HEMOPATOLOGIA

Autor: MUÑOZ MARÍN M. LUZ.
Año: 2004.
Universidad: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: HOSPITAL SANT PAU.
Centro de realización: ESCUELA DE POSTGRADO.

Resumen: La leucemia aguda es una alteración clonal de los progenitores hematopoyéticos, con una gran heterogenidad tanto desde el punto de vista clínica como biológico. Actualmente el tratamiento de los pacientes con leucemia aguda se estratifica en función de la clasificación y de la presencia de ciertos factores pronósticos. Disponemos de diversas técnicas útiles en el diagnóstico, clasificación y seguimiento de los enfermos con leucemia aguda como son la citología, la citogenética, la citometría de flujo y la biología molecular y es necesario integrar todas ellas para conseguir una correcta caracterización de leucemia aguda. De esta manera se definen entidades clínico-biológicas con determinado valor pronóstico y tributarias a un tratamiento más individualizado. En este sentido, el análisis inmunofenotípico en la leucemia aguda es imprescindible para una correcta clasificación, aporta información pronóstica y más recientemente se utiliza en el estudio de la enfermedad residual mínima en la remisión. El objetivo global de esta tesis es analizar el valor de la caracterización inmunofenotípica de las leucemias agudas, identificar nuevos marcadores y establecer asociaciones con parámetros clínicos y biológicos, entre estos últimos se hace especial hincapié en la correlación con subgrupos moleculares. Para ello se realizan un análisis de la expresión de los antígenos CD66 y CD123 y se estudian las características clínico-biológicas y el patrón fenotípico característico en las siguientes alteraciones genético-moleculares con valor pronóstico en la leucemia aguda: bcr/abl en la LLA-B; aml-1/eto, cbfb/myh-11, reordenamiento de MLL y duplicación de FLT3 en la LMA. El antígeno CD66 se expresó en el 67% en la LLA-B, mientras que el antígeno CD123 se expresó en todos los pacientes con LLA-B y en el 93% de la LMA. En cambio casi no se detectó reactividad de CD66 ni de CD123 en los precursores hematopoyéticos normales. Esto sugiere que estos marcadores son de utilidad en el estudio de la enfermedad residual mínima en los pacientes con leucemia aguda con una alta aplicabilidad. El estudio de la detección de ERM en los pacientes con LLA-Ph+ mediante citometría de flujo y RT-PCR demostró una buena correlación entre ambas técnicas. Sin embargo se detectaron varias muestras con resultados discordantes. La sensibilidad de la combinación de ambos métodos fue superior a cada una de las técnicas por separado por lo que consideramos que la combinación de citometría de flujo y RT-PCR es de elección en el estudio de la ERM en los pacientes con LLA-B Ph+. De la serie de pacientes con LMA, la frecuencia de aml-1/eto fue del 7%. Estos enfermos eran significativamente más jóvenes, tenían menor infiltración de blastos en médula ósea al diagnóstico presentaban mayor porcentaje de remisión completa con el tratamiento de inducción y mostraban una mayor supervivencia global que el resto de la serie. El patrón fenotípico más característico era la presencia de varias subpoblaciones mieloides inmaduras con expresión de antígeno monocíticos variable. La frecuencia de cbfb/myh-11 fue del 8%. No encontramos diferencias en cuanto a la edad, cifra de blastos ni respuesta al tratamiento de inducción. Los enfermos de este grupo mostraron mayor supervivencia global y menor probabilidad de recaída que el resto de la serie pero sin diferencias significativas. El patrón fenotípico más característico fue la presencia de varias subpoblaciones blásticas con fenotipo mielomonocítico con una elevada expresión de antígenos monocíticos. La frecuencia del reordenamiento del gen MLL fue del 12% y la duplicación parcial el tandem fue del 8%. Estos enfermos presentaban de manera significativa un mayor porcentaje de leucemias monocíticas, no existieron diferencias en cuanto a la respuesta al tratamiento de inducción, pero mostraron menor supervivencia global y mayor probabilidad de recaída. El patrón fenotípico característico de esta lesión mo 8 lecular 5df es la presencia de una única población blástica mielomonocítica madura, en todos los casos se detectó coexpresión de antígenos monocíticos. Finalmente el último grupo molecular analizado fue la duplicación del gen FLT3, que fue el más frecuente: 27%. Estos pacientes mostraron mayor leucocitosis al diagnóstico, mayor porcentaje de leucemias monocíticas y de cariotipos normales así como menor supervivencia global y mayor probabilidad de recaída que el resto de la serie. El patrón fenotípico más habitual fue la presencia de varias subpoblaciones blásticas mielomonotícias con elevada expresión de antígenos monocíticos y disminución de antígenos de inmadurez. Estos pacientes presentaban una alta inestabilidad genética con frecuentes cambios fenotípicos y genotípicos en la recaída.

Autor: MARCÉ TORRA SILVIA.
Año: 2005.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FACULTAT MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAT DE MEDICINA.

Resumen: El LCM es un síndrome linfoproliferativo agresivo y altamente resistente a las terapias actuales. Al estudiar el efecto citotóxico de la fludarabina, la mitoxantrona y la ciclofosfamida sobre células primarias de LCM y sobre células de líneas celulares probadoras de la t(11;14) (q13;q32) se demuestra que la mitoxantrona, un inhibidor de la topoisomerasa II, ejerce el mayor efecto citotóxico. Además, la variante blástica es más sensible a la mitoxantrona que la variante típica posiblemente debido a los elevados niveles de expresión de la topoisomerasa-II. En los casos blásticos. La citotoxicidad inducida por estos fármacos genotóxicos está mediada por la activación de la vía apotótica mitocondrial debido a un año en el DNA, por lo que es necesario que los sensores de daño a DNA, p53 y/o ATM, sean funcionales. El efecto dela fludarabina sobre células de LLc-B viene determinado, en primera instancia, por el transporte vía hENT2, atribuyéndole importancia, por primera vez, en el efecto terapéutico de un análogo de nucleósidos. La expresión de este transportador correlaciona significativamente con el efecto citotóxico inducido por la fludarabina en células de LLC-B. Sin embargo, las células de LCM, que no responden in vitro a la fludarabina, expresan niveles más altos de mRNA y de proteína de hENT1 que de hENT2. Esta expresión diferencial podrían explicar la diferente respuesta a la fludarabina entre células de LCM y LLC-B. La gemitabina, fármaco transportado mayoritariamente por hENT1, induce un efecto citotóxico sobre células de LCM a dosis inferiores a las necesarias de fludarabina para ejercer el mismo efecto, lo que nos sugiere que el análisis de la expresión de transportadores de nucleósidos en las células de LLC-B y LCM resulta útil para la elección del tratamiento a seguir y posiblemente para predecir la respuesta al tratamiento. Los casos de LCM que presentan deleción del gen MTAP y pérdida de expresión de la proteína se asocian a una mayor agresividad del a enfermedad y peor pronóstico. Este fenómeno se debe, muy probablemente, a la estrecha relación entre el gen MTAP y el locus INK4a-ARF en este tipo de tumores, lo que sugiere que la detección inmunohistoquímica de MTAP puede ser un buen marcador de la perdida de todo el locus. Además, el análisis de la expresión de MTAP puede ser una buena herramienta para identificar aquellos pacientes que podrían beneficiarse de una terapia dirigida mediante la inhibición de la vía de síntesis de novo de AMP. Nuestros resultados apoyan la idea del uso de la combinación de L-alanosina y EFA como tratamiento de esos casos con delección de MTAP.

Autor: CARVAJAL VERGARA XONIA.
Año: 2005.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: CENTRO DE INVESTIGACION DEL CANCER.
Centro de realización: CENTRO DE INVESTIGACION DEL CANCER.