kriptia.com
Búsqueda personalizada




Inicio > QUIMICA > BIOQUIMICA >

BIOQUIMICA MOLECULAR (4)

English | Français | Deutsche
111 tesis en 6 páginas: 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6
  • REGULACIÓN DE LA MIGRACIÓN ENDOTELIAL POR ÓXIDO NÍTRICO: ACCIÓN SOBRE MMP-13 Y CAVEOLINA-1

    Autor: LÓPEZ RIVERA ESTHER.
    Año: 2005.
    Universidad: AUTÓNOMA DE MADRID [Más tesis de esta universidad] [www.uam.es].
    Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS.
    Centro de realización: FACULATAD DE CIENCIAS Y BIOLOGÍA.
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#114268
    Resumen: ENTRE LA MULTITUD DE FUNCIONES BIOLÓGICAS EJERCIDAS POR LA MOLÉCULA ÓXIDO NÍTRICO (NO) SE HA DESCRITO SU PAPEL COMO ESTIMULADOR DE LA MIGRACIÓN ENDOTELIAL. ESTA MIGRACIÓN INTERVIENE TANTO EN LA RESPUESTA ANGIOGÉNICA, COMO EN EL REMODELADO Y REPARACIÓN DE LOS VASOS. SIN EMBARGO, EL MECANISMO A TRAVÉS DEL CUAL EL NO LLEVA A CABO ESTE PROCESO NO ESTÁ CLARAMENTE DEFINIDO. HEMOS ESTUDADO EL EFECTO DEL NO SOBRE EL MOVIMIENTO DE LAS CÉLULAS ENDOTELIALES AÓRTICAS DE PROCEDENCIA BOVINA Y MURINA, MEDIANTE EL MODELO IN VITRO DE RE-ENDOTELIZACIÓN EN MONOCAPA, EMPLEANDO EL DONADOR DE NO, DEA-NO, ASÍ COMO EL ESTIMULADOR DE LA ENZIMA OXIDO NITRICO SINTASA ENDOTELIAL (eNOS o NOS3) BRADIQUININA. OBSERVAMOS QUE EL NO INCREMENTA LA MIGRACIÓN ENDOTELIAL AÓRTICA EN ESTADIOS TEMPRANOS DEL MISMO (2, 4, Y 6 HORAS). TAMBIÉN QUISIMOS ESTUDIAR CUAL ERA LA IMPLICACIÓN DEL NO ENDÓGENO DURANTE LA MIGRACIÓN ENDOTELIAL Y PUDIMOS OBSERVAR UN INCREMENTO TRAS EL TRATAMIENTO CON EL DONADOR DE NO A LAS 2 HORAS QUE DESCENDIÓ DRÁSTICAMENTE EN PERIODOS POSTERIORES DE TIEMPO (4 Y 6 HORAS) ASÍ CARACTERIZAMOS COMO ESTE EFECTO LO LLEVABA A CABO A TRAVÉS DE UNA METALOPROTEASA DE MATRIZ EXTRACELULR LLAMADA COLAGENA-3 O MMP-13 LA CUAL NO SOLO TIENE LA CAPACIDAD DE DEGRADAR COLÁGENOS FIBRILARES TIPO I, II, II Y TENER UNA ELEVADA CPACIDA PROTEOLÍTICA SINO QUE ADEMÁS SE HABÍA DETECTADO SU PRESENCIA EN TEJIDO AÓRTICO, Y CUYA REGULACIÓN TRANSCRIPCIONAL POR NO EN ESTE TIPO CELULAR, FUE PREVIAMENTE DESCRITA POR NOSOTROS EN LA CUAL LA CASCADA DE SEÑALIZACIÓN INVOLUCRADA EN MODULAR LA REGULACIÓN ES A TRAVÉS DE LA VÍA NO-GMPc-PKG-MAPK. ADEMÁS DETECTAMOS UNA LOCALIZACIÓN DE MMP-13 EN MICRODOMINIOS DE MEMBRANA CAVEOLARES, ASOCIADA DIRECTAMENTE A UNA PRTOTEÍNA ABUNDANTE Y FUNDAMENTAL EN LA ESTRUCTURURA DE LAS CAVEOLAS, DENOMINADA CAVEOLINA-1. EN ESTE CONTEXTO, OBSERVAMOS LA ACCIÓN DIRECTA EJERCIDA POR NO SOBRE LA INTERACCIÓN ENTRE MMP-13 Y CAVEOLINA-1, CAUSANDO UN INCREMENTO EN EL EXTERIOR CELULAR, FUNDAMENTAL MENTE DE SU FORMA ACTIVA DURANTE BREVES PERÍODOS DE TIEMPO. POR TODO ELLO, PROPONEMOS QUE EL NO PUEDE MODULAR LA MIGRACIÓN ENDOTELIAL POR MEDIO DE MMP-13 EN MICRODOMINIOS DE MEMBRANA CAVEOLARES, FAVORECIENDO LA DISOCIACIÓN DE MMP-13 Y CAVEOLINA-1 DURANTE LA FASE TEMPRANA DEL PROCESO MIGRATORIO.
  • ENSAMBLAJE DE LA CÁPSIDA DEL PARVOVIRUS MVM: TRANSPORTE NUCLEAR DE INTERMEDIOS TRIMÉRICOS Y SU REGULACIÓN POR FOSFORILACIÓN

    Autor: RIOLOBOS SANTAMARÍA LAURA.
    Año: 2005.
    Universidad: AUTÓNOMA DE MADRID [Más tesis de esta universidad] [www.uam.es].
    Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS.
    Centro de realización: CENTRO DE BIOLOGÍA MOLECULAR SEVERO OCHOA (UAM-CSIC).
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#114288
    Resumen: Se ha investigado la regulación del transporte nuclear de las proteínas estructurales de la cápsida durante el ensamblaje del parvovirus diminuto del ratón (MVM). Las proteinas que forman la cápsida icosaédrica (T=1) del virus MVM, VP1 y VP2, pueden ser entrecruzadas con el agente químico dimetil-suberimidato en dos oligómeros equimoleculares. La especie de mayor tamaño presenta VP1 y corresponde en tamaño (200kDa) a un heterotrímero formado por una subunidad de VP1 y dos de VP2. El oligómero de menor tamaño contiene sólo VP2 y corresponde en tamaño (180 kDa) a un homotrímero de esta proteína. La introducción de mutaciones en residuos involucrados en múltiples interacciones en las interfases entre trímeros de VPs en la cápsida de MVM produce la acumulación de intermedios triméricos competentes para el transporte al núcleo pero no para ensamblar en cápsidas. Por otro lado, mutaciones en los residuos básicos en la señal de localización nuclear de estas proteínas (Motivo de Localización Nuclear, NLM) , inactivan su función y producen la acumulación citoplasmática de las proteínas. La mutación de la señal NLM producía la acumulación de los trimeros de VP2 en el citoplasma, mientras que los heterotrímeros que contienen VP1 se localizan fundamentalmente en el núcleo. Estos resultados indican que el ensamblaje de la cápsida del virus MVM ocurre a través de intermedios triméricos en el citoplasma y que son competentes para translocarse a través de la membrana nuclear. Además, cuando los trimeros que contienen VP1 son los únicos que se transportan al núcleo, como ocurre en el mutante en el motivo NLM, su ensamblaje produce la formación de grandes agregados no regulares, lo que sugiere que la estequiometría del transporte al núcleo de ambos tipos de trímeros actúa como control de calidad durante la morfogénesis viral. Además, se analizó el transporte al núcleo de trímeros de proteína VP en células permeabilizadas con digitonina. Los trímeros de VPs purificados a partir de gradientes de sacarosa, pero no las cápsidas, fueron competentes para atravesar la membrana nuclear de las células permeabilizadas. El transporte de los trímeros no podía competirse con péptidos que contienen dos tipos de señales convencionales (M9 y NLS), incluso a dosis en las que éstos inhibian completamente el transporte de una proteína que emplea dichas rutas. De acuerdo con estos datos, los trímeros de VPs no pudieron transportarse al núcleo en un ensayo en presencia de Ran-GTP y las importinas purificadas alpha 2 y beta 1. Además, trímeros de VPs expresados en células de insecto con un baculovirus recombinante no están fosforilados ni son competentes para el transporte en células humanas permeabilizadas. Sin embargo, tras su fosforilación mediante la coinfección con un baculovirus que expresa Raf-1, los trímeros de VPs expresados en este sistema y purificados se transportaron eficazmente al núcleo de la células permeabilizadas. Así, los intermedios triméricos de la cápsida del virus MVM se transportan al núcleo a través del poro nuclear empleando por un mecanismo dependiente de fosforilación y por una ruta no convencional y no conservada en células de insecto.
  • FUNCION DE LA SUBUNIDAD REGULADORA DE PI3K, P85 ALFA, EN CITOQUINESIS EN MAMIFEROS

    Autor: Garcia Fernandez Zaira.
    Año: 2005.
    Universidad: AUTÓNOMA DE MADRID [Más tesis de esta universidad] [www.uam.es].
    Centro de lectura: Dep. de Biol. Mol. Fac. de Cien..
    Centro de realización: Centro Nacional de Biotecnologia.
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#114290
  • CARACTERIZACIÓN BIOQUÍMICA DE LA ADN POLIMERASA MU HUMANA Y SU IMPLICACIÓN EN NHEJ

    Autor: JUAREZ SANTOS RAQUEL.
    Año: 2005.
    Universidad: AUTÓNOMA DE MADRID [Más tesis de esta universidad] [www.uam.es].
    Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS.
    Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS (CBMSO-CSIC).
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#114311
    Resumen: SE HA REALIZADO UNA CARACTERIZACION BIOQUIMICA DETALLADA DE LA ADN POLIMERASA MU HUMANA, INCLUYENDO EL ESTUDIO DE SU ACTIVIDAD TRANSFERASA TERMINAL ASI COMO DE LAS REACCIONES DEPENDIENTES DE MOLDE QUE ES CAPAZ DE LLEVAR A CABO (EN CONCRETO EL MECANISMO DE DISLOCACION) Y SE HA DETERMINADO SU ELEVADA VERSATILIDAD A LA HORA DE UTILIZAR DISTINTO TIPO DE SUTRATOS DE ADN Y DE OFRECER DIFERENTES SOLUCIONES DE POLIMERIZACION, LO CUAL SE TRADUCE EN UNA ALTA CAPACIDAD MUTADORA. ASIMISMO SE HA LLEGADO A DEMOSTRAR LA IMPLICACION DE ESTA POLIMERASA EN EL MECANISMO DE REUNION DE EXTREMOS NO HOMOLOGOS (NHEJ), MEDIANTE EVIDENCIA DE SUS INTERACCIONES CON LOS FACTORES DE NHEJ, ASI COMO SU CAPACIDAD DE LLEVAR A CABO ESTE TIPO DE REACCIONES IN VITRO (AVALADO TODO ELLO CON DATOS IN VIVO). ADEMAS SE HA IDENTIFICADO UN ELEMENTO ESTRUCTURAL IMPORTANTE (EL LOOP1) QUE ES CLAVE PARA LA ACTIVIDAD TRANSFERASA TERMINAL DE ESTA POLIMERASA, SIENDO IMPORTANTE ESTA ACTIVIDAD PARA CIERTO TIPO DE REACCIONES DE NHEJ, EN CONCRETO AQUELLAS QUE CONECTAN EXTREMOS CON MINIMA O NULA MICROHOMOLOGIA, QUE SON LAS REACCIONES EN QUE ESTA POLIMERASA ESTARIA FUNDAMENTALMENTE IMPLICADA A NIVEL CELULAR
  • CARACTERIZACIÓN FUNCIONAL DEL GEN VESTIGIAL DE DROSOPHILA MELANOGASTER

    Autor: Baena López Luis Alberto.
    Año: 2005.
    Universidad: AUTÓNOMA DE MADRID [Más tesis de esta universidad] [www.uam.es].
    Centro de lectura: Fac.de Ciencias. Centro Severo Ochoa.
    Centro de realización: Centro de Biología Molecular Seveo Ochoa.
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#114361
    Resumen: El desarrollo de los discos imaginales de Drosophila es un modelo clásico para estudiar el crecimiento y la especificación genética de un órgano. El crecimiento, el tamaño y la forma de un órgano es el resultado de la coordinación en patrones específicos de diferentes procesos celulares (proliferación celular, muerte celular y distribución espacial de las células) durante el desarrollo. A su vez, estos procesos celulares están íntimamente relacionados con los mecanismos que definen la especificación posicional. Sin embargo, la relación entre los mecanismos de asiganción posicional y la expresión restringida de factores genéticos es poco conocida todavía. vestigial (vg) es un gen esencial para el desarrollo del ala de Drosophila. Su función se ha observado que es imprescindible para asignar la identidad diferencial a las células del ala y también es requerida para la supervivencia y proliferación celular. Considerando estos precedentes se ha sugerido que su función es suficiente para controlar el programa completo de desarrollo del ala en incluyéndose dentro de la categoría de genes maestros. Sin embargo, en la tesis se muestra que la expresión ectópica de vg sólo es capaz de controlar ciertos aspectos de la diferenciación del ala y tiene una fuerte dependencia del gen wingless para iniciar el programa de desarrollo correspondiente a las partes distales del ala. Estos resultados ponen en duda la existencia de genes capaces de iniciar y controlar el desarrollo completo de un órgano, sugiriendo alternativamente que éste depende de la acción combinada de múltiples genes. En este trabajo también se muestra que la expresión de vg es heterogénea a lo largo de los ejes de crecimiento (anterior-posterior y próximo-distal) en las partes distales del ala. A su vez, la expresión heterogénea de vg parece estar relacionada con el control autónomo y no autónomo de la proliferación celular en las partes distales del ala, modulando la longitud total del ciclo celular. En este contexto, la expresión de vg podría estar definiendo la información posicional de las células en las partes distales del ala a lo largo de los ejes de crecimiento. También observamos que la forma del ala depende fuertemente de las heterogeneidades de vg.
  • DESARROLLO DE UN MODELO DE ADHESIÓN CELULAR "IN VITRO" PARA EL ESTUDIO DE LA ADHESIÓN TROFOBLÁSTICA AL ENDOMETRIO HUMANO: ANÁLISIS DE LA EXPRESIÓN GÉNICA DURANTE LA FASE INICIAL DE LA IMPLANTACIÓN EMBRIONARIA.

    Autor: Imbaud Martínez Juan Ignacio.
    Año: 2005.
    Universidad: AUTÓNOMA DE MADRID [Más tesis de esta universidad] [www.uam.es].
    Centro de lectura: Fac. de Ciencias - Dep. Biol.Mol..
    Centro de realización: Centro de Biología Molecular Severo Ochoa.
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#114370
    Resumen: En la reproducción humana, la baja eficiencia de la implantación embrionaria es uno de los mayores factores limitantes. Uno de los eventos iniciales de este proceso consiste en la adhesión de las células trofoblásticas, que conforman la capa externa del embrión, al epitelio uterino. En los últimos años, los investigadores han realizado numerosos intentos con el fin de descifrar los mecanismos moleculares que tiene lugar en esta etapa. En este sentido, se han identificado numerosos factores como marcadores potenciales de receptividad endometrial. No obstante, los mecanismos moleculares implicados en la implantación embrionaria son aún ampliamente desconocidos. Recientemente se han descrito en la literatura diversos sistemas o modelos experimentales destinados a la medición de la adhesión embrionaria y al estudio del rol de potenciales factores, escenciales para la implantación. Sin embargo, la mayoría no pueden ser reproducidos en numerosos laboratorios, son dificultosos para principiantes o bien requieren equipamientos costosos y sofisticados. En este trabajo, hemos desarrollado un nuevo método para el estudio de las fuerzas de adhesión de trofoblastos a células epiteliales endometriales humanas y, además, para el análisis de factores moleculares y medioambientales que rodean esta etapa inicial de la implantación embrionaria. Lo novedoso de nuestro modelo de adhesión trofoblasto-endometrio fué la introducción del gen EGFP en células de tipo trofoblástico (JAR y JEG-3) por transferencia génica retroviral, para generar poblaciones de células que expresan establemente la proteína verde fluorescente (JAR/G y JEG-3/G). Su expresión estable permitió una rápida detección, análisis y separación por citometría de flujo luego de su co-cultivo sobre monocapas confluentes de células epiteliales endometriales (RL95-2 y HEC-1A). Así, se cuantificó la adhesión de los trofoblastos a tiempos de co-cultivo variables. Por otra parte, el modelo permitió realizar estudios en tiempo y espacio de diferentes factores involucrados durante la implantación embrionaria. También permitió estudiar la expresión de genes y realizar seguimientos de sus respectivos niveles de proteína a tiempos variables de interacción célula trofoblástica-célula endometrial. Empleando este simple y novedoso modelo, hemos analizado la expresión génica de un grupo reducido de genes que previamente hemos seleccionado por su potencial implicación en el proceso de implantación embrionaria, los cuales no habían sido estudiados previamente en este sistema. Como consecuencia de la adhesión celular (co-cultivos de 16 y 42 horas), se han identificado patrones de expresión diferencial de los genes: PLA-1 (sobreexpresión) y TEF-5 (represión leve) en la línea celular trofoblástica JAR/G; y de los genes MUC-1 (sobreexpresión), IGFBP7/MAC-25 (represión) y UBA-2 (sobreexpresión) en células endometriales RL95-2. Las variaciones observadas a nivel de los RNAs mensajeros, por RT-PCR cuantitativa, fueron luego correlacionadas con los respectivos niveles de proteínas, analizados por inmunofluorescencia y por Western Blot, verificándose una estrecha correlación entre ambos. Asimismo, empleando la tecnología de Microarrays de Affymetrix, hemos realizado estudios globales del transcriptoma humano en células trofoblásticas JAR/G y células endometriales RL95-2, luego de su co-cultivo durante 42 horas. Se han identificado numerosos genes candidato, posiblemente implicados en las etapas iniciales de la implantación embrionaria, la placentación y el mantenimiento temprano del embarazo. Dado que una normal implantación y placentación son críticas para el éxito del embarazo, un mejor entendimiento de los mecanismos moleculares responsables de estos procesos mejoraría, sin duda alguna, la capacidad de los clínicos para tratar desórdenes tales como la infertilidad, la pérdida temprana del embarazo o la pre-eclampsia. Asimismo, permitirá incrementar las bajas tasas de implantación embrionaria obtenidas actualmente e 8 n técnic 2b1 as de reproducción asistida tales como la fertilización "in vitro".
  • REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN DEL RECEPTOR DE INSULINA Y SUS SUSTRATOS. EFECTO DEL TRATAMIENTO IN VIVO CON INSULINA SOBRE LA SEÑALIZACIÓN DE LA HORMONA EN HIGADO Y MUSCULO ESQUELETICO DE RATA CON EL ENVEJECIMIENTO

    Autor: SERRANO VARGAS ROSARIO.
    Año: 2005.
    Universidad: CASTILLA-LA MANCHA [Más tesis de esta universidad] [www.uclm.es].
    Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS.
    Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS CIUDAD REAL.
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#114466
    Resumen: El presente trabajo consistió en el estudio de la vía de señalización de la insulina en el hígado y el músculo esquelético durante el envejecimiento con el fin de dar un paso más en el esclarecimiento de la secuencia de acontecimientos que culminan con el desarrollo de resistencia a insulina a edades avanzadas y la aparición de intolerancia a glucosa. Para ello, se realizó un tratamiento in vivo con insulina a ratas de 3 y 24 meses de edad, lo que nos permitía analizar la capacidad de respuesta de estos tejidos a la hormona durante el envejecimiento. Después de dicho tratamiento, se obtuvieron muestras de hígado y de músculo esquelético para llevar a cabo un fraccionamiento subcelular de cada tejido que nos permitió inmunodetectar las principales proteínas de la vía de señalización de insulina en las diferentes fracciones subcelulares obtenidas. Del mismo modo, se aisló el RNA total de muestras procedentes de ambos tejidos para examinar por RT-PCR la expresión de los genes correspondientes al receptor de insulina y a sus principales sustratos.
  • CARACTERIZACIÓN ESTRUCTURAL Y MOLECULAR DE FRUTOS DE FRAGARIA VESCA QUE SOBREEXPRESAN FAPE1, UNA ISOENZIMA PECTÍN METIL ESTERASA DE FRESA

    Autor: OSORIO ALGAR SONIA.
    Año: 2005.
    Universidad: MÁLAGA [Más tesis de esta universidad] [www.uma.es].
    Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS.
    Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#114605
    Resumen: El enzima pectín metil esterasa (PE, EC, 3.1.1.11) cataliza la desmetilación de la pectina, y como consecuencia, se producen cambios en la interacción de los componentes de la pared celular durante su síntesis y degradación. En plantas, las proteínas pectín metil esterasa son codificadas por una familia génica. Con el objetivo de conocer el papel de la enzima pectín metil esterasa durante la maduración del fruto de fresa, se ha estudiado diferentes líneas transgénicas de Fragaria vesca que sobreexpresan FaPE1, una isoenzima pectín metil esterasa de Fragaria x ananassa asociada a maduración. La sobreexpresión de FaPE1 altera la composición de la pared celular, presentando dicha pared un menor grado de esterificación, así como una distribución más en bloque de los grupos ésteres de la pectina. Asimismo, presentan una mayor concentración de iones calcio y magnesio que posiblemente neutralicen el mayor número de grupos carboxilatos presentes generados por esta desmetilación más en bloque. Posiblemente, estos cambios en la pared celular generan una mayor concentración de oligosacrinas que hacen que la planta esté en SAR y esto explicaría el fenotipo de un menor crecimiento del hongo Botrytis cinerea cuando éste es inyectado en el fruto arrancando. Las plantas FaPE1 tienen una mayor concentración de ácido salicílico, así como mayor expresión del gen PR5. Por otro lado, la sobreexpresión de FaPE1 provoca un cambio en la composición de ceras epecuticulares, haciendo a estas más amorfas y este cambio favorece la interacción de la espora de honbo B.cinerea cuando éste es deposita sobre el fruto.
  • EFECTOS RENALES DE LOS INHIBIDORES SELECTIVOS DE LA CICLOOXIGENASA-2 (COX-2) EN LA CIRROSIS. ESTUDIOS IN VIVO EN RATAS INDUCIDAS A CIRROSIS Y ESTUDIOS IN VITRO EN CÉLULAS MESANGIALES

    Autor: LÓPEZ PARRA MARTA.
    Año: 2005.
    Universidad: BARCELONA [Más tesis de esta universidad] [www.ub.es].
    Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA.
    Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#114953
    Resumen: En la cirrosis descompensada, la síntesis renal de prostaglandinas (PGs), juega un papel clave en el mantenimiento de la función renal. En concreto, las PGs renales contrarrestan la exacerbada actividad vasoconstrictora asociada a la activación de los sistemas vasoactivos endógenos que tiene lugar en esta patología. De hecho, se ha podido observar que en pacientes cirróticos, la inhibición aguda de las PGS con AINEs se asocia un empeoramiento significativo en la función renal, por lo que en la práctica línica los pacientes con cirrosis y ascitis no pueden recibir tratamientos prolongados con AINEs, debido al elevado riesgo de desarrollar fallo renal y ascitis regractaria. A pesar de que el papel de las PGs en el mantenimiento de la función renal en la cirrosis está bien establecido, se desconoce cuál es la isoforma de la ciclooxigenasa (COX) responsable de la síntesis de PGs involucradas en la homeostasis renal en esta enfermedad. Con el propósito de esclarecer este aspecto, además de caracterizar el efecto delos nuevos inhibidores selectivos de la COX-2, y especialmente si su uso puede o no causar efectos del etéreos renales en la cirrosis con ascitis, se ha llevado a cabo el presente proyecto. Los objetivos del mismo fueron: 1,- Caracterizar la expresión y distribución renal de COX-1 y COX-2 en ratas control y cirróticas. 2,- Comparar los efectos producidos por la administración de un inhibidor selectivo COX-1 (SC-560), con los de un inhibidor selectivo COX-2 (celexoxib), sobre la función renal, respuesta diurética y natirurética a la furosemida y metabolismo del agua, en ratas con cirrosis y ascitis. 3,- Investigar, in vitro, los mecanismos de acción de celecoxib en células renales, evaluando los efectos de celecoxib sobre la biosíntesis de eicosanoides vasoactivos, la liberación de renina, la activación de PPARgamma y la expresión de a-SMA en células mesangiales de rata. 4,- Establecer si la albúmina, utilizada en la clínica como expansor plasmático en esta patología, modula las acciones moleculares de celecoxib en esta línea celular. De manera global, de los resultados de esta tesis doctoral se puede concluir que, en la cirrosis experimental, y en concreto en la cirrosis con ascitis, el mantenimiento dela función renal es dependiente de las PGs derivadas de la COX-1, y que el uso de clecoxib, un inhibidor selectivo de la COX-2, en estos animales, no comprometen su función renal. Asimismo, se demuestran nuevos mecanismos de acción de celecoxib, aparte de la inhibición dela COX-2, que sugieren que este compuesto puede inducir menores efectos renales adversos que los AINEs convencionales, en patologías como la cirrosis descompensada, en las que las PGs renales son de una importancia crítica en el mantenimento de la función renal dentro de los límites normales. Estos resultados aportan información para futuras evaluaciones de ese compuesto, con las que esclarecer si celecoxib puede ser considerado como opción antiinflamatoria en pacientes con enfermedad hepática crónica.
  • UTILITZACIÓ D'OLIGONUCLEÓTIDS EN TERÁPIA GÉNICA: INHIBICIÓ DE L'EXPRESSIÓ DE LA DIHIDROGOLAT REDUCTASA I DE LA SURVIVINA, REPARACIÓ DE MUTACIONS PUNTUALS

    Autor: COMA BASSAS SILVIA.
    Año: 2005.
    Universidad: BARCELONA [Más tesis de esta universidad] [www.ub.es].
    Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA - UNIVERSIDAD DE BARCELONA.
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#115079
    Resumen: Esta tesis, engloba en el campo de la terapia génica, se centra en la utilización de oligonucleótidos como material genético con dos aplicaciones específicas: 1,- Terapia anticancerosa. 2,- Reparación de mutaciones puntuales que podría aplicarse en la terapia de enfermedades monogénicas. Como terapia anticancerosa, se han desarrollado immunoliposomas anti-HER2 para vihiculizar un oligonucleótido antisentido contra el RNA para el enzima dihidrofolato reductasa, involucrado en la replicación del DNA. La utilización de los immunoliposomas ha permitido dirigir el oligonucleótido a células de cáncer de mama humanas que sobrexpresan el receptor HER2 y mejorar así su sensibilidad (Rodríguez et al. 2002). También se han diseñado oligonucleótido antisentido y siRNAs contra el RNA para la proteína antiapoptótica survivina presente en células endoteliales. De esta manera, además de aumentar los niveles de apoptosis, se inhibe la capacidad de las células endoteliales de proliferar, migrar y formar capilares, etapas muy importantes en la angiogénesis tumoral (Coma et al. 2004). Finalmente, se ha estudiado la posibilidad de utilizar oligonucleótidos formadores de triple hélices bifuncionales, formados por un dominio reparador y un dominio TFO,para corregir mutaciones puntuales. Como modelo de estudio se ha utilizado el gen de la dihidrofolato reductasa ya que disponemos de una colección de mutantes puntuales en este gen. La utilización de TFBOs ha permitido reparar la mutación a nivel de proteína con unas frecuencias de recombinación bajas. Para aumentar estas frecuencias de reparción, hemos estudiado la posibilidad de utilizar hairpins reparadores, formados por un dominio reparador y un dominio hairpin, ya que se ha demostrado que los hairpins tienen la capacidad de unirse al DNA de doble cadena (Coma et al. 2005).
  • NUEVOS RETROTRANSPOSONTES DE NARANJO. DESARROLLO DE MARCADORES BASADOS EN RETROTRANSPOSONES PARA LA EVALUACIÓN DE LA BIODIVERSIDAD DE LOS CÍTRICOS

    Autor: RICO CABANAS LAURA.
    Año: 2005.
    Universidad: BARCELONA [Más tesis de esta universidad] [www.ub.es].
    Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
    Centro de realización: LABORATORI DE GENÉTICA MOLECULAR VEGETAL - CONSORCI CSIC-IRTA (IBMB-CSIC).
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#115101
  • ESTRATÈGIES TERAPÈUTIQUES DIRIGIDES A POTENCIAR L'EFECTE ANTITUMORAL DEL SISTEMA TK/GCV. ESTUDI EN UN MODEL DE CÁNCER DE PÁNCREAS EXOCRÍ HUMÁ

    Autor: CASCANTE CIRERA ANNA.
    Año: 2005.
    Universidad: BARCELONA [Más tesis de esta universidad] [www.ub.es].
    Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
    Centro de realización: CENTRE DE REGULACIÓ (CRG).
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#115102
  • ANÁLISIS GENÉTICO DE LA FUNCIÓN DE LOS ACTIVADORES TRANSCRIPCIONALES HNF-1 Y HNF-4 EN LAS CÉLULAS BETA PANCREÁTICAS

    Autor: FERNÁNDEZ BOS SILVIA.
    Año: 2005.
    Universidad: BARCELONA [Más tesis de esta universidad] [www.ub.es].
    Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
    Centro de realización: HOSPITAL CLÍNICOS IDIBAPS.
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#115103
    Resumen: Estudio de la función del os factores de transcripción HNF-1 y HNF-4 en las células beta pancreáticas mediante el análisis de modelos murinos gen o anulados para estos dos factores. Se describe un circuito transcripcional dirigido por HNF-1 específico de células pancreáticas.
  • IMPLICACIÓN DEL PROINFLAMATORIO PAF Y DE LA GLICERALDEHÍDO-3-FOSFATO DESHIDROGENASA DE ESCHERICHIA COLI ENTEROHEMORRÁGICA EN EL DIÁLOGO ENTEROCITO-BACTERIA EN LA INFECCIÓN INTESTINAL

    Autor: EGEA PUJOL LAIA.
    Año: 2005.
    Universidad: BARCELONA [Más tesis de esta universidad] [www.ub.es].
    Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA. UNVIERSIDAD DE BARCELONA.
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#115118
    Resumen: En los mecanismos de patogenicidad, la adhesión de la bacteria y la serie de mecanismos moleculares bidireccionales de interrelación que se desencadenan por la adhesión, juegan un papel clave. En este contexto, hemos abordado el estudio de la interacción anterobacteria-célula epitelial intestinal desde dos perspectivas: 1,- Desde un punto de vista de la célula eucariota, analizando la implicación del PAF (Factor Activador de Plaquetas) en los procesos infecciosos intestinales. 2,- Estudiando la respuesta de la bacteria consecuencia de la adhesión. En referencia a la respuesta inducida en el huésped hemos considerado de gran interés analizar la contribución del epitelio intestinal a la producción de PAF en respuesta a la infección por bacterias enteroinvasivas (como Salmonella enterítidis) o enterohemorrágicas (como Escherichia coli O157; H7,EHEC O157:H7). Además, conocida su implicación en las enfermedades inflamatorias intestinales, y teniendo en cuenta que el intestino alberga un elevado número de bacterias de la microbiota, hemos postulado otro posible origen del PAF intestinal, la formación de éste por parte de enterobacterias. El PAF es un potente agente proinflamatorio con propiedades quimiotácticas y activadoras de las células responsables del daño tisular local asociado a la inflamación. En este trabajo se ha utilizado como modelo de epitelio intestinal las células Caco-2. Hemos determinado que estas células expresan las enzimas especificas delas vías de síntesis de PAF, colina fosfotransferasa (CPT) y liso-PAF acetiltransferasa (lios-PAF-AT), y en cuánto a las enzimas de degradación, las subunidades beta y gamma de la PAF acetilhidrolasa (PAF-AH)(I), y la PAF-AH(II). Hemos descrito por primera vez la expresión de la PAF-AH(II) en células intestinales, puesto que hasta el momento solamente se había descrito, mediante Northern Blot, la expresión de la CPT y de las subunidades beta y gamma de la PAF-AH(I) en tejidos de colon humano. Los resultados obtenidos han evidenciado que las células epiteliales de colon humano tienen la capacidad de incrementar la síntesis de PAF en respuesta a citoquinas pero no a enterobacterias. Ni los niveles de PAF ni las actividades implicadas en su síntesis y degradación no se modifican en el modelo de células epiteliales intestinales por incubación directa con ninguna de las enterobacterias ensayadas. Así pues, el epitelio intestinal contribuye a la respuesta inmune inmediata liberando citoquinas proinflamatorias y quimioatrayentes de neutrófilos, pero no contribuye directamente a la producción del proinflamatorio PAF como primera señal en la infección. La estimulación de células epiteliales con interleuquina-1beta (IL-1beta) en cambio, sí que causa un aumento significativo en los niveles del mediador PAF, sugiriéndose que la producción de PAF por parte del enterocito tendría lugar una vez el sistema inmune se hubiera activado y liberado citoquinas estimuladoras de la producción de PAF, como la IL-1beta. En relación a la respuesta de la bacteria consecuencia de la adhesión a la células intestinal existen actualmente pocos estudios sobre cambios de expresión global de bacterias adheridas. En este trabajo se ha seguido una aproximación proteómica con la finalidad de evaluar en la cepa EHEC O157:H7 los cambios asociados a la adhesión a células Caco-2. El análisis por electroforesis bidimensional y la identificación de las manchas diferencialmente expresadas por MALDI-TOF nos ha permitido detectar algunas proteínas marcadamente sobreexpresadas consecuencia de la adhesión, entre ellas la gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH), proteína que además parece sufrir en bacterias adheridas algún tipo 8 de modif 38f icación post-traduccional que cambia su punto isoeléctrico. En este trabajo, hemos descrito por primera vez en patógenos Gram-negativos, como son E.coli enteropatogénica (EPEC) y EHEC, la secreción e GAPDH al medio de cultivo y también su localización en la superficie de la bacteria. Hemos caracterizado que este fenómeno es dependiente de cepa y de medio de cultivo postulamos que podría contribuir a la patogenicidad de la bacteria actuando como adhesina o como molécula activadora de señalización celular.
  • REGULACIÓN POSITIVA DE LA ASIMILACIÓN DE NITRATO EN ALGAS Y PLANTAS

    Autor: CAMARGO GARCIA ANTONIO.
    Año: 2005.
    Universidad: CÓRDOBA [Más tesis de esta universidad] [www.uco.es].
    Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS.
    Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#115156
    Resumen: La asimilación de nitrato es cuantitativamente la ruta más importante para la adquisición de nitrógeno en la biosfera y por tanto para la incorporación del nitrógeno inorgánico en compuestos orgánicos tan esenciales como proteínas, ácidos nucleícos etc. Las plantas y las algas son organismos ecuariotas fotosintéticos claves para la asimilación de nitrato. En los cultivos agrícolas, y con objeto de aumentar el rendimiento de las cosechas, se ha producido una abuso de los abonos nitrogenados. Sin embargo, este abuso ha conducido a problemas medioambientales y de salud animal derivados de los efectos indeseables del nitrato. El nitrato no sólo es un nutriente esencial sino que suministra una señal positiva para la expresión óptima de los genes implicados en su propia asimilación, otras rutas metabólicas y además es una señal para procesos de diferenciación y crecimiento celular. Entender los mecanismos que subyacen a la señalización positiva por nitrato es clave y puede permitir mejorar la relación crecimiento con poco nitrógeno. El objetivo de esta Tesis Doctoral fue profundizar en los mecanismos de señalización positiva dela ruta de asimilación de nitrato en algas y plantas, utilizando como organismo modelos Chlamydomonas y Arabidopsis, respectivamente. Los principales resultados obtenidos se resumen a continuación: 1,- Se ha caracterizado Nit2 de Chlamydomonas rinhardti. Indicando que NIT2 es una proteína de unión a DNA con motivos RWP-RK, cremallera de lecuina y GAF. Nit2 es el único gen regulador-esencial para la asimilación de nitrato de Chlamydomonas. Si bien, otros genes del locus (5n2) parecen corregular, junto a Nit2 una señalización óptima por nitrato. 2,- Se ha propuesto un mecanismo de regulación en el gen NIT2 estaría inactivo en el citoplasma pero que requiere nitrato intracelular para su activación y regulación de la expresión génica. En este contexto, NIT2 sería un sensor de nitrato y los transportadores de nitrato serían los que le suministran el nitrato. 3,- Nit2 junto con otros genes de locus, participan en la toxicidad/resistencia a nitrito. 4,- Se han identificado, en Arabidopsis, nuevo posibles homólogos en Nit2 de Chlamydomonas (Nin1-9). Uno de los genes identificados, Nin7, es un posible mediador de la señal de nitrato y mutantes en este gen presentan características fenotípicas claras con nitrato milimolar en cuanto al crecimiento y expresión de genes de la ruta.
  • REGULACIÓN NEGATIVA DE LA ASIMILACIÓN DE NITRATO EN CHLAMYDOMONAS REINHARDTII

    Autor: TASSIN DE MONTAIGU AMAURY.
    Año: 2005.
    Universidad: CÓRDOBA [Más tesis de esta universidad] [www.uco.es].
    Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS.
    Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#115183
    Resumen: En Chlamydomonas reinhardtii la fuente de N preferida es el amonio, y la presencia simultánea de amonio y nitrato en los medios de cultivo da lugar a una inhibición de la ruta de asimilación de nitrato a distintos niveles. Se ha descrito la inhibición transcripcional y post-transcripcional por amonio de los transportadores de nitrato y de la nitrato reductasas del alga pero los actores moleculares que intervienen en esta vía de señalización siguen desconocidos. Con el fin de identificar genes implicados en este proceso, se ha generado una colección de mutantes insercionales de Chlamydomonas y aislado 40 mutantes amonio-insensibles (AI), que no respondían a la señal negativa del amonio. Para ello se utilizó una estirpe parental que contenía el gen reportero de la arilsulfatasa (Ars) (1) bajo control del promotor del gen Nia1. Los mutantes Al expresaban actividad Ars en presencia de amonio (2). Estos mutantes etiquetados tenían una sola copia del DNA marcador, y se identificaron las regiones genómicas donde habían tenido lugar las inserciones en la mayor parte de ellos mediante RESDA-PCR(3). Se eligieron varios mutantes para estudios más profundos. Se determinó a gran escala la expresión de los genes afectados mediante PCR a tiempo real en 17 mutantes Als inducidos en medios con distintas fuentes de nitrógeno, usando la tecnología de placas de 384 pocillos asistido por robot. El objetivo de estudiar el efecto de unas mutaciones Als sobre genes identificados, y afectados en la colección de mutantes y así dibujar un primer esquema de esta vía de señalización. Se concluyó que un gen para una posible guanilato ciclasa aprecía tener un papel central en la señalización negativa, implicando la participación del GMPc en esta ruta.
  • DESARROLLO DE TÉCNICAS DE DETECCIÓN DE TOXINAS MARINAS BASADAS EN LA UNIÓN LIGANDO-RECEPTOR

    Autor: PAZOS GULDRÍS MARÍA JOSÉ.
    Año: 2005.
    Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA [Más tesis de esta universidad] [www.usc.es].
    Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#115225
    Resumen: Las ficotoxinas marinas son metabolitos producidos por algunas especies de microalgas fitoplanctónicas presentes en aguas saladas. La proliferación excesiva de fitopláncton produce fenómenos conocidos con el nombre de "Mareas Rojas", que abarcan una amplia variedad de episodios tóxicos, distintos en función del tipo de toxinas producidas. Estas toxinas son acumuladas principalmente por moluscos bivalvos y peces durante el proceso de filtración de agua marina. Estos productos marinos son utilizados más tarde como alimentos para el consumo humano, produciendo importantes efectos tóxicos sobre la salud pública. El método oficial para la detección de estas tóxinas es el bioensayo de ratón, pero este método supone el sacrificio de animales, es poco reproducible, da lugar a falsos positivos. El objetivo de presente tesis doctoral es el desarrollo de una técnica que permita determinar de forma rápida y fiable la presencia y concentración de toxinas marinas en productos pesqueros mediante estudios ligando-receptor, utilizando como ligando diferentes tipos de toxinas y como receptor su correspondiente diana celular. Para detectar la unión se utiliza un biosensor de afinidad que mide las variaciones ópticas que se producen en función de la cantidad de complejo que se forma, permitiendo además calcular las constantes cinéticas de la unión. En este trabajo se estudia la unión de la yesotoxina a las PDEs celulares utilizando esta técnica y se desarrolla un método de detección de esta toxina. También se estudia la unión de otras toxina, la Palitoxina, y su posible diana celular, la ATPasa de Na, K. Las conclusiones de este trabajo son: 1,- La yesotoxina se une a las fosfodiesterasas celulares de forma reversible y dependiente de la concentración de toxina, siendo la constante de disociación en el equilibrio de esta unión 3.74 micromolar. 2,- El biosensor de afinidad permite detectar y cuantificar la yesotoxina y sus análogos de manera rápida y selectiva en muestras de mejillón contaminado. 3,- La afinidad que presentan la yesotoxina y sus análogos por las fosfodiesterasas es diferente, presentando un valor de la constante de disoación en el equilibrio de 7.36 micromolar para la OH-YTX, 13 micromolar para el éste rMTPA-YTX y 23 micromolar par la carboxi-YTX. 4,- La yesotoxina presenta afinidad por las fosfodiesterasas cíclicas 1,3,4 y por las exonucleasas I y II, mientras que no se observa interacción con la fosfodiesterasa 2 cíclica. 5,- En un biosensor de afinidad no se detecta unión entre la palitoxina y la ATPasa de Na, K.
  • FACTORES TRANSCRIPCIONALES DE LA CLASE DOF EN LA REGULACIÓN GÉNICA EN SEMILLAS

    Autor: MORENO RISUEÑO MIGUEL ÁNGEL.
    Año: 2005.
    Universidad: POLITÉCNICA DE MADRID [Más tesis de esta universidad] [www.upm.es].
    Centro de lectura: ESCUELA TÉCNICA SUPERIOR DE INGENIEROS AGRÓNOMOS.
    Centro de realización: ESCUELA TÉCNICA SUPERIOR DE INGENIEROS AGRÓNOMOS.
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#116113
    Resumen: Los factores transcripcionales de la clase DOF son una familia de proteínas implicada en la regulación de la expresión génica de procesos específicos de plantas que se unen a la secuencia 5'-(T/A)AAAG-3' en los promotores de los genes que regulan. La presente tesis versa sobre: 1,- La identificación y anotación de nuevos genes DOF de cebada. 2,- La caracterización molecular y funcional de dos nuevos factores DOF de esta especie implicadas en la regulación de genes específicos de semillas. 3,- La realización de un análisis filogenético evolutivo de la familia DOF en siete especies representativas de la evolución de las plantas, el alga verde Chlamydomonas reinhardtii, el musgo Physcomitrella patens, el helecho Selaginella moellendorffii, la gimnosperma Pinus taeda, la angiosperma dicotiledónea Arabidopsis thaliana y las dos angiospermas moncotiledóneas Oryza sativa y Hordeum vulgare. En C.reinhardtii hemos identificado un único miembro de la familia DOF, en P.patens nueve, y ocho en S.moellendorffti y P.taeda. En cebada, nuestra especie de interés, se han identificado y anotado 18 nuevos miembros de esta familia en las bases de datos, que se suman a los ocho previamente anotados en este laboratorio. Para profundizar en el origen y evolución de esta familia de factores transcipcionales, realizamos un análisis filogenético con los DOFs previamente identificados y aquellos de A.thaliana y O.sativa. Todos estos genes pueden agruparse en seis familias de genes ortólogos y parálogos que se habrían originado desde un grado basal parafilético o subfamilia A. La estructura de intrones y exones del gen DOF de C.reinhardtii apoya la formación del primer DOF por barajado de exones en el ancestro de las plantas. Así, duplicaciones del DOF ancestral durante el subsiguiente proceso evolutivo habría ocasionado la formación de una familia de noventa y dos miembros en las plantas vasculares aquí estudiadas. Nuestros datos, sugieren además que la pérdida, adquisición y barajado de motivos conservados además del DOF entre los nuevos genes, habría condicionado la formación de las siete subfamilias aquí descritas. Entre los ventiséis genes DOF anotados en cebada, HvDof17 y HvDof19 fueron seleccionados para su caracterización posterior, ya que se expresaban preferentemente en la aleurona de las semillas en germinación. En la aleurona post-germinativa de los granos de creales, se sintetizan un conjunto de hidrolasas, cuya expresión está inducida por GA y reprimida por ABA, que posteriormente se secretan en el endospermo amiláceo liberando los nutrientes que se movilizaran hacia el embrión. En los promotores de estos genes se ha identificado un motivo tripartito en cis necesario para una respuesta plena a GA (GARC: GA-Responsive Complex). Por el contrario, los elementos regulatorios en cis que median la respuesta de estos genes al ABA son desconocidos. Los tránscritos del gen HvDof19 se acumulan en la capa de aleurona en respuesta a ABA, estando su expresión, así como la del otro gen seleccionado, HvDof17, reprimida por GA. En este tejido, HvDOF19 media la represión por ABA del gen CatB, que codifica una tiol proteasa del tipo catepsina B, y HvDIF17 contribuye a la regulación negativa de este gen en una ruta independiente de esta hormona. Ambos factores son capaces de revertir la trans-activación del gen CatB medida por GAMYB, el cual pertenece a la clase de factores R2R3MYB y está implicado en la activación de la expresión de genes de hidrolasas en respuesta a GA; e interaccionan con él in vivo. En el endospermo en desarrollo de cebada, hemos determinado que HvDOF 17 y HVDOF19 también regulan la expresión del gen Hor2, que codifica la proteína de reserva B-hordeína. El patrón de expresión de HvDof19 durante la maduración del endospermo, se ajusta a su comportamiento como activador transcripcional del gen Hor2 y a la interacción detectada entre éste y BLZ2, un activador de la expresión de este mismo gen previamente caracterizado en el laboratorio. Por el contrario, HvDIF 19 reprime la expresión del gen Hor2. En conclusión, esta tesis contribuye a un mejor conocimiento de la regulación transcripcional de los genes de hidrolasas en respuesta a ABA, y 8 muestra 325 la implicación de HvDOF19 y HvDOF17 en la activación y represión, respectivamente, de los genes que codifican proteínas de reserva en la semilla de cebada.
  • ESTUDIO DEL CITOCROMO C Y PEPTIDOS PROCEDENTES DE PROTEINAS INVOLUCRADAS EN APOPTOSIS. INTERACCION CON SISTEMAS MODELO DE MEMBRANA

    Autor: BERNABEU SANZ ANGELA.
    Año: 2005.
    Universidad: MIGUEL HERNÁNDEZ DE ELCHE [Más tesis de esta universidad] [www.umh.es].
    Centro de lectura: I.BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR.
    Centro de realización: INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR.
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#116174
    Resumen: Objetivo: Estudio y caracterización mediante el empleo de técnicas espectroscópicas de la interacción del citocromo c y diferentes péptidos procedentes de proteínas apoptóticas con sistemas modelo de membrana. RESUMEN El trabajo de tesis doctoral consistió en 5 capítulos experimentales. En el primer capítulo experimental se realizó el estudio del citocromo c en su interacción con sistemas modelo de membrana. En concreto se intentó observar si existía especificidad de interacción con el fosfolípido cardiolipina empleando como control el ácido fosfatídico. Los estudios fueron realizados para ambos estados redox de la proteína y analizados mediante espectroscopia infrarroja bidimensional. Los resultados obtenidos mostraron especificidad de interacción de la proteína con la cardiolipina y diferencias en función del estado redox, pudiendo los resultados obtenidos presentar implicaciones biológicas en la función in vivo de la proteína. En los capítulos experimentales 2º y 4º se estudiaron las proteínas proapoptóticas del tipo 'sólo BH3' Hrk y Bik. Los análisis de hidrofobicidad y anfipaticidad mostraron en ambos casos la existencia de una región en la porción C-terminal de ambas proteínas con elevada tendencia a interaccionar con las membranas. Dichas regiones fueron las empleadas para la realización de los estudios biofísicos en los que se determinó que en ambos casos presentaban una gran eficiencia de interacción con membranas, generando una estructura en hélice alfa transmembrana. En el caso de la proteína Hrk se observó que el dominio C-terminal presentaba dependencia en la orientación y en la estructura secundaria con la composición fosfolipídica. En el capítulo experimental 3º se realizaron análisis estructurales de diversos dominios BH3 de la proteína Hrk de función conocida. En concreto se estudió la secuencia silvestre y 6 secuencias mutantes. Los análisis estructurales no mostraron diferencias significativas entre los diferentes mutantes correlacionables con la función in vivo observada. Sin embargo los estudios de análisis computacional mostraron una buena correlación no sólo con la actividad apoptótica sino que además permitieron establecer los requerimientos estructurales implicados en la interacción de Hrk con la proteína Bcl-xl. Finalmente en el 5º capítulo experimental se estudió la proteína Huntingtina responsable de la enfermedad de Huntington. Los análisis de hidrofobicidad y anfipaticidad mostraron la existencia de dos regiones con una elevada tendencia teórica de interaccionar con membranas. Dichas regiones fueron analizadas y se observó que constituían fundamentalmente estructuras oligoméricas que se depositaban en la región interfacial de los sistemas modelo de membrana. CONCLUSIONES Los resultados experimentales mostraron diferencias en la interacción del citocromo c con los sistemas modelo de membrana en función del estado redox y del fosfolípido aniónico presente en el medio. Las proteínas Hrk y Bik presentan en su porción C-terminal la existencia de una región con una elevada tendencia de interaccionar con membranas que constituye una hélice alfa transmembrana. El dominio BH3 de Hrk constituye una hélice alfa anfipática que interacciona con Bcl-xl mediante interacciones hidrofóbicas (responsables de la afinidad) y electrostáticas (responsables de la especificidad). La proteína Huntingtina presenta una región con una elevada tendencia de interaccionar con membranas cuya interacción depende de la existencia de fosfolípidos cargados negativamente en el medio que constituiría una estructura secundaria en hoja beta.
  • PAPEL DE PARP-1 EN PROCESOS DE MUERTE CELULAR INDUCIDA POR EL TRATAMIENTO CON EL ANTINEOPLÁSICO DOXORRUBICINA

    Autor: Muñoz Gámez José Antonio.
    Año: 2005.
    Universidad: GRANADA [Más tesis de esta universidad] [www.ugr.es].
    Centro de lectura: Facultad de Medicina.
    Centro de realización: Laboratorio Investigaciones Clínicas, Universidad de Granada.
    Enlace a esta ficha: http://www.kriptia.com/QUIMICA/BIOQUIMICA/BIOQUIMICA_MOLECULAR/4#116546
    Resumen: La ausencia de control de los mecanismos apoptóticos proporciona ventajas de supervivencia a las células tumorales (1). p53 juega un papel central en la regulación del crecimiento y muerte celulares (2). En cáncer de mama, las alteraciones de las vías apoptóticas incluyen la regulación negativa de la vía de receptores de muerte, mutaciones en p53 y sobre-expresión de BCL-2 (3-5). Estas deficiencias en p53 confieren resistencia a tratamientos quimioterapeúticos usados en clínica, como es el caso de Doxorubicina (DOXO), una potente antraciclina ampliamente usada en protocolos clínicos antineoplásicos (6,7). El objetivo del presente proyecto de tesis ha sido la determinación de los efectos de la inhibición de PARP, una proteína nuclear implicada en procesos de reconocimiento y reparación de daños en el ADN (8,9), sobre la citotoxicidad de doxorubicina y el mecanismo por el cual el uso de inhibidores químicos de PARP (4-amino 1,8-naftalimida, ANI) sensibiliza la muerte inducida por doxo.
111 tesis en 6 páginas: 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6
Búsqueda personalizada
kriptia.com
E-mail