QUIMICA ANALITICA (2)

Autor: RODRÍGUEZ CEA ANDRÉS.
Año: 2005.
Universidad: OVIEDO [www.uniovi.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS.

Resumen: El análisis químico de las concentraciones de metales y compuestos orgánicos en el medio acuático no basta para conocer el alcance real en los seres vivos. Para solucionar este problema, la ecotoxicología moderna va hacia una nueva aproximación basada en la evaluación de la respuesta que un un organismo ofrece frente a la exposición al agente químico en el medioambiente. Estas respuestas, definidas como biomarcadores, constituyen una señal integrada para evaluar el nivel de contaminación en un área determinada y son por tanto indicadoras del nivel de riesgo toxicológico. Las metalotioneínas y los citocromos P450 son bioindicadores de la contaminación por metales pesados y compuesto orgánicos respectivamente. Sin embargo, el papel individual que juega en la detoxificación cada una de las formas proteicas que forman parte de estas superfamilias de proteínas aún no está dilucidada completamente. El objetivo de la presente Tesis Doctoral es la puesta a punto de metodologías analíticas para evaluar el potencial de las metalotioneínas y citocromos P-450 de peces como bioindicadores. Estas metodologías están basadas en el uso de técnicas cromatográficas con detección por espectrometría de masas con fuente de plasma de acoplamiento inductivo (ICP-MS). El análisis de especiación metálico ha sido llevado a cabo en tres especies piscícolas: Anguilla anguilla, Netuma barba y Geophagus brasiliensis. Se observó que la exposición a cadmio provoca un incremento de determinadas isoformas de MT, las cuales podrían ser usadas como biomarcadores. Se llevó a cabo por primera vez la especiación de hierro en enzimas P450 de trucha arcoiris (Oncorhrynchus mykiss) mediante HPLC-ICP-MS. La medida de los niveles de P450 en peces también se ha conseguido mediante técnicas más clásicas como son los ensayos catalíticos (EROD) e inmunoquímicos (ELISA y western blotting). La determinación de los niveles de los enzimas P450 de trucha común (Salmo trutta) se realizó aplicando estás tres técnicas en un estudio de campo. Los niveles altos de P450 se correlacionaron con la exposición a PAHs en el medio acuático.

Autor: GALERA GARCÍA RAQUEL.
Año: 2005.
Universidad: MURCIA [www.um.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE QUÍMICA, UNIVERSIDAD DE MURCIA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA, UNIVERSIDAD DE MURCIA.

Resumen: En esta Tesis se aportan nuevos métodos analíticos para la determinación de sustancias de interés terapéutico y de metabolitos empleando la técnica de electroforesis capilar. Además, se demuestra la aplicabilidad de los métodos propuestos para el control de los analitos seleccionados en diferentes tipos de muestras, tales como productos farmacéuticos comerciales y fluidos biológicos, consiguiéndose rapidez en los análisis y una excelente reproducibilidad en los resultados. Se han seleccionado como técnicas de detección, dependiendo de las características de los analitos, la espectrofotometría o la fluorescencia inducida por láser, de gran sensibilidad. Utilizando la detección espectrofotométrica se han separado y determinado con excelentes resultados los antagonistas del receptor H2 de la histamina, ranitidina y famotidina. También se ha conseguido una eficiente separación por electroforesis capilar de alopurinol y su metabolito oxipurinol, especies inhibidoras de la xantina oxidasa que actúan eficientemente en el tratamiento de la gota. En otras investigaciones de esta Tesis se ha prestado atención a la determinación de productos de descomposición de drogas de interés. Así, se ha propuesto un método de electroforesis capilar en zona libre para la separación y determinación del analgésico y antipirético acetaminofén y su producto de degradación, el p-aminofenol, aportando un procedimiento mucho más fiable y sencillo que los encontrados en la bibliografía. Otro problema que hemos abordado ha sido la separación y determinación de creatinina, uno de los marcadores clínicos de más interés fundamentalmente en enfermos renales, en presencia de otras sustancias que pueden actuar como potenciales interferentes, tales como creatina, ácido úrico y ácido p-aminohipúrico. La cromatografía capilar electrocinética micelar ha sido el modo más eficaz para separar el omeprazol, un potente inhibidor de la secreción gástrica, de sus metabolitos hidroxiomeprazol y omeprazol sulfona. Finalmente hemos aplicado la fluorescencia inducida por láser a la determinación de especies que no presentaban características fluorescentes, pero que previamente habían sido sometidas a un proceso de derivatización con un marcador fluorescente adecuado para que fuera posible utilizar el láser de argón de 488 nm. Estas especies han sido el captopril, un antihipertensivo de uso generalizado y los antitiroideos 2-tiouracilo y 6-fenil-2-tiouracilo. Los métodos propuestos en esta Tesis han sido aplicados al análisis de diferentes muestras reales conteniendo estas especies, como preparados farmacéuticos comerciales y fluidos biológicos, suero sanguíneo y orina, con resultados excelentes en todos los casos.

Autor: ESCUDER GILABERT LAURA.
Año: 2005.
Universidad: VALENCIA [www.uv.es].
Centro de lectura: Facultad de Química.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA. UNIVERSITAT DE VALÈNCIA.

Resumen: Esta Tesis Doctoral se enmarca dentro de una línea de investigación desarrollada por nuestro grupo de investigación durante los últimos años cuyo objetivo general es el desarrollo de sistemas "in vitro", basados en técnicas cromatográficas y electroforéticas micelares, para la evaluación del comportamiento biológico de xenobióticos. Esta línea de investigación se planteó como respuesta a la demanda creciente por parte de la industria farmacéutica y química de disponer de sistemas "in vitro" que sirvan como alternativa o apoyo a la experimentación con animales, para su implementación en las primeras fases del desarrollo de nuevos xenobióticos y que presenten una capacidad de alto rendimiento, que reduzcan tiempo, esfuerzo experimental y costes. En la actualidad, entre los métodos alternativos al uso de ensayos "in vivo" destacan los que emplean organismos inferiores no protegidos por la legislación y vertebrados en las primeras fases de su desarrollo. De particular interés resultan los métodos "in vitro" que utilizan material de estos organismos y los modelos matemáticos de predicción como las relaciones cuantitativas estructura-actividad (QSAR) y retención-actividad (QRAR) en los que se relaciona cuantitativamente la actividad biológica de los xenobióticos con sus propiedades físico-químicas o con un parámetro de retención cromatográfico, respectivamente. La hidrofobicidad de los xenobióticos es una de sus propiedades físico-químicas determinante de su actividad biológica. Su cuantificación resulta de gran interés en los estudios QSAR y tiene un valor de predicción en distintas disciplinas como farmacología, toxicología y control medioambiental. El método clásico para estimar la hidrofobicidad de un compuesto consiste en la determinación de su relación de reparto (logP) en el sistema bifásico n-octanol/agua, utilizando para ello un sistema de extracción líquido-líquido. Este método presenta una serie de inconvenientes como son su elevado coste, lentitud, requiere compuestos y disolventes muy puros y tiene un intervalo de aplicación limitado. Por estos motivos, se ha puesto mucho empeño en la búsqueda de nuevas metodologías para la estimación de la hidrofobicidad de los compuestos. En 1977 aparecieron las primeras publicaciones en las que se utilizaba la retención de un compuesto en cromatografía líquida en fase inversa como medida de su hidrofobicidad, originando los estudios que se denominaron relaciones cuantitativas estructura-retención (QSRRs). La aplicación de este principio a la predicción de la actividad biológica de un xenobiótico originó los estudios denominados QRARs. La cromatografía líquida micelar (MLC) es una modalidad de la cromatografía líquida en fase inversa que utiliza como fases móviles disoluciones de surfactantes por encima de su concentración micelar crítica. En estas condiciones, la fase estacionaria se modifica por la adsorción de monómeros de surfactante y en la fase móvil existen micelas en equilibrio con los monómeros de surfactante existentes en disolución y en la fase estacionaria. En MLC, el soluto no sólo se reparte entre la fase móvil y la fase estacionaria, sino que dentro de la fase móvil entre el agua y la micela, por lo que la hidrofobicidad de un compuesto es un factor determinante de su retención. Estas características especiales de la MLC la convierten en una técnica atractiva para la estimación de la hidrofobicidad de las moléculas y sugiere que bajo las condiciones experimentales adecuadas podría emular los procesos biológicos de reparto. El objetivo principal que se plantea en esta Tesis Doctoral es la evaluación de la aplicabilidad de la MLC en la cuantificación de las propiedades hidrófobas de moléculas bioactivas y su posible aplicación para la evaluación farmacológica y ecotoxicológica de xenobióticos. Para la 8 consecuc 19b0 ión del mismo se realizaron los siguientes estudios: En primer lugar, se abordó la problemática existente acerca de la naturaleza no lineal de las relaciones entre la retención de los compuestos en MLC (expresada como el logaritmo del factor de retención, logk) y logP. Este estudio se realizó con diferentes de series de compuestos neutros eluidos con diversas fases móviles micelares de surfactantes aniónicos, catiónicos y neutros. Para ello, se desarrolló un algoritmo simplex que mostró su validez para modelar dicha relación y además, de forma más eficaz que los modelos de regresión clásica polinómicos. Por otro lado, el algoritmo desarrollado permitió la estimación de los valores de logP de nuevos compuestos neutros, obteniendo valores consistentes con los obtenidos experimentalmente y mejor que los calculados mediante programas informáticos comerciales. A continuación, se abordó la problemática existente en la obtención de relaciones logk-logP para compuestos iónicos. Para llevar a cabo este estudio se ensayaron diversos modelos y se comprobó su validez utilizando los datos de retención de diversas familias de compuestos congéneres ionizables eluidos con diferentes fases móviles micelares a diferentes valores de pH. Se observó que la retención de compuestos iónicos puede describirse en función de logP y un nuevo descriptor al que denominamos carga molar total, de forma más robusta que empleando el parámetro clásico logD (logaritmo de la relación de distribución n-octanol/agua) ampliamente utilizado en la bibliografía. El paso siguiente fue la obtención de modelos retención-hidrofobicidad generales, es decir, aplicables a compuestos que exhiban una amplia variedad de propiedades físico-químicas de hidrofobicidad, ácido-base y otras propiedades electrónicas y estéricas. Con objeto de garantizar que la hidrofobicidad de los compuestos es un factor determinante en su retención se utilizaron columnas C18 y se seleccionó el surfactante no-iónico Brij35 (polioxietileno(23)lauril éter). Se envaluaron diferentes tipos de variables mediante técnicas multivariantes y se observó que para describir la retención en MLC de compuestos no relacionados estructuralmente es necesario tener en cuenta, además de logP, dos nuevos descriptores la carga molar negativa y positiva. Por otro lado, el análisis de las variables ensayadas reveló que la retención de un compuesto en MLC en las condiciones experimentales estudiadas viene determinada principalmente por sus propiedades hidrófobas, electrónicas y en menor medida estéricas. Este tipo de propiedades pueden determinar la actividad biológica de un xenobiótico, por lo que se planteó el uso directo de la retención (obtenida con columnas C18 y fases móviles de Brij35 preparadas en condiciones fisiológicas de pH y fuerza iónica) como variable de predicción de las actividades biológicas de los xenobióticos. A esta nueva modalidad de cromatografía líquida micelar la denominamos cromatografía micelar de bio-reparto (CMB). Existen una serie de similitudes entre las biomembranas y el sistema CMB. Así, en CMB la disposición de los monómeros de Brij35 adsorbidos sobre la fase estacionaria es similar a la de los fosfolípidos en las biomembranas. Además, el balance hidrófilo/hidrófobo del surfactante reproduce el de las cabezas polares y cadenas alifáticas de los fosfolípidos. Finalmente, la fase móvil en CMB constituida por disoluciones acuosas salinas de micelas en equilibrio con monómeros de surfactante y preparadas en condiciones que reproducen la fuerza iónica y pH de los fluidos biológicos, se asemeja a los mismos, compuestos básicamente por agua, sales, glucosa, aminoácidos, proteínas y lípidos, los cuales pueden forman agregados micelares. Estas similitudes justifican el éxito obtenido en los siguientes capítulos en los que se utilizó la retención en CMB para la construcción de modelos QRAR para la descripción y predicción de la actividad farmacológica de dos familias terapéuticas (anestésicos locales y antiinflamatorios no esteroideos) y de la ecotoxicidad de un amplio conjunto de contaminantes orgánicos. La bondad de los modelos QRAR obtenidos pone de manifiesto que el sistema CMB emula las interacciones inter-moleculares responsables del reparto de los xenobióticos en las biomembranas. Adicionalmente, CMB presenta una serie de ventajas frente a otras metodologías alternativas, tales como precisión, automatización, versatilidad, rapidez y bajo coste, que la hacen una herramienta "in vitro" de alto rendimiento, atractiva y útil para su implementación en los laboratorios de I + D de las industrias. Además, la CMB satisface los requerimientos de las directrices europeas que indican la necesidad de la reducción del número de animales utilizados con fines experimentales y el reemplazo de la experimentación con animales siempre que exista otro método científico satisfactorio y factible para obtener el resultado perseguido. Finalmente, se evaluó la potencialidad de la cromatografía electrocinética utilizando disoluciones micelares de Brij35 para llevar a cabo este tipo de estudios, concretamente se aplicó al estudio de la ecotoxicidad de herbicidas fenoxiácidos y se comparó con los resultados obtenidos con CMB, obteniendo en ambos casos excelentes correlaciones. Estos resultados ponen de manifiesto que el factor de afinidad obtenido en cromatografía electrocinética micelar (MEKC) con disoluciones micelares de Brij35 también es un descriptor prometedor para la estimación de las respuestas biológicas de xenobióticos ionizados. Adicionalmente, la electroforesis capilar también reúne una serie de requisitos (alto rendimiento en el procesado de muestras, bajo consumo de reactivos y de muestras, versatilidad y automatización) solicitados en la actualidad por los laboratorios de I + D de las industrias en el marco del desarrollo de metodologías "in vitro" alternativas a las tradicionales.

Autor: MOLERO MONFORT MÓNICA.
Año: 2005.
Universidad: VALENCIA [www.uv.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: Hoy en día, con el desarrollo de la química combinatoria, se sintetizan cientos y cientos de fármacos que muestran actividad biológica potencial. Los estudios sobre fármacos, desde su descubrimiento hasta su salida al mercado, son muy largos y costosos e implican la selección de candidatos y el estudio de sus propiedades farmacocinéticas y farmacodinámicas. En las primeras etapas del descubrimiento de un nuevo fármaco, los estudios farmacocinéticos y farmacodinámicos se llevaban a cabo tradicionalmente sobre organismos vivos como ratones, conejos, perros, etc. Los estudios de desarrollo de nuevas moléculas candidatas a fármacos requieren además en sus fases iniciales la realización de estudios predictivos de los potenciales de absorción y permeabilidad de las sustancias ensayadas. Hasta el momento en nuestro país estos estudios se llevan a cabo mediante distintas técnicas "in situ" o "in vitro" que utilizan de animales de experimentación. Actualmente, por razones éticas y/o económicas, se están dedicando muchos esfuerzos a desarrollar sistemas in vitro que permitan evitar o reducir el uso de estos animales experimentales. Los procesos farmacodinámicos y los procesos basados en la difusión pasiva de fármacos tiene mucho en común con los procesos fundamentales de las separaciones cromatográficas: son procesos dinámicos, las mismas propiedades fisicoquímicas de los compuestos que determinan su actividad y su permeabilidad en un sistema biológico son las que pueden determinar su retención en un sistema cromatográfico, bajo unas condiciones cromatograficas adecuadas y excepto los procesos metabólicos no implican ruptura de enlaces Consecuentemente es lógico pensar que deben existir relaciones entre la retención cromatográfica de un compuesto y su permeabilidad; y por tanto su actividad biológica. En los últimos años han aparecido en la bibliografía diferentes trabajos en los que se utilizan parámetros cromatográficos de fármacos como variables predictoras con el fin de construir modelos retención-actividad biológica (quantitative retention-activity relationships, QRAR) Esta metodología tiene una ventaja frente a los modelos QSAR, ya que al ser la retención cromatográfica de un compuesto el resultado de un conjunto de interacciones (hidrofóbicas, electrónicas y estéricas), un solo parámetro (la retención cromatográfica, expresada como factor de retención k o su logaritmo logk) puede utilizarse como variable predictora de los modelos QRAR mientras que en la aproximación QSAR el número de descriptores es considerablemente mayor. Otra ventaja adicional de la metodología QRAR es que al basarse en sistemas dinámicos, es posible controlar estrictamente las condiciones experimentales lo que conlleva un aumento en la reproducibilidad de los resultados en comparación con los modelos in vitro basados en lineas celulares. Nuestro grupo de investigación ha demostrado que el empleo de disoluciones micelares de polioxietilen(23) lauril eter (Brij35) como fases móviles y una columna C18 en condiciones experimentales adecuadas, proporciona un entorno que permite reproducir experimentalmente el ambiente que va a encontrar el fármaco al ser administrado a un organismo vivo. Esta metodología a la que hemos llamado cromatografía micelar de bio-reparto (CMB) ha demostrado ser útil en la obtención de buenos modelos para la descripción y predicción del comportamiento farmacocinético y farmacodinámico de un gran numero de fármacos y desarrollo de buenos modelos para describir y predecir la absorción de fármacos a través de las membranas. El éxito de la CMB en la descripción del comportamiento de fármacos en organismos vivos puede ser atribuido a las similitudes entre el sistema cromatográfico de CMB y las interfases membrana biológica-medio acuoso en organismos vivos .

Autor: FERNÁNDEZ GARCIA BEATRIZ.
Año: 2005.
Universidad: OVIEDO [www.uniovi.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA.

Resumen: El objetivo fundamental de la presente Tesis Doctoral es la puesta a punto de metodologías analíticas para llevar a cabo la caracterización de materiales no conductores de interés industrial (vidrios homogéneos y con recubrimientos delgados) y muestras líquidas de importancia biológica (desoxinucleótidos) empleando la descarga luminiscente (glow discharge, GD) en combinación tanto con espectrometría de emisión óptica (OES) como un espectrometría de masas (MS). Este objetivo básico se desarrolla en los siguientes objetivos específicos: 1,- Puesta a punto de una metodología analítica para el análisis cuantitativo de muestras homogéneas no conductoras (vidrios) mediante descarga luminiscente de radiofrecuencia - espectrometría de emisión óptica. Las descargas luminiscentes han cobrado gran interés en los últimos años como fuente de atomizació/excitación/ionización utilizando como detección tanto espectrometría de masas como espectrometría de emisión óptica, debido a su capacidad de generar átomos directamente de las muestras sólidas. Las descargas luminiscentes con detección por espectrometría de emisión óptica se consideran hoy en día una de las principales técnicas para el análisis directo de muestras sólidas debido a su fiabilidad, rapidez y sensibilidad. Entre las diferentes muestras sólidas debido a su fiabilidad, rápidez y sensibilidad. Entre las diferentes muestras que se pueden estudiar con esta técnica se encuentran materiales homogéneos (análisis global) y materiales con recubrimientos (perfiles en profundidad). Las GDs pueden ser generadas con corriente continua (dc) o con radiofrecuencia (rf). Aunque aun en desarrollo, el empleo de las rf-GDs se ha visto incrementado en los últimos años, ya que en este tipo de descarga es posible extender el campo de aplicación al análisis directo de materiales no conductores. El análisis directo de materiales dieléctricos empleando rf-GD es la gran ventaja que presenta esta técnica frente a su homóloga (dc-GD). Sin embargo, aunque el análisis de materiales conductores (tanto homogéneos como con recubrimientos) está ampliamente desarrollado, a uno no se han propuesto metodologías de cuantificación para llevar a cabo el análisis de muestras no conductoras con rf-GDs. En este sentido, el concepto de "eficiencia de emisión constante" ha sido ampliamente utilizado en las calibraciones multimatriz para el análisis de materiales conductores con dc-GDs. Sin embargo, el empleo de la eficiencia de emisión no ha sido investigado hasta la fecha para la cuantificación de materiales no conductores. Por lo tanto, el primer objetivo de la presente tesis doctoral será el desarrollo de una metodología analítica sencilla y fiable para el análisis cuantitativo de muestras no conductoras homogéneas. La metodología se desarrollará utilizando el término de "eficiencia de emisión constante" y empleando para la calibración muestras no conductoras de composición variada. Dicha metodología empleará correcciones para el espesor de las diferentes muestras (vidrios homogéneos). 2,- Evaluación de una metodología analítica para el análisis cuantitativo del perfil en profundidad de muestras no conductoras (vidrios con capas delgadas) mediante descarga luminiscente de radiofrecuencia -espectrometría de emisión óptica. Actualmente las películas delgadas y los recubrimientos conductores sobre materiales sólidos son empleados en un gran número de aplicaciones industriales en diferentes campos tecnológicos, desde la microelectrónica y la óptica hasta como recubrimientos protectores para tipos muy variados de muestras. Las propiedades de estas películas delgadas dependen de la composición química, estructura y espesor de esta capas. De este modo, para una correcta optimización de las propiedades requeridas por 8 dichos m 1ff8 ateriales, estos parámetros químicos han de ser caracterizados correctamente empleando técnica analíticas con bajos límites de detección, buena reproducibilidad y una alta resolución lateral y en profundidad. Las descargas luminiscentes acopladas a espectrometría de emisión óptica y a espectrometría de masas se han convertido en una herramienta analítica muy útil para la determinación de la composición de los perfiles en profundidad de muestras con recubrimientos. La posibilidad de estudiar la variación de la composición de un material en función de su distancia a la capa más externa empleando las GDs, viene dada por la facilidad con que se eliminan las capas de la superficie a analizar de forma controlada por el proceso de arrancado o "sputtering". Empleando rf-GD dicho proceso de "sputtering" se realiza con iones Ar+ de baja energía (menor 50 eV) y elevada densidad de corriente (en el orden de 100 mA.mmm-2). La baja energía de los iones Ar+ permite asegurar que el proceso de "sputtering" tiene lugar sin la alteración de las capas a analizar, el cual es un prerrequisito de éxito para los análisis desperfiles en profundidad de películas delgadas. La determinación del perfil cuantitativo en profundidad requiere un método de cuantificación que transforme las medidas de intensidad de emisión en concentración, y las de tiempo establecidos para la cuantificación de muestras homogéneas no son aplicables a la cuantificación de los perfiles en profundidad de capas superpuestas. Para la cuantificación de perfiles en profundidad empleando dc-GDs se ha propuesto hasta la fecha varios métodos de cuantificación, sin embargo, empleando rf-GDs todavía no existe un método establecido para las muestras no conductoras por la dificultad de controlar las condiciones eléctricas de la descarga. Por lo tanto, el segundo objetivo de la presente tesis doctoral será el desarrollo de una metodología analítica sencilla para el análisis cuantitativo de muestras no conductoras con recubrimientos delgados. La metodología se desarrollará utilizando el concepto de "eficiencia de emisión constante" y se aplicará para evaluar diferentes tipos de recubrimientos conductores y no conductores sobre vidrios homogéneos de diferentes espesores. 3,- Investigación de la adición de gases moleculares (hidrógeno, nitró negó u oxígeno) a una descarga luminiscente de radiofrecuencia acoplada a espectrometría de emisión óptica. A pesar de que el argón es el gas más empleado en las descargas luminiscentes, en los últimos años se ha llevado a cabo estudios basados en la utilización de gases alternativos e incluso se ha experimentado con diferentes mezclas de gases, con el objeto de investigar los procesos básicos que tienen lugar en el plasma (como son los mecanismos de excitación/ionización) o de mejorar las características analíticas de las fuentes de GD. La mayor parte de estos estudios se han realizado con GDs de corriente continúa. En el caso de las más actuales GDs de radiofrecuencia, los trabajos publicados hasta la fecha se han centrado mayoritariamente en mezclas argón/helio. En este sentido, el tercer objetivo de la presente tesis doctoral consistirá en evaluar la influencia de la adición de gases moleculares (hidrógeno, nitrógeno u oxígeno) en el análisis de materiales conductores y aislantes mediante rf-GD-OES. Dicho estudio se desarrollará en dos fases. En la primera se investigará el efecto que ejerce la adición controlada bien de hidrógeno, nitrógeno u oxígeno a una descarga basada en argón, sobre las características analíticas de una rf-GD (intensidades de emisión, velocidades de arrancado y eficiencias de emisión). Para ello se estudiarán de manera comparativa el efecto de dichos gases sobre muestras conductoras de acero y muestras no conductoras de vidrio. En segundo lugar, con el fin de buscar una metodología con la mejor resolución en profundidad posible para que permita el análisis de capas muy delgadas, se realizará un estudio del efecto que ejerce en los análisis de perfiles en profundidad de películas delgadas la adición controlada de dichos gases moleculares. Para ello se llevará a cabo la evaluación de la potencial generada entre los electrodos, la forma del cráter obtenido en las muestras (parámetro crítico en este tipo de análisis) y la influencia del gas añadido en la resolución de perfiles en profundidad para muestras de vidrio con diferentes recubrimientos. 4,- Puesta a punto de una metodología analítica para el análisis de muestras no conductoras mediante descarga luminiscente de radiofrecuencia - espectrometría de masas. El acoplamiento de las GDs como fuente de ionización a espectrometría de masas para el análisis elemental directo de sólidos ofrece importantes ventajas frente a espectrometría de emisión óptica, entre las que se encuentran: posibilidad de determinar la mayor parte de los elementos de la tabla periódica, obtención de información isotópica en un espectro relativamente simple y bajos límites de detección. En esta línea, el empleo de una GD acoplada a un analizador de masas de tiempo de vuelo (TOFMS) para el análisis de muestras homogéneas y perfiles de concentración en profundidad de materiales recubiertos, constituye una poderosa herramienta analítica. Por una parte, para el análisis de muestras con recubrimientos la fuente de GD permite el análisis directo del sólido mediante el arrancado homogéneo de la superficie del mismo, y por otra, el analizador de masas de tiempo de vuelo proporciona la rapidez necesaria para la medida de señales que varían a cada instante de tiempo según penetramos en el sólido. En particular, la habilidad que los análisis realizados mediante GD-TOFMS presentan para recoger el espectro completo de masas con la misma precisión, sensibilidad y resolución, para todas las relaciones masa/carga, ha proporcionado un fuerte incentivo para el empleo de TOFMS en este tipo de análisis. En nuestros estudios, se investigará la descarga luminiscente de radiofrecuencia acoplada a espectrometría de masas de tiempo de vuelo para la caracterización de materiales no conductores. 5,- Evaluación de las descargas luminiscentes para el análisis de muestras líquidas: determinación de fósforo y carbono en desoxinucleótidos mediante descargas luminiscentes de cátodo hueco - espectrometría de emisión óptica. La descarga luminiscente está siendo ampliamente utilizada como técnica de análisis directo de sólidos, tanto de materiales conductores como de semiconductores y aislantes, debido a su capacidad como fuente de atomización, excitación e ionización. Sin embargo, en los últimos años se ha investigado el empleo de las GDs para el análisis de muestras líquidas. En este sentido, se han publicado algunos trabajos encaminados a desarrollar una fuente de descarga luminiscente acoplada a la espectrometría de emisión óptica para la detección específica de muestras líquidas. En este tipo de análisis se requiere una interfase que permita la introducción de la muestra en el plasma de manera continua. La interfase conocida como interfase de "haz de partículas" (paticle beam, PB) permite introducir los eluyentes de un sistema de cromatografía líquida en la fuente de baja presión mientras se mantienen las características cromatográficas como son la calidad de retención y elución. La interfase de "haz de partículas", compuesta por un nebulizador termoconcéntrico, una cámara de desolvatación y un cámara donde se eliminan los vapores residuales y se reduce la presión, permite obtener un fino aerosol seco a partir de la muestra líquida. El acoplamiento de dicha interfase con la fuente de descarga luminiscente de cátodo hueco (HC) ha sido investigada en los últimos años para diferentes tipos de muestras líquidas (aminoácidos, compuestos de selenio, hidrocarburos aromáticos policíclicos, etc.). Por lo tanto, el último objetivo de la presente tesis doctoral consistirá en evaluar el potencial de la técnica PB-HC/GD-OES para el análisis de muestras líquidas de actual interés biológico. En nuestro caso, se evaluará la capacidad de la técnica para el análisis de fósforo y carbono en diferentes desoxinucleótidos (AMP, ADP, dATP, dCTP y dGTP).

Autor: SANCHEZ NUÑEZ NOE.
Año: 2005.
Universidad: OVIEDO [www.uniovi.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE QUIMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUIMICA.

Resumen: Con el fin de introducir las ventajas de la Cromatografía Líquida de Alta Velocidad en los laboratorios farmacéuticos, un equipo estándar de HPLC fue modificado para la práctica de esta nueva modalidad. Básicamente, estas modificaciones involucran al sistema de inyección, al volumen de la celda y al tiempo de respuesta del detector y a los tubos de conexión. La adaptación del equipo se evaluó mediante la reproducibilidad de los tiempos de retención y de las áreas de los picos cromatográficos, tanto en régimen isocrático como en gradiente, y por su eficacia con medidas del ensanchamiento de banda instrumental y del número de platos teóricos para una separación estándar con columnas cortas de microdiámetro. Los resultados muestran una satisfactoria adaptación, al haberse logrado una reducción del ensanchamiento extra-columna de unas cinco veces y un aumento de eficacia entorno al 75% para solutos eluidos antes de cinco minutos. Además, se presenta un sistema de bypass a la válvula de inyección, como estrategia para reducir el estrés mecánico que sufren las columnas empaquetadas con micropartículas. De esta forma, se desarrollaron tres métodos analíticos aplicables al control de la producción de los principios activos: sulbactam, rifabutina y sultamicilina. Su utilización permite: 1) el seguimiento y optimización de los procesos de síntesis; 2) el análisis del producto final; 3) la determinación del perfil de impurezas. Estos nuevos métodos mejoran notablemente los empleados en la actualidad en la industria, al haberse reducido su tiempo de análisis en un 70%, aproximadamente, lo que incrementa la productividad y la eficacia del laboratorio, al tiempo que reduce el coste por análisis. Asimismo, los criterios de validacion exigidos por los organismos de regulación han sido superados, lo que permite presentar a la Cromatografía Liquida de Alta Velocidad como una alternativa a la técnica convencional de HPLC utilizada en la industria farmacéutica.

Autor: SANCHEZ NUÑEZ NOE.
Año: 2005.
Universidad: OVIEDO [www.uniovi.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE QUIMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUIMICA.

Resumen: Con el fin de introducir las ventajas de la Cromatografía Líquida de Alta Velocidad en los laboratorios farmacéuticos, un equipo estándar de HPLC fue modificado para la práctica de esta nueva modalidad. Básicamente, estas modificaciones involucran al sistema de inyección, al volumen de la celda y al tiempo de respuesta del detector y a los tubos de conexión. La adaptación del equipo se evaluó mediante la reproducibilidad de los tiempos de retención y de las áreas de los picos cromatográficos, tanto en régimen isocrático como en gradiente, y por su eficacia con medidas del ensanchamiento de banda instrumental y del número de platos teóricos para una separación estándar con columnas cortas de microdiámetro. Los resultados muestran una satisfactoria adaptación, al haberse logrado una reducción del ensanchamiento extra-columna de unas cinco veces y un aumento de eficacia entorno al 75% para solutos eluidos antes de cinco minutos. Además, se presenta un sistema de bypass a la válvula de inyección, como estrategia para reducir el estrés mecánico que sufren las columnas empaquetadas con micropartículas. De esta forma, se desarrollaron tres métodos analíticos aplicables al control de la producción de los principios activos: sulbactam, rifabutina y sultamicilina. Su utilización permite: 1) el seguimiento y optimización de los procesos de síntesis; 2) el análisis del producto final; 3) la determinación del perfil de impurezas. Estos nuevos métodos mejoran notablemente los empleados en la actualidad en la industria, al haberse reducido su tiempo de análisis en un 70%, aproximadamente, lo que incrementa la productividad y la eficacia del laboratorio, al tiempo que reduce el coste por análisis. Asimismo, los criterios de validacion exigidos por los organismos de regulación han sido superados, lo que permite presentar a la Cromatografía Liquida de Alta Velocidad como una alternativa a la técnica convencional de HPLC utilizada en la industria farmacéutica.

Autor: FERNANDEZ RODRIGUEZ PABLO.
Año: 2005.
Universidad: OVIEDO [www.uniovi.es].
Centro de lectura: SERVICIOS CIENTIFICO TECNICOS.
Centro de realización: FACULTAD DE QUIMICA.

Resumen: El desarrollo de nuevas metodologías analíticas y su aplicación a la evaluación de agentes químicos en el campo de la higiene industrial en general y en atmósferas de trabajo en particular, es hoy día de primordial importancia. El establecimiento por parte de los gobiernos u organismos internacionales de valores límites que protejan la salud de los trabajadores, la eliminación del uso de algunos compuestos o producción de otros, la regulación a través de normativas y leyes de las emisiones de sustancias peligrosas demandan la necesidad actual de desarrollar técnicas analíticas que permitan la determinación de sustancias químicas presentes en los ambientes de trabajo. En esta Tesis Doctoral se han desarrollo nuevas estrategias y metodologías para el control analítico de sustancias químicas presentes en atmósferas de trabajo, empleando técnicas de Espectrometría de Masas Inorgánica (ICP-MS, ETV-ICP-MS), Espectroscopía de Infrarrojo (FTIR) y Difracción de Rayos X (DRX). En concreto: 1. Se han puesto a punto metodologías analíticas para la determinación de cuarzo mediante FTIR y DRX en muestras de polvo respirable, comparando diferentes soportes de muestreo (cloruro de polivinilo y nitrato de celulosa), y estudiando las interferencias que se pueden encontrar en la determinación sílice libre cristalina en muestras de explotaciones a cielo abierto. La metodología desarrollada se aplicó al análisis de muestras tomadas en diferentes explotaciones españolas con vistas a tratar de obtener una lista de materias primas cuyo contenido en cuarzo sea inferior al 5%, dado que en estos casos la legislación actual establece un valor límite de exposición de "polvo respirable" de 5 mg/m3 y bastaría con determinar dicha concentración, evitando así, en análisis rutinarios, la determinación de sílice cristalina. 2. Se ha puesto a punto un método para la determinación de trazas metálicas en partículas atmosféricas (PM10) por ICP-MS. Se estudiaron las condiciones de extracción de los elementos utilizando patrones internos para eliminar los posibles efectos de matriz. El método multielemental desarrollado se aplicó a la evaluación de los niveles de metales existentes en una cantera próxima a la ciudad de Oviedo con objeto de evaluar su posible influencia sobre el entorno. Por otro lado, se llevó a cabo la determinación de relaciones isotópicas de plomo en muestras de PM10 tomadas en dicha cantera, con objeto de identificar y discriminar las diferentes fuentes de contaminación por plomo. 3. Se han evaluado las prestaciones analíticas de un espectrómetro secuencial tipo cuadrupolo y un espectrómetro de tiempo de vuelo (TOF) para llevar a cabo medidas multielementales y multiisotópicas así como medidas de relaciones isotópicas en señales transientes rápidas como las producidas por un vaporizador electrotérmico (ETV). 4. Se ha desarrollado una metodología analítica para la determinación de trazas y ultratrazas metálicas en muestras con cantidades de silicio elevadas usando el acoplamiento de un vaporizador electrotérmico de filamento de volframio con un ICP-MS.

Autor: MARTINAVARRO DOMINGUEZ ADRIAN.
Año: 2005.
Universidad: JAUME I DE CASTELLON [www.uji.es].
Centro de lectura: ESC. SUP.DE TECN. Y CIENCIAS EXPERIMENTALES.
Centro de realización: ESC. SUP.DE TECN. Y CIENCIAS EXPERIMENTALES.

Resumen: La cromatografia líquida micel·lar (MLC) ha estat aplicada amb èxit a la monitorització de fàrmacs. La MLC és un mode de la cromatografia líquida en fase inversa (RPLC) que conté micel·les, generalment de dodecil sulfat sòdic, que actuen com a modificadors de la fase mòbil, i un solvent orgànic o alcohol de cadena curta, que millora l'eficàcia i permet controlar la força eluent i la selectivitat de la fase mòbil. Les fases mòbils micel·lars, en comparació amb les aquó-orgàniques, tenen l'avantatge de permetre l'injecció directa de mostres biològiques (sèrum, orina, saliva, suor, etc.), i a més són més ecològiques, barates i estables. L'objectiu fonamental de la monitorització dels fàrmacs consisteix en millorar l'assistència terapèutica del pacient, tant en patologies agudes com en les cròniques, i això es du a terme mitjançant l'ajust de la dosi del fàrmac en funció de les concentracions plàsmiques, de manera que puga combinar la màxima eficiència del fàrmac i el mínim risc de toxicitat. També la monitorització és útil en la determinació de paràmetres químics i farmacològics, tals com el temps de vida mitja i d'altres. Els grups de substàncies amb els que s'han dut aquests tipus d'estudis han estat el dels antiarrítmics, antiepilèptics, antidepressius tricíclics, anàlgèsics, broncodilatadors i drogues d'abús, que inclouen a les amfetamines, barbiturats, benzodiazepines i opiacis.

Autor: GRINDLAY LLEDÓ GUILLERMO.
Año: 2005.
Universidad: ALICANTE [www.ua.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE DERECHO.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: En los últimos años se ha empleado la radiación de microondas (MW) con éxito en los sistemas de introducción de muestras en Espectrometría Atómica (e.g. ICP-AES e ICP-MS) para la generación y la desolvatación de aerosoles. En ambos casos la radiación permite mejorar la sensibilidad y los límites de detección obtenidos con un sistema convencional de introducción de muestras (i.e. nebulizador neumático concéntrico acoplado a una cámara de nebulización). No obstante, los resultados obtenidos con ambos sistemas pueden ser mejorados más aún, ya que la cavidad y el generador de MW utilizados no son los más adecuados para este tipo de aplicaciones. Por otro lado, dado que el principio de funcionamiento y la instrumentación de ambos sistemas es similar, podría ser posible el desarrollo de un sistema integrado de nebulización y desolvatación mediante radiación de microondas. En este trabajo se ha desarrollado un sistema integrado de nebulización y desolvatación mediante radiación de microondas para ICP-AES utilizando una única cavidad de MW (MWIS). Para ello, en primer lugar, se ha rediseñado el sistema de generación y aplicación de MW (magnetrón y cavidad). A continuación, se ha procedido a evaluar este nuevo diseño para la nebulización (MWTN) y la desolvatación (MWDS2) de forma individual. Las principales variables estudiadas en ambos sistemas han sido la potencia de MW, la naturaleza de la matriz (inorgánica y orgánica) y el caudal líquido de muestra (Ql). A partir de las conclusiones obtenidas se ha procedido al diseño del sistema integrado de nebulización y desolvatación. Los resultados obtenidos tanto con el MWDS2 como con el MWTN muestran que la cavidad (TM010) y el magnetrón utilizado permiten una mayor eficacia y control en el calentamiento, lo que proporciona una mejora en la sensibilidad y en los límites de detección en ICP-AES e ICP-MS respecto a los diseños anteriores de estos sistemas y un sistema convencional. Las condiciones óptimas de funcionamiento para el MWDS2 son potencias de MW elevadas, así como concentraciones de matriz y Ql bajos (<400 µL·min-1), mientras quepara el MWTN es conveniente utilizar potencias de MW, concentraciones dematriz y Ql elevados (>1000 µL·min-1). El MWDS2 se muestra eficaz a la hora de reducir los efectos de matriz de disoluciones orgánicas diluidas, lo que permite el análisis directo de muestras de vino utilizando un calibrado con patrones de agua y patrón interno. En cuanto al MWTN, se ha estudiado el mecanismo de generación del aerosol y se ha desarrollado un modelo capaz de predecir a priori las características del aerosol primario generado. Para desarrollar el MWIS ha sido necesario llegar a una situación de compromiso en las condiciones experimentales de trabajo del MWDS2 y del MWTN. Los resultados muestran que, a pesar de las limitaciones de tipo práctico encontradas, el MWIS mejora la sensibilidad y los límites de detección hasta 30 veces respecto a un sistema convencional de introducción de muestras.

Autor: RODRÍGUEZ GARCÍA ISABEL MARÍA.
Año: 2005.
Universidad: SEVILLA [www.us.es].
Centro de lectura: INSTITUTO DE RECURSOS NATURALES Y AGROBIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICAS.

Resumen: La presente Tesis plantea el estudio de la composición química de las fibras de varias plantas herbáceas utilizadas como materia prima para la fabricación de pasta de papel de alta calidad, así como, la evolución de sus principales componentes durante el proceso de cocción con objeto de obtener un mejor aprovechamiento industrial de estas fibras. Las fibras seleccionadas para este estudio fueron: lino, (Linom Vistatissimum), cáñamo (Cannabis Sativa), Kenaf (Hibiscus Cannabinus), yute (Corchorus Capsularis), Sisas (Agave Sisalana) y Abacá (Musia Textilis). El estudio se centra en una caracterización general de las fibras basada en la cuantificación de las principales fracciones (Polisacáridos, Lignina, Extraíbles, Hidrosolubles y Cenizas), poniendo especial énfasis en el estudio detallado de la composición de los extraíbles lipofílicos y Lignina, fracciones que presentan una especial relevancia en la fabricación de pasta de papel. También se estudio el comportamiento y los cambios estructurales de lipidos y lignina tras la cocción alcalina.

Autor: BENÍTEZ SERRA MIRIAM.
Año: 2005.
Universidad: POLITÉCNICA DE VALENCIA [www.upv.es].
Centro de lectura: UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE VALENCIA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE VALENCIA.

Resumen: La presente tesis doctoral tiene como objetivo el desarrollo de compuestos organosilíceos periódicos mesoporosos (PMOs) con fotoactividad. Estos compuestos son materiales híbridos en los que tenemos una matriz inorgánica que determina la porosidad y un componente orgánico que le va a proporcionar una funcionalidad determinada. La parte inorgánica de estos compuestos consiste en sílice y le proporcionara una estructura rígida con canales con un tamaño de poro en el rango de los mesoporos y una elevada área superficial. Por otro lado la parte orgánica del compuesto es una molécula fotoactiva. Esto permite estudiar la influencia que tiene la matriz inorgánica sobre la molécula como su potencial aplicación en nanotecnología como dispositivos fotoactivos o adsorbentes. Particularmente, se aumenta la accesibilidad del componente orgánico que está más dispuesto para interaccionar con otros compuestos. Se han agrupado estos PMOs en tres grandes grupos: El primero de ellos será PMOs quirales en los que se emplean por un lado como moléculas orgánicas unidades de binaftilo quiral y de ciclohexanodiamina. El primero de ellos exhibe una exaltación enantioselectiva de su fluorescencia en presencia de sustratos quirales indicando así la e existencia de un fenómeno de reconocimiento quiral. El segundo es un PMO que contiene unidades de un derivado de la ciclohexildiamina que se ha empleado como medio de reacción para el proceso fotoquímico di--metano del dibenzobarreleno. En estas condiciones se obtiene un grado de inducción asimétrica (25%) notable para haberse conseguido mediante una transformación fotoquímica y superior al conseguido usando sistemas análogos basados en zeolitas. El segundo grupo serán PMOs con una posible aplicación en fotoelectrónica, capaces de generar segundos armónicos o electroluminiscencia. Por un lado se ha preparado un PMO que contiene en su estructura un derivado del 4-(aminofenil)-2,6-difenilpirilio, que exhibe propiedades de óptica no-lineal generando el segundo armónico mediante excitación con un pulso de láser de 1064 mm. El material electroluminiscente contiene en su estructura un derivado del 9,10-diarilantraceno y emite luz de color amarillo habiendo alcanzado una eficacia de 0.5 cabdekas xm-2 y una eficiencias e conversión de energía eléctrica en luz de 3 lumenesxvatio-1. Finalmente se han preparado dos PMOs con propiedades adsorbentes. El primero de ellos, es un PMO que debido a la presencia de unidades de azobenceno en su estructura, cuando es irradiado con longitudes de onda adecuadas sufre isomerización E/Z o Z/E, la cual da lugar a cambios notables en su capacidad de adsorción como lo demuestra la diferente cantidad de oro coloidal que se adsorbe según predomine el lisómero E o el Z. El segundo material incorpora grupos urea en el PMO adsorbiendo hierro en disoluciones acuosas con una constante de reparto de 700mlxg-1 y una capacidad de adsorción de hierro de 0.19 mmolxg-1.

Autor: BOHOYO GIL DIEDO.
Año: 2005.
Universidad: EXTREMADURA [www.unex.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: En el presente trabajo de investigación, se han desarrollado nuevos métodos de determinación analítica de distintos antibióticos y principios activos de interés. La técnica de trabajo utilizada en todos los métodos analíticos es la luminiscencia molecular. Los compuestos determinados incluyen antibióticos de la familia de las tetraciclimas y sulfamidas, antiinflamatorias y anticancerígenos. Los métodos se han aplicado a muestra de interés alimentario (mieles), formulaciones zoosanitarias y fluidos biológicos (orina y suero). Se han utilizado distintas estratégicas instrumentales (fluorescencia, fotoinducida), químicas(fluorescencia sensibilizada, por lantáridos, medios micelares, ciclodextrimas) y quimiométricas (técnicas de derivadas, métodos de calibración multivariante), para el establecimiento de los métodos de análisis. Entre estos últimos podemos citar métodos de primer orden (mínimos cuadrados parciales (PLS)), segundo orden (Análisis en Factores Paralelos (PARAFAC), Descomposición Trilinear Alternada Autodescompuesta (SWATLD), Mínimos Cuadrados, Bilineares acopladas con bilinearización, Residual (BLLS, RBL), Mínimos Cuadrados Parciales N-dimensionales (N-PLS), Mínimos Cuadrados Parciales concatenados (Unfolded-PLS) y tercer orden (Análisis en Factores Paralelas (PARAFAO), Mínimos Cuadrados Trilineares (TLLS/RTL) y Mínimos Cuadrados Parciales Concatenados acoplados con Trilinearización Residual (Unfolded-PLS/RTL). Los métodos desarrollados presentan un indudable interés desde el punto de vista de su aplicación agroalimentaria y farmacológica, al permitir nuevos procedimientos de análisis sencillos y sensibles. Los métodos TLLS y unfolded-PLS/RTL, que permiten la utilización de datos de cuatro vías han sido desarrollados en este Trabajo dichos métodos suponen un avance importante dentro de los métodos guimiométricos de calibración multivariante y un campo de investigación de muy reciente actualidad y aún en desarrollo siendo los únicos métodos alternativos a PARAFAC para datos de cuatro vías.

Autor: NAVEA VÁZQUEZ SUSANA.
Año: 2005.
Universidad: BARCELONA [www.ub.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE QUÍMICA DE LA UNIVERSITAT DE BARCELONA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA (UNIVERSITAT DE BARCELONA).

Resumen: Esta Tesis Doctoral se ha orientado a la mejora de estrategias generales de seguimiento experimental y de tratamiento de los datos de proceso proteicos, a partir de los cuales se pueda conseguir una mejor interpretación de la información estructural y de los mecanismos que los controlan. Como ejemplo de procesos proteico, en este trabajo se han estudiado los procesos de plegamiento, desnaturalización y/o dimerización de diversas proteínas modelo (alfa-lactoalbúmina, alfa-apolactoalbúmina y beta-lactoglobulina). Estos procesos proteicos han sido inducidos mediante la variación de la temperatura, el pH o la concentración de agentes desnaturalizantes. Para el seguimiento de procesos proteicos se ha investigado el potencial de técnicas espectroscópicas, como la fluorescencia molecular, el dicroísmo circular, la espectroscopia de infrarrojo (medio y cercano) y la espectrometría de masas con ionización por electroespray (ESI-MS), técnicas que nos permiten observar cambios conformacionales a diferentes niveles de estructura proteica, así como el potencial de sus posibles acoplamientos. Los datos experimentales han sido analizados mediante el método de resolución de curvas por mínimos cuadrados alternados (MCR-ALS), que permite la resolución matemática de los perfiles de concentración y de los espectros puros de las conformaciones proteicas presentes en los procesos proteicos estudiados. La información contenida en estos perfiles ha permitido: * Modelar el mecanismo de plegamiento o desnaturalización de las proteínas. * Detectar especies intermediarias que no pueden ser aisladas experimentalmente. * Modelar las contribuciones de la proteína en presencia de señales interferentes que también evolucionan a lo largo del proceso bajo estudio. * Modelar especies oligoméricas. Paralelamente al estudio de procesos proteicos se ha estudiado la posibilidad del uso de técnicas espectroscópics sencillas (CD, IR o CD/IR) combinadas con herramientas quimiométricas para la clasificación y elucidación de la estructura secundaria de las proteínas. Para estos estudios se ha dispuesto de una base de datos de CD e IR de 50 proteínas, conocida como RaSP50. En la clasificación de proteínas se han utilizado diversos métodos de clasificación (supervisados o no supervisados). Los resultados obtenidos muestran que las proteínas que se clasifican a partir de medidas espectroscópicas son las proteínas de las clases alfa y beta. En cambio, las proteínas de clases intermedias no se agrupan al no presentar características espectroscópicas específicas. Para la elucidación de la estructura secundaria de los motivos ordenados (hélice alfa y hoja Beta) se utilizó el método de regresión por mínimos cuadrados con intervalos (iPLS). Este método nos permitía una selección de los intervalos espectrales de CD e IR más relacionados con los motivos de estructura secundaria hélice alfa y la hoja beta. A partir de estos intervalos espectrales seleccionados, se realizó la predicción de la fracción de hélice alfa y hoja beta.

Autor: BARCO CEPA MÓNICA.
Año: 2005.
Universidad: BARCELONA [www.ub.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA.

Resumen: Las microcistinas son una familia de heptapéptidos monocíclicos producidas por cianobacterias de los géneros Microcystis, Anabaena, Planktothrix (Oscillatoria) y Nostoc. En los últimos años ha aumentado considerablemente el interés en evaluar la presencia de estos compuestos en fuentes de abastecimiento de agua debido a su elevada toxicidad y, en consecuencia, al riesgo que suponen para la salud pública. Atendiendo a estas consideraciones, el presente estudio se ha planteado en base a dos objetivos principales. En primer lugar, nos propusimos establecer una metodología analítica para la identificación y cuantificación de microcistinas en muestras de agua y para ello, en una primera fase, evaluamos diversos métodos para la extracción de las microcistinas contenidas en el interior de las células de cianobacteria (microcistinta intracelulares) con el fin de proponer un método que permitiera el análisis de un amplio número de microcistinas intracelulares. Además, también nos planteamos desarrollar un método de análisis selectivo y sensible para la determinación e identificación de las diferentes microcistinas presentes en muestras de agua. Con esta finalidad, se optó por utilizar la cormatografía de líquidos acoplada a la espectrometría de masas. El segundo objetivo ha sido estudiar la presencia de microcistinas en diferentes aguas superficiales utilizadas habitualmente como fuentes para la obtención de agua potable con el fin de evaluar la calidad de las aguas y proporcionar información sobre la situación real en nuestro país. Finalmente, también nos hemos propuesto evaluar la efectividad de diferentes procesos de tratamiento de agua para la eliminación de microcistinas.

Autor: NOZAL MARTINEZ LEONOR.
Año: 2005.
Universidad: CÓRDOBA [www.uco.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: El objetivo general de esta Memoria ha sido contribuir al desarrollo de nuevas estrategias analíticas para mejorar el potencial analítico de la Electroforesis Capilar como técnica de separación. Se intentan poner a punto métodos analíticos de bajo coste, de respuesta rápida y de alta precisión. Mediante la incorporación en línea de diversos sistemas a equipos comerciales de Electroforesis Capilar se pretenden alcanzar un alto grado de automatización y robustez en los métodos analíticos propuestos. Se han abordado los siguientes aspectos: * Acoplamiento de sistemas continuos de tratamiento de muestras a equipos comerciales de Electroforesis Capilar para automatizar nuevas metodologías analíticas. * Desarrollo de una nueva modalidad electroforética basada en la formación de agregados micelares en medios no acuosos. * Acoplamiento de membrana líquidas soportadas y fibras huecas a equipos comerciales de Electroforesis Capilar para la introducción directa de la muestra sin tratamiento previo. Los resultados obtenidos en las investigaciones que aparecen recogidas en esta Memoria permiten extraer las siguientes conclusiones generales. 1,- En relación a los métodos basados en las separaciones electroforéticas en medios acuosos. 1.1,- Se ha desarrollado una metodología nueva, rápida y fiable que permite efectuar el cribado en las muestras de acuerdo a su contenido en penicilina. La metodología propuesta nos permite conocer la forma química de administración. 1.2,- Se ha desarrollado y aplicado un método para la determinación tetraciclinas en muestras ambientales, aguas de río. El método se basa en un sistema de preconcentración en flujo basado en la extracción en fase sólida (SPE) directamente acoplado a un equipo comercial de CE . 2,- En relación a los métodos electroforéticos realizados en medios no acuosos o microemulsionados. 2.1,- Se ha demostrado la eficacia del uso de fases pseudoestacionarias en medios no acuosos para aumentar la resolución electroforética. En concreto se ha propuesto por primera vez el uso de agregados neutros de tensioactivos como fase pseudoestacionaria. El potencial analítico de estos sistemas se ha demostrado para el análisis de tetraciclinas en muestras de agua de río. 2.2,- Se ha demostrado la posibilidad de utilizar disolventes orgánicos altamente volátiles, como hexano, en la disolución electroforética una vez sea estabilizado y dispersado con el tensioactivo. La microemulsión de hexano ha permitido aumentar la resolución electroforética consiguiéndose la separación y cuantificación simultánea de tres familias de antibióticos diferentes. 3,- En relación a uso de membranas líquidas soportadas y/o fibras huecas acopladas en el propio equipo comercial de CE. 3.1,- Se han descrito por primera vez sistemas integrados de tratamiento de muestra basado en sistemas de extracción en fase líquida, que permiten efectuar las etapas de purificación y preconcentración en el propio equipo electroforético comercial sin la intervención del analista. 3.2,- Se ha desarrollado en un sistema de microextracción el fase líquida que insertado en el propio vial del equipo electroforético permite extraer selectivamente los analitos de interés. El sistema se ha diseñado de forma que durante el proceso de extracción un electrodo positivo es introducido en la disolución aceptora. El sistema ha permitido analizar directamente el contenido en nitroimizadoles de homogeneizados de tejido de hígado de cerdo sin ningún tratamiento previo. 3.3,- Se ha insertado (in-line) una unidad de microextracción en fase líquida en el propio capilar electroforético. Concretamente ha permitido determinar antiinflamatorios no esteroideos directamente en muestras de orina.

Autor: RODRÍGUEZ GARCÍA JUAN CARLOS.
Año: 2005.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA [www.usc.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA.

Resumen: En los últimos años la contaminación medioambiental se ha convertido en uno de los principales problemas de los países industrializados y medir su alcance en determinadas zonas supone un reto para la comunidad científica, debido a las dificultades inherentes al muestreo. Una de las estrategias seguidas es la de evaluarla de forma indirecta mediante diversos indicadores que reflejan fielmente el alcance de la polución en un área concreta. Uno de estos posibles indicadores es la miel que fue utilizada en las últimas décadas para monitorizar diversos pesticidas, radionucleótidos y metales pesados en el medioambiente. La cuantificación de los metales pesados presentes en la miel es una tarea difícil debido a las bajas concentraciones en que se encuentran, lo que hace necesario desarrollar métodos con un bajo límite de detección utilizando técnicas muy sensibles. En el presente trabajo se llevó a cabo un estudio sobre el posible uso de la miel como bioindicador, según su contenido metálico. Fue necesario para ello desarrollar métodos de determinación mediante Espectrometría de Absorción Atómica con Atomización Electrotérmica (ETAAS), técnica suficientemente sensible para permitir la determinación de metales minoritarios como cadmio, plomo, níquel, cromo y cobre en mieles gallegas, obteniendo así información sobre la influencia antropogénica en estamatriz. Además, mediante Espectrometría de Emisión Atómica con Fuente de Plasma Acoplado Inductivamente (ICP-AES) se cuantificaron metales mayoritarios (hierro, manganeso, magnesio, calcio, potasio, sodio, litio y cinc), que complementaron la información obtenida anteriormente. Una vez realizada la determinación del contenido metálico de un gran número de muestras de mieles de la comunidad Autónoma de Galicia fue necesario emplear técnicas estadísticas quimiométricas. Éstas son técnicas que permiten procesar la información y alcanzar las conclusiones oportunas según la hipótesis departida. Mediante el uso de técnicas de clasificación se pudieron agrupar las mieles según su contenido metálico en dos grupos: mieles procedentes de zonas rurales no imputadas, y mieles procedentes de oznas industriales y urbanas impactadas. Aplicando la técnica de reconocimiento de modelos basada en las redes neuronales multicapa, se pudieron clasificar correctamente las muestras con un margen de error inferior al 10% en estos dos grupos. La conclusión a la que se llegó en el presente trabajo fue que se desarrollaron 17 metodologías para realizar el análisis de metales minoritarios en mieles por ETAAS. Se realizó con los métodos más adecuados la determinación del contenido de cadmio, plomo, cobre, níquel y cromo de las mismas, así como la cuantificación de los metales mayoritarios. Se concluyó tras realizara un estudio multivariante que existe una base robusta para emplear la miel como bioindicador en Galicia en función de su contenido metálico.

Autor: González Rodríguez Manuel Juan.
Año: 2005.
Universidad: ALMERÍA [www.ual.es].
Centro de lectura: F.Ciencias Experimentales.
Centro de realización: Departamento de Química Analítica.

Resumen: El uso de plaguicidas es esencial en el control de plagas en los cultivos hortícolas. La elevada aplicación de los mismos en la agricultura, tanto intensiva como extensiva, origina la contaminación de los ecosistemas y pone en peligro la salud de las personas. Para la protección de la salud de los consumidores muchos países han establecido directivas legales para controlar sus niveles en los alimentos, a través de los niveles máximos de residuos (LMRs). En este contexto, el control de residuos de plaguicidas en vegetales es actualmente un objetivo prioritario a fin de evaluar la calidad de las frutas y hortalizas para evitar alteraciones en la salud humana. Esta situación ha llevado a la UE a incluir la seguridad alimentaría entre sus prioridades políticas. Es importante sobre todo mejorar las normas de calidad y reforzar los sistemas de control sobre toda la cadena alimentaría, desde la granja o el campo de cultivo hasta el consumidor. La UE se ha marcado como objetivo alcanzar un justo equilibrio entre una producción agrícola competitiva y el respeto a la naturaleza y el medio ambiente. El proceso de integración se basa en la introducción de medidas para la protección del medio ambiente en los diferentes campos de actuación comunitaria y lleva consigo la firme resolución de alcanzar la coherencia entre la política ambiental y la agrícola. Por lo tanto, el desarrollo de metodologías analíticas fiables y seguras, que permitan controles medio ambientales y alimentarios, son una necesidad en la sociedad actual. La cromatografía de gases (GC) acoplada a espectrometría de masas en tándem (MS/MS) se considera la principal técnica usada para el análisis de residuos de plaguicidas, debido al poder de separación de la GC, con la sensibilidad, selectividad y capacidad de identificación de la MS en tándem. GC-MS/MS en combinación con los métodos multirresiduo (MRM) son una de las estrategias más adecuadas y utilizadas en los laboratorios de análisis de residuos de plaguicidas, permitiendo el control y la cuantificación de un elevado número de analitos, a niveles inferiores a los LMRs establecidos. Actualmente, se utilizan un gran número de materias activas de diferentes familias: organoclorados, organofosforados, carbamatos, tiocarbamatos, piretroides, fenilureas, triazinas, triazoles, nitroanilinas, imidas, ect. En consecuencia se encuentran una gran variedad de analitos de diferentes características (polaridad, estabilidad térmica, volatilidad, etc.) las cuales son de gran interés a la hora de abordar su determinación. Los MRM deben tener capacidad para dar respuesta analítica a compuestos de diferentes familias y por tanto de diferentes propiedades. La GC es la técnica más utilizada en los MRM por su gran capacidad de separación, adecuada para el análisis de compuestos volátiles y semivolátiles. En la actualidad, una de las tendencias de la GC es el aumento de la velocidad de análisis, debido a las repercusiones económicas que ello conlleva. En esta Memoria se presentan dos alternativas para el desarrollo de metodologías rápidas de análisis: el desarrollo de métodos rápidos mediante GC de Baja Presión (LP-GC) y el desarrollo de métodos de criba mediante el empleo de MS de tipo triple cuadrupolo (QqQ-MS)

Autor: RODRÍGUEZ BENCOMO JUAN JOSE.
Año: 2005.
Universidad: LA LAGUNA [www.ull.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE QUÍMICAS.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA.

Resumen: Se estudia el contenido en precursores de aroma y en aromas libres en vinos elaborados con las variedades Malvasía, Listán Blanco, Gual y Marmajuelo y se realiza una clasificación en cada variedad según su importancia organoleptica

Autor: GIMÉNEZ IBÁÑEZ DIEGO.
Año: 2005.
Universidad: BURGOS [www.ubu.es].
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: El trabajo se enmarca en el ámbito de Quimiometría y, como todo buen método, explora y explota las posibilidades que ofrece la calibración multivariante y multivía para obtener información útil a partir de las señales obtenidas de la moderna instrumentación analítica que proporciona una gran cantidad de medidas de alta calidad. En particular, las señales experimentales usadas en este trabajo son señales espectroscópicas (de absorción molecular y de fluorescencia) y en ambos caso se concluye que el uso del calibrado multivariante o multivía permite obviar la necesidad de buscar medidas completamente selectivas y específicas. De hecho, el uso de procedimientos rápidos, económicos y con buena capacidad de detección como es la fluorescencia de excitación-emisión resultan ser muy eficientes para el análisis sistemático sin complejos pretratamientos de la muestra, pero con un calibrado multivariante o (y) multivía. En el marco de las determinaciones sistemáticas (laboratorios de referencia y control) la calidad de una determinación analítica está normalizada. Los organismos internacionales (como la ISO, IUPAC, FDA, etc.) así como las instituciones públicas con capacidad para establecer normativa legal sobre sustancias tóxicas o peligrosas para la salud o el medio ambiente han ido desarrollando una metodología para evaluar los métodos analíticos. Es el caso de la Decisión de la Comisión de 12 de agosto de 2002 de la Unión Europea relativa al funcionamiento delos métodos analíticos y la interpretación de los resultados, por la que se aplica la Directiva 96/23/CE del Consejo de la UE que regula los residuos de medicamentos veterinarios en los alimentos de origen animal. En este contexto normativo, se ha generalizado los conceptos de capacidad de detección y sensibilidad analítica cuando se usa un calibrado multivariante/multivía y se ha analizado el impacto de la propiedad de segundo orden sobre estas figuras de mérito. Se ha explorado también el efecto sobre las determinaciones analíticas de incluir diversas fuentes de variabilidad habituales en las medidas (analista, tiempo, sustancias no calibradas presentes en la muestra problema, etc.). Todo ello ha llevado a establecer criterios prácticos de un funcionamiento que optimizan la utilización de la propiedad de segundo orden para lograr la máxima calidad en la determinación analítica.