FISIOLOGIA GASTROINTESTINAL

Autor: FARRE MASIP CARME.
Año: 2002.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Centro de realización: SERVICIO DE BIOQUÍMICA. HOSPITAL DE SANT JOAN DE DÉU. ESPLUGUES DE LLOBREGAT, BARCELONA.

Resumen: La enfermedad celíaca (EC) es un intolerancia al gluten de carácter permanente que condiciona en individuos genéticamente predispuestos una lesión inflamatoria de la mucosa del intestino delgado superior. La lesión histológica se relaciona con una respuesta inmune anormal de las células T a determinados péptidos de gliadina y se caracteriza por un aumento del infiltrado linfocitario, una hiperplasia de criptas y una atrofia vellositaria intestinal. La activación de la EC está genéticamente restringida a los portadores de los alelos HLA-DQ2/DQ8 que codifican las proteínas diméricas presentadoras de los péptidos de gliadina modificados enzimáticamente por la transglutaminasa tisular a las células TCR alfabeta+productoras de citoquinas inflamatorias. La respuesta humoral con producción de autoanticuerpos específicos contra la transglutaminasa se explica a través del reconocimiento del reconocimiento del complejo péptido de gliadina - transglutaminasa y de la colaboración entre células T y B con producción de autoanticuerpos contra la transglutaminasa dependientes de la ingesta de gluten. La EC es la alteración crónica mas prevalente (1/200) e infradiganosticada en nuestro medio debido a la inespecificidad de las formas de presentación clínica. La detección es serológica a través de los anticuerpos antiendomisio (AEA) o antitransglutaminasa (AcTGt) de clase IgA i el diagnóstico es histológico. El tratamiento consiste en una estricta y permanente dieta sin gluten (DSG), lo que comporta una remisión de la clínica y de la lesión histológica, así como una negativización de los marcadores serológicos. Los tres grandes objetivos de esta tesis son: 1,- La optimización de los recursos del laboratorio clínico en la detección de la EC. 2,- El estudio de la EC en poblaciones de riesgo. 3,- El estudio de la relación entre la EC no tratada y el riesgo de linfoma. Se evalúan los marcadores serológicos de la EC realizados en el laboratorio del Hospital Sant Joan de Déu (HSJD) entre 1987 y 2002. Durante los cinco trienios se observa un incremento de la demanda en progresión geométrica con una constante del 3% del muestras positivas (AEA) correspondientes a pacientes detectados por primera vez. En cambio, el % de pacientes conformas clínicas atípicas frente al total de pacientes detectados se incrementa desde el 11% (1987) hasta el 51% (2002) Las formas atípicas se identifican en poblaciones de riesgo como : familiares de primer grado, pacientes con DM, anemia, talla baja, hipertransaminasaemia, Síndrome de Down, etc. Un 90% (386/430) de los pacientes con EC son HLA-DQ2 + (DQA1*0501 y DQB1*0201) para la EC, frente a un 22% (20/90) del grupo control ( p menor 0,001). Son DQ2+ un 60% (312/518) de los familiares, un 57% (41/72) de los pacientes con DM1 y un 29% (31/107) de los pacientes con Síndrome Down, todos ellos no afectados por la EC. Dado que familiares, diabéticos y Down comparten una aumentada frecuencia de EC respecto a la población general, la condición DQ2+ es más sugerente de EC en un paciente son S. De Down que en un familiar de celíaco o en un paciente diabético. En general, la condición DQ2+ delimita una población genéticamente predispuesta para la EC, y representa aproximadamente un 20% de la población genéticamente predispuesta para la EC, y representa aproximadamente un 20% de la población general , entre ellos, un 0,2% (1/200) sufren EC. La frecuencia de pacientes con EC en poblaciones de riesgo como familiares de primer grado, pacientes con anemia microcítica sin causa aparente, con déficit aislado de IgA (en estos pacientes se determinan los anticuerpos de clase IgG), con el Síndrome de Down o con diabetes mellitus tipo 1 es de 10 a 20 veces superior (5%-10%) ala de la población general (0,5 8 %), en l 839 a mayoría de los casos no se observa la clínica digestiva clásica de la EC. Los anticuerpos antigliadina (AGA) muestran poca sensibilidad para la detección de pacientes con EC sin clínica digestiva, principalmente en el estudio de familiares de primer grado de celíacos. Los AEA o AcTGt de clase IgA o de clase IgG en individuos higa deficientes son los marcadores serológicos de referencia. La microcitosis y la hipertansaminasemia (HT) están presente se una tercera parte de los celíacos activos y en un 4% de los casos on la única o las más relevante de las manifestaciones de la EC. La HT es leve, no se relaciona con la desnutrición, y puede normalizarse antes de iniciar la dieta sin gluten, planteando por primera vez la hipótesis de que la HT podría formar parte de un factor desencadenante de la EC. La EC es frecuente en pacientes con DM1, las enfermedades autoinmunes asociadas a la EC se relacionan con el tiempo de contacto del paciente celiaco con el gluten. En el último capítulo de la tesis y dentro del estudio de los efectos indeseables de la EC no tratada, no se encuentra relación entre el riesgo de linfoma y la EC no tratada. Entre las conclusiones más relevantes de la tesis se encuentran las sugerencia del despistaje serológico para la EC en la población general y la necesidad de estudio de las enfermedades autoinmunes asociadas la EC como una de las complicaciones más importantes de la EC no tratada.

Autor: ASURABARRENA IRAOLA CARMEN.
Año: 2004.
Universidad: PAÍS VASCO.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGIA.

Resumen: Se ha diseñado un método para aislar y separar las fracciones apical y baso lateral de la membrana plasmática de las células parietales de las glándulas gástricas de conejo y se ha caracterizado su grado de purificación mediante el estudio de las actividades de conocidos enzimas marcadores de cada fracción. En los estudios de unión del radioligando [35S]dATP?S a dichas fracciones de membrana se ha comprobado que existe una alta densidad de sitios de unión específica de alta afinidad en la fracción basolateral de la membrana plasmática. El análisis de los resultados obtenidos sugiere que gran parte de esa unión específica se correspondería con un receptor P2Y probablemente del subtipo P2Y11 y/o P2Y12.

Autor: PASCUA RODRIGUEZ PATRICIA.
Año: 2004.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA.

Autor: GONZÁLEZ PÉREZ PILAR.
Año: 2005.
Universidad: LEÓN.
Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: La hepatitis C es la causa más frecuente de morbilidad y mortalidad relacionadas con el hígado en el mundo y representa un problema de salud pública importante. Sin embargo, el mecanismo mediante el cual el virus de la hepatitis C (VHC) causa daño hepático no está totalmente establecido, si bien podrían estar implicados la respuesta inmune frente a los hepatocitos infectados así como los efectos citopáticos directos de las proteínas del virus. Estudios previos indican la posible implicación de la existencia de estrés oxidativo en la patogenia de la enfermedad. Así, la infección por VHC se caracteriza por un incremento en la concentración circulante de especies reactivas de oxígeno (EROs) y de nitrógeno (ERNs). Entre los principales mecanismos de defensa frente a las EROs y ERNs se encuentra el incremento de la expresión de las enzimas antioxidantes. A este respecto, se ha descrito un aumento de la concentración de ARNm de la SOD mitocondrial (SOD-Mn) en células mononucleares periféricas, si bien dicho incremento no se observa en el hígado, lo que sugiere que este órgano estaría menos protegido contra el daño oxidativo. Algunas proteínas víricas están implicadas directamente en los mecanismos patogénicos de la enfermedad. A ese respecto, se ha descrito la participación de la proteína estructural core y de la no estructural NS5A en la inducción de dicho estrés oxidativo. A pesar de conocerse la implicación del estrés oxidativo en el desarrollo de la hepatitis C y la contribución de las proteínas core y NS5A del VHC en dicho proceso, es prácticamente inexistente la información referente a la naturaleza de las distintas EROs y ERNs generadas así como su patrón temporal de aparición, su repercusión en la activación de la expresión génica de ONSi, la aparición de daño oxidativo celular y las modificaciones existentes en la capacidad antioxidante enzimática y no enzimática hepática, por lo que en el presente trabajo nos propusimos como objetivo aportar luz en dichos parámetros. Para la realización de la investigación se utilizó un modelo in vitro basado en la utilización de células Chang liver. Dichas células fueron transfectadas de forma estable con el gen que codifica para la proteína no estructural NS5A o con el gen que codifica para la proteína estructural core del VHC. Dichas células fueron posteriormente incubadas con una mezcla de citoquinas durante 48 horas con el fin de reproducir el ambiente inflamatorio hepático existente en pacientes con hepatitis C. Nuestros resultados indican que ambas proteínas del virus C participan en la producción de EROs y ERNs y en la inducción de la enzima ONSi si bien su contribución relativa es diferente siendo más marcada y más temprana cuando las células expresan la proteína NS5A del VHC. Asimismo, ambas proteínas actúan sobre los mecanismos de defensa antioxidante celulares tanto enzimáticos como no enzimáticos, mostrando asimismo una diferente contribución en dichos mecanismos patogénicos. En resumen, tanto la proteína NS5A como core del VHC desempeñan una función fundamental en la patogénesis de la enfermedad causada por dicho virus, a través de la producción de estrés oxidativo y nitrosativo, la activación de la enzima óxido nítrico sintetasa inducible y la alteración de la capacidad antioxidante celular.

Autor: GUTIÉRREZ FERNANDEZ Ma. BELÉN.
Año: 2005.
Universidad: LEÓN.
Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE LOEN.

Resumen: FK506 (TACROLIMUS) Y RAPAMICINA (SIROLIMUS) SON DOS FÁRMACOS INMUNOSUPRESORES AMPLIAMENTE UTILIZADOS EN EL TRASPLANTE DE ÓRGANOS. LOS ESTUDIOS QUE RELACIONAN EL TRATAMIENTO CON ESTOS FÁRMACOS Y LA PRODUCCIÓN DE MEDIADORES DE LA RESPUESTA INFLAMATORIA, SON CONTRADICTORIOS, OTORGÁNDOLES PROPIEDADES TANTO TÓXICAS COMO PROTECTORAS. EL OBJETIVO DEL PRESENTE ESTUDIO COMPROBAR EL EFECTO DE AMBOS FÁRMACOS EN LA PRODUCCIÓN DE ESPECIES REACTIVAS DE OXÍGENO Y NITRÓGENO, DE ÓXIDO NÍTRICO Y DE LA CITOQUINA PROINFLAMATORIA TNF-ALFA, EN UN MODELO DE DAÑO OXIDATIVO INDUCIDO POR EL LIPOPOLISACÁRIDO EN HEPATOCITOS AISLADOS DE RATA. ASIMISMO, SE PROPUSO EVALUAR LAS MODIFICACIONES EN LA EXPRESIÓN GÉNICA DE LA ENZIMA ÓXIDO NÍTRICO SINTASA Y EN LA ACTIVIDAD DEL FACTOR DE TRANSCRIPCIÓN NUCLEAR KAPPA B. LA MEDIDA DE LA LIBERACIÓN DE LACTATO DESHIDROGENASA Y DE LA CITOQUINA PROINFLAMATORIA TNF-ALFA AL MEDIO DE CULTIVO PUSO DE MANIFIESTO EL DAÑO INFRINGIDO POR EL LIPOPOLISACÁRIDO, Y COMO LOS INMUNOSUPRESORES FK506 Y RAPAMICINA SON CAPACES DE REVERTIR DICHO EFECTO. ASIMISMO SE EVALUÓ LA LIBERACIÓN DE NITRITOS AL MEDIO DE CULTIVO, Y LA EXPRESIÓN DE LA ENZIMA RESPONSABLE DE SU FORMACIÓN, LA ÓXIDO NÍTRICO SINTASA, QUE SE MOSTRÓ MUY ELEVADA CUANDO LAS CÉLULAS SON TRATADAS CON LA ENDOTOXINA BACTERIANA, MIENTRAS QUE CUANDO SE COADMINISTRAN LOS INMUNOSUPRESORES, ESTE EFECTO DISMINUYE HASTA VALORES PRÓXIMOS AL CONTROL. DE FORMA SIMILAR, LOS NIVELES DE GLUTATIÓN OXIDADO Y DE PEROXIDACIÓN LIPÍDICA SE INCREMENTARON SIGNIFICATIVAMENTE EN LAS CÉLULAS TRATADAS CON EL LIPOPOLISACÁRIDO, Y DISMINUYÓ CON AMBOS FÁRMACOS. EL ESTUDIO DEL FACTOR DE TRANSCRIPCIÓN KAPPA B PUSO DE MANIFIESTO UNA NOTABLE INDUCCIÓN POR PARTE DEL LIPOPOLISACÁRIDO QUE SE VIÓ REVERTIDA POR EL COTRATAMIENTO CON FK506 Y CON RAPAMICINA. LOS RESULTADOS DEL PRESENTE ESTUDIO CONFIRMAN LOS INCREMENTOS DEL ESTRÉS OXIDATIVO, DE LA EXPRESIÓN DE LA ENZIMA ÓXIDO NÍTRICO SINTASA, DE LA PRODUCCIÓN DE TNF-ALFA Y DE LA ACTIVACIÓN DEL FACTOR DE TRANSCRIPCIÓN KAPPA B, INDUCIDOS POR LA ADMINISTRACIÓN DEL LIPOPOLISACÁRIDO BACTERIANO EN LOS HEPATOCITOS AISLADOS DE RATA, Y COMO DICHOS INCREMENTOS SON REVERTIDOS SIGNIFICATIVAMENTE TRAS EL TRATAMIENTO DE LAS CÉLULAS CON LOS INMUNOSUPRESORES TACROLIMUS Y SIROLIMUS. POR CONSIGUIENTE, AMBOS INMUNOSUPRESORES MUESTRAN UN EFECTO PROTECTOR IN VITRO FRENTE A DIVERSOS MECANISMOS DE LA RESPUESTA INFLAMATORIA HEPÁTICA.