FISIOLOGIA ANIMAL, 2

Autor: MOLINA DE LA TORRE ANTONIO JOSE.
Año: 2005.
Universidad: LEÓN.
Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: La isquemia-reperfusión (I/R) intestinal está considerado un problema clínico con elevada mortalidad y un aumento en su incidencia durante los últimos años. Los daños causados incluyen la formación de radicales libres, la liberación de citoquinas y graves alteraciones en la mucosa intestinal. Puesto que el intestino tiene gran influencia en la biodisponibilidad de fármacos administrados oralmente, tanto por los procesos absortivos como por la acción de los sistemas de detoxificación presentes, se evaluó el efecto que la isquemia-reperfusión tiene en la absorción y en el metabolismo de albendazol (ABZ) y diltiazem (DTZ), dos fármacos que son administrados oralmente y presentan un importante metabolismo intestinal. El proceso de I/R fue generado por la oclusión de la arteria mesentérica superior y la posterior reperfusión en ratas, realizándose estudios in situ, con microsomas intestinales y anillos evertidos de yeyuno e ileon. Los resultados obtenidos en los estudios in situ muestran que la captación de ABZ desde el lumen y su aparición en sangre fueron incrementadas por la I/R intestinal, reduciéndose además la formación del metabolito albendazol sulfóxido (ABZSO). Los estudios con anillos evertidos y con microsomas intestinales confirman una menor actividad albendazol sulfoxidasa, demostrándose que son afectados los sistemas FMO y CYP3A responsables de dicha actividad. Los estudios in situ con DTZ, mostraron que tras la I/R aumenta la aparición en sangre del fármaco respecto a lo observado en el grupo Control, reduciéndose la formación total de metabolitos, de los cuales el desacetildiltiazem (M1) generado por las esterasas fue el metabolito mayoritario. Los estudios con microsomas mostraron un descenso de la formación de M1, tras la I/R, observándose que dicha actividad es inhibida por paraoxon y bis-nitrofenilfosfato. En los estudios con anillos evertidos también se observó un descenso en la formación de metabolitos tras I/R, detectándose además una diferenciación regional tanto en Control como en I/R, presentándose un mayor metabolismo en el yeyuno que en el ileon. Asimismo se estableció un modelo in vitro intestinal con células Caco2 TC7, en condiciones de hipoxia en atmósfera de nitrógeno. Observándose alteraciones pero más reducidas que las observadas en las ratas por I/R. Se obtuvieron microsomas de este tipo de células y se observó que la actividad albendazol sulfoxidasa fue llevada a cabo principalmente por el sistema FMO (~60%), y el CYP3A (~40%). La actividad de ambos sistemas fue reducida en la situación de hipoxia, por el contrario, la actividad diltiazem desacetilasa de estos microsomas no se vio afectada en dichas condiciones experimentales.

Autor: HERNÁNDEZ MERÁS ANA MARÍA.
Año: 2005.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: El toro bravo pertenece a una arcaica variedad zoológica, mantenida únicamente en territorio español, francés, portugués y en Iberoamérica, donde se refleja en la sociedad, cultura y economía. Nosotros hemos querido estudiar diferentes parámetros hormonales después de la lidia para valorara la respuesta adrenogonadal que estos animales presentan frente al estrés y el ejercicio intenso que supone esta práctica. Los animales los clasificamos por edades (erales, utreros y toros) y tomamos como grupo control aquellos animales que son devueltos por no reunir cualidades suficientes para ser lidiados. Las muestras que tomamos de estos grupos animales son: sangre, testículos y adrenal, de donde obtenemos el plasma y los macerados de los órganos. Para la determinación de las concentraciones de hormonas esteroides (cortisol, corticosterona, testosterona, androstenodiona y 17 beta estradiol) se utilizó el método de inmunoanálisis ELISA de competencia. A la vista de los resultados obtenidos, se observa que la lidia provoca significativo de las concentraciones tisulares y plasmáticas de cortisol, especialmente en los animales más jóvenes. Las concentraciones tanto plasmáticos como tisulares de coritcosterona entran dentro de los márgenes fisiológicos dados por diversos autores para el ganado vacuno, encontrando los niveles más bajos en el grupo control. En el caso de las hormonas gonadales la lidia completa provoca un incremento de las concentraciones de testosterona y 17beta estradiol tanto a nivel plasmático como tisular, presentando los niveles inferiores el grupo control. En cuanto a la androstenodiona, no encontramos diferencias significativas entre los grupos estudiados.

Autor: ALVARADO FRADUA CARMEN.
Año: 2005.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: En la presente tesis se han abordado tres objetivos generales con la finalidad de determinar los mecanismos que subyacen al proceso de la inmunosenescencia, así como su relación con la longevidad, y al desarrollo de procesos infecciosos, ambos muy relacionados con una situación de estrés oxidativo. Para ello, nos hemos apoyado en la utilización de un modelo de envejecimiento prematuro, clasificando a los animales en PAM (prematurely aging mice) y NPAM (mon-prematurely aging mice) en base a su comportamiento en el test del laberinto en T, y un modelo de shock endotóxico letal, ambos en ratones hembra de la cepa ICR/CD-1. Además, hemos evaluado el efecto, sobre determinados parámetros de función y sobre el estado redox de leucocitos peritoneales, de la ingestión de una mezcla de antioxidantes, como son la vitamina E, vitamina C, cinc, selenio y beta-carotenos, como parte habitual de la dieta, en ambas situaciones de estrés oxidativo, para determinar su posible uso como estrategia para conseguir un envejecimiento saludable y una mayor longevidad, así como fortalecer nuestras defensas para enfrentarnos con éxito a posibles agentes patógenos que podrían desencadenar la muerte de forma prematura. En general, se ha demostrado que durante el envejecimiento se produce un deterioro de la funcionalidad del sistema inmunitario debido, al menos en parte, al aumento del estrés oxidativo de estas células. Asimismo, a lo largo del shock endotóxico se reproducen los cambios observados durante el envejecimiento en los diferentes parámetros inguinarios analizados en los leucocitos peritoneales, pero de forma aguda y prominente, lo cual conduce a la muerte prematura de los ratones. La suplementación de la dieta con antioxidantes revierte en cierta medida el estrés oxidativo que subyace el envejecimiento y shock endotóxico mejorando la funcionalidad de los leucocitos procedentes del peritoneo. Por otro lado, el efecto de estos compuestos sobre estas células, varía en función de la edad, de la dosis así como del tiempo de administración de los antioxidantes. Así, podemos afirmar que el mantenimiento de la homeostasis redox de las células inmunitarias parece desempeñar un papel fundamental en su funcionalidad, incidiendo de forma positiva en la longevidad de los ratones, así como en la evolución de los procesos infecciosos.

Autor: ÁLVAREZ CIFUENTES PEDRO.
Año: 2005.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE FISIOLOGÍA ANIMAL, FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: En la presente tesis se ha constatado la existencia de cambios en el estado funcional y redox de las principales células inmunitarias en dos proceso que muestran una base oxidativa, como lo son el envejecimiento y el shock endotóxico. Por un lado, se ha empleado en ratones un modelo de envejecimiento prematuro mediante una prueba de exploración espontánea en un laberinto en T, que diferencia a ratones PAM (prematurely aging mice) de NPAM (non prematurely aging mice), de forma que los primeros están "biológicamente más envejecidos" que los segundos. Los PAM presentan un claro deterioro de la función nerviosa y de la funcionalidad del sistema inmunitario, de su estado redox leucocitario, así como una menor esperanza de vida en relación a los NPAM. Además, se ha encontrado un paralelismo del envejecimiento a lo que acontece cuando a los animales se les genera, mediante inyección intraperitoneal de LPS de E.coli (25 mg/kg), un "shock endotóxico", un proceso en el que tiene lugar un estrés oxidativo agudo, el producido por una septicemia. La suplementación en la dieta con los antioxidantes tiólicos N-acetilcisteína (NAC) y tioprolina (TP) o con cereales naturalmente ricos en antixodiantes polifenólicos, mejora la función imunitaria y neutraliza el estrés oxidativo, hecho que se parecía fundamentalmente en los animales prematuramente envejecidos (PAM) y en los animales que manifiestan una endotoxemia. Por tanto, dichas suplementaciones tienen un papel "preventivo" y/o "terapéutico", al aumentar la probabilidad de envejecer de forma exitosa y saludable y prevenir la promoción de ciertas enfermedades. Estos resultados, además parecen confirmar la teoría oxidativa-inflamatoria que subyace al envejecimiento y a toda una serie de estados fisiopatológicos, como el shock endotóxico.

Autor: MONTSERRAT PULIDO NÚRIA.
Año: 2005.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA, UNIVERSIDAD DE BARCELONA.

Resumen: Se ha estudiado el papel de la insulina y los factores de crecimiento tipo insulina (IGFs) en el crecimiento y metabolismo en trucha arco iris (Oncohrynchus mykiss) y dorada (Sparus aurata). Para asumir este objetivo, se han realizado experimentos in vivo en ambas especies, en los que se ha provocada una situación de crecimiento compensatorio. Mediante RT-PCR real time se ha analizado la expresión de los principales reguladores miogénicos (miogenia, myoD), así como la de los FGFs, miostatinta, IGF-I e IGF-II durante el crecimiento compensatorio en la trucha arco iris, de la misma manera se ha estudiado el papel de los receptores de insulina e IGF-I en la musculatura blanca durante este fenómeno. En la dorada, se ha estudiado el papel de los receptores de insulina e IGF-I en la musculatura blanca, así como los valores plasmáticos para la insulina e IGF-I durante los diferentes periodos experimentales igualmente se ha analizado la movilización de las diferentes reservas energéticas (lípido, proteína y glucógeno) en músculo blanco e hígado. Para completar nuestros estudios in vivo, se ha analizado la expresión de los receptores de hormona de crecimiento (GH) en la musculatura blanca y en hígado, así como la expresión de los IGFs en ambos tejidos durante la reglamentación en la trucha arco iris. A la luz de los resultados in vivo se procedió a la puesta a punto de un cultivo de células musculares de dorada. En este sistema in vitro se ha estudiado el papel de la insulina y de los IGFs en la estimulación de las diferentes vías de transducción de la señal a lo largo del cultivo. De la misma manera se ha estudiado el papel metabólico de estos péptidos realizando estudios de captación de glucosa y de alanina en los diferentes días de cultivo. Para confirmar que los efectos de estos péptidos eran mediados por la presencia de receptores específicos se realizaron estudios de binding para el receptor de IGF-I en los diferentes días de cultivo y se estudió el efecto de diferentes inhibidores de las vías de la transducción de la señal a lo largo del cultivo.

Autor: BELTRAN ARCAS MARTA.
Año: 2005.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: La limitación de la harina de pescado ha estimulado la investigación de los recursos vegetales como fuentes alternativas para el cultivo de especies carnívoras. En general, elevados porcentajes de fuentes vegetales suelen comportar una disminución del crecimiento. Esta disminución está asociada, entre otras razones, a la menor calidad de la proteína vegetal en comparación con la proteína animal. Desde el punto de vista fisiológico, existe una estrecha relación entre el contenido de aminoácidos de la dieta (especialmente aminoácidos esenciales), los aminoácidos libres de los tejidos, el metabolismo de estos tejidos y la utilización del os aminoácidos para sintetizar proteínas. El objetivo general de esta tesis era estudiar el efecto de la sustitución sobre la capacidad de utilización de la proteína de la dieta. Para dicho estudio, dietas con diferente porcentaje de sustitución fueron marcadas con isótopos estables (13C y 15N) y se hizo un seguimiento post-prandial (a 11 y 24 horas) de la proteína de la dieta. Se analizó la incorporación de marcaje en los componentes principales de tejidos (músculo, hígado, vísceras) así como en los aminoácidos libres de plasma y músculo. La incorporación de los marcadores procedentes de la proteína de la dieta en los tejidos y sus componentes principales, así como en los aminoácidos libres de músculo y plasma, demuestra que en trucha y dorada se puede sustituir un 50% de la harina de pescado sin alterar el uso de la dieta. Las dietas de 75% de sustitución provocaron en trucha una mayor oxidación de la proteína de la dieta, repercutiendo sobre el crecimiento. Sin embargo, el patrón de distribución de los marcadores en los componentes principales de los tejidos era similar al de la situación control. En cambio, el 100% de sustitución provocó en esta especie un incremento del reciclaje de los aminoácidos del músculo, una disminución de la relación aminoácidos esenciales/aminoácidos no esenciales en plasma y músculo, así como una activación de la gluconeogénesis hepática. Por otro lado, el seguimiento de los carbohidratos de la dieta 100% vegetal (mediante marcaje con almidón-13C) puso de manifiesto la baja disponibilidad de éstos. En dorada, un 75% de sustitución provocó, como en trucha, una mayor oxidación de la proteína de la dieta. En esta especie, la disponibilidad de los aminoácidos de la dieta disminuía cuando su origen era 100% vegetal, echo que provocó un incremento del reciclaje proteico en músculo, evidenciado por el mayor enriquecimiento isotópico de alanina, aspartato y prolina, y por la disminución de la relación esenciales/no esenciales. Sin embargo, la dorada no mostró problemas de digestión y absorción de los carbohidratos de la dieta 100% vegetal. La técnica de marcaje con isótopos estables ha permitido no sólo hacer estos estudios sin problemas de contaminación ambiental y personal, sino que además, el estudio del fraccionamiento isotópico del 15N ha resultado una herramienta muy útil para determinar el reciclaje proteico. Por otro lado, nuestros estudios muestran que le 15N puede ser un buen marcador del origen de la proteína de la dieta.

Autor: DÍA FERRER MÓNICA.
Año: 2005.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: Los transportadores de glucosa de difusión facilitada (GLUTs) son proteínas esenciales para permitir la entrada de glucosa dentro de la célula. En mamíferos han sido identificadas catorce isoformas (GLUT1-14). En concreto, el GLUT4 se ha descrito como la isoforma más importante para el mantenimiento de la glucemia, ya que es el mediador de la acción de la insulina para incrementar la tasa de captación de glucosa. Hasta el momento en peces sólo se han identificado cuatro isoformas de GLUTs, y entre ellas destaca el GLUT4, el cual fue clonado por primera vez en trucha común (Salmo trutta). En el inicio de esta tesis ya existían algunas evidencias sobre la regulación de la insulina sobre la expresión de este transportador in vivo, específicamente en el músculo rojo de trucha. Sin embargo se desconocía si la acción de la insulina era un efecto directo sobre el tejido muscular o bien actuaba a través de otros mediadores. Por otro lado, tampoco se conocí a la acción de la insulina sobre la proteína GLUT4 de trucha, un hecho importante si consideramos que la proteína es la que en definitiva ejerce la función transportadora de glucosa. Por lo tanto, en esta tesis hemos intentado resolver estas cuestiones para poder contribuir a un mejor conocimiento de uno de los elementos importantes que intervienen en el metabolismo de los carbohidratos en los peces teleósteos. En este estudio se demostró que los niveles de insulina circulantes son capaces de modular el contenido de proteína GLUT4 in vivo en el músculo esquelético de trucha que y esta regulación es específica del tipo de fibra muscular. También se demostró que los efectos de la insulina sobre la expresión de GLUT4 en el músculo esquelético de trucha son debidos a la acción directa de ésta sobre las células musculares. La expresión basal de GLUT4 aumenta a lo largo de la diferenciación de las células musculares de trucha. La insulina y el IGF-I estimulan la expresión de GUT4 y sus efectos son más marcados en miotubos que en mioblastos. Asimismo, la expresión de GLUT1 también aumenta durante el proceso de diferenciación muscular pero más levemente que la expresión de GLUT4. La insulina, en general, promueve la acumulación de ARN mensajero de GLUT1 en las células musculares de trucha. Por su parte, el IGF-I también aumenta la expresión de GLUT1 pero sólo lo hace de forma notable en mioblastos. En esta tesis también se estudió la regulación del tráfico del GLUT4 de trucha por insulina en células musculares L6. Para ello fue generada una línea estable de células L6 que expresaban el GLUT4 de trucha con un epítopo myc en su porción extracelular (btGLUT4myc). La insulina fue capaz de estimular la aparición del btGLT4myc en la membrana plasmática, aumentando así la captación de glucosa en estas células. Este efecto era cuantitativamente menor que el que tenía la insulina sobre el GLUT4myc de rata, ya que, en estado basal, un mayor porcentaje de btGLUT4myc estaba ya presente en la superficie celular comparado con el GLUT4myc de rata. Además, btGLUT4myc respondía de manera más lenta que el GLUT4myc es más lenta que la del GLUT4myc de rata. Estos resultados nos sugieren que las diferencias observadas entre el tráfico del GLUT4 de trucha y el GLUT4 de rata pueden ser debidas a diferencias en algunos motivos aminoacídicos los cuales en mamíferos se ha demostrado que participan en la internalización y retención intracelular del transportador en estado basal. También se ha visto que la insulina estimula la translocación de BtGLUT4 en las células musculares de trucha y como consecuencia aumenta el transporte de glucosa en estas células musculares de trucha y concentrado en la región perinuclear, tal y como ha sido descrito previamente para el GLUT4 de mamífero. En conjunto, podemos concluir que los mecanismos de regulación de la insulina sobre GLUT4 en el músculo esquelético ya existen en los vertebrados inferiores, aunque existen algunas diferencias con respecto a los mamíferos. Así, podemos ver que a lo largo de la evolución se ha perfeccionado el sistema de regulación de la captación de gl 8 ucosa ha 2e4 sta llegar a ser un mecanismo eficiente que permite una recuperación rápida de la glucemia.

Autor: RAMUDO GONZALEZ LAURA.
Año: 2005.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGIA.
Centro de realización: EDIFICIO DEPARTAMENTAL.

Autor: GRASA LÓPEZ LAURA.
Año: 2005.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA Y FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: Numerosas patologías digestivas que afectan a los animales y a los humanos son producidas por agentes infecciosos tales como las bacterias E. Coli, Salmonella, Sighella... Estos agentes infecciosos pueden inducir una reacción inflamatoria y producir trastomos en la motilidad intestinal. En esta tesis se estudió el papel del calcio, así como de la prostaglandina E2 y del NO, como mediadores de la inflamación, en la contractilidad del intestino delgado del conejo. Tanto el músculo liso intestinal longitudinal como el circular, mostraron contracciones espontáneas rítmicas y fásicas. Estas contracciones espontáneas se vieron afectadas por la liberación de neuromoduladores excitatorios colinérgicos muscarínicos y adrenérgicos. Además estas contracciones espontáneas se encuentran reguladas tanto por el calcio extracelular como por el calcio intracelular. Por el contrario, las contracciones producidas por la acetilcolina y el KC1 se vieron afectadas fundamentalmente por el calcio extracelular. La prostaglandina E2 y diversos agonistas de los receptores de la prostaglandina E2 (receptores EP1-4) produjeron contracciones en el músculo liso longitudinal del intestino. En esta respuesta contráctil de la PGE2 parecen estar implicados los receptores EP1 y EP3, que están localizados en las neuronas del plexo mientérico y submucoso y en las capas musculares intestinales. La PGE2 actuaría a través de diversos mecanismos intracelulares entre los que se encontrarían implicados el calcio, la proteína cinasa C, el AMPc y la vía de las tirosinas cinasas. El nitroprusiato sódico, un donador de NO, produjo relajación de los músculos lisos longitudinal y circular del intestino. Esta relajación parece estar mediada por una via neuronal excitatoria tónica, por canales de calcio voltaje dependientes, por el GMPc y por canales de potasio dependientes de calcio de gran conductancia. Las contracciones espontáneas de los músculos longitudinal y circular del intestino se vieron reducidas en presencia del lipopolisacárido (LPS) de E. coli. Este efecto del LPS parece estar mediado por el NO y las prostaglandinas.

Autor: BISCAIA FERNÁNDEZ JOSÉ MIGUEL.
Año: 2005.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS (UCM).
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS (UCM) Y FACULTAD DE PSICOLOGÍA (UNED).

Resumen: Considerando que los derivados cannabionoides son una de las drogas ilegales más consumidas en los países occidentales y teniendo en cuenta también que dicho consumo suele iniciarse durante la adolescencia, se ha incrementado en los últimos años la alarma social ante las repercusiones futuras que este hábito puede acarrear. Por tal motivo, el objetivo de esta tesis doctoral ha sido estudiar el efecto de un tratamiento crónico en edad periadolescente con el agonista cannabionoide CP 55,940 sobre diferentes psicobiológicos registrados en ratas adultas de ambos sexos. En concreto, nos hemos interesado por estudiar los efectos de dicha exposición cannabinoide sobre diferentes conductas espontáneas, la conducta sexual, los niveles de algunas hormonas y la interacción con el sistema opioide. Para llevar a cabo estos objetivos, hemos dividido nuestra investigación con tres diseños experimentales diferentes: - En el primer diseño experimental, estudiamos el efecto del tratamiento con CP55,940 sobre la conducta espontánea de la rata en la edad adulta. Realizamos una batería de test conductuales (el tablero con agujeros, el campo abierto y el laberinto en cruz elevado), medimos la ingesta de los animales y la evolución de su peso corporal y valoramos los niveles de corticosterona. - En el segundo diseño experimental, se estudió como la exposición cannabinoide afectaba a la conducta sexual de la rata y se valoraron también algunas hormonas sexuales: estradiol, testosterona, hormona luteinizante (LH) y hormona folículo estimulante (FSH). - En el tercer diseño experimental, hemos estudiado la interacción entre los sistemas cannabinoide y opioide. Vimos como la exposición continuad de cannabionoides alteraba la conducta de autoadministración intravenosa de morfina y cómo se veían afectados los niveles de unión y la funcionalidad de los receptores así como la expresión de pro-encefálica. Los resultados encontrados en el primer diseño mostraron que el tratamiento con el agonista cannabionoide afectaba a la actividad locomotora, la emotividad, la actividad exploratoria así como la ingesta y la evolución del peso corporal. Además, se pudo encontrar un marcado efecto sexodimórfico en muchos de los parámetros estudiados. Con respecto al segundo diseño experimental, pudo concluirse que le CP55,940 alteraba el inicio de la actividad sexual aunque no modificaba los niveles de las hormonas sexuales valoradas. En el último experimento se vio que la exposición al agonista cannabinoide afecta a la adquisición de la conducta de autoadministración intravenosa de morfina y alteraba la unión y funcionalidad de los receptores u-opioides en ciertas regiones cerebrales. Nuevamente, fueron encontradas algunas diferencias sexodimórifvas. No se vio, sin embargo, efecto alguno del CP55,940 sobre la expresión de proencefalina. En conclusión, puede afirmarse que la tesis aquí presentada aporta datos sobre los efectos que el consumo juvenil de cannabinoides puede tener sobre diferentes aspectos neurobiológicos a largo plazo.

Autor: CAAMAÑO TUBÍO ROSA ISABEL.
Año: 2006.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA-UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE COMPOSTELA.

Resumen: La mayoría de los peces, a diferencia de los mamíferos, están metabólicamente mal equipados para hacer frente a cantidades significativas de carbohidratos en su dieta. No obstante, los requerimientos de glucosa en los peces son importantes ya que hay tejidos que la usan como sustrato energético fundamental, de ahí la necesidad de mantener controlados los niveles de glucosa en la sangre. La regulación de la glucemia está íntimamente ligada a la acción de diversas hormonas, entre ellas las catecolaminas (adrenalina, A y noradrenalina, NA) y, aunque el control de su liberación es principalmente colinérgico, también existe un control no colinérgico en el que se ha especulado que puede estar involucrada la serotonina (5-HT). En peces, el sistema 5-HT es muy poco conocido, sobre todo a nivel periférico. Los objetivos básicos planteados en este trabajo fueron: i) identificar los principales depósitos periféricos de 5-HT en la trucha arco iris, Oncorhynchus mykiss y su importancia en la homeostasis de la 5-HT sanguínea, e ii) investigar si existe un control (central y/o periférico) de la 5-HT sobre la liberación de las catecolaminas y sobre la glucemia, así como los posibles receptores 5-HT implicados. Los resultados pusieron de manifiesto, por primera vez en peces, que: i) los principales depósitos periféricos de 5-HT son el intestino y las branquias, seguidos por el riñón, el hígado, el corazón y el bazo. El intestino libera la 5-HT procedente de los plexos nerviosos 5-HT de las capas musculares de la pared intestinal e inmediatamente la recapta para metabolizarla. La escasa 5-HT no metabolizada en el intestino llega a otros tejidos (hígado y branquias) a través de la sangre, para ser captada y metabolizada. El ácido indolacético (5-HIAA) que llega al plasma procedente de la degradación de la 5-HT, rápidamente es eliminado vía urinaria por un eficaz sistema de excreción renal, y ii) en la trucha arco iris no existe un control central de la 5-HT sobre el sistema nervioso simpático; la 5-HT actúa a nivel periférico sobre el sistema interrenal produciendo un efecto hiperglucémico a través del control de la secreción de la A por medio de la activación de receptores de tipo 5-HT1-like, si bien no se descarta una participación (menor) de receptores 5-HT2 a través de la modulación de la secreción de la NA.

Autor: Carrascal Moreno María Livia.
Año: 2006.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: Facultad de Biología.
Centro de realización: Facultad de Biología.

Resumen: El objetivo general de esta Tesis Doctoral es la caracterización electrofisiológica y morfológica de las motoneuronas (Mns) del núcleo motor ocular (nMOC) durante el desarrollo postnatal. Las Mns del nMOC de la rata presentaron grandes cambios en las principales propiedades electrofisiológicas durante el desarrollo pudiéndose distinguir tres grandes etapas: o Primera etapa o etapa inicial (1-5 días) en la que maduran las propiedades pasivas de las Mns. o Segunda etapa o etapa intermedia (6-20 días) en la que terminan de madurar las características del potencial de acción. o Tercera etapa o etapa final (>20 días) en la que las Mns muestran las características electrofisiológicas típicas del adulto. Las Mns del nMOC de la rata presentaron grandes modificaciones en las principales características morfométricas durante el desarrollo pudiéndose distinguir dos grandes etapas: o Primera etapa que transcurre desde el nacimiento hasta aproximadamente los 10 primeros días postnatales en la que se produce un incremento en la complejidad y longitud de las dendritas acompañada de un aumento en la superficie somato-dendrítica. Además, en esta primera etapa algunas células presentan acoplamiento. o Segunda etapa a partir de los 10 días postnatales en la que ya no hay crecimiento en superficie de membrana debido a que se produce una regresión en la complejidad, acompañada de un aumento en la longitud de los segmentos, así como de un aumento en la máxima distancia del soma al terminal y en el diámetro dendrítico. Todos estos datos muestran que durante el desarrollo postnatal se producen importantes cambios en las características morfo-funcionales de las Mns del nMOC, que conducirán en el animal adulto a realizar las fijaciones y movimientos oculares de forma correcta..

Autor: BLANCO LÓPEZ FRANCISCO JAVIER.
Año: 2006.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: El endotelio vascular es una monocapa de células que tapiza el interior de los vasos sanguíneos y que se encuentra en contacto directo con el torrente circulatorio. El proceso de formación de nuevos vasos sanguíneos a partir de otros preexistentes se denomina angiogénesis. Sobre este proceso, el factor de crecimiento transformante-beta (TFG-beta) es una citoquina que juega un papel dual, ejerciendo funciones tanto pro-angiogénicas como anti angiogénicas. En esta tesis doctoral se ha demostrado que endoglina, receptor auxiliar de TGF-beta, altamente expresado en células endoteliales, es capaz de promover la fase de activación de la angiogénesis en respuesta a TGF-beta. Se ha obtenido que es capaz de interaccionar con ALK-1, receptor tipo I de TGF-beta expresado predominantemente en células endoteliales. Esta asociación física tiene lugar tanto a nivel extracelular como citoplásmico y resulta en una cooperación funcional sobre su vía de señalización, esto es, a través de SAmd1. Se inducen así fenómenos como proliferación celular y la inducción de genes específicos como ld1. Por el contrario, endoglina es capaz de bloquear la vía de señalización de TFG-beta a través del ampliamente expresado receptor tipo I, denominado ALK-5, mediante Smad3. Por otra parte, se ha observado que cuando las células endoteliales entran a senescencia, hay un cambio en la expresión de la isoforma endoglina, generándose una proteína más corta denominada endoglina-S. Esta isoforma es capaz de interaccionar con ambos receptores tipo I de TGF-beta pero con una afinidad muy mayor por ALK-5. El resultado de la expresión de endoglina-L. Endoglina-S favorece la vía de señalización ALK-5/Smad3 en detrimento de la de ALK-1/Smad, reflejándose en un aumento de la actividad transcripcional del promotor de PAI-1 y disminución del de ld1, respectivamente. Además, se ha demostrado que ALK-1 se localiza en unos microdominios especializados de la membrana plasmática denominados caveolas, donde es capaz de interaccionar con caveolina-1, su principal componente proteico. Esta asociación directa depende del dominio de andamiaje de caveolina-1 que reconoce un motivo consenso en la región Trp339-Trp406 de la estructura primaria de ALK-1. Esta interacción resulta en una activación de la angiogénesis, representando uno de los pocos casos descritos hasta ahora en los que caveolina-1 ejerce una cooperación funcional positiva. Tanto la isoforma mayoritaria de endoglina como caveolina-1 tienen una función pro-angiogénica en la célula endotelial, promoviendo la respuesta celular a esta citoquina multifuncional.

Autor: PÉREZ DE HEREDIA BENEDICTE FÁTIMA.
Año: 2006.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: El tejido adiposo no es la masa homogénea y pasiva que se creía, sino que se comunica con el resto del organismo. Los adipocitos tienen receptores para señales neuroendocrinas y secretan más de 50 sustancias bioactivas, como leptina, adiponectina, resistina, o citoquinas, participando en la regulación de multitud de funciones. El tejido adiposo también envejece, y con la edad aumenta el porcentaje de grasa corporal. El estilo de vida de nuestra sociedad (sedentario y con alto consumo de energía y grasa), favorece la acumulación del tejido, lo que, junto con el incremento de la esperanza media de vida, conduce a poblaciones con un número cada vez mayor de individuos con sobrepeso. Envejecimiento y obesidad se relacionan con patologías como diabetes, hiperlipidemias, cáncer y riesgo cardiovascular, haciendo fundamental encontrar una terapia que frene el avance de la obesidad y sus complicaciones. Una candidata es la dehidroepiandrosterona (DHEA), una hormona a la que se le atribuyen propiedades rejuvenecedoras y adelgazantes. En este trabajo estudiamos qué cambios fisiológicos y bioquímicos se producen con el envejecimiento en el tejido adiposo de ratas Sprague-Dawley alimentadas con una dieta hipergrasa; determinamos cómo influyen en la evolución de otros parámetros, como la sensibilidad a insulina o los lípidos y hormonas plasmáticos; analizamos si la DHEA revierte dichos cambios; y comparamos la reacción de distintos depósitos grasos ante los diferentes estímulos. Parte de las ratas se alimentaron con pienso estándar, (grupo control), y parte con una dieta hipergrasa. A distintos momentos (6 y 14 meses de edad), se sacrificaron subgrupos de ratas. A los 16 meses de edad, los animales se dividieron en dos grupos, y uno de ellos recibió un suplemento de DHEA al 0,5% en la dieta durante 13 semanas. Se extrajeron los tejidos adiposos marrón, subcutáneo, periovárico, perirrenal y mesentérico, para estudiar tamaño de adipocitos, perfil de ácidos grasos y expresión de genes de adipoquinas. En los animales viejos se analizó la lipolisis, para ver si se modificó por el tratamiento con DHEA. En plasma se midieron glucosa, lípidos, insulina, SDHEA, leptina, adiponectina, resistina, TNF , SHBG y el perfil de ácidos grasos. Las ratas con dieta hipergrasa ingirieron más energía, pero no desarrollaron obesidad en los primeros meses. Con el tiempo, sí se observó un aumento significativo de adiposidad en estos animales. Esto pone de manifiesto una acción sinérgica de la edad y la dieta en los cambios de composición corporal. Con la edad aumentaron las concentraciones de lípidos plasmáticos, incrementando el riesgo metabólico. La concentración de insulina, por su parte, no varió ni con la edad ni con la dieta. Los animales con dieta hipergrasa presentaron concentraciones menores de adiponectina y resistina que sus controles. Con la edad disminuyeron el SDHEA y la adiponectina, y aumentaron la leptina y la resistina. Estos cambios revelan un perfil hormonal proclive a un mayor riesgo metabólico con el envejecimiento. La expresión de adiponectina y leptina disminuyó con la edad, mientras que la de resistina aumentó. Los cambios fueron significativos en los depósitos viscerales, pero no en el subcutáneo. El perfil de ácidos grasos del tejido adiposo fue característico de la región: el marrón fue el más saturado, el subcutáneo el más insaturado y el mesentérico el que más ácidos trans acumuló. Edad y dieta influyeron en este perfil; con la dieta hipergrasa se incrementaron los AGS y el oleico, a expensas de los AGP, llegando a desaparecer las diferencias iniciales entre depósitos. Con la edad, se elevaron los AGM y AGP y disminuyeron los AGS. En las ratas con DHEA disminuyó la ingesta, el peso y la grasa corporal, revirtiendo el incremento ocurrido durante el envejecimiento. El tejido subcutáneo fue el que más menguó. Además, aumentó la exp 8 resión d 5a5 e adiponectina, sugiriendo un nuevo mecanismo de acción en los efectos beneficiosos de la DHEA, y disminuyó la concentración de insulina, confirmando su efecto protector frente al riesgo metabólico. El tratamiento modificó el perfil de ácidos grasos del tejido adiposo, aumentando el esteárico y el oleico, y disminuyendo el linoleico. En el tejido marrón se elevaron los n-3, sugiriendo una posible relación entre DHEA, composición del tejido y termogénesis. El análisis factorial reveló que las variables más influyentes en el tejido adiposo fueron la edad y los ácidos grasos, especialmente AGS y AGM, seguidas de la adiposidad, la leptina y la insulina. Tanto el tratamiento dietético como el hormonal se revelaron como agentes capaces de alterar los valores de los parámetros estudiados y las relaciones entre ellos.

Autor: TEJERA HERNANDEZ NOEMI.
Año: 2006.
Universidad: LA LAGUNA.
Centro de lectura: FACULTAD DE FISICA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA.

Resumen: La incorporación de nuevas especies de peces marinos a la acuicultura es un reto para el futuro desarrollo de esta actividad. Los avances realizados en el establecimiento de las técnicas de cultivo de bocinegro (Pagrus pagrus), permiten considerarlo como una especie con un fuerte potencial para la acuicultura, siendo la dificultad de obtener ejemplares correctamente pigmentados en cautividad, el principal obstáculo a la comercialización de esta especie. En otros espáridos, como la dorada japonesa, que también poseen un aspecto externo rojizo en el medio natural, la pigmentación de la piel es consecuencia de la deposición de pigmentos carotenoides provenientes de la dieta y, en concreto, del carotenoide astaxantina. En la presente memoria se detallan los resultados obtenidos en cuatro experiencias de engorde de alevines de esta especie, realizadas en colaboración con el Instituto Oceanográfico de Canarias, en las que se ha tratado de evaluar globalmente el papel que ejercen los carotenoides en su dieta. A tal fin, se han utilizado dietas suplementadas con distintas fuentes y niveles de caroteno, controlándose el cómo afectaban al crecimiento y supervivencia, coloración, nivel de carotenoide total, y nivel y forma química de la astaxantina depositada en la piel de los ejemplares sometidos a estudio. Asimismo, dado el importante requerimiento de ácidos grasos altamente insaturados que poseen las especies de peces marinos, se ha analizado la composición lipídica de la piel y los niveles de peróxidos lipídicos, con el fin de establecer el papel de los carotenoides en la protección contra la oxidación de estos ácidos grasos esenciales. En una primera experiencia de engorde se probó una dieta suplementada con un 12% de camarón congelado (Plesionika sp.) para alimentar alevines de bocinegro, obteniéndose buenos resultados en cuanto a pigmentación se refiere. En el segundo experimento se incluyeron distintas fuentes y niveles de astaxantina, económicamente más viable que el camarón, en la dieta del bocinegro. A tal fin se probaron niveles de 25 y 50 mg/kg de astaxantina Carophyll Pink y del alga Haematococcus Pluvialis para suplementar las dietas. En la tercera experiencia de engorde se probaron niveles inferiores, 8 y 16 mg/kg de las fuentes de astaxantina empleadas en la experiencia anterior. Asimismo, se probaron dos niveles, 25 y 50 mg/kg del carotenoide cantaxantina. De los experimentos realizados se extrae que independientemente de la forma química de la astaxantina suministrada en la dieta, libre (Carophyll Pink) o esterificada (Haematococcus Pluvialis y Plesionika sp), ésta se depositó en la piel de los peces mayoritariamente en su forma diéster. Asimismo, se determinaron ciertos niveles de tunaxantina diéster, carotenoide descrito en la piel de la dorada japonesa. Los niveles de astaxantina empleados en la tercera experiencia resultaron insuficientes a la hora de promover una pigmentación rojiza en la piel del bocinegro, mostrando que el nivel de astaxantina más adecuado para obtener una coloración aceptable desde el punto de vista comercial debe situarse en torno a los 20 mg/kg de pienso (peso seco), siendo la forma esterificada de este carotenoide más eficiente que la forma libre a la hora de lograr dicho objetivo. Asimismo, en esta experiencia se comprobó que la cantaxantina no resulta eficaz a la hora de conferir una pigmentación rojiza de la piel de los ejemplares de cultivo. En cuanto al análisis de la composición lipídica y de los peróxidos lipidicos, los resultados indicaron que si bien no existen diferencias importantes en la composición en ácidos grasos entre los peces alimentados con carotenoides y los alimentados sólo con la dieta basal, el nivel de peróxidos en la piel de estos últimos es superior. Ello sugiere que la inclusión de carotenoides en la dieta se tradujo en una mayor protección frente a las autooxidaciones lipídicas. Teni 8 endo en a4c cuenta los resultados obtenidos en las experiencias realizadas, las cuales se llevaron a cabo en tanques, y dado que el sistema de cultivo de peces más adecuado para las condiciones propias de nuestras costas es el de jaulas marinas flotantes, se diseñó una cuarta experiencia de engorde para establecer la idoneidad de estas sistemas en el cultivo del bocinegro. En este experimento, en el que se probó una dieta comercial suplementada con astaxantina, se contó con la colaboración de la empresa canaria CEDRA, S.L.L., entidad que se dedica al engorde de dorada y lubina en este tipo de estructuras flotantes. Como resultado más destacado en esta experiencia observamos una pigmentación más oscura en los ejemplares de jaula respecto a los de tanque. Este hecho se refleja en una mayor deposición de astaxantina en la piel de los bocinegros mantenidos en jaulas marinas, los cuales pueden haber depositado mayores niveles de este carotenoide como protección frente a las altas intensidades lumínicas a las que se vieron expuestos. Así desde el punto de vista aplicado y para abaratar los costes de producción de piensos suplementados con astaxantina para el engorde de bocinegros en jaulas marinas flotantes, se sugiere no utilizar dosis superiores a 20 mg/kg de pienso (peso seco) de astaxantina esterificada y cubrir las jaulas con estructuras capaces de disminuir la intensidad lumínica en la superficie de las mismas. Bajo estas premisas se desarrolla actualmente el Proyecto de Transferencia de Resultados de Investigación (PETRI, ref. PTR1995-0933-OP-02-01) titulado Suplementación de piensos con astaxantina para la adecuada coloración del pargo (Pagrus pagrus), en condiciones de cultivo comercial, coordinado por la Universidad de La Laguna y en la que participan el Instituto Español de Oceanografía y la empresa de cultivos CEDRA, S.L.L. Ello ha sido posible gracias a los resultados preliminares obtenidos y que han sido expuestos en la presente memoria

Autor: HUERTAS PAU M. DEL MAR.
Año: 2006.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: La biología de la anguila, junto con un enigmático ciclo de reproducción y situación actual del stock cercana a la extinción hacen de esta especie un sujeto de estudio muy interesante. La presente tesis puede contribuir al desarrollo de estrategias para la conservación para este importante grupo de teleósteos mediante la mejora del entendimiento de su ciclo reproductivo, pudiendo así tener un impacto socio-económico secundario. También se estudió el papel de factores ambientales en el crecimiento y la reproducción, siendo éste un factor fundamental para el cultivo artificial de la especie. La importancia de la comunicación química en vertebrados ha sido objeto de un creciente interés en los últimos años, prueba de ello es el incremento de publicaciones de alto impacto en revistas de prestigio. El estudio consta de cinco capítulos. El primero trata el efecto de la densidad de cultivo en el crecimiento y la diferenciación sexual de la anguila, introduciendo el concepto de uso de señales químicas en la interacción social, el cual se trata en el capítulo dos. En el capítulo 3 se estudian los sistemas implicados en el transporte de señales químicas desde el medio externo. Finalmente en el capítulo cuarto y cinco, se estudia la posible fuente de señales química susceptibles de ser detectadas por el olfato de los peces y su uso entre e intra especies.

Autor: SANTIGOSA I CULÍ ESTER.
Año: 2006.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: UNIVERSIDAD DE BARCELONA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE BARCELONA.

Resumen: La creciente importancia de la acuicultura ha impulsado la investigación dirigida a la mejora de las dietas para peces y a la disminución de los costes de fabricación de éstas, con el objetivo de optimizar el desarrollo sostenible del sector. Se hace necesaria la búsqueda de ingredientes alternativos a la harina y el aceite de pescado, tradicionalmente utilizados en la formulación de los piensos para peces carnívoros, y que son materias primeras cada vez más limitantes. Para la dorada (Sparus aurata) y la trucha (Oncorhynchus mykiss) se han estado dietas experimentales con distintos porcentajes de sustitución de la harina de pescado por fuentes proteicas vegetales, llegando al reemplazo total. Con el fin de ajustar la composición aminoacídica del pienso al perfil requerido por las especies, se utilizaron en las dietas de substitución mezclas de ingredientes vegetales y suplementación con aminoácidos libres. En experiencias de doce semanas de crecimiento, la sustitución de la harina de pescado disminuyó la actividad total de las proteasas digestivas, sugiriendo la presencia de factores antinutricionales en la dieta. Pero en ambas especies, se presentaron mecanismos de compensación, como el incremento de la longitud intestinal relativa, el incremento de algunas actividades proteasas específicas, o el desplazamiento de la capacidad de absorción desde el intestino proximal hacia el distal. Estos mecanismos compensatorios permitieron obtener buenas tasas de crecimiento hasta un 75% de reemplazo de la harina de pescado. Los animales alimentados con dietas de substitución total presentaron una función digestiva muy deteriorada y un crecimiento aproximadamente un 20% inferior a la de los animales alimentados con el pienso basado en harina de pescado. En dorada se testó la substitución simultánea de la harina de pescado 75% y de distintos porcentajes de aceite de pescado 33, 66 i 100%. La administración de las dietas experimentales con un 66% y un 100% de aceites de origen vegetal durante diez semanas disminuyó la actividad enzimática digestiva, no viéndose afectada la capacidad de absorción de aminoácidos. Solamente la dieta de doble substitución con un reemplazo total del aceite de pescado afectó negativamente el crecimiento. Se estudió en dorada el efecto de la inclusión total de aceite vegetal en dietas con distintos porcentajes 50% i 75% y orígenes de las fuentes proteicas vegetales. Los animales mostraron distintos patrones de regionalización de la capacidad de absorción de nutrientes a lo largo del tracto intestinal según la digestibildiad de las fuentes proteicas utilizadas. El grupo alimentado con la dieta de menor sustitución de harina de pescado presentó una actividad proteolítica digestiva superior, y una tasa de crecimiento significativamente más elevada. El síndrome de invierno es una enfermedad que afecta a las doradas en la costa norte del Mediterráneo. Tiene un origen multifactorial, pudiendo ocasionar pérdidas económicas importantes durante los meses más fríos. Se han testado, en dorada, piensos comerciales con distintos porcentajes de lípidos 14 y 22% como dietas de preparación para el invierno. El engorde durante 75 días con los piensos seleccionados no afectó a la absorción de nutrientes a nivel intestinal ni tampoco a los índices de crecimiento. El ejercicio moderado tampoco afectó los parámetros estudiados. Se descarta que a bajas temperaturas los animales rehusen el alimetno debido a una incapacidad en la absorción de nutrientes, ya que todos los grupos de doradas respondieron a de manera similar a una situación duradera de frío.

Autor: CRISTIÀ CIVIT ESTHER.
Año: 2006.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA, UNVIERSIDAD DE BARCELONA.

Resumen: La tesis doctoral engloba el estudio de las adaptaciones funcionales y estructurales que se producen en el colon distal de rata debido a cambios en la ingesta de sodio. En concreto se ha estudiado el papel de tres hormonas, angiotensina II, aldosterona y vasopresina, en el transporte de Na+, en la permeabilidad del epitelio y en el crecimiento miofibroblástico de la zona pericriptal. Mediante un modelo animal de activación del sistema renina-angiotensina-aldosterona (RAAS) en rata, se han reproducido las adaptaciones funcionales y estructurales en la mucosa del colon distal en la adaptación de una dieta con alto contenido en sodio (HS) a una dieta con bajo contenido en sodio (LS). En tan solo 3 días de dieta LS además del aumento en el transporte electrogénico de sodio, se observa una disminución de la permeabilidad del tejido, que se confirma por un aumento en la densidad de las uniones estrechas, concretamente de la expresión de claudina 4, y por un aumento en la resistencia transepitelial. Además hay proliferación de la capa de miofibroblastos presentes en la zona pericriptal, ya que aumenta la expresión de alfa-actina de músculo liso y la síntesis de colágeno IV y aumenta la expresión de las uniones adherentes, concretamente E- y OB-caderina. Estas adaptaciones provocan la acumulación de sodio en la zona pericriptal, creando una tensión hidráulica que facilita el paso de agua en una zona intestinal donde éste se encuentra con una fuerte oposición debido a la alta osmolalidad de las heces. El tratamiento con inhibidores de la cadena enzimática del RAAS, captopril, losartan, y esprionolactona, revierte estos efectos, confirmando la implicación de la angiotensina II y la aldosterona. Para determinar el papel concreto de cada una de estas hormonas en estas adaptaciones del colon distal, se ha puesto a punto un modelo animal de activación del RAAS minimizando la síntesis de aldosterona mediante una operación de adrenalectomía y controlando la concentración plasmática de ambas hormonas mediante su infusión exógena. La aldosterona, sin la presencia de angiostensina II, consigue reproducir los efectos de la dieta LS aumentado el transporte electrogénico de sodio, disminuyendo la permeabilidad del tejido, incrementando la resistencia transepitelial y favoreciendo el crecimiento miofibroblástico y la acumulación de sodio en la zona pericriptal. La angiotensina II, en cambio, por si sola no reproduce estos efectos. Los resultados obtenidos están recogidos en dos publicaciones (Moretó et al., 2005). También se han estudiado los efectos del grado de deshidratación sobre las funciones del colon distal, comprobando la implicación directa de la vasospresina y determinando los receptores implicados. Tanto la deshidratación como concentraciones elevadas y de vasopresina dan lugar a una disminución de la permeabilidad del tejido, un aumento en la acumulación de sodio en la zona pericriptal y un aumento del crecimiento miofibroblástico. Ambos tipos de receptores V1 i V2, están implicados en estos efectos. Además, se ha confirmado la expresión de acuaporina-2 (AQP-2) en la mucosa del colon distal y el aumento de su expresión en estados de deshidratación y debido a la administración de basopresina. La expresión de AQP-2 está mediada por el receptor V2, ya que tan solo el tratamiento con tolvaptan, un antagonista específcio de estos receptores, lo inhibe. Este estudio destaca la aldosterona como la hormona clave en las adaptaciones del colon distal al disminuir la ingesta de sodio de la dieta, descartando un papel directo de la angiotensina II en estos efectos. En condiciones de deshidratación, la vasopresina también disminuye la permeabilidad el epitelio e induce el crecimiento miofibrolástico, además de regular el movimiento de agua a través de acupaporinas mediante sus receptores V2 en el colon distal de rata.

Autor: GONZÁLEZ CASTRO ANA MARÍA.
Año: 2006.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA - UNIVERSIDAD DE BARCELONA.

Resumen: El tejido linfoide asociado al intestino delgado o GALT constituye le componente defensivo mayoritario de las mucosas y posee características anatómicas y funcionales diferentes a las del sistema inmunitario sistémico. La mayoría de estructuras que forman el GALT se forman durante la vida fetal, pero su funcionalidad no se desarrolla plenamente hasta después del nacimiento. El proceso de maduración inmunológica está influido por factores exógenos procedentes de la dieta, de la instauración de la flora comensal y de posibles contactos con agentes patógenos. Estudios previos realizados en nuestro laboratorio han permitido establecer la progresiva maduración fenotípica de los linfoctios del epitelio y de la lámina propia intestinal durante la etapa de lactancia de ratas. La importancia de la lactancia materna en la maduración del sistema inmunitario junto a su papel protector frente a infecciones y alergias es hoy en día incuestionable. Entre los agentes bioactivos de la leche materna se encuentran las poliaminas, aminas biógenas policatiónicas necesarias para el crecimiento y proliferación celular. En este sentido, se ha observado que la administración de poliaminas, de forma suplementaria a la lactancia en animales de experimentación, conduce al a maduración precoz de la estructura intestinal y de su función digestiva. Por todo ello se han abordado los siguientes objetivos y se han extraído las siguientes conclusiones de cada uno de ellos. * Determinar el efecto del suplemento dietético con las poliaminas espermina y espermidina durante la lactancia sobre la maduración fenotípica de los linfocitos del epitelio y de la lámina propia intestinales, y sobre la capacidad de secreción de anticuerpos de la lámina propia intestinal. Ambas poliaminas aceleran la disminución progresiva de la proporción de linfoctios intraepiteliales CD8+ que se produce en condiciones fisiológicas durante el periodo de lactancia. En intestino proximal, la administración de espermina incrementa la proporción de células con fenotipo CD8alfaalfa+ NKR-P1A+, y CD2-. Fenotipo característico de células NK implicadas en la respuesta inmunitaria innata. Sin embargo, en intestino distal, espermina induce una mayor proporción de IEL CD8+ con fenotipo TCRalfabeta+, CD8alfabeta+ y CD2, característico de linfocitos T citotóxicos implicados en la respuesta inmunitaria adaptativa. Los efectos de espermidina se localizan preferentemente en la región distal del intestino delgado, donde, de forma análoga a espermina, incrementa la proporción relativa de la subpoblación linfocitaria TCRalfabeta+, CD8alfabeta+ y CD2. * Determinar la influencia del suplemento dietético con espermina y espermidina sobre la maduración del sistema inmunitario sistémico durante la lactancia, concretamente sobre los cambios fenotípicos de linfocitos esplénicos y su capacidad secretora de inmunoglobulinas. Ambas poliaminas aceleran el incremento de la proporción de linfocitos CD4+ de la lámina propia, el cual se produce de forma fisiológica durante la lactancia. Asimismo favorecen la presencia de linfocitos CD4+ con fenotipo maduro CD90-. La administración de espermina acelera la reducción de la proporción de linfocitos CD8+ de lámina propia observada en condiciones fisiológicas durante la lactancia. * Evaluar el posible efecto protector de la administración diaria de poliaminas desde el nacimiento frente al desarrollo de inflamación del intestino delgado. Ambas poliaminas no son capaces de proteger frente al desarrollo de inflamación inducida por indometacina en rata joven. Por ello, como conclusión final se puede establecer que espermina y espermidina favorecen el desarrollo y maduración del sistema inmunitario intestinal en ratas durante la lactancia, pero no son capaces de proteger frente al desarrollo de inflamación induc 8 ida por 1ad indometacina en rata joven.

Autor: CALATRAVA DIANA NIEVES.
Año: 2006.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA - UNIVERSIDAD DE BARCELONA.

Resumen: Estudios previos demostraron que la disminución de la liberación del ácido araquidónico (AA), al inhibir la actividad fosfolipasa (PL) A2, reducía la proliferación de los fibroblastos 3T6 inducida por suero fetal. Al mismo tiempo, se demostró el papel de los prostaglandinas (PGs) en el control del crecimiento de los fibroblastos 3T6 inducido por suero. Así, se observó que la inhibición de las ciclooxigenasas (COXs) producía una reducción parcial de la proliferación celular, mientras que los antagonistas receptoriales de la PGE2 bloqueaban casi completamente el crecimiento de los fibroblastos 3T6. Estos resultados sugirieron la implicación de los metabolitos del AA producidos a través de otras vías sobre el crecimiento de los fibroblastos 3T6, como la vía de los lipoxigenasas (LOXs) o la vía de los citocromos P -450 (CYPs) que producen leucotrienos (LTs), ácidos hidroxiecosatetraenoicos (HETEs) y ácidos epoxieicosatrienoicos (EETs). Así, en este trabajo se plantea estudiar la implicación de estas vías sobre el control de la proliferación de los fibroblastos 3T6. Los resultados obtenidos sugieren que factores de crecimiento como el suero inducen la síntesis de PGE2 y 12(S)-HETE en cultivos de fibroblastos 3T6, mientras que los niveles de LTB4 se encuentran en el límite de detección. Por otro lado, los inhibidores específicos de la 5-LOX (zileuton) y de la 12/5-LOXs (Baicaleína), y los antagonistas de los receptores de los LTs (U-75302, REV-5901, LY-171883) no inhibieron de forma significativa el crecimiento de los fibroblastos 3T6 ni la incorporación de timidina. Sin embargo, en los macrófagos RAW 264.7, una línea celular donde se ha demostrado la expresión de las 5-, 12- y 15-LOXs y donde el AA se metaboliza principalmente por las COXs y LOXs, estos mismos tratamientos fueron capaces de inhibir la proliferación celular y la incorporación de timidan. Además, el zileuton produjo un retraso en el ciclo celular aumentando el número de células en la fase G0/G1. Además, hemos comprobado que la inhibición del crecimiento por parte de los inhibidores de la 5-LOX y los antagonistas receptoriales de los LTs no es debida a la inducción de citotoxicidad o apoptosis en los macrófagos RAV 264.7. Estos resultados sugieren la implicación de l a 5-LOX y los receptores de los LTs en el control de la proliferación de los macrófagos RAW 264.7. Por otro lado, nuestros resultados demuestran que la adición exógena de LTB4 o LTD4, en ausencia de suero, induce un incremento del número de células y de la incorporación de timidina de los macrófagos RAW 264.7, y este efecto está mediado por la activación de las vías MAPK y PL3K/Akt. El EPA compite con el AA para ser matabolizado por la COX-2, formando las PGs de la serie-3, y por la 5-LOX, dando lugar al LTB5. Nuestros resultados demuestran que la PG3 estimulaba la proliferación delos macrófagos con una potencia similar ala de la PGE2, mientras que el LTB5 tuvo menos efecto que el LTB4. Dado que la vía de la sLOXs no parecía implicada en el control de la proliferación de los fibroblastos 3T6, se centró el interés en estudiar la implicación de los metabolistos del AA producidos por los CYPs. Los CYPs pueden tener actividad */*-1 hidroxilasa y tipo-lipoxigenasa formando los HETEs, o epoxigenasa produciendo los EETs. Nuestros resultados demostraron que el suero induce la síntesis de 12(S)-HETE en los fibroblastos 3T6. Además, el uso de inhibidores de los CYPs como el sKF-525A, 17-ODYA, ABT o PPOH inhibieron la síntesis de 12(S)-HETE, el crecimiento celular y la síntesis de DNA. El SKF-525A produjo un retraso en el ciclo celular, que podría explicar el efecto inhibitorio de estos tratamientos sobre el crecimiento y la incorporación de timidina. Además, el 5-HETE, 12(S)-HETE, 15(S)-HETE y 20-HETE revertieron la inhibición del crecimiento celular inducida por el SKF-525A, mientras que el 11,12-EET no al cimiento, el 5-HETE, 12(S)-HETE y 15(S)-HETE inducen el crecimiento de los fibroblastos 3T6 y la síntesis de DNA, y 8 este efe 6aa cto fue a través de la activación de la vía Pl3K/Akt. Además, estos metabolitos aumentaron los niveles de P-Akt. Por otro lado la tesis muestra que la adición exógena de 5,6-EET, 8,9-EET, 11,12-EET, 14,15-EET, 5,6-DHETE o 11,12-DHETE inhibió la proliferación de los fibroblastos 3T6 y la incorporación de timidina inducida por PDGG. Además, se sugiere que estos metabolitos son pro-apoptóticos ya que aumentan la externalización de la fosfatidilserina, la actividad caspasa total y la fragmentación de la cromatina nuclear. El 11,12-EET y 14,15-EET aumentaron la actividad caspasa-3 en los fibroblastos 3T6, y este efecto fue consecuencia de una activación previa de la caspasa-12. Sin embargo, estos metabolitos no fueron capaces de inducir apreciablemente la actividad caspasa-9 ni caspasa-8 en las condiciones experimentales usadas. Por lo tanto, los resultados sugieren que la vía mediada por estrés en el retículo endoplasmático podría ser la implicada en la acción pro-apoptótica del 11,12-EET y 14,15-EET. En resumen, la proliferación de los fibroblastos 3T6 estaría regulada por los metabolitos del AA producidos por la vía de la COXs y por la vía de los CYPs. En este último caso, están implicados los HETEs con efecto proliferativo, y los EETs, con efectos anti-proliferativo y pro-apoptótico.