TRASPLANTE DE ORGANOS

Autor: MILLAN LÓPEZ OLGA.
Año: 2003.
Universidad: BARCELONA [www.ub.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La utilización de inmunosupresores en el transplante requiere tratamientos indefinidos. Los parámetros farmacocinéticos, a pesar que son muy útiles sobretodo en la prevención de la toxicidad, no son suficientes ni para evidenciar toda la variabilidad interindividual existen, ni para conocer ¿Qué nivel de inmunosupresión necesita un paciente concreto? Ni ¿Qué nivel de inmunosupresión se obtiene con los fármacos que se administran? En los útlimos años se han iniciado toda una serie de estudios centrados en el conocimiento del impacto biológico que realizan estos fármacos en el sistema inmunitario del receptor, es lo que se conoce como Farmacodinámica. Farmacocinética y Farmacodinamia son dos disciplinas que se complementan; una nos define el destino del fármaco mientras que la otra nos define el efecto de las dosis administradas. En los últimos años se han propuesto diversos métodos con el fin de evaluar más eficazmente la acción de los inmunosupresores: 1,- Evaluar la actividad del enzima diana del inmunosupresor en cuestión. 2,- Evaluar algún mediador implicado en el mecanismo de acción. 3,- Evaluar marcadores colaterales inducidos por los inmunosupresores. El objetivo de la tesis ha sido dar soporte experimental a la hipótesis de que la medida de la actividad de la enzima diana de determinados inmunosupresores es una herramienta útil para evidenciar déficit en la inmunosupresión. Hemos desarrollado toda una serie de métodos farmacodinámicos en función del fármaco evaluado: Micofenolato Mofetil (MMF) (Actividad enzimática IMPDH, Respuesta CEM); Ciclosporina (CsA) y Tracrolimus (TRL) (Actividad fosfatasa calcineurina, producción de IL-2 e IFN-gamma) y se ha realizado un exhaustivo seguimiento tanto farmacocinético como farmacodinámico en poblaciones de transplantados renales en etapa de mantenimiento como en una población infectada por el Virus de la Inmunodeficiencia Humana (HIV). Los resultados se centran en 3 artículos publicados: Clinical Chemistry, 2000; 46:9;1376; Clinical Chemistry, 2003;49:11;1891 y Clinical Pharmacokinetics 2003, in press y unos datos sometidos a publicación. Para la monitorización farmacodinámica del tratamiento con MMF el parámetro de Respuesta de CEM, diseñado por nuestro grupo, se ha mostrado más eficaz que la evaluación de su diana específica, la enzima IMPDH, dada la elevada variabilidad que presento este parámetro. La evaluación de la actividad calcineurina es válida para el seguimiento delt ratamiento inmunosupresor con monoterapias basadas en la administración de CsA o TRL, pero cuando estos fármacos anticalcineurínicos se administran concomitantemente con MMF el parámetro que mejor refleja la acción conjunta de estos fármacos es la evaluación de la producción de IL-2. Cuando se evaluó la eficacia de dosis bajas de MMF en pacientes infectados por el HIV, sólo el parámetro de Respuesta de CEM se mostró capaz de diferenciar aquellos pacientes que rebotaban en la carga viral tras la supresión del tratamiento antiretroviral respecto los que no la rebotaron. La Farmacodinamica junto con la Farmacocinética son imprescindibles para el avance en el conocimiento del tratamiento inmunosupresor. Haciendo uso de ambas disciplinas se podría optimizar la introducción de nuevos fármacos, nuevas asociaciones y nuevas pautas de dosificación.

Autor: GONZÁLEZ LEÓN LETICIA.
Año: 2004.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID [www.ucm.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: El conocimiento de las bases moleculares de gran número de patologías hace que las células madre sean una diana excelente para la terapia génica. Las características de estas células aseguran que los genes transferidos a una pequeña población celular puede corregir el daño genético. Esta siendo un objetivo fundamental para muchos investigadores. La necesidad de un modelo pre-clínico en grandes animales que permita abordar estas terapias ha hecho que se utilice el perro para estos fines dado que posee una diversidad génica comparable a la humana. Sobre la base de estas premisas nos propusimos como objetivo concreto la transferencia génica a una población de precursores hempatopoyéticos caninos, de un gen marcador, en nuestro caso el gen que codifica para la proteína verde fluorescente. Ya que los estudios de transducción de células hematopoyéticas humanas no están los suficientemente perfeccionados como para su aplicación en protocolos de terapia génica, por lo que la optimización en grandes animales, sería de gran utilidad con fines terapéuticos. Este objetivo global se ha dividido en tres objetivos parciales. * Asilamiento, caracterización e identificación de una población de precursores hematopoyéticos caninos. * Evaluación de la capacidad de la población enriquecida de células madre hematopoyéticas, para anidar, proliferar y diferenciarse: poniendo una atención especial en los estudios de funcionalidad de la progenie provenida. * Por último, se optimizaran las condiciones previas y ensayaran diferentes protocolos de transferencia génica hasta conseguir un porcentaje idóneo de células transducidas que nos permita, en posteriores estudios, el seguimiento del quimerismo y el abordaje de patologías mediante terapia génica. Se obtuvieron unos resultados que se resumen en las siguientes conclusiones. * El anticuerpo 6C9 se une a dos poblaciones claramente diferenciadas, de las que solo una de ellas posee un tamaño y complejidad característico de células inmaduras. La falta de enriquecimiento en progenitores hematopoyéticos, en la población "6C9+" sugiere que por el momento, este anticuerpo no es una herramienta adecuada para la purificación y aislamiento de progenitores hematopoyéticos caninos. * La utilización de anticerupos monoclonales específicos para células linaje positivo caninas, nos ha permitido obtener, una población Lin-enriquecida en células CD34+ y Rh- 123 baja. El incremento en progenitores mielomonocíticos y eritroides en esta población, ha diso cuantificado mediante cultivos clonogénicos y estudios morfológicos. * En este trabajo se describe por primera vez, la generación in vitro de neutrófilos caninos, con capacidad para llegar a los focos de infección y garantizar los mecanismos de defensa contra infecciones inespecíficas. El conjunto de los resultados obtenidos con nuestro modelo in vitro, nos asegura la capacidad de repoblación de la población Lin-; requisitos fundamental para garantizar el éxito de los transplantes de células madre hematopoyéticas. * Los altos porcentajes de transucción obtenidos en progenitores hematopoyéticos caninos deben ser atribuidos, fundamentalmente, a la especificidad de las citoquinas caninas, y al desarrollo de un protocolo de transducción que se caracteriza por el incremento del número de partículas virales sobre la capa de fironectina y la asuencia de contacto entre el sobrenadante viral y las células diana. En respuesta al objetivo global de esta tesis, pensamos que las aportaciones descritas en esta memoria contribuyendo al establecimiento y progreso de un modelo pre-clínico en grandes animales, imprescindible hoy en día, para el desarrollo y aplicación de expectantes protocolos terapéuticos.

Autor: MORELL GINESTÀ MIREIA.
Año: 2004.
Universidad: BARCELONA [www.ub.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Autor: CABALLERO FLORES FRANCISCO.
Año: 2004.
Universidad: AUTÓNOMA DE BARCELONA [www.uab.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA-DEPARTAMENTO DE MEDICINA-UAB.
Centro de realización: UNIVERSIDAD AUTONOMA DE BARCELONA.

Resumen: INTRODUCCIÓN En los trabajos que constituyen esta Tesis se recogen los criterios más amplios de aceptación de donantes y de órganos para trasplante en el ámbito mundial y también nuestra experiencia con todos los casos de trasplantes de órganos torácicos y abdominales realizados con injertos procedentes de donantes de órganos fallecidos por consumo de drogas (cocaína, éxtasis) por vía no parenteral y por metanol. El trasplante de órganos procedentes de estos donantes está poco documentado con la literatura. OBJETIVOS 1,- Analizar todas las estrategias adoptadas por nuestro grupo para incrementar el número de donantes y de órganos humanos viables para trasplante. 2,- Establecer los criterios de evaluación estructural y funcional y de viabilidad de todos los órganos generados para trasplante por donantes fallecidos por intoxicación aguda por determinados fármacos, gases, drogas de abuso y productos de uso industrial y doméstico. 3,- Evaluar nuestros resultados con 52 pacientes trasplantados con 54 órganos (37 riñones, 9 hígados, 5 corazones, 2 pulmones y 1 páncreas) procedentes de 20 donantes fallecidos por intoxicación aguda (16 por metanol, 2 por éxtasis y 2 por cocaína): supervivencia del injerto y receptor a corto, medio y largo plazo. CONCLUSIONES 1,- El porcentaje de cadáveres en muerte encefálica y a corazón latiente que no cumplen los criterios para la donación de órganos para trasplante, debido a las contraindicaciones absolutas para la donación o para la utilización de órganos concretos, puede ser inferior al 7,5%. 2,- No existe límite de edad para la donación de órganos para trasplante. Un 33% del total de donantes de órganos pueden ser mayores de 65 años de edad y pueden representar desde un punto de vista epidemiológico uno de los factores más importantes que determina el número de trasplantes de hígados y riñón. 3,- La supervivencia actuarial del injerto renal simple de donantes de 60-87 años de edad en receptores mayores de 60 años ha sido del 87% y 81% al año y 5 años del trasplante, respectivamente. Cuando los receptores eran menores de 60 años de edad la supervivencia del injerto renal fue del 95% y 83%, respectivamente. 4,- Existe una correlación directa entre la edad del donante y causa de su muerte con el número de órganos generados y trasplantados. De los donantes menores de 50 años se extraen y trasplantan más órganos que de los mayores de 50 años, especialmente de aquellos donantes fallecidos por traumatismo craneoencefálico y hemorragia subaracnoidea. De los donantes mayores de 50 años se desechan post-extracción más órganos para trasplante que de los donantes jóvenes, especialmente de aquellos donantes fallecidos por anoxia encefálica secundaria a paro cardiaco primario por micardiopatía isquémica. 5,- Los donantes reales de órganos no efectivos pueden ser inferiores al 13%. Suelen ser donantes mayores de 65 años de edad que presentan una mayor incidencia de lesiones estructurales arteriales o parenquimatosas severas y de cáncer previamente no diagnosticado. Generalmente de riñón y próstata. 6,- La supervivencia del injerto y receptores de corazón, hígado y riñones a corto y largo plazo con órganos de donantes fallecidos por intoxicación por metanol es similar a la del resto de trasplantes con órganos de donantes no intoxicados. 7,- Los órganos torácicos y abdominales procedentes de donantes fallecidos por intoxicación aguda por éxtasis pueden ser válidos para trasplante, y la evolución de los trasplantes a corto y medio plazo estrictamente normal. 8,- El trasplante de hígado y riñones con órganos procedentes de donantes fallecidos por intoxicación aguda por cocaína puede tener una evolución de injerto y receptor estrictamente favorable. 9,- La transmisión del tóxico y sus efectos tóxicos a través del órgano trasplantado, de donante a receptor, es excepcional.

Autor: MONFORTE TORRES VÍCTOR.
Año: 2004.
Universidad: AUTÓNOMA DE BARCELONA [www.uab.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE POSTGRADO.

Autor: GALLEGO VALADÉS FRANCISCA.
Año: 2004.
Universidad: AUTÓNOMA DE BARCELONA [www.uab.es].
Centro de lectura: HOSPITAL DE LA SANTA CREU I SANT PAU.
Centro de realización: ESCUELA DE POSTGRADO.

Resumen: Hemos analizado el efecto de la IL-12 sobre la enfermedad autoinmune en un modelo murino semialogénico de enfermedad crónica de injerto contra el huésped (EICHc) inducida en ratones (Balb/c A A/J) F1 (CAF1) inyectados por vía intraperitoneal con células semialogénicas de la cepa parental BALB/c. La IL-2 fue administrada 1h antes del transplante de células semialogénicas siguiendo dos protocolos diferentes de administración: A,- inyectado 2ug de rmIL-12 (IL-12 murina recombinante) por ratón antes de la primera inyección de células semialogénicas. B,- Inyectado los 2 ug de rmIL-12 fraccionada en 5 días. Se produjo una respuesta Th1 pero no apareció la enfermedad aguda de la EICH a pesar de las diferencias en clase I y II de antígenos del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) entre donante y receptor. Cuatro días después de la transferencia de células semialogénicas, los ratones tratados con rmIL-12 mostraron una marcada reducción en el porcentaje de células B comparado con animales control CAF1 y ratones con EICH CAF1+BALB/c. Después de 5-6 meses de seguimiento de la enfermedad, el quimerismo de células donantes incrementó significativamente en bazo (70 +- 31 vs 43 +- 31%) y en timo. La citometría de flujo de esplenocitos demostró que el quimierismo de células donante estaba constituido por linfocitos T CD4, T CD8 y B y los porcentajes fueron más elevados en animales inyectados con IL-12. Además, el 100% de linfocitos T CD8 fueron de origen donante en los animales con EICH tratados con IL-12 y el 50% fueron de origen donante en los animales con EICH no tratados. Los resultados demostraron que: 1,- La IL-12 probablemente juega un papel en el mecanismo del quimerismo de células donantes, probablemente producido por mecanismos mediados por CTL donantes anti-huésped. 2,- No induce la variante aguda de la EICH a pesar de las diferencias en clase I y II de moléculas del MHC. 3,- La IL-12 no muestra ningún efecto sobre signos clínicos de la enfermedad AR-like desarrollada en este modelo de EICH aunque los signos subclínicos histológicos fueron menos frecuentes, y no se detectó glomerulonefritis en ratones con EICH tratados con IL-12.