuerpos intracelulares PAS-positivos de depósito diseminado. Se han descrito dos genes responsables de la enfermedad: EPM2A y EPM2B. En este trabajo hemos analizado clínica y molecularmente un total de 104 pacientes diagnosticados con enfermedad de Lafora, pertenecientes a 82 familias. El gen que se encuentra mutado con mayor frecuencia en nuestra serie de pacientes es EPM2A (67,1% de las familias). EPM2B se encuentra mutado en el 30,5% de las familias. En un 2,4% de las familias no se han detectado mutaciones en ninguno de estos dos genes. En EPM2A hemos identificado 34 mutaciones diferentes, 8 de las cuales son nuevas. El análisis de haplotipos relacionados con la mutación más frecuente en EPM2A, R241X, indica que el origen de esta mutación se debe tanto a un efecto fundador como a la recurrencia. En EPM2B hemos identificado 18 mutaciones diferentes, 12 de las cuales son nuevas. El análisis de haplotipos relacionados con las mutaciones más frecuentes en EPM2B, indica que el origen de la mutación P69A se debe tanto a un efecto fundador como a la recurrencia, mientras que la mutación C26S se debe a la existencia de un efecto fundador. Se ha realizado también un estudio de comparación entre genotipo y fenotipo. Las distintas variables clínicas analizadas en la comparación de los fenotipos EPM2A y EPM2B (edad de aparición del deterioro motor, edad de fallecimiento y años de progresión de la enfermedad) indican que aunque las mutaciones en ambos genes producen el mismo fenotipo, el período de evolución es más largo en pacientes con mutaciones en EPM2B. La existencia de familias diagnosticadas con enfermedad de Lafora confirmada mediante biopsia sin mutaciones en EPM2MA ni EPM2B, implican la existencia de al menos un tercer gen implicado en la enfermedad de Lafora.

Autor: SAN PEDRO GARCÍA JOSÉ IGNACIO.
Año: 2005.
Universidad: PAÍS VASCO.
Centro de lectura: HOSPITAL DE CRUCES.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DEL PAIS VASCO.

Resumen: La diabetes tipo 1 es una enfermedad autoinmune en la cual tiene lugar una destrucción de la célula beta pancreática mediada por linfocitos T. La enfermedad celiaca, por su parte, es un desorden autoinmune causado por una intolerancia al gluten de la dieta. Ambas se desarrollan en individuos genéticamente susceptibles. La región HLA de clase II, en el cromosoma 6, ha sido propuesta como principal implicada en la susceptibilidad genética a estas dos enfermedades, siendo el HLA-DR3.DQ2 y HLA-DR4.DQ8, los mayores determinantes de riesgo. En los últimos años, se ha sugerido la existencia de otra región de susceptiblidad para estas dos enfermedades autoinmunes, el locus VDR (receptor de la vitamina D) en el cromosoma 12. Una de las principales funciones de la vitamina D es la de actuar como modulador del sistema inmune, ejerciendo su principal actividad biológica a través de su receptor nuclear (VDR), el cual actúa como un factor de transcripción nuclear de otros genes. La asociación entre las variantes alélicas del gen del receptor de la vitamina D y las enfermedades autoinmunes ha sido descrita en numerosos trabajos, por lo que hemos estudiado diferentes polimorfismos en el locus VDR, en el cromosoma 12q12-14, con el objetivo de estudiar una posible asociación de estos con la diabetes tipo 1 y/o la enfermedad celiaca en nuestra población, así como si los mismos alelos estaban asociados con ambas enfermedades. Para la realización de este trabajo se utilizaron las técnicas de RFLP y la discriminación alélica mediante sondas TaqMan MGB. Los resultados muestran, por una parte, una asociación estadísticamente significativa entre el haplotipo fBAt y la diabetes mellitus tipo 1, y por otra, una asociación, también estadísticamente significativa, entre el genotipo ff y la enfermedad celiaca. A la vista de estos resultados podemos concluir que los polimorfismos del gen del receptor de la vitamina D son marcadores de susceptibilidad de la diabetes mellitus tipo 1 y la enfermedad celiaca. No obstante, existe una heterogeneidad poblacional, pero también en diferentes patologías dentro de una misma población. Debido a esta heterogeneidad no esta claro si el locus VDR es el determinante etiológico primario si se trata de un marcador ligado al verdadero gen de susceptibilidad.

Autor: SABATER LLEAL MARIA.
Año: 2005.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAT DE BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAT DE BIOLOGÍA - UNIVERSITAT DE BARCELONA.

Autor: PAISÁN RUIZ CORO.
Año: 2005.
Universidad: PAÍS VASCO.
Centro de lectura: E.U. ENFERMERÍA DE DONOSTÍA.
Centro de realización: HOSPITAL DONOSTIA/LAB. NEUROGENETICS (NIA/NIH).

Autor: ALVAREZ ALVAREZ MAITE.
Año: 2005.
Universidad: PAÍS VASCO.
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: La enfermedad de Alzheimer (EA) es una enfermedad neurodegenerativa multifactorial. Están bien establecidos algunos factores de riesgo ambientales (sexo, edad, historia familiar de demencia, ..) y genéticos (APP PS1, PS2 y APOE) pero aún se desconoce mucho de la/s causa/s que puedan originar esta enfermedad. Por otro lado, una fase previa a la EA es el Deterioro Cognitivo Leve (DCL). En este trabajo hemos analizado posibles marcadores genéticos localizados en los genes ESRalfa, ESRbeta, TNFbeta, IDE, HTR-6 y CYP46A1 para averiguar su posible implicación en la EA (n=246) y/o DCL (n=156) como factores de riesgo de protección. Marcadores en los genes ESRalfa, TNFbeta, HTR-6 y CYP46A1 parecen mostrar cierta asociación con la EA O DCL, asociación que mayoritariamente se pone de manifiesto cuando la muestra de pacientes fue estratificada en base al género y/o presencia/ausencia de alelo APOE*4.

Autor: MARTÍN PAGOLA AINHOA.
Año: 2005.
Universidad: PAÍS VASCO.
Centro de lectura: HOSPITAL DE CRUCES.
Centro de realización: HOSPITAL DE CRUCES.

Resumen: La enfermedad celiaca (EC) es un desorden autoinmune causado por la intolerancia al gluten de la dieta que se desarrolla en individuos genéticamente susceptibles. La región HLA en el cromosoma 6 ha sido propuesta como la principal implicada en la susceptibilidad a esta enfermedad (concretamente los genes HLA de clase II, DR y DQ). Así, más del 90% de los pacientes celiacos presentan el alelo DQ2, mientras que una minoría presenta el alelo DQ8. En los últimos años, se ha sugerido la existencia de un segundo locus de susceptibilidad en la región HLA, cerca del gen HLA-B, que podría tener un efecto independiente a los genes de clase II. Uno de los genes candidatos situado en esta región es el gen MICA (MHC class I Chain-realted A gene). Este gen codifica una proteína que se expresa en condiciones de estrés en el tejido gastrointestinal y que activa a células del sistema inmune. El objetivo de este estudio es determinar la implicación de MICa en la enfermedad celiaca. Los resultados de este trabajo muestran una asociación genética de un polimorfismo del gen MICA con EC, aunque se debe al desequilibrio de ligamiento con los genes HLA de clase II. Por otra parte, desde el punto de vista funcional, parece existir una implicación de MICA en el inicio de la respuesta inmune innata que se desarrolla en el intestino de pacientes celiacos, como consecuencia directa de la exposición al gluten de la mucosa intestinal, mientras que no parece tener un papel importante en la respuesta inmune que se tiene lugar en las etapas avanzadas de la enfermedad celiaca, cuando existe una lesión intestinal.

Autor: PEDROLA VIDAL LAIA.
Año: 2006.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA DE LA UNIVERSITAT DE VALÈNCIA.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS - UNIVERSITAT DE VALÈNCIA.

Resumen: La enfermedad de Charcot-Marie- Tooth (CMT) es la neuropatía sensitivo-motora hereditaria más frecuente y representa un grupo de enfermedades muy heterogéneas tanto clínica como genéticamente. Existen dos formas en función de la topografía de la lesión primaria en el nervio periférico: CMT desmielinizante o tipo 1 y CMT axonal o tipo 2. En la actualidad se ha descrito más de veintiún genes y más de cuarenta loci asociados a CMT, siendo la mayoría responsables de formas desmielinizantes. La enfermedad de Charcot-Marie- Tooth se caracteriza por una debilidad progresiva y atrofia muscular de las extremidades. Los enfermos tienen defectos al caminar, pies cavos y mano en garra. La edad de aparición de la enfermedad suele ser en la primera o segunda década de la vida. Charcot-Marie- Tooth tipo 4A (CMT4A) es una forma clínica grave de CMT axonal, con herencia autosómica recesiva, asociada a disfonia. En el 2001, nuestro grupo aisló y caracterizó el gen responsable de la enfermedad, GDAP1 (-ganglioside-induced differentiation-associated protein 1 ') localizado en el cromosoma 8q21. Tras la caracterización del gen, nos planteamos estudiar GDAP1 en pacientes esporadicos en los que se había diagnosticado una neuropatía axonal y disfonia. En los catorce casos que investigamos encontramos un polimorfismo neutro ya descrito anteriormente (S169S en ocho cromosomas polimorficos de 28 cromosomas totales) y dos polimorfismos no descritos (L28L en un cromosoma y R225R también en un cromosoma de los 28 totales). Dada la alta frecuenta de 51695 en nuestra serie calculamos las frecuencias alélicas de este (T=51.3% y G=48.6%). Además encontramos dos cambios patológicos en homozigosis ya descritos también anteriormente, Q163X en dos cromosomas y S194X en seis cromosomas. Los tres pacientes de nuestra serie que presentaban la mutación S194X, ya descrita en una familia española, eran de origen marroquí. Realizamos un análisis de haplotipos para estudiar el origen de los cromosomas portadores de dicha mutación y concluimos que la mutación S194X tiene un mismo origen en individuos espaiioles e individuos marroquies. Para investigar el origen celular de la patogenia estudiamos la expresión de GDAP1 en varios tejidos neuronales y no neuronales de rata adulta, asi como en células de 5chwann de rata en diferentes condiciones de cultivo. Observamos que GDAP1 se expresa mayoritariamente en celulas neuronales, sugiriendo que CMT4A es, de hecho, una neuropatía axonal. Además, confirmamos la expresión de GDAP1 en diversos tipos de células neuronales como en neuronas de los bulbos olfatorios, del hipocampo y en células de Purkinje del cerebelo. Observamos tambien expresión en neuronas motoras de la médula espinal y en neuronas sensitivas del ganglio de la raiz dorsal (DRGS), tal y como se espera en una neuropatia axonal sensitivo-motora. En el estudio de la localización subcelular de la proteína determinamos que GDAP1 se localiza en membranas mitocondriales. AI analizar el patrón de expresión de GDAP1 definimos GDAP1 como una proteína implicada en la dinámic mitocondrial, induciendo procesos de fision. Las mutaciones -missense" encontradas en GDAP1 se expresan correctamente en mitocondrias por 10 que el mecanismo molecular que subyace a la enfermedad debe ser otro, tal vez GDAP1 tenga otras funciones ademas de inducir fision mitocondrial o simplemente, pequeiias diferencias en la morfologia desencadenan grandes efectos en el balance de fusion y fision. Entre estas mutaciones existe una excepcion, la mutación de novo dominante T157P que al ser sobreexpresada produce mayoritariamente una morfologia de mitocondrias agregadas. Además, al sobreexpresar la proteína sin dominios transmembrana para simular las mutaciones -nonsense II (estas mutaciones truncan siempre la protein a antes del dominio transmembrana) se produce una deslocalizacion de la proteína. En cualquier caso, un defecto en la función de GDAP1 conduce a graves consecuencias en el sistema nervioso, probablemente porque sobretodo las neuronas tienen un alto requerimiento energetico que es aportad 8 o en gra 43b n medida por las mitocondrias. También confirmamos que el dominio transmembrana además de ser necesario es suficiente para localizar GDAP1 correctamente. Finalmente, analizamos si GDAP1 era capaz de actuar como las demas enzimas GSTs conjungando el glutation con un compuesto químico estandar (CDNB) y observamos que al menos en estas condiciones de ensayo, GDAP1 no tiene actividad GST

Autor: MARÍN GARCÍA PABLO.
Año: 2006.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGÍA.
Centro de realización: FUNDACIÓN VALENCIANA DE INVESTIGACIONES BIOMÉDICAS/INSTITUTO DE INVESTIGACIONES CITOLÓGICAS.

Resumen: La hipertensión arterial es una de las principales causas de morbilidad y mortalidad cardiovascular humana. La implicación de la hipertensión en el desarrollo de enfermedades del sistema cardiovascular y renal en cada individuo son el resultado de complejas intereacciones entre diferentes factores genéticos y condiciones ambientales. En esta interacción los genes no solo pueden determinar la respuesta a la presión sanguínea, sino también a la susceptibilidad de los órganos diana (corazón, vasos sanguíneos, rilion etc.) a agentes estresantes com la elevada presión arterial. En esta tesis doctoral se evalúa la posible relación entre varios de los polimorfismos genéticos de los principales componentes del Sistema Renina Angiotensina Aldosterona (SRAA) y el daño orgánico en pacientes hipertensos (medido como presencia de microalbuminuria). Para ello se realizó un estudio de asociación entre varios de los polimorfismos de los genes del SRAA y la prevalencia y niveles de microalbuminuria, mediante un estudio de cohorte transversal al tiempo de entrada en el estudio y otro de evolución a 3 años. De los polimorfismos estudiados (entre los que se encuentran el ACE I/D, AGT c.-6G>A, AGT p.M235T, AGT p.T174M, AGTR1 c.573C>T y AGTR1 c.1166A>C), en el estudio transversal solo el c.573C> T parece tener algún efecto en los niveles d microalbuminuria basal teniendo el alelo TT los niveles más bajos de microalbuminuria. En el estudio longitudinal se ha visto que los individuos con el genotipo AGT c.-6 M presentan una mayor resistencia a la bajada de microalbuminuria y este efecto es independiente de la bajada de presión arterial, y el genotipo ACE DD presenta una correlación positiva entre la variación de la PAS y la variación de la microalbuminuria.

Autor: Pérez Cadahía Beatriz.
Año: 2006.
Universidad: A CORUÑA.
Centro de lectura: Facultad de Ciencias.
Centro de realización: Facultad de Ciencias.

Resumen: El 19 de noviembre de 2002 el petrolero Prestige rompió su casco a 130 millas náuticas de la costa gallega derramando unas 40000 toneladas de fuel. A lo largo de las semanas siguientes 22000 más llegaron a la costa en forma de tres mareas negras. El accidente ocasionó una conmoción generalizada dada la importancia y riqueza ecológica de las rias gallegas. Un elevado número de personas se movilizaron para colaborar en las tareas de recuperación de las zonas y fauna afectadas, posicionándose como integrantes de una población expuesta y potencialmente afectada por los efectos del fuel. En este trabajo se han analizado dichos efectos en una población de 240 individuos: 60 voluntarios (expuestos 5 dias) 60 trabajadores de recogida de fuel (4 meses) 60 trabajadores que emplearon hidrolimpiadoras (3 meses) y 60 controles. Los niveles de exposición se determinaron mediante el análisis de los compuestos orgánicos volátiles ambientales (VOC) y los metales pesados presentes en sangre. Se utilizaron como biomarcadores de efecto a nivel genotóxico el ensayo del cometa, el test de micronúcleos y los intercambios entre cromátidas hermanas, y a nivel endrocrino los niveles plasmáticos de prolactina y cortisol, teniendo en cuenta la posible influencia de factores individuales fisológicos, de hábitos de consumo y genotípicos sobre la susceptibilidad ante el daño causado por la exposición. Tras el análisis se han observado niveles considerables de VOC en las muestras de aire, y las concentraciones de metales pesados en sangre reflejan la existencia de una exposición interna. Se ha obtenido un incremento en los niveles de daño en el ADN en los individuos expuestos. En cuanto a la toxicidad endocrina, los resultados sugieren que la mezcla de xenobióticos presentes en el fuel del Prestige induce alteraciones en el estatus hormonal, pudiendo ser considerado como un disruptor endocrino. Por otra parte, los resultados muestran que los niveles de daño se ven influidos por el sexo, la edad y el consumo de tabaco, mientras que el empleo de de equipamiento protector durante las labores de limpieza no han resultado relevante. Los polimorfismos genéticos analizados en enzimas metabólicas y de reparación del ADN parecen ejercer una influencia considerable sobre los biomarcadores de efectos analizados. Los parámetros seleccionados han demostrado de ser buenos indicadores de los procesos de toxicidad asociados a la exposición a fuel procedente del buque Prestige.

Autor: OTAEGUI BICHOT DAVID.
Año: 2006.
Universidad: PAÍS VASCO.
Centro de lectura: ESCUELA DE ENFERMERÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA - UPV/EHU.

Resumen: INTRODUCCIÓN Este trabajo intenta acercarse a los factores de susceptibilidad genética que influyen en el riesgo a sufrir esclerosis múltiple (EM) o en la evolución de ésta. Para ello se han utilizado dos vías de aproximación. En primer lugar se han estudiado SNPS en 8 genes propuestos en la literatura como asociados con la EM y en el sistema de haplogrupos del ADN mitocondrial. La segunda aproximación ha consistido en estudiar los patrones de expresión génica en los nódulos Linfáticos de un modelo murino EAE. En es tos ratones se ha inducido una EAE que cursa en brotes y se ha construido un modelo longitudinal de la enfermedad con extracciones de tejido en 12 puntos diferentes. En estos tejidos se ha estudiado la expresión de 18 000 transcritos mediante arrays de ARN. Para corroborar las conclusiones obtenidas en este estudio se han estudiado algunos de los genes propuestos en ARN obtenido de pacientes. RESULTADOS Los haplogrupos mitocondriales y los SNPs propuestos en los genes CD24, APOE y PD1.3 no están relacionados con la EM. En nuestros datos sí que aparecen relacionados con la enfermedad los cambios estudiados en los genes CCR5, TLR-4, UCP-2 y SYN III. En el estudio de expresión en EAE se ha caracterizado la firma transcripcional de la respuesta inmune inespecífica frente al adyuvante. Se propone un modelo en el que se ve como la firma transcripcional de las células inmunes migra del nódulo linfático al SNC. Se propone que los genes de la caseína, lactoalbumina y Expri desempeñan un papel protector ante el brote en el modelo EAE. Se propone que la caseína kappa desempeña un papel en la respuesta del organismo frente al brote en humanos.

Autor: URREIZTI FREXEDAS ROSER.
Año: 2006.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA (UNIVERSIDAD DE BARCELONA).

Resumen: El objetivo de esta tesis doctoral ha sido el estudio molecular de las variaciones plasmáticas en dos patologías asociadas a este metabolito. Por un lado, la enfermedad monogéncia homocistinuria (Hcu) clásica [por deficiencia en el enzima Cistationina beta-sintasa (CBS)]. Por otro lado el estudio de asociación de genes candidatos del metabolismo de la homocisteína (Hcy) con lahiperhoimocisteinemia y con la cardiopatía isquémica (CAI). En el estudio molecular de la Hcu en pacientes de la Península Ibérica y Latinoamérica se ha caracterizado el 96% de los alelos causales. Se han encontrado una elevada prevalencia del alelo p.T191M, por tanto en la Península como en Colombia. Mediante el estudio de haplotipos se ha determinado un origen múltiple para este alelo. Con el fin de comprobar la patogeneicidad de los alelos mutantes se realizó el estudio funcional de 14 de los cambios encontrados que la mayoría de enzimas mutados pierden totalmente de los cambios encontrados en la cohorte estudiada encontrando que la mayoría de enzimas mutados pierden totalmente su actividad enzimática mientras sólo 3 conservan valores de actividad superiores al 10, en particular, el enzima mutado p.R548Q conserva el 60% de la actividad y un patrón de activación correcto, lo que sugiere que este cambio es un polimorfismo y no una mutación patogénica. En estudio de asociación con genes candidatos hemos encontrado que el alelo c.66 G del gen MSR está significativamente asociado a un incremento del riesgo relativo (RR) a sufrir CAI de 1,76. As u vez, el haplotipo presente en el gen CBS está significativamente asociado con un incremento del RR de 2,16. Los polimorfismos presentes en el gen MTHFR son los únicos significativamente asociados con los niveles de Hcy.