ANTIMETABOLITOS

Autor: PEÑUELAS PRIETO SILVIA NURIA.
Año: 2004.
Universidad: BARCELONA [www.ub.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMÁCIA.

Autor: ZINE NADIA.
Año: 2004.
Universidad: AUTÓNOMA DE BARCELONA [www.uab.es].
Centro de lectura: CENTRO NACIONAL DE MICROELECTRÓNICA.
Centro de realización: ESCUELA DE POSTGRADO.

Resumen: El trabajo realizado para la tesis se han centrado en el desarrollo y el estudio de multi-sensores químicos basados en silicio para aplicaciones biomédicas. Dicho trabajo se divide en tres partes: En la primera parte se han fabricado sensores de silicio basados en transistores de efecto de campo sensibles a iones (ISFET). El dispositivo tiene forma de aguja e incluye dos sensores ISFETs, un pseudo-electrodo de referencia de platino y un sensor de temperatura basado en una resistencia de platino. Los ISFETs se han caracaterizado eléctricamente como transistores MOSFET y químicamente como sensores de pH, con resultados satisfactorios, lo que ha demostrado la viabilidad de las tecnologías de fabricación. Se han desarrollado MEMFETs selectivos al ión potasio depositando sobre el ISFET una membrana polimérica de PVC que contiene la valinomicina como ionóforo. Los sensores mostraron una respuesta de 50 mV/década aproximadamente, en un rango de actividad del ión K+ que va desde 10 -4M hasta 10 -1M. Debido a su gran volumen, el electrodo de referencia estándar no es práctico para trabajar con ISFETs. Por ello se ha estudiado la realización de medidas diferenciales utilizando además del MEMFET de potasio, un ISFET de referencia (REFET) y el pseudo electrodo de platino integrado en el dispositivo permitiendo así la substitución del electrodo de referencia. EL REFET se ha fabricado depositando una membrana polimérica de PVC inerte. Para mejorar la adherencia de la membrana a la superficie del REFET se ha realizado un proceso de silanización de la superficie, consistente en modificar químicamente la superficie del dieléctrico, de modo que se crean enlaces mediante los cuales la membrana queda bien adherida al dispositivo. Se ha caracterizado también el sensor de temperatura basado en una resistencia de platino integrado en la aguja. Los resultados obtenidos son muy lineales y repetitivos, con un valor del coeficiente de temperatura de la resistencia TRC de 3687+-3 ppm/C. En la segunda parte de la tesis, se han desarrollado microelectrodos de estado sólido sensibles al ión hidrógeno en forma de aguja de silicio, basado en membranas poliméricas, utilizando como ionóforos el Chromoionoforo I (ETH 5294) y el Tri-n-dodecilamino (TDDA). Se ha depositado sobre los microelectrodos de platino un nuevo material polimérico conductor; el polipirrol dopado con el anión cobaltabisdicarballuro [3,3' -Co(1,2-C2B9H11)2]- mediante la técnica de electropolimerización. Este polímero actúa como capa intermedia entre el platino y la membrana. El empleo de esta etapa intermedia aumenta considerablemente la adherencia de la membrana PVC sobre la superficie del transductor y por tanto el tiempo de vida. Las características de respuesta delos microelectrodos son muy satisfactorias. Los dispositivos presentan una sensibilidad nernstiana en un rango de respuesta amplio (pH 3.5-11.0). Los coeficientes de selectividad poenciometricos obtenidos ponen de manifiesto la buena selectividad de los microelectrodos alión hidrógeno en presencia de iones como potasio, sodio y litio. La última parte de este trabajo ha sido dirigida a la búsqueda de soluciones a dificultades que han sido encontradas en la utilización química de los MEMFETs sensibles al ión K+. En este sentido, se ha estudiado la modificación del óxido de silicio utilizado en la puerta del ISFET con el fin de variar su selectividad a iones específicos. Para ello se han fabricado estructuras capacitivas sensibles al ión potasio utilizando membranas inorgánicas basadas en la técnica de implantación iónica del ión aluminio y postasio en el oxido de silicio. Las estructuras han sido caracterizadas mediante la técnica capacidad-tensión (C-V) a alta frecuencia. Las características de respuesta obtenidas tanto e 8 n cuanto 339 a sensibilidad como a selectividad han sido aceptables y comparables con las halladas en la bibliografía.

Autor: HERNÁNDEZ DE ROJAS ALMA.
Año: 2004.
Universidad: OVIEDO [www.uniovi.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA UNIVERSIDAD DE VALLADOLID.

Resumen: Lactococina 972 es una bacteriocina producida por la cepa Lactococcus lactis subsp.lactis IPLA 972. Los determinantes genéticos necesarios para la producción de la bacteriocina y la inmunidad frente a la misma se sitúan en el plásmido pBL1 (10,9 Kb). En él se diferencian dos regiones flanqueadas por secuencias de inserción ISS1. Esto sugiere que el plásmido podría ser un mosaico generado a partir de la fusión de dos replicones diferentes. Una de las regiones alberga los genes de replicación, y la otra, los genes responsables de la biosíntesis/inmunidad. Estos últimos forman un único operán constituido por el gen de estructural lclA, cuyo producto es un polipéptido de 91 aminoácidos que incluye el péptido señal, y los genes lclB y lclC cuyos productos peptídicos poseen las características de un transportador ABC y están implicados en la inmunidad frente a la bacteriocina. Entre las bacteriocinas producidas por bacterias lácticas, la lactococina 972 posee un modo de acción único ya que inhibe la formación del septo de división, de forma similar al efecto ejercido por determinados antibióticos beta-lactámicos. La detección de las proteínas de unión a penicilina (PBPs) en Lactococcus lactis, especie sensible a la bacteriocina, permitió poner de manifiesto que el blanco al que se une la bacteriocina es PBP4, proteína de 55 kDa. Esta proteína es similar estructuralmente (funcionalmente ?¿) a PBP3 de E.coli, la cual es una transpèptidasa cuya inhibición impide la formación del septo, lo que se traduce en una filamentación de los cultivos. Asimismo, al igual que ciertos antibióticos beta-lactámicos que se unen exclusivamente a PBP3 de E.coli inducen la respuesta SOS, la lactococina 972 induce dicha respuesta en L.lactis. Como consecuencia de la misma, se produce la inducción e profago en la cepa lisogénica L.lactis MG1614, lo que constituye una nueva prueba de la acción de la bacteriocina sobre el homólogo funcional en L.lactis de PBP3. La síntesis de lactococina 972 muestra una cinética propia de un metabolismo asociado a crecimiento, evolucionando paralelamente a la biomasa durante la fase exponencial de crecimiento de la cepa productora. En cultivo en continuo (quimiostato), la síntesis del a bacteriocina se produce fundamentalmente en tasas de dilación próximas a la umax, lo que confirma su carácter de metabolito asociado a crecimiento.

Autor: DE LOS SANTOS APARICIO MARIO.
Año: 2004.
Universidad: ZARAGOZA [www.unizar.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS.
Centro de realización: CENTRO POLITECNICO SUPERIOR.

Resumen: LA TESIS DOCTORAL VERSA SOBRE EL DESARROLLO DE METODOLOGIA ANALITICA PARA LA DETERMINACION DE DIVERSOS ANALITOS EN PAPEL. ESTOS ANALITOS INCLUYEN LOS AGENTES BLANQUEANTES, LOS COLORANTES AZOICOS Y LAS AMINAS AROMATICAS. LOS METODOS DE ANALISIS SE DESARROLLAN MEDIANTE LA DETERMINACION POR CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTA RESOLUCION ACOPLADA A DIVERSAS TECNICAS DE DETECCION (ESPECTROMETRIA DE MASAS, FLUORESCENCIA O ABSORCION UTRAVIOLETA) POR OTRO LADO, SE HA OPTIMIZADO UN METODO DE EXTRACCION DE LOS ANALITOS ANTERIORES DE LA MATRIZ CELULOSICA MEDIANTE EL USO DE ULTRASONIDOS Y EMPLEO DE AGUA PRESURIZADA A ALTA TEMPERATURA. LOS METODOS GENERALES DE HA COMPARADO CON DIVERSOS METODOS OFICIALES Y VALIDADO PARCIALMENTE.