FARMACOPEAS

Autor: NÚÑEZ PENAS FRANCISCO JAVIER.
Año: 2005.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: Los fucanos son polisacáridos sulfatados presentes en la matriz intercelular de algas pardas (Phaeophyceae) y están formados por uniones de polímeros heterogéneos. El principal objetivo de este trabajo de investigación ha sido demostrar la capacidad de los fucanos, presentes en las algas Cystoseira tamariscifolia y Laminaria ochroleuca, para modificar positivamente los niveles sanguíneos de lípidos en diferentes modelos de experimentación y, en estudiar, su efecto sobre la lipoproteína lipasa, una de los enzimas claves en el metabolismo lipídico. Asimismo, para ampliar el estudio, se realizó un seguimiento de sus posibilidades terapéuticas potenciales sobre los procesos fisiológicos de la agregación plaquetaria y de la coagulación sanguínea. Mediante el método de Mian y Percival se aislaron los extractos brutos cálcico y clorhídrico de las dos algas y a continuación se llevó a cabo su franccionamiento por gradiente iónico mediante una cromatografía de intercambio, empleando una columna de DEAE-Sephacel. Tras este proceso se obtuvieron cuatro fracciones por cada uno de los extractos brutos, correspondientes a la elución con cloruro potásico de concentración creciente 0.15, 0.3 y 1 M. Posteriormente se realizó también una caracterización química de los fucanos extraídos de las algas, a fin de poder relacionar su estructura química con su actividad biológica. Este proceso incluyó la determinación del contenido en grupos sulfato, fucosa, ácidos urónicos y azúcares reductores, la determinación del peso molecular, y la realización delos correspondientes espectros de infrarrojos. En la caracterización química de las fracciones se observa una tendencia en éstas a enriquecerse en fucosa y empobrecerse en azúcares reductores a medida que aumenta el gradiente iónico de elución. Así como, en líneas generales, el grado de sulfatación de las fracciones aumenta en relación directa con el potencial iónico de elución. Los pesos moleculares determinados por cromatografía del gel filtración sobre Sephacryl S-400 HR mostraron que L.ochroleuca presenta mayor diversidad de fucanos que C.tamariscifolia y que los fucanos de las fracciones de C.tamariscifolia son, en líneas generales, más pequeños que los de L.ochroleuca. Seguidamente los fucanos se sometieron a un estudio farmacológico en el que se trató de determinar sus efectos sobre los niveles sanguíneos de lípidos en diferentes modelos de lipemia. En ratas normolipémicas, los extractos brutos aislados de las dos especies de algas presentan un potente efecto hipotriglíceridemiante dosis dependiente. El extracto clorhídrico de C.tamariscifolia es el más activo en este sentido y, además, también reduce de forma significativa y dosis dependiente los niveles de colesterol total y LDL-colesterol. En ratas con hiperlipemia inducida por Tiloxapol, y tras la realización del ensayo preliminar, así como los ensayos de fase inicial y de segunda fase, se deduce que los diferentes extractos brutos y las fracciones de las dos algas tienen un importante efecto hiptriliceridemiante. Los mejores resultados los ofrecen las fracciones clorhídricas de C.tamariscifolia que son capaces de transformar fueron altamente opalescentes (TG 600 mg/dl) en sueros con triglicéridos próximos a la normalidad (TG 100 mg/dl). De los diferentes ensayos en ratas con hiperlipemia inducida por Tiloxapol también se concluye que los fucanos analizados presentan un moderado efecto hipocolesterolemiante, principalmente las fracciones clorhídricas de C.tamariscifolia que manifiestan este efecto por estimulación de los proceso de eliminación. La actividad hipolipemiante de las diferentes fracciones de un extracto de una misma alga se relaciona directamente con el contenido en grupos sulfato e inversamente con el contenido en azúcares reductores. Del análisis comparativo de fracciones entre extractos brutos de las dos algas se concluye que la actividad hipolipermiante se ve afectada además por el peso molecular, ya que un menor tamaño implica una mayor actividad. En los ensayos sobre la actividad lipasa, y a las dosis ensayadas, todos los extractos brutos y todas las fracciones mostraron un potente efecto estimulante dosis dependiente sobre la actividad de la lipoproteína lipasa. Los resultados obtenidos con las fracc 8 iones de 99a C.tamariscifolia mantuvieron concordancia con los datos de disminución de triglicéridos plasmáticos en los ensayos de lípidos. De modo, que la actividad lipasa aumenta al incrementares el grado de sulfatación, y disminuye al aumentar el peso molecular. Para comprobar si entre los fucanos administrados por vía intraperitoneal se producían diferencias de absorción se realizó el ensayo de concentraciones plasmáticas-tiempo que mostró que las diferencias de actividad biológica entre los fucanos no se deben a diferencias de biodisponibilidad. La cromatografía de afinidad sobre Heparin-Sepharosa demostró la existencia de una interacción iónica entre los diferentes fucanos estudiados y la enzima lipoproteína lipasa, observándose una relación directamente proporcional entre el contenido en grupos sulfato de los polisacáridos y su afinidad por la lipoproteína lipasa de la columna. Asimismo, cuando el grado de sulfatación es similar, los fucanos de menor peso molecular son los que desplazan más activamente a la enzima de su unión a la heparina. Los ensayos de agregación plaquetaria con el alga C.tamariscifolia mostraron que las fracciones 0.5 y 1 M de ambos extractos brutos y la fracción 0.15 M clorhídrica presentan acción antiagregante que se relaciona directamente con el contenido en grupos sulfato e inversamente con el peso molecular. Los diferentes ensayos de coagulación (TT, TP y TTPA) han puesto de manifiesto el esperado efecto anticoagulante de los fucanos de estas algas pardas, relacionándose la actividad directamente con el contenido en grupos sulfato pero no se ha encontrado relación actividad-peso molecular. Como conclusión final hemos de resaltar que los fucanos de las fracciones 0.5 y 1M clorhídricas de Cystoseira tarmariscifolia presentan potentísima actividad hipotrigliceridemiante, notable actividad hipocolesterolemiante, moderada activada antiagregante plaquetaria y muy ligera actividad anticoagulante que los convierte en moléculas con elevado potencial de uso en la prevención de la enfermedad isquémica arterial.