FARMACOS NATURALES

Autor: YÁÑEZ JATO MATILDE.
Año: 2004.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FARMACIA.

Resumen: El ajo (Allium sativum L.) es una de las plantas medicinales más conocidas y estudiadas. Su efecto sobre el sistema cardiovascular es, quizás, uno de los más extensamente documentados en la bibliografía científica. Aunque su poder terapéutico parece evidente, su mecanismo de acción no se conoce con exactitud y son numerosos los estudios que aparecen continuamente tratando de clarificarlo. Los resultados de los estudios son poco homogéneos y a veces contradictorios debido a las distintas metodologías empleadas y a la variabilidad en las condiciones experimentales. Gran parte de las diferencias observadas se deben también a la gran diversidad de preparados de ajo utilizados, en los que varía significativamente la concentración de los compuestos activos. Por ello, en este trabajo se evalúan de forma independiente los efectos y los mecanismos de acción sobre las plaquetas sanguíneas y las células musculares lisas vasculares de cuatro compuestos característicos de esta planta que, aunque no están presentes en la forma natural, se forman rápidamente tras su trituración: alicina, ajoene, disulfuro de díalilo y disulfuro de dipropilo. La alicina y el ajoene, en un rango de concentraciones 1-25 UM,Y el disulfuro de dialilo y el disulfuro de dipropilo en un rango 50-500 1UMbloquean por completo la acción agregante del colágeno, mientras que muestran un efecto inhibidor dependiente de la concentración frente a trombina o ionomicina. Cuando se utiliza una concentración 500 UMde disulfuro de dialilo se produce un aumento importante de la concentración citosólica de calcio, que provoca la formación de microvesículas plaquetarias. Con una concentración 100 UMde disulfuro de dipropilo se provoca una activación de la fosfolipasa C, que conduce a una activación de las plaquetas con resultado de agregación. Al evaluar el efecto de la alicina y el ajoene sobre los distintos puntos del proceso de activación plaquetaria y sobre procesos bioquímicos asociados se comprobó lo siguiente: - Las concentraciones de alicina y ajoene que inhiben la agregación plaquetaria modifican en distintos grados tanto la adhesión espontánea de las plaquetas, como la inducida por distintos agonistas (principalmente trombina y colágeno). - La alicina y el ajoene, a las concentraciones estudiadas, no afectan al cambio de forma plaquetario. - Ambos compuestos, alicina y ajoene, inhiben la secreción inducida por trombina 0,25 U/mi, resultando más eficaz el ajoene, con una CI50 próxima a 5 UM.Este efecto se relaciona con la actividad antiagregante mostrada por dichas sustancias. - La alicina y el ajoene inhiben, de manera dependiente de la concentración utilizada, el incremento en el nivel de calcio citosólico causado por la estimulación de las plaquetas con trombina. El incremento inducido por la ionomicina no se ve afectado por la alicina mientras que el ajoene provoca una ligera potenciación del mismo. - El ajoene incrementa casi un 25% los niveles de AMPc basales plaquetarios y potencia un 50% los niveles de este nucleótido en plaquetas en las que se estimula la adenilatociclasa. A las concentraciones estudiadas, la alicina no altera significativamente las concentraciones plaquetarias de AMPc. - Los niveles de GMPc basales no se modifican por efecto de la alicina ni del ajoene. Sin embargo, la incubación del ajoene con plaquetas cuya guanilatociclasa se encuentra estimulada, potencia el incremento del nucleótido un 30%. - La alicina y el ajoene producen un aumento en el nivel de fosforilación en tirosina de diversas proteínas plaquetarias. La fosforilación es de tipo irreversible, permaneciendo su efecto tras la eliminación de los compuestos del medio de resuspensión plaquetario. - El efecto antiagregante mostrado por la alicina y el ajoene no parece relacionado con el incremento en la fosforilación en tirosina causado por estos compuestos, sino más bien una consecuencia del efecto combinado de diferentes procesos (inhibición del incremento de calcio citosólico, inhi 8 bición d 76e e la secreción, incremento del nivel de AMPc plaquetario). - El aumento en el grado de fosforilación de las proteínas plaquetarias es más una consecuencia de la estimulación de las tirosina quinasas plaquetarias, que de la inhibición causada sobre las tirosina fosfatasas. - La capacidad de la alicina y del ajoene para incrementar la fosforilación en tirosina de algunas proteínas plaquetarias desaparece en suspensiones plaquetarias incubadas con b-mercaptoetanol, debido al efecto potenciador de este compuesto sobre las tirosina fosfatasas plaquetarias. También se estudió la posible repercusión de estos derivados sobre las células musculares lisas que forman el tejido arterial, observándose una inhibición en la proliferación dependiente del tiempo de incubación y de la concentración de compuesto utilizada. Esta inhibición podría estar mediada por una acción sobre la homeostasis del calcio citosólico y por la inhibición de la fosforilación en residuos de tirosina de la p38 MAPK. El efecto no parece ser específico ya que los compuestos son, asimismo, capaces de inhibir la proliferación de las células tumorales HeLa, donde también se produce una disminución en el grado de fosforilación en tirosina de ciertas proteínas.

Autor: GONZÁLEZ SANTIAGO MARIA PILAR.
Año: 2004.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: Las enfermedades cardiovasculares constituyen la primera causa de mortalidad en el mundo. La oxidación de las lipoproteínas LDL parece estar implicada en los procesos de iniciación y progresión de la aterosclerosis. El hidroxitirosol es un compuesto fenólico presente en el aceite de oliva con una potente actividad antioxidante e importantes propiedades biológicas que hacen pensar que puede ejercer un efecto protector sobre la enfermedad cardiovascular. Los objetivos de esta tesis fueron profundizar sobre los efectos cardiovasculares producidos por el hidroxitirosol en un modelo de aterosclerosis experimental inducida por una dieta rica en grasa saturada y colesterol en conejos, estudiar su absorción cuando es ingerido por vía oral tanto en animales como en humanos e investigar sobre los posibles mecanismos de acción implicados mediante el estudio de su asociación a las lipoproteínas plasmáticas humanas y su efecto sobre la expresión génica en hígado de ratón mediante el uso de tecnología microarray. La administración diaria de 4 mg/kg de hidroxitirosol puro a los conejos ateroscleróticos produjo una reducción significativa del 42% y del 48% en las concentraciones plasmáticas de colesterol total y triglicéridos, respectivamente, duplico la concentración de colesterol-HDL en plasma, redujo al peroxidación lipídica medida como malondialdehido y aumento la capacidad antioxidante del plasma. Así mismo produjo un menor avance de la lesión aterosclerótica, medida como área de la capa íntima en el cayado aórtico, que se vio reducida de forma significativa en los grupos experimentales que recibieron hidroxitirosol. Cuando el hidroxitirosol purificado fue administrado disuelto en agua y en ayunas, presentó un máximo de concentración plasmática a los 10 minutos en ratas y a los 13 minutos en humanos y a continuación su concentración descendió rápidamente. Los metabolitos procedentes del hidroxitirosol encontrados fueron el alcohol homovanílico, el ácido homovanílico y el ácido dihidroxifenilacético, todos ellos con actividad antioxidante, que en humanos fueron excretados por orina en forma libre o conjugados con glucurónido y sulfato. El hidroxitirosol mostró en el plasma humano una afinidad específica por las lipoproteínas LDL. Esta unión fue hábil y transitoria y no se encontró para el resto de los metabolitos procedentes del hidroxitirosol. La administración de 0.05 y 0.5 g/kg de hidroxitirosol durante 15 días a ratones sanos produjo efectos débiles sobre la expresión de genes implicados en la síntesis de colesterol, el metabolismo lipídico y glucídico, la inflamación, la coagulación sanguínea, la angiogénesis y la contracción del músculo liso en hígado de ratón.

Autor: OLMOS FONT ANA.
Año: 2005.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: En el presente trabajo se aborda el estudio del efecto que, sobre la nitración de tirosina, producen una hidroquinona y dos derivados cafeicos aislados de Phagnalon rupestre (Asteraceae). Se han realizado análisis en tirosina libre y albúmina bovina. En ambos ensayos se obtiene una actividad destacada para los compuestos en estudio. Cuando la nitración se lleva a cabo por peroxinitrito, el efecto de los compuestos es afectado por la presencia de bicarbonato, a diferencia de los resultados obtenidos cuando la nitración se realiza con nitrito, mediante el sistema catalizado por hemoproteínas. A partir de datos espectroscópicos se deduce que la 1-glucosil-2-isoprenilhidroquinona inhibe la nitración de tirosina por peroxinitrito mediante la formación de un derivado 5-mononitrado; sin embargo, el éster metílico del ácido 3,5-dicafeilquínico es muy sensible a la oxidación y resistente a la nitración. En la determinación de nitración intracelular de fibroblastos, los compuestos deben estar presentes en el medio cuando se adiciona el peroxinitrito, para así bloquear la rápida progresión de sus efectos. Cuando se utilizan leucocitos polimorfonucleares humanos estimulados por acetato de miristoílforbol se obtienen también elevadas potencias para los tres principios, sobretodo para los derivados cafeicos. Finalmente se ha evaluado el efecto de los compuestos sobre modelos de hipersensibilidad por contacto inducida por oxazolona y dinitrofluorobenceno en ratón, incluyendo aquellos relativos a la génesis de NO y derivados nitrantes. Los ésteres cafeicos presentan, en general, un efecto antiinflamatorio superior al de la hidroquinona, tanto sobre el espesor auricular como sobre la liberación de citocinas.

Autor: ZENG YUEQIN.
Año: 2005.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: La presente Tesis Doctoral se ha centrado en el estudio de especies utilizadas en medicina tradicional china y otras especies utilizadas en medicina popular como antiinflamatorias, particularmente en procesos que afecten a la piel. Las especies objeto de estudio han sido Schinus molle, Lysimachia foenum-graecum, Lithospermum erythrorhizon, Forsythia suspensa e Isodon xerophilus. El desarrollo experimental ha consistido en la obtención previa del material vegetal mediante los medios adecuados en cada caso, extracción y fraccionamiento de los extractos. Estudio analítico y farmacológico de todos los extractos obtenidos y aislamiento e identificación de los principios mayoritarios de las fracciones activas. Como métodos experimentales in vivo se han desarrollado los protocolos de inflamación aguda y crónica en oreja de ratón inducida por el 13-acetato de 12-O-tetradecanoilforbol (TPA) y los modelos de edema agudo en pata de ratón inducido por carragenina y fosfolipasa A2 (PLA2). Entre las técnicas in vitro desarrolladas se incluyen la determinación de citotoxicidad, inhibición de la producción de nitritos, leucotrieno B4 y mediadores peptídicos en células aisladas, así como la actividad antioxidante. Entre los resultados más destacables se pueden citar: a) aislamiento de dos triterpenos y una biflavanona del extracto diclorometánico de Schinus molle y determinación de la actividad antiiflamatoria; b) aislamiento de cinco nuevos saponósidos de Lysimachia foenum-graecum y estudio de su citotoxicidad y capacidad de inhibición de la producción de leucotrieno B4; c) determinación de la actividad antioxidante de extractos de Lithospermum erythrorhizon y principios presentes en la misma; d) aislamiento de dos triterpenos del extracto antiinflamatorio de Forsythia suspensa y determinación de la actividad antioxidante de las fracciones obtenidas; e) y finalmente el aislamiento de 14 diterpenoides de Isodon xerophilus y determinación de la citotoxicidad, inhibición de la producción de óxido nítrico e inhibición de la producción de TNF- .

Autor: AMIGÓ AVELLÁN MARÍA.
Año: 2006.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: En el presente trabajo, se ha evaluado el efecto de una serie de derivados de avarol sobre diversos parámetros implicados en el desarrollo de la psoriasis, tanto a nivel de la proliferación celular y de la diferenciación de los queratinocitos, como a nivel del componente inflamatorio de dicha patología. En un screening preliminar, se ha estudiado la actividad antioxidante de los compuestos en neutrófilos humanos. En la línea celular de queratinocitos humanos HaCaT hemos determinado el efecto de los derivados sobre la generación de PGE2 y sobre la proliferación celular. En queratinocitos humanos se ha evaluado la capacidad de regular marcadores de diferenciación psoriásica (SAKLP/Elafín) y de diferenciación normal (citoqueratina 10), así como el efecto de los derivados sobre la proliferación. Tras realizar este screening preliminar se ha seleccionado el derivado tiosalicílico de avarol por su potente actividad antioxidante y por la inhibición de la generación de PGE2. Además, este compuesto inhibe la activación de NF-?B en queratinocitos HaCaT estimulados con TNF-a. En un estudio paralelo, se ha estudiado el efecto fotoprotector del derivado tiosalicílico de avarol y una serie de 13 nuevos derivados tioavarol frente a la irradiación UVB en queratinocitos HaCaT. Los resultados destacan de nuevo al derivado tiosalicílico de avarol por reducir los niveles de TNF-a y la activación de NF-?B tras irradiar con UVB. El derivado tiosalicílico reduce de manera concentración dependiente la producción de PGE2 y TNF-a en monocitos humanos estimulados, así como la generación de LTB4 en neutrófilos humanos. Este compuesto inhibe la actividad sPLA2 determinada en un sistema libre de células y en el sobrenadante de queratinocitos HaCaT. En el modelo de bolsa de aire en ratón inducida por zimosán, el derivado tiosalicílico produce una reducción dosis-dependiente de todos los parámetros determinados (PGE2, LTB4, TNFa) en los exudados tras 4 h de la inyección del zimosán. En el modelo de hiperplasia inducida por TPA en piel de ratón, la aplicación tópica del derivado de avarol reduce el edema, la actividad mieloperoxidasa y los niveles de eicosanoides. El estudio histoquímico muestra que disminuye la infiltración leucocitaria y la hiperplasia epidérmica, además de los niveles de TNF-a tal y como se ha observado en un análisis inmunohistoquímico. Este compuesto también inhibe la translocación nuclear de NF-?B in vivo determinado en piel de ratón.