MOLEKULARBIOLOGIE VON MIKROORGANISMEN

Autor: GUISANDE ÁLVAREZ JOSÉ ANTONIO.
Jahr: 2001.
Universität: VIGO [www.uvigo.es].
Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIAS DE VIGO.
Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIAS DE VIGO.

Inhaltsangabe: Spanien ist der größte Hersteller von Muscheln Europas, die sich die meisten dieser Tätigkeit in Galizien. Intensive Landwirtschaft produziert eine Erhöhung der Gefahr des Ausbruchs von Infektionskrankheiten, wodurch die Notwendigkeit zur Überwachung und Kontrolle sowohl auf die Umwelt und die eigene wachsenden Muscheln. Die Ziele der Studie sind die Ermittlung polifásica Bakterien im Zusammenhang mit dem Anbau von Muscheln, die Auswahl der phänotypische Tests Unterschiede für ihre Charakterisierung und Gestaltung von Sonden olognonucleótidos spezifischen damit seine schnelle Identifizierung. Insgesamt wurden 488 Stämme isoliert von Wasser, Phytoplankton, Samen, Larven und Zucht von Muscheln und Austern in Galizien und 51 Stämme der Referenz wurden phenotypically zeichnet sich durch numerische Taxonomie mit 92 Tests physiologischen, morphologischen und biochemischen. Unterschiedliche Arten der Gattung Vibrio wurden hauptsächlich aus Proben von Muscheln, Austern und Wasser Anbau, während Pseudomonas und Pesudoalteromonas wurden Geschlecht am häufigsten isoliert von Proben von Phytoplankton. Dieses Papier schlägt vor, eine Reihe von phänotypische Tests für die voraussichtliche Identifizierung der wichtigen Gruppen identifiziert bakterielle. Aufgrund der schnellen Identifizierung, die diese Tests und wird sehr nützlich für die Kontrolle der Qualität von Muscheln, Kläranlagen oder industriellen Mitarbeiter in der hygienischen und sanitären Kontrolle. Es wurden insgesamt 71 Isolate fakultativ anaerobe Vertreter der fenones durch numerische Taxonomie waren mit ribotipado. Die Profile ribotípicos gewonnen wurden in 9 ribogrupos. Vertreter der einzelnen analysiert phylogenetisch durch Sequenzierung des Gens Codierung für ARNr 16S. Die Identifizierung polifásica erlaubt Isolation zum ersten Mal V.trasmaniensis, V.kanaloae, V.pormeroyi und V.neptunius aus anderen Kulturen und Muscheln, und auch die Gestaltung der spezifischen Oligonukleotide, die ihre schnellen Identifizierung.

Autor: RUIZ GARCÍA MONTSERRAT.
Jahr: 2003.
Universität: MIGUEL HERNÁNDEZ DE ELCHE [www.umh.es].
Ort der Lesung: MEDICINA.
Ort der Vorbereitung: UNIVERSIDAD MIGUEL HERNÁNDEZ.

Inhaltsangabe: Die Anwendung der molekularen Techniken für die Untersuchung von Tuberkulose ist ein Durchbruch im Verständnis dieser Krankheit. Techniken mehr utilziadas sind: RFLP von IS6110 (technische Standard der Auffassung, dass eine Folge Einfügung), und PCR basierenden Techniken (spoligotypius, VNTR yAFLP sehr nützlich als Hilfsmittel zur RFLP von IS6110). RFLP wird zur Verbesserung der Kenntnisse über die Epidemiologie der Tuberkulose in der Bevölkerung, Birne ist nicht in der Lage, anspruchsvolle Stämme mit weniger als 6 Kopien von IS6110, in diesen Fällen nützlich sein könnten Techniken auf der Grundlage PCR. Unsere Ziele sind: 1. - Verbesserung des Verständnisses der Epidemiologie von ABC auf dem Gebiet der Gesundheit Elche durch die Anwendung der Technik der Verweis IS6110 - RFLP. 2 - Bewerten Sie die Bedeutung und den Nutzen der AFLP Ergänzung IS6110 - RFLP und Anwendbarkeit für die Untersuchung von dieser Krankheit. 3 - Studieren passenden molekular-epidemiologische mit der klassischen Epidemiologie.

Autor: NADAL MATAMALA ANNA.
Jahr: 2003.
Universität: GIRONA [www.udg.es].
Ort der Lesung: CIENCIAS.
Ort der Vorbereitung: LAB. INVESTIGACIÓN DE MEDICINA INTERNA-HEPATOLOGIA DEL HOSPITAL DE LA VALL D'HEBRON.

Inhaltsangabe: Der Hepatitis C Virus (HCV) führt zu einer chronischen Hepatitis, die Auswirkungen auf mehr als 171 Millionen Menschen. Es handelt sich um eine RNA positiv Kette wird innerhalb der Familie Flaviviridae und wie die meisten von RNA Virus zeichnet sich durch eine hohe Mutation. Eine der wichtigsten biologischen Auswirkungen der hohen Mutation ist der Widerstand gegen die Behandlung. Wollte wie andere therapeutische Lösungen zur Bekämpfung von Viren, einschließlich des Einsatzes von ribozimas dirigidad direkt gegen die RNA Genom des Virus. Die ribonuclease P (Rnasa P) ist ein ribozina, die in allen Organismen, da sie das Enzym, die für die Reifung der prescursores der Transfer RNA. Es ist ein endonucleasa sehr spezifisch und unterscheidet sich von den anderen natürlichen ribozimas warum erkennt Elemente destructurales anstatt in der richtigen Reihenfolge. Die interessantesten auf der Grundlage der Therapie ist, dass es hat sich gezeigt, dass man ihre Aktivitäten auf dem Weg zu einer Anleitung RNA mit einer Folge von RNA, dass, wenn hybrida mit RNA Ziel, die hybride imitieren, die sekundäre Struktur des Substrat narural. Die letztendliche Ziel dieser Arbeit ist geschnitten, in vitro I'RNA HCV mit ribozima Rnasa S. Wir haben zwei Modelle der Rnasa P, Rnasa P menschlichen Führung durch externe Führer Sequenzen (EGS) ich RNA M1 der Rnasa P E.coli im Zusammenhang mit der Folge von den extremen 3 '(ribozima M1GS). Bevor Regie ribozima wir untersucht die Struktur und Variabilität in einer Region des Genoms des Virus, da sie beschrieben wurde, die Faktoren, die die Wirksamkeit der ribozima. Dieses Papier enthält Daten Zugänglichkeit und Variabilität einer Region, die internen genomo, die Region E2/NS2.Los Ergebnisse zeigten, dass in vitro wurde die Leitung sowohl Rnasa P menschlichen wie ribozima M1GS hatte HCV-RNA und schneiden sich in einem standardmäßigen Position als zugänglich . Eine Analyse von Mutationen deutet darauf hin, dass die Region ist variabel untersucht. Durch die Interaktion mit Sequenzen Leitfaden ist anfällig für Schwankungen im Ziel diese Mutationen beeinträchtigen könnte die Effizienz des Gerichts. Vor dieser Ergebnisse und im Fall von Ziel für eine therapeutische Strategie wäre die mehrere Ziele gleichzeitig angreifen. Auf der anderen Seite, zwei Schnitte wurden charakterisiert beobachtet auf der HCV Genom ausgebrütet, wenn mit diesem Auszug aus Rnasa P menschlichen Sequenzen in der Abwesenheit der Berufsberatung. Für carecterización haben verschiedene Techniken angewandt werden können, gliedert sich in direkten Methoden (RNA Fingerprinting) ich indirekten (inmunoprecipitación und wettbewerbsfähige Hemmung). Die Ergebnisse zeigen, dass Rnasa P menschlichen Enzyms ist verantwortlich für die spezifischen Kürzungen, die sich, auf der internen Ribosom Eintrag (IRES) und der andere in der Region Codierung strukturelle und nicht strukturelle. Die Rnasa P ist ein von den Metabolismus von tRNAs. Außerdem, während ein Virus ist sehr variabel, diese Strukturen müssen wichtig für das Virus, da es in allen Varianten natürlichen analysiert. Unabhängig von ihrer Rolle ist, die Präsenz von diesen Strukturen replantea erste therapeutische Strategie, weil die Ähnlichkeit mit der eltRNA macht sie anfällig für Angriffe Rnasa P direkt, ohne die Notwendigkeit für die Sequenzen Führer.

Autor: LLARENA FERNÁNDEZ MARTA.
Jahr: 2004.
Universität: PAÍS VASCO [www.ehu.es].
Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA.
Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA.

Inhaltsangabe: In Cyanobakterien Nitrat / Nitrit befördert werden, zu niedrigeren Zelle durch ein Förderband "ATP bindende Kassette (ABC) genannt NRT, bestehend aus vier Untereinheiten Protein: NrtA (Untereinheit periplásmica verantwortlich für die Bindung von Nitrat / Nitrit), NrtB (Untereinheit transmembranären) , NrtC und NrtD (Subunits von Nukleotid verbindlich). Die filamentöses Cyanobakterium, Thermo- und nicht zur Festsetzung Stickstoff, Phormidium laminosum worden identifiziert Gene nrtA, nrtB und nrtC, die Kodierung der ABC Transporter Nitrat / Nitrit, Teil operon nir, zusammen mit dem Gen mirA, die konsolidiert Nitrit Reduktase. Diese Studie hat das Gen nrtD nach mrtC Teil operon nir. Die Untereinheit NrtC Transporter Nitrat / Nitrit P.laminosum wurde gereinigt von Zellen einen Mangel an Stickstoff, und es hat sich gezeigt, dass hydrolysiert ATP in vitro in Abwesenheit von anderen Komponenten der Fördertechnik. Gene nrtC und nrtD wurden geklonten in Plasmid Ausdruck pQE - 9 und wurden in E.coli, Reinigung von Proteinen als Fusion in die Warteschlange histidinas. Wir haben charakterisiert Untereinheiten His6NrtC und His6NrtD für seine Fähigkeit, ein Katalysator für die Hydrolyse von ATP, im Hinblick auf ihre Spezifität für verschiedene Substrate und Inhibitoren Sensibilität zeigten, dass beide Proteine hydrolysiert ATP in vitro nicht. Darüber hinaus wird durch elctroforesis im Polyacrylamid Gele in nicht Denaturierung Bedingungen wurde festgestellt, Bildung homodímeros der NrtC, His6NrtC und His6NrtD. Die Bildung von homodímeros der His6NrtD auch getestet wurde durch Massenspektrometrie MALDI-TOF.

Autor: BONJOCH FORNOS XAVIER.
Jahr: 2004.
Universität: BARCELONA [www.ub.es].
Ort der Lesung: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE BIOLOGIA.

Inhaltsangabe: Die Gattung Bifidobacterium wurde vorgeschlagen, als Indikator für die Herkunft der fäkale Verunreinigungen, wie bestimmte Arten von Bifidobacterium Spp. Es ist nur in den Menschen und in anderen warmblütigen Tieren. Diese Mikroorganismen können verwendet werden, um eine Unterscheidung zwischen Mensch und Tier fäkale Verunreinigung. Diese sind in einer Konzentration zwischen 10 9 und 10 10 KBE / g Faeces. Darüber hinaus anaeroben ihrer Physiologie, ihre Nahrung komplexen Anforderungen und die Unfähigkeit zu vermehren und unter 30Â ° C sind unwahrscheinlich, spielen in der Mitte extraenterico. Das Ziel dieser Arbeit war die Optimierung dieser Techniken für die Erkennung und Quantifizierung von Bifidobacterium spp.en Proben von Abwasser. Der selektive Medien Analyse für den Nachweis von Bifidobacterium, Beerens, HBSA und BFM, Aufzählungen einige sehr ähnlich im Abwasser, die eine hohe Spezifität für den Nachweis von Bifidobakterien. Allerdings ist die mittlere Beerens und HBSA erholte sich deutlich eine Reihe gleich und höchste Bifidobakterien landwirtschaftlicher nicht die Mitte BFM. Die koloniale Hybridisierung mit der Sonde Bif erlaubt eine Bestätigung der Praxis Aufzählungen, die eine Korrektur für das Wachstum Bruchteil des Gebens keine spezifischen Mittel verwendet werden. Die durchschnittliche HBSA erlaubt die Berechnung des Verhältnisses bibidobacterias insgesamt Achtung bibidobacterias fermentierte Sorbitol / Y / T), wodurch eine Unterscheidung der Herkunft der fäkale Verunreinigung. Die Werte für dieses Verhältnis über 0,20 zeigen einen menschlichen Ursprung der Verschmutzung. Die Werte unter 0,20 deuten auf eine Verunreinigung von tierischen Ursprungs. Dieses Papier hat eine PCR für mehrere Arten B.adolescentis und B.dentium als ein ergänzendes Werkzeug zur Charakterisierung der molekularen Ursprung der fäkale Verunreinigungen im Wasser. Die Nachweisgrenze dieser Technik ist 10 3 CFU/100mL. Zur Quantifizierung dieser Art in der Umgebung der Durchführung einer quantitativen PCR für diese beiden Arten (als Indikator der menschlichen fäkale Verunreinigungen im Abwasser). Diese Technik bietet eine Nachweisgrenze von 10 4 UCF/100mL. Schließlich Studien wurden Inaktivierung von Bifidobacterium Gattung in der Fluss Wasser durch alle Techniken entwickelt, in der Diplomarbeit. Geschlecht Bifidobacterium ist möglicherweise ein guter Hinweis auf die Herkunft der jüngsten fäkale Verunreinigungen im Wasser. Aber seine geringe Persistenz in der Umwelt Wasser ist ein Nachteil, wenn fäkale Verunreinigung ist nicht neu.

Autor: CANTERO GONZÁLEZ SALAZAR LAURA.
Jahr: 2004.
Universität: POLITÉCNICA DE MADRID [www.upm.es].
Ort der Lesung: E.T.S. INGENIERÓS AGRONOMOS.
Ort der Vorbereitung: E.T.S. INGENIEROS AGRONOMOS.

Inhaltsangabe: Die Rhizosphäre ist der Bereich des Bodens geändert durch die Anwesenheit von Exudate und Pflanzenwurzeln. Als Ergebnis gibt es eine größere mikrobielle Aktivität in der Rest der Erde, und es ist in der Rhizosphäre, wo ist der Anfang einer Interaktion zwischen dem symbiotischen Bakterien Stickstoff - Festsetzung Rhizobium und die Wurzel der Hülsenfrüchte. % & / Forschung kurzem ergab, die Existenz von Systemen Autoinduktion ( "Quorum Sensing") in vielen Rhizobium, die eine wichtige Rolle in den frühen Phasen der Anerkennung und Kolonisierung der Rhizosphäre der Hülsenfrucht Host (Rodelas ua. 1999 ). Die Systeme sind Autoinduktion chemische interzelluläre Kommunikation Systeme, die bakteriellen Zellen erkennen, die Größe der Bevölkerung, in der sie sich befinden. Im besten Fall untersucht, die chemische Signale sind Moleküle acil - homoserian Lactone (AHLs), die durch ihre Struktur, die frei über Zellmembranen. Diese Moleküle werden synthetisiert auf niedrigem Niveau normalerweise als Mitautor inductoras oder Zusammenarbeit represoras Systeme Gen über einem Schwellenwert. Gerade aufgrund ihrer chemischen Struktur, die es ihnen ermöglicht zu geben und lassen Sie die Zellen, nur diese Schwelle erreicht wird für eine Zelle bestimmt, wenn eine ausreichende Zahl von Zellen ist in unmittelbarer Nähe mit dieser Zelle. Es handelt sich also um Detection Systeme für die Zelle Dichte, und hat seine Bedeutung in Prozessen, in denen die Bakterienpopulation Größe ist wichtig, da die Pathogenität, Leuchten, und so weiter. Das System besser bekannt in der rizobios ist Rhizobium leguminosarum bv.viciae A34 in Symbiose mit Erbsen, dank der Arbeit von Downie ua. (Siehe Überprüfung Wisniewski - Dyé Downie, 2002). Das Hauptziel dieser Arbeit basiert auf früheren Studien von Systemen Autoinduktion in diesem Stamm, und ist die Bestimmung der Art, die Zusammensetzung, Funktion und Regelung solcher Systeme in Autoinduktion Stämme von Rhizobium leguminosarum bv.viciae UPM791 und 3841. Spezifische Ziele in dieser Dissertation: 1 - Studie über die Produktion von Molekülen Signal Typ acil - homoserina Lactone (AHLs) Stämme UPM791 und 3841. Diese findet Techniken Dünnschichtchromatographie zu trennen und identifizieren, die einzelne Moleküle synthetisiert. 2 - Identifizierung und Beschreibung in beiden Stämme von den verschiedenen Systemen der Autoinduktion Gen für die Produktion von diesen Molekülen, sowie seine Lage im Genom. Diese findet Molekularbiologie Techniken (Projektabschlussberichte, Hybridisierung mit Sonden ..), damit die Charakterisierung dieser Systeme. 3, - Suche nach Genen und Proteinen, die durch die Systeme Autoinduktion. Diese Informationen werden in die Methoden der Trennung von Proteinen mit hochauflösenden zweidimensionalen Gele, die einen Vergleich der proteomas von verschiedenen Stämmen im Hinblick auf die Präsenz und das Fehlen von acil - homoserina Lactone (AHLs). Diese Proteine variieren ihren Ausdruck nicht identifiziert werden können, indem Fingerabdruck Peptid (Massenspektrometrie mit MALDI-TOF) und der Vergleich mit der Datenbank werden uns mit der Genomsequenz. 4 - Bestimmung der Rolle der Systeme in der Autoinduktion das Überleben und die Wettbewerbsfähigkeit der R.leguminosarum in der Rhizosphäre und auf der Oberfläche der Pflanze. Diese findet funktionelle Studien in Anwesenheit und Abwesenheit von AHLs erforderlich, um festzustellen, wie die Einhaltung der Wurzel, oder die Wirksamkeit in Symbiose in der frühen und späten Phasen der Interaktion mit der Pflanze.

Autor: LUQUE ALMAGRO VICTOR MANUEL.
Jahr: 2004.
Universität: CÓRDOBA [www.uco.es].
Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIAS.
Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIAS.

Inhaltsangabe: In Cordoba, Industrie joyera als Ergebnis ihrer Tätigkeit eine Verschwendung mit hohen Konzentrationen von Cyanid frei und komplexe cianuro - metálicos. Mit dem Ziel der Gestaltung eines biotechnologischen Prozess zur Beseitigung dieser toxischen Substanzen wurden isoliert aus dem Schlamm Guadalquivir, wie sie durch Cordova, ein Bakterium alcalófica der Lage, sich mit Zyanid in der alkalischen Bedingungen. Die Bakterien, die sich als Pseudomonas pseudoalcaligenes CECT5344, benutzen Zyanid Rückstand kostenlos oder Schmuck als Quelle von Stickstoff für Wachstum Aerobic. Der Weg der Zerstörung von Cyanid in diesem Bakterium durch cianhidrinas, während ihre Fähigkeit zu synthetisieren sideróforos ermöglicht Ihnen die Verwendung komplexer cianurados sehr stabil, wie die Ferrocyanidtest férrico.Una Angleichung Proteomik hat ergeben, dass P.pseudoalcaligenes CECT5344 Zyanid führt zu einem Protein, das könnte , Die in der Synthese von sideróforos (fosforribosilglicinamida formiltransferasa) Proteine, die beim Schutz vor oxidativem Stress (Alkyl- hidroperóxido Reduktase und eine DNA protein Art Ferritinwerte), ein regulatorisches Eiweiß Bedingungen, die in der Regel von Stickstoff Begrenzung (PII - 2) und ein Hitzeschockprotein . In P.pseudoalcaligenes CECT5344, Stoffwechsel Zyanat könnte, hängt von einer Förder- und Bikarbonat sind innerhalb von Katabolitrepression. Diese Arbeit stellt zum ersten Mal eine Verbindung zwischen den Stoffwechsel und die Zyanat Zyanid, sondern in einer mutierten Gen cynS deutet darauf hin, dass die Zyanat nicht esun Zwischenhändler in der Assimilierung gezwungen von Cyanid. So weit, S. Pseudoalcaligenes CECT5344 ist das erste Bakterium, dass abbaut beschrieben Zyanid auf der alkalischen pH-Wert und in der Abwesenheit von Glukose. Alle Eigenschaften, machen diese Bakterien eine perfekte Kandidat für die Verwendung in proceos Biotechnologie, als gezeigt wurde, mit destoxificacióm Rückstand von Schmuck in einem Bioreaktor und der Bau eines Biosensors von Zyanat.

Autor: MARÍN ALBERDI M. DOLORES.
Jahr: 2004.
Universität: AUTÓNOMA DE MADRID [www.uam.es].
Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIAS.
Ort der Vorbereitung: CENTRO DE BIOLOGÍA MOLECULAR SEVERO OCHOA.

Inhaltsangabe: Dieses Papier hat sich ein Stamm von Saccharomyces cerevisiae, industriellen Bäcker fähig amilolítica für die Aufnahme in die Genom Gen SWA 2 von Schwanniomyces Westler. Die neue Sorte enthält nur DNA aus Hefe und hat ein hohes Niveau der Nutzung von Stärke. Die Transformation der Hefe durchgeführt wurde durch einen Prozess der Integration Genomik führte allocus ILV2. Das Gen SWA 2 wird auf einer konstituierenden Projektträger im Rahmen des ADH 1. Er hat das Wachstum, und die Auslastung der Stärke der Gärung des neuen Belastung werden. Panaderia Tests gezeigt, dass es keine wesentlichen Verbesserungen bei der Nutzung des transformierten Stamm von S. Cerevisiae. Wir haben daher die coexpresión der amilasa SWA 2 mit anderen Aktivitäten amilolíticas. Zu diesem Zweck haben wir untersucht das System amilolítico von Hefe Phaffia rhodozyma, als eine mögliche Spender Aktivitäten amilolíticas. Hefe Phaffia rhodozyma wurde weit verbreitet in der Lebensmittelindustrie, weil sie das Pigment astaxantina. In diesem Papier, wir studierte das Wachstum der Hefe auf verschiedenen Substraten und analysiert Ihr System amilolítico. Es wurde gereinigt von diesem ein - glucosidasa extrazellulären Hefe mit Ionenaustausch Chromatographie. Das Molekulargewicht des gereinigten Protein ist 115 + -7% auf der Grundlage der Erkenntnisse der molekularen Filtration auf einer nicht Denaturierung. Die SDS-PAGE Gele fest, dass das Protein besteht aus zwei Untereinheiten von etwa 60 kDa jeder. Die Voraussetzungen für die maximale Aktivität 45Â ° C und pH 5,5. Das Enzym hat eine hohe Aktivität auf Maltose, maltotriosa und Oligosacchariden und nicht hidrolizalos Substraten, die durch Links zu (1,6). Die neue glucosidasa präsentiert Tätigkeit transglicosidasa und kann für die Synthese von Oligosacchariden mit einer Kapazität prebiotic. Wir haben festgestellt, die kinetische Konstanten des Enzyms auf verschiedenen Substraten. Um das Gen für glucosidasa beschrieben, die sie erzeugte ein genoteca von cDNA der Phaffia rhodozyma. Es war auch degenerierte Oligonukleotide konserviert Ausrichtung der verschiedenen Regionen ein - glucosidasas, zur Verstärkung der internen Abläufe mittels PCR Gen.

Autor: MARTIN MARCOS MARIA DEL PILAR.
Jahr: 2004.
Universität: SALAMANCA [www.usal.es].
Ort der Lesung: CENTRO DE INVESTIGACION DEL CANCER.
Ort der Vorbereitung: INSTITUTO DE MICROBIOLOGIA BIOQUIMICA.

Inhaltsangabe: Gcn4p ist eine transkriptionelle Aktivität von mindestens 539 Gene in Saccharomyces cerevisiae,. Die Expression von Genen, GCN4 geregelt ist traduccionalmente abhängig von der Verfügbarkeit von Aminosäuren, für eine "Wiederaufnahme der Übersetzung", das hängt von den vier Phasen des Lesens kurz in der Region führend mRNS - GCN4 und eine Reihe von positiven Effektoren ( GCN) und negative (KSR). Die genetische Charakterisierung einer mutierten selbständig gcd17 hat zu RPL33A als neue GCD Gen, dessen Produkt ist für die Bekämpfung traduccional von GCN4 im S. Cerevisiae. L33A ist ein Protein essentiell für die ribosomale Untereinheit 60S, es ist Teil einer Familie von hoch konserviert eukaryotischen Proteine, die in die Bindung an tRNAs. Die Punktmutation rpl33a - 1 bestimmt den Ersatz von Glycin an Position 76 durch ein Arginin, in einer Domäne des Proteins L33A hoch konserviert phylogenetisch. Ein Modell der dreidimensionalen Struktur der L33A sagt voraus, dass die G76 ist Teil einer starren äußeren Schleife, und dass die Mutation nicht verändert, die Faltung des Proteins. Mutationen ersetzen einige synthetische Abfälle in der gleichen Domain durch andere Rohstoffe haben die gleichen phänotypischen Folgen, die die spontane Mutation rpl33a - 1. Sowohl die Mutation rpl33a - 1 der Ersetzung RPL33A durch eine Null Allel, wodurch mehrere Mängel in der Verarbeitung der ribosomalen RNA und der Montage vor partículas 60S, wodurch ein ernsthafter Mangel an Untereinheit 60S reifen in der Zelle. Das Fehlen von Untereinheiten 60S Ursachen schwerwiegende Mängel in der Einleitung der Übersetzung der mRNA in der Regel Hefe, sondern bevorzugt die Übersetzung der mRNA - GCN4 im Besonderen. Der Mechanismus, durch den dieses Phänomen tritt in Mutanten gcd17 hat versucht zu interpretieren schlägt mehrere Modelle, die auf regulatorische traduccional von GCN4 und Integration von Daten, die in dieser Arbeit.

Autor: Busquets Martí Núria.
Jahr: 2005.
Universität: AUTÓNOMA DE BARCELONA [www.uab.es].
Ort der Lesung: Facultad de Ciencias.
Ort der Vorbereitung: Universidad Autónoma de Barcelona.

Inhaltsangabe: Frühere Studien in unserem Labor haben, zeichnen sich strukturell und phenotypically die bacteriófago SE1. Diese bacteriófago stellt eine hohe Frequenz Transduktion fähig infizieren S. Enterica und Serovar Enteritidis Serovar Typhimurium. Im Anschluss an diese Linie der Forschung, diese Arbeit wurde erhöht, um die genetische Beschreibung dieses bacteriófago und zu charakterisieren, die unterschiedlichen Rollen Phagen SE1 Staat lisogenia, wie die Umstellung lisogénica, Integration und ihren genetischen Schalter oder Regler. Die sequenciación Genom bacteriófago SE1, aus einer genoteca fágica und direkt am Fuß des Genoms hat gezeigt, dass hat eine Länge von 41941 vos, die sich in 67 ORF. Der Vergleich mit der GenBank Datenbank ergab, dass die Phagen, wie andere fagos lambdoides, ist ein Mosaik Ergebnis der genetischen Rekombination und transferéncias horizontale mit anderen Bakteriophagen. Die Reihenfolge erlaubt, die zeigen, dass der Mangel in der extremen carboxi Terminal periplasmátic des Proteins kodiert durch ein Gen Umwandlung lisogénica (GtrC) kann die Ursache für die Qualität der bacteriófago P22 wäre in der Lage zu infizieren eine Zelle lisógena von bacteriófago SE1. Des weiteren ist der vorliegende Arbeit wurde angesichts der Folgen der Betreiber in der Region, um sich mit den regulatorischen Proteinen cI der genetischen Schalter oder Regler. Durch Prozess verzögern elektrophoretische (EMSA) und footprinting definiert hat den Konsens Reihenfolge der Gründe für den Beitritt Betreiber Protein cI: AtAN3tTN3TATT. Auf der anderen Seite, análisi die Zusammensetzung der Einheit transkriptionelle Gen cI durch RT-PCR pirmitió fest, dass das Gen orf23 Teil davon. Das Protein Orf23 ernsthafte potenzielle regulatorische Mitglied der Superfamilie der ATPasas im Zusammenhang mit der Partition Genomik. Mutanten in diesem defektes Gen haben einen augmento der Induktion von lytic Zyklus in der Anwesenheit von Mitomycin C, was darauf hindeutet, dass dieses Protein kann ein Modulator des Proteins cI oder mit ihm interagieren konnte. Dies ist das erste Mal, dass ein Protein charakterisiert diese superfamília der ATPasas ein bacteriófago, ist integriert in das Genom der Gastgeber.

Autor: VICENTE GARCÍA RUBÉN.
Jahr: 2005.
Universität: BARCELONA [www.ub.es].
Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE BIOLOGÍA UNIVESIDAD DE BARCELONA.

Inhaltsangabe: Diese Dissertation präsentiert die Studien durchgeführt Kv1.3, einer der Kalium Kanäle, die in Makrophagen und deren Regulierung auf verschiedene Reize in der Zellproliferation und Aktivierung. Insbesondere der erste Beitrag, ist beigefügt beschreibt, wie Kalium Kanäle Kv1.3, Kv1.5 und Kir2.1 sind verantwortlich für den Fluss der Ausgangsspannung abhängigen und Berichtigung für die Einreise zu erkennen in diesen Zellen. Dieses Papier zeigt, wie Kv1.3 und Kir2.1 sind stark durch den Wachstumsfaktor MCSF als Faktoren Anstiftung zur Aktivierung von Makrophagen als ellipopolisacárido und Zytokin TNFa, elektrophysiologische Veränderungen in der Strömung Kv. Diese Studien zeigen, wie nicht nur Kv1.3 ist in den Prozess der Verbreitung und Aktivierung, sondern erfordert, dass ihre Teilnahme an diesen Prozessen. Zusätzlich zu dieser Regelung (! Ion beigefügt eine Stelle, die zeigt, dass diese Modulation ist ein allgemeiner Mechanismus von Bedeutung sein könnten in verschiedenen patologias systemische, in denen diese Vermittler sind wie Kachexie, Sepsis oder chronischen Entzündungen. Ferner, der zweite Absatz in diesem Dissertation konzentriert sich auf die Veränderungen in der elektrophysiologischen präsentiert Kv in der Proliferation und Aktivierung. Behandelt die Möglichkeit, die aufgrund von Änderungen in der Zusammensetzung von komplexen funcional.En diesem Zusammenhang ist ein Beitrag, die beschreibt, die die Anwesenheit von Makrophagen in allen Untereinheiten Kv ¡3 studierte Mindestens Kv ¡34. Proliferation induziert MCSF Erhöhung der Ausdruck aller Untereinheiten Assistenten während der Aktivierung verschiedener Reize, LPS und TNFa, regulieren die Expression dieser Proteine di anders. Kinetische Parameter der Abfluss von Kalium auf diese Untereinheiten handeln, wie auch die ständige Aktivierung , Inaktivierung und deactivación, wurden analysiert, in einem Versuch, molekulare Veränderungen mit Änderungen electrofisiológfeos im wuchernden und aktiviert Makrophagen. Eine weitere Angleichung Analyse der elektrophysiologischen Veränderungen in aktiviert Makrophagen kommt als Veröffentlichung in Vorbereitung, in der beschreibt, wie Kv1 .5 ist in der Lage, Mitarbeiter mit Kv1.3 zu einem komplexen funktionalen Generator Abflüsse von Kalium. Dieses Papier Studien zeigen, Vereinigung von konfokaler Mikroskopie und Elektronik zusammen mit pharmakologischen Studien bestätigen, dass die Bildung von komplexen heteromérico. Veränderungen in der elektrophysiologischen Parameter der Strömung, abhängig von der Zusammensetzung Der komplexen diskutiert wurden auf verschiedene Modelle der heterologen Expression. Schließlich wird vorgeschlagen, dass die Veränderungen in der Takt, die in diesem Fluss auf verschiedene Reize, wie zB TNFa, könnte aufgrund von Veränderungen im estequiometría der Untereinheiten, die das komplexe Generator von Den Abfluss von Kalium in Makrophagen. Subzelluläre Lage und der sie umgebenden Membran Proteine sind entscheidend in den Rollen. In der dritten Absatz dieses mémoria präsentiert Studien über die Zellbiologie der komplexen von Kv1.3, sowohl das Verkehrsaufkommen als Membran Lokalisation. War das Studium der Einfluss verschiedener Untereinheiten, die in der komplexen über die Biologie der Zelle, unter Berücksichtigung der Einfluss der Untereinheit Kv1.5, dass bereits in Makrophagen, und ist durch die neuesten Studien Anfang der Internalisierung des Kanals Durch vesículas beschichtet clatrina.

Autor: NICOLAS MOLINA FRANCISCO ESTEBAN.
Jahr: 2005.
Universität: MURCIA [www.um.es].
Ort der Lesung: FACULTAD DE BIOLOGIA.
Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE BIOLOGIA.

Inhaltsangabe: Mucor circinelloides ist ein filamentöses Pilz, die eine weite Verbreitung, die im Boden, Gülle und andere organische Substrate zersetzen. Es gehört zu der Klasse Zygomycota zeichnet sich durch eine Paarung Fusion gametangios, ein Myzel allgemein cenocítico (in einigen Arten zeigen einige Septen), und produzieren Sporen aflageladas und unbeweglich. Die RNA-mediated Genstillegung ist ein komplexer Mechanismus der Genregulation, der in der Welt eucariota (eine bemerkenswerte Ausnahme ist S. cerevisie), was dazu führt, dass die Unterdrückung der Genexpression durch kleine RNA Moleküle, die die Zerstörung der mRNA, hemmen Übersetzung Transkription oder hemmen. Ursprünglich als molekulare Mechanismus der Abwehr gegen Viren und Transposons, in den letzten Jahren hat es sich gezeigt, dass dieser Mechanismus auch bei der Regelung komplexer Prozesse wie die Bildung von heterocromatina, Entwicklung und Physiologie der Organismen. Zusätzlich zu erkennen, daß die Welt von bisher unbekannten Genregulation, RNA-mediated Genstillegung ist zu einem wichtigen Instrument bei der Untersuchung der Rolle von Genen, die auch für die Entwicklung neuer Disziplinen wie funktionelle Genomik Das übergeordnete Ziel dieser Arbeit ist Wurden die molekularen Charakterisierung des Mechanismus der Genstillegung in der Zeit nach dem Pilz M. Circinelloides: M. Circinelloides stellt einen Mechanismus Transgen hervorgerufene Genstillegung, was sich durch die Einführung von Kopien von exogenen Gens Geld carB. Das Schweigen Phänotyp ist instabil und reversibel, und ist eine direkte Folge einer starken Verringerung der reifen mRNS Gen carB. Dieser Rückgang ist nicht auf eine niedrigere Transkription dieses Gens bei Menschen zum Schweigen, sondern auf die Zerstörung der mRNA reifen weist darauf hin, dass die beobachteten Genstillegung ist nach transcripcional.El Schweigen Gen in M. Circinelloides ist nicht mit Methylierung der transgenen Sequenzen. Allerdings ist es im Zusammenhang mit dem Vorhandensein von einer hohen Anzahl von Kopien der Transgen, die weiterhin als episomas Strukturen multiméricas. In M. Circinelloides, das Transgen hervorgerufene Genstillegung steht im Zusammenhang mit dem Vorhandensein von Molekülen Antisense siRNA und Sinn. Es gibt zwei verschiedene Klassen von siRNA Antisense, 21 und 25 ng, die unterschiedlich akkumuliert während der vegetativen Wachstum der Pilze. Das Schweigen auf M. Circinelloides ist im Zusammenhang mit der Verstärkung Prozess, der in der siRNA Moleküle Seite der beiden Klassen Größe, die den Sequenzen befindet sich hinter dem Molekül induziert. Beide Arten von siRNA werden in erster Linie aus der Region 3 'mRNS Ziel. Es hat geklonten das Gen dicer1 M. Circinelloides diese Zahl mit einem Protein Domains strukturelle Merkmal des Enzyms Dicer-Enzym. Der Ausdruck dieses Gens tritt in der gesamten vegetativen Wachstum und führt zu mehreren transkribiert, die sich auf dem Gelände des polyadenylation und / oder Verfolgung eines seiner Alternative Introns. Es ist nicht möglich zu wissen, die Funktionalität von alternativen Transkripten. Die funktionale Analyse von null Mutanten für die Gentherapie dicer1 deutet darauf hin, dass das Gen ist nicht erforderlich, in dem Mechanismus der Schweigen und schlägt vor, die Existenz von mindestens einem Gen Dicer weiter. Es ist nicht auszuschließen, dass das Gen dicer1 zu einer redundanten Rolle in dem Mechanismus der Genstillegung. Der Phänotyp von null Mutanten für dicer1 deutet darauf hin, dass dieses Gen ist an der mizellaren Wachstum und Morphologie der Hyphen, was auf die Beteiligung von dicer1 im endogenen regulatorischen Prozesse durch die miRNAs

Autor: CATANESE GAETANO.
Jahr: 2005.
Universität: CÓRDOBA [www.uco.es].
Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIAS.
Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIAS.

Inhaltsangabe: Die melva (Auxis thazard und Auxis Rochei) ist eine Art von Thunfisch mit äußerster Wichtigkeit, in der andalusischen Fischereiindustrie, und insbesondere in der Konservenindustrie. Trotz ihrer wirtschaftlichen Bedeutung, die bisher noch nicht durchgeführt detaillierte Studie zur Ermittlung der Grad der genetischen Variabilität in natürlichen Populationen, noch hat sich kein besonderes System für die Authentifizierung der Produkte verarbeitet melva. In diesem Zusammenhang ist der Mangel an Daten über diese molekularen Arten gehindert hat zweifellos der Bewältigung dieser Probleme. Deshalb gibt es in dieser Arbeit wurde isoliert und charakterisiert molekulare Marker mitochondrialer und nuklearer Waffen, haben die genetischen Eigenschaften der natürlichen Populationen von A.rochei und hat ein System entwickelt, der Authentifizierung von Konserven. Sie haben analysiert Kopien von A.rochei aus dem westlichen Mittelmeer, den Atlantik und den Pazifik östlichen Osten. Der Arten Auxis thazard wurden Kopien aus dem westlichen Indischen Ozean. Als mitochondriale Marker, es hat sequenziert der mitogenomas der A.rochei (Atlantik und Pazifik) und A.thazard sowie Thunfisch T.thynnus, T.alalunga, Elalletteratus und K.pelamis. Die gesamte Größe zwischen 16501 und 16503 vos für A.rochei und 16506 vos für A.thazard. Vergleicht man die Sequenzen gefunden wurden zwischen 761 und 773 Positionen polymorph. Der Inhalt und die Organisation nach dem Muster der Wirbeltiere. Die phylogenetische Analyse ergab, die Existenz von zwei mitochondriale Linien (mitotipo I und II) an A.roche. Darüber hinaus gab es eine monophyletic Herkunft A.rochei und A.thazard im Hinblick auf andere Arten von Thunfisch. Für die Studie Bevölkerung A.rochei analysiert mitochondriale Marker (Cytochrom Kontrolle durch die Region) und der nuklearen (Abstandhalter ribosomalen ITS - 1 und Sein - 2 und Mikrosatelliten). Beide Marken offenbart das Fehlen der genetischen Differenzierung zwischen Populationen Atlantik und Mittelmeer. Im Gegensatz dazu, die Bevölkerung Pazifik zeigte eine klare Trennung für 2 oben und für die drei Marken (cytb Fst zwischen 0025-0031, ITS - 1 und ITS - 2 Fst zwischen 0083-0087, Mikrosatelliten Fste zwischen 0015-0027). Biologische Daten und Isolation durch die Entfernung dieser Ergebnisse erklären. Die Unterscheidung von Proben Pazifik die Daten von anderen Autoren basiert auf morphologischen Merkmalen und merísticas, auf der Existenz von Unterarten A.rochei eudorax in diesem pazifischen Region. Schließlich hat sie entwickelt und optimiert ein System von mehreren MS - PCR Produkte für die Authentifizierung erhalten melva. Dieses System basiert auf der gleichzeitigen Verstärkung von drei verschiedenen Regionen der mitochondrialen: Cytochrom b spezifische A.rochei, ATPase 6, spezifische A.thazard, ARNr 12S, wie eine positive Kontrolle Verstärkung. Die Prüfungen auf Konserven Produkte auf dem Markt haben gezeigt, die Besonderheiten und die Zuverlässigkeit des Systems für die Authentifizierung von melva.

Autor: SANTIAGO MORA RAQUEL MARIA.
Jahr: 2005.
Universität: CÓRDOBA [www.uco.es].
Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIAS.
Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIAS.

Inhaltsangabe: Der weit verbreitete Einsatz von Herbiziden in der Landwirtschaft hat dazu geführt, dass die aktuelle Studie über die Auswirkungen der Produkte auf die Umwelt haben, wie auch die Erforschung der Prozesse der Degradation Erwerb von großer Bedeutung. Simazin ist ein Herbizid triazínico, war weit verbreitet in einer Vielzahl von Pflanzen, auch in den Olivenhain. In dieser Arbeit wurde quantifiziert durch PLC, Simazin Restwert Boden der Olivenhaine in der Provinz Cordoba, nur eine der Proben festgestellt wurde eine Konzentration von Simazin mehr als 0,1 ppm. Es wurde festgestellt, die Kinetik der Mineralisierung von Simazin in zwei Etagen Olivenhain. Wir haben es geschafft zu isolieren Mikroorganismen der Lage, mit der wachsenden Simazin als einzige Quelle von Kohlenstoff und Stickstoff. Unter den Mikroorganismen isoliert, das sind jene, die das Herbizid degradieren und isolierte Mikroorganismen, Bakterien, die sich auf ein Konsortium zu degradieren Simazin. Diese Mikroorganismen, Bakterien und Pilze wurden oder zumindest in der Lage zu bestimmen, die taxonomische Gruppe, zu der sie gehören, von molekularen Techniken. Unter den Mikroorganismen sind Xanthomonas, vs Variovarax vs Pseudothantomonas mexikanischen Acidovarax vs und Methylopila capsulata. Drei Routen beschrieben worden Abbau von Simazin in verschiedenen Mikroorganismen entdeckt wurden und isoliert die codierende Gene für Enzyme, die für diese Degradierung.

Autor: PAZ GONZALEZ BEGOÑA.
Jahr: 2005.
Universität: LEÓN [www.unileon.es].
Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS Y AMBIENTALES.
Ort der Vorbereitung: UNIVERSIDAD DE LOEN.

Inhaltsangabe: Ziele dieser Arbeit zu Hause angeboten, der Untersuchung waren die folgenden: 1. Ein Programm der Entwicklung der klassischen Auswahl stützt sich auf die Chance zur Veränderung. 2. CLONACIÓN von Genen von B. trispora an der BIOSÍNTESIS der CAROTENO-, und / oder einen Ausdruck konstituierende. 3. Entwicklung von A-Protokoll zu transformieren B. trispora. 4. Expression von Genen BIOSINTÉTICOS-CAROTENO in CIRCINELLOIDES M. und B. trispora. 5. Wirkung des Lichts auf die Produktion in CAROTENOIDES M. und B. trispora CIRCINELLOIDES. IDENTIFICADO werden, CLONADO und die Gene CARACTERIZADO RECORD, CARB und CARRA. ORF gen des Datensatzes (1561 PB) besitzt 4 INTRONES, CODIFICA A G-ACTINA und ihre Region ist die Förderung der funktionellen E. coli und A. chrysogenum. Gene und die CARB CARRA ist LIGADOS Eine Region, in der 4,5 kb des Genoms B. trispora und ist TRANSCRIBEN im Sinne OPUESTOS unter der Kontrolle von A bi-direktional Promoter von 611 pb. Gen des ORF CARB (1955 PB) besitzt 2 INTRONES und CODIFICA A PROTEÍNA mit der Aktivität FITOENO-Dehydrogenase. Gen des ORF CARRA (1894 PB) besitzt 1 INTRÓN und CODIFICA A PROTEÍNA mit der Aktivität FITOENO SINTASA / LICOPENO CICLASA. Gen der CARB ECA SUPERPRODUCTORA? CAROTENO B. trispora-F-744-Mutation der eigenen A1791C, führt dazu, dass der Ersatz von AMINOÁCIDO werden in diesem B. trispora NRRL 2457 in der Position 528 durch dieses arg in F-744 (S528R). Gen der CARRA ECA F-744-Mutation der eigenen T497C führt dazu, dass der Ersatz von AMINOÁCIDO PRO in NRRL 2457 in der Position 143 durch die in dieser F-744 (P143S)). Die Gene der CARB und CARRA B. trispora sind in der funktionellen M. CIRCINELLOIDES. Gen der CARB B. trispora Ergänzung der Mangel an Aktivität FITOENO Dehydrogenase der ECA M. CIRCINELLOIDES MS23 GEN CARRA und Ergänzung der Mangel an den Aktivitäten FITOENO SINTASA und LICOPENO CICLASA der ECA M. CIRCINELLOIDES MS8. Ausdruck von GEN CARRA B. trispora und M. CIRCINELLOIDES MS12 erhöht Produktion G-CAROTENO und der Vermittler BIOSINTÉTICOS G-CAROTENO, LICOPENO und NEUROSPORENO. Das Vorhandensein von Licht steigt die Produktion in CAROTENOIDES M. CIRCINELLOIDES, dass während dieser Produktion sinkt in den beiden Kulturen der einzelnen B. trispora als gemischt. Produktion von Kulturpflanzen in gemischten auf CAROTENOIDES B. trispora NETAMENTE überlegen ist erhältlich bei der gleichen Kulturen der einzelnen Stämme. Die Transkription von Genen und der CARB CARRA B. trispora induziert sind im Hinblick auf die Dunkelheit, das Gegenteil von dem, was passiert, und M. CIRCINELLOIDES.

Autor: Blanco Calvo Moises.
Jahr: 2005.
Universität: A CORUÑA [www.udc.es].
Ort der Lesung: Facultad de Ciencias.
Ort der Vorbereitung: Facultad de Ciencias.

Inhaltsangabe: Die Blutverträglichkeit ist ein Molekül von Interesse aus der Sicht des Energie-Stoffwechsel, da zusätzlich zu intervenieren und die Gefangennahme und den Transport von Sauerstoff (unerlässlich, um den Prozess der Erlangung von Energie über die Atmung) auch als Teil einer funktionellen Proteine der Transportkette Mail Und mitochondrialen oxidativen Phosphorylierung. Überdies ist es im Fall von Hefe, als Lambda-Sonde in die Zelle und ist beteiligt an der Regulierung der Gene abhängig von der Verfügbarkeit von Sauerstoff. Daher ist die Blutverträglichkeit eines Moleküls ist von entscheidender Bedeutung, dass angesichts der Bedeutung, könnte es helfen, enträtseln, warum die Unterschiede zwischen den metabolischen Kluyveomyces lactis und Hefe Saccharomyces cerevisiae und wir bieten Werkzeuge zur Verbesserung der landwirtschaftlichen Biotechnologie. Das Gen HEM13 S. cerevisiae Hypoxic ist, dass ein Gen kodiert für das Enzym coproporfirinógeno-Oxidase (CPO), die katalysiert die sechste Schritt der Route Biosynthese Gruppe Blutverträglichkeit. Sowohl die Gen-und Protein erzeugt es die wichtigsten Punkte sind in der Regulation der Synthese von Blutverträglichkeit und S. Cerevisiae. Auf der einen Seite, die PCO ist das erste Enzym der Strecke benötigte Sauerstoff als Substrat in ihrer Reaktion, so dass das Gesicht eines Sturzes in Sauerstoff kann zu einem Engpass für die Generation der Blutverträglichkeit (daher gibt es eine direkte Beziehung zwischen Blutverträglichkeit Ebenen und Sauerstoff) Auf der anderen Seite, ist ein Gen ScHEM13 hypoxisch, das heißt steigt Ausdruck im hypoxisch Bedingungen. In der Verordnung ScHEM13 interveniert weitere Blutverträglichkeit als Initiator eines regulatorischen Kaskade führt zur Unterdrückung Aerobic oder desrepresión hypoxisch-Gen. Diese These hat das Gen isoliert KlHEM13 aus einer genoteca K. Lactis und hat eine Testversion Ergänzung einer mutierten Schem13 und stellt fest, dass KlHEM13 kodiert für ein PCO, so ähnlich wie die S. Cerevisiae, dass beide sind funktional austauschbar. An der Wurzel des Vorstehenden hat eine Vorhersage des tertiären Struktur für die PCO K. Lactis Zeichnung auf der letzten Kristallisation und Strukturaufklärung des PCO S. Cerevisaie, mit der eine enge Ähnlichkeit zwischen den beiden. Er studierte auch die Regulierung der KlHEM13 als Reaktion auf Sauerstoff durch Maßnahmen der Tätigkeit? - Und galactosidasa Norden. KlHEM13 ist geregelt in einer ähnlichen Art und Weise, wie es funktioniert ScHEM13, Sprechen, so weit in Hypoxie. Allerdings KlHEM13 zu folgen scheint ein Muster der Verordnung andere als die oben beschrieben ScHEM13, denn während die letzteren wird unterdrückt, um einen Faktor Rox1 aerobically, KlHEM13 nicht betroffen KlRox1. Es zeigt die schwache Ausprägung des Aerobic KlHEM13 in einer mutierten Stamm in der Gen-Codierung KlROX1 Repressor mit dem gleichen Namen. Auch scheint es, dass KlHEM13 nicht reglementiert ist von Faktoren und S. cerevisiae loa Schauspiel auf Gen-Expression hipóxicos. Wir haben die Punkte über die Einleitung der Transkription für KlHEM13 und zwei der intensivsten erfüllt 3Â'del ersten ATG (ATG1) pautra des ORF und 5Â'de ein zweites internes ATG (ATG2). Sie fanden auch andere Punkte schwächer 5Â'del ATG1 unter ihnen ein Gegenwart nur in der Lage hipóxicas. Die Analyse der Transkription von RT-PCR gezeigt, dass es einige, die haben beide ATGs und Fusionen zu lacZ mit beiden ATGs deuten darauf hin, dass es wahrscheinlich zu generieren beiden Proteine (auch wenn nicht bekannt ist, ob dies der Fall ist und eine natürliche Art und Weise) auch erhalten hat, Eine Null-Mutante von KlHEM13 nicht machbar und das Fehlen von Vorprodukten und Blutverträglichkeit, wurden geprüft und gemessen, ihre Tätigkeit PCO sowie deren Belastung isogénica von wilden Pflanzen und Aerobic-Zelle in der löslichen Fraktion (kostenlos Membranen und Mitochondrien) Null-Mutante von KlHEM13 wie erwartet , Keine Aktivität PCO. Aber die Belastung, wenn sie mit dem, was zumindest in der Erprobung, die PCO K. Lactis cytosolische ist als sein Pendant S. Cerevisiae. Schließlich wurde von Arrays, die transkriptionelle Regulierung in Reaktion auf die Verfügbarkeit von Sauerstoff eine Reihe von Genen, K. Lactis Kollegen in den qu 8 und S. 4 e1 cerevisiae kodieren Transkriptionsfaktoren, die Gen-Regulation in Abhängigkeit von Sauerstoff. Die Gene untersucht wurden: HAP1, ROX1, MOT3 Und MGA2. In K. Lactis keines dieser Gene zeigen nach sechs Stunden in Hypoxie, zeigen Veränderungen in der Expression in Bezug auf Aerobic. Innerhalb dieser Studie analysiert auch das Verhalten von Genen in der biosynthetische Route der Blutverträglichkeit K. Lactis noch studiert: KlHEM2, KlHEM3, KlHEM4, KlHEM14, KlHEM15. KlHEM14 zeigen eine leichte Induktion nach sechs Stunden in Hypoxie, nichts Vergleichbares auf die Induktion von fast drei mal so zeigt ScHEM14.

Autor: CORDON PRECIADO VIOLETA.
Jahr: 2005.
Universität: SALAMANCA [www.usal.es].
Ort der Lesung: CENTRO DE INVESTIGACION DEL CANCER.
Ort der Vorbereitung: CENTRO DE INVESTIGACION DEL CANCER.

Inhaltsangabe: Um die Integrität des Genoms, eukaryotischen Zellen Mechanismen entwickelt haben, Bewältigungsstrategien, bekannt als "Checkpoints", die Koordination der Reparatur von DNA-Schäden und die Progression des Zellzyklus. In der Hefe Saccharomyces cerevisiae die Kinase Rad53 ist ein zentraler Regulator dieser Mechanismen. Im Gegenzug ist ein Protein essentiell für ein normales Wachstum von Zellen. Durch die Kennzeichnung carboxi-terminalen Ende des Proteins Rad53 mit epítopo HAT haben wir eine Mutante Stamm zeichnet sich durch eine Reduzierung der Ebenen dieser Kinase. Die Hefezellen mit dem Allel rad53HA sind scheinbar normal, da sie wirtschaftlich sind und keine offensichtlichen Mängel in Zellwachstum. Allerdings, wenn die Behandlung mit genotoxischen Agenzien zeigen eine ungleichmäßige Empfindlichkeit gegenüber Wildtyp, was darauf hindeutet, sie sind defectivas bei der Aktivierung von einigen Checkpoints. Bei der Aufdeckung dieser Zellen zur Behandlung mit Hydroxyharnstoff, dass ein Medikament hemmt die Synthese von DNA, Lebensfähigkeit verlieren aufgrund eines Zusammenbruchs der Replikation Gabeln im Gange, wie durch zweidimensionale Elektrophorese von DNA. Im Gegensatz dazu, wenn sie subletalen Dosen von Alkylanz Methyl-metano-sulfonato, Zellen rad53HA sind toleranter als die wilde Art der Droge, die Einführung eines höheren Wachstums in seiner Anwesenheit könnte erläutert werden, dass durch eine vorzeitige Abschaltung der Checkpoint. Die Fusion Protein ist funktionell, wie durch Tests autofosforilación vor Ort. Darüber hinaus Überexpression kehrt ihre Befindlichkeiten zu genotoxischen Agenzien bei der Belastung gekennzeichnet, was darauf hinweist, dass die Mängel, sollten eingeführt werden, um die niedrigen basalen Ebenen der Kinase. Diese Arbeit zeigt, dass die Modulation der Aktivierung von Rad53 ist entscheidend für das reibungslose Funktionieren des Checkpoints und eine reduzierte Aktivierung von der gleichen Sache, im Gegensatz zu bestimmten genotoxischen Agenzien, erhöhte Zelle Überleben in der Anwesenheit von DNA-Schäden.

Autor: GODIO FERNÁNDEZ RAMIRO PEDRO.
Jahr: 2006.
Universität: LEÓN [www.unileon.es].
Ort der Lesung: FACU.DE CIEN. BIOL. Y AMBIENTALES.
Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS Y AMBIENTALES.

Inhaltsangabe: Es wurde entwickelt und optimiert für eine effektive Strategie für die Umstellung auf H. Sublateritium, vermittelt durch A. Tumefaciens. Es hat gezeigt, wie wichtig die Sequenzen mit Projektträgern gehören, zumindest in der gleichen Branche (Basidiomycotina), um effizient Arten der Gattung Grünblättriger. Es wurde eine starke Korrelation zwischen den pH-Wert der Kultur mittel-und Säure-Produktion clavárico Kultur in den verschiedenen Medien getestet. Es wurde auch der Einfluss verschiedener Faktoren auf die Säureproduktion clavárico, einschließlich der Zugabe von Kupfer-, Anbau-oder Agitation Supplementierung mit Öl. Wurden die in das Genom des Stammes HS898 H. Sublateritium zwei Gene encoding wichtige Enzyme in der Biosynthese von Sterolen und Säure clavárico, erg1 und osc1; dieser Gene wurden kloniert und sequenziert. Das Gen erg1 von 1659 bp, kodiert für ein Protein aus 461 Aminosäuren mit einer molekularen Masse von 49079 kDa abgezogen. Das Protein kodiert durch dieses Gen, zeigt die Regionen der konserviert FAD verbindliche Merkmale einiger monooxigenasas. Die Überexpression des Gens erg1, führt erhöhte Säure-Produktion clavárico commensurate mit der Erhöhung der Gen-Dosis erhöht, sondern auch das Wachstum der Myzel. Die Dämpfung von Gen erg1 erzeugt eine typische Phänotyp abhängig Ergosterol (Transformanden nur wachsen, wenn die Nährlösung hinzugefügt Ergosterol), was darauf hindeutet, dass das Gen erg1 möglicherweise in den Stoffwechsel der primären H. Sublateritium, und auch in den sekundären Stoffwechsel, wie sie Reduziert die Produktion von Säure clavárico. Das Gen osc1 von 2840 bp, kodiert für ein Protein aus 721 Aminosäuren mit einer molekularen Masse von 82388 kDa abgezogen. Das Protein kodiert durch dieses Gen, eingeführt konservierten Regionen "QW" charakteristisch für die Mehrheit der terpenociclasas. Die Überexpression des Gens osc1, führt erhöhte Säure-Produktion clavárico commensurate mit der Erhöhung der Gen-Dosis, ohne die das Wachstum von Myzel. Die Störung des Gens osc1 Ursachen Unterbrechungen in der Synthese von Säure clavárico. Zudem ist das Wachstum der mutierten Gens osc1 unterbrochen ist vergleichbar mit der elterlichen Belastung und erfordern keine Supplementierung mit Ergosterol für die normale Entwicklung, und dies deutet darauf hin, dass das Gen nur osc1 engagiert sich in den Stoffwechsel von sekundären H. Sublateritium, insbesondere Auf der Straße biosintética acid clavárico. Die Dämpfung von Gen osc1, entweder durch die Strategie der Antisense-RNA oder die Strategie der RNA-Interferenz bestätigt die Ergebnisse, wenn das Gen osc1. Voraussetzungen waren H. Sublateritium Mutante superproductores als subproductores acid clavárico. Die Analyse der Mutante ergab, dass einige der Gene, die in sobreexpresados Mutanten superproductores, stehen in direktem Zusammenhang mit der Biosynthese von Sterolen.

Autor: GONZALO ASENSIO JESUS ANGUEL.
Jahr: 2006.
Universität: ZARAGOZA [www.unizar.es].
Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIAS.
Ort der Vorbereitung: DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA.

Inhaltsangabe: Tuberkulose ist eine der Haupttodesursachen durch Infektionskrankheiten, die mehr als zwei Millionen Menschen sterben jedes Jahr, und das Drittel der Bevölkerung HIV-infiziert ist mit Mycobacterium tuberculosis. Obwohl Tuberkulose ist eine gut behandelbare Krankheit mit Antibiotika und kann durch Impfung verhindert werden, die Entstehung resistenter Stämme zu Anti-Tuberkulose-Medikamente und die Variable schützenden Wirksamkeit der BCG-Impfstoff gegen pulmonale Manifestationen der Krankheit aus dem Sieg über die Tuberkulose nicht erreicht werden. Die Suche nach einem wirksamen Impfstoff weiter, gemeinsame Initiativen der europäischen und amerikanischen Labors möglich gemacht haben, den Bau von effektiven Impfstoff-Kandidaten. In der Tat, der Ausgangspunkt für diese Arbeit wurde das Gen phoP, deren Rolle in der Virulenz von M. Tuberkulose wurde zuvor studierte in unserem Labor in Zusammenarbeit mit dem Institut Pasteur in Paris. Eine Mutante phoP gebaut strain Klinik MT103 bietet einen besseren Schutz gegen Tuberkulose, dass die aktuelle BCG-Impfstoff in verschiedenen Tiermodellen, Ergebnisse deuten darauf hin, dass diese Mutante als ein viel versprechender Kandidat für Live-Impfstoff. Allerdings, auch wenn die virulente Phänotyp der Mutante phoP wurde auch untersucht, die molekularen Mechanismen, die dazu führen, dass die Dämpfung nicht gekennzeichnet sind. Daher wurde diese These konzentrierte sich auf die Erforschung der Funktion der Gene entschlüsseln phoP und seine Rolle in der Virulenz von Tuberkulose. PhoP ist ein Transkriptions-Regulator, die Teil des Zwei-Komponenten-System (2CS) PhoPR M. Tuberkulose. Die 2CSs Median transcripcionales Veränderungen in der Reaktion auf bestimmte Reize und sind an der Regulation der Virulenz in pathogenen Bakterien. Zur Charakterisierung der Rolle von gentechnisch System PhoPR, haben wir durch delección Mutante in dem Gen phoP oder beide Gene phoPR in drei verschiedenen Stämmen von M. Tuberkulose. Die biochemische Analyse dieser Mutanten zeigen, dass PhoP regelt und koordiniert positiv Synthese von Lipiden an der Virulenz von M. Tuberkulose. Diese Ergebnisse zusätzlich in eine gute Erklärung für die attenuierten Phänotyp der Mutante phoP repräsentieren eines der ersten experimentellen Beweise für die transkriptionelle Regulierung des Fettstoffwechsels und Tuberkulose. Diese Arbeit hat sich auch auf das Verständnis der Wirkungsweise des Systems PhoPR. Die Tatsache, dass einige dieser 2CSs autorregulan seinen eigenen Worten führte uns zur Untersuchung der Wechselwirkung zwischen PhoP mit eigenem Promotor und Transkription des Gens phoP. Unsere Ergebnisse zeigen, dass die mRNA des phoP synthetisiert wird von drei Standorten über die Einleitung der Transkription (TL) suggeriert eine komplexe Regelung ihres Ausdrucks. Wir haben auch gezeigt, dass sich seine eigene PhoP Promoter. Die Region umfasst PhoP Gewerkschaft der TL's dieses Gens. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass PhoPR ist eine selbstregulierende System und macht uns davon ausgehen, dass die Expression von Genen durch PhoP hängt stark davon ab, ihre eigenen Ausdruck. Eines der ehrgeizigsten Ziele dieser Studie war die Identifikation von Genen reguliert PhoP in einem Versuch zu verstehen, die transkriptionelle Dämpfung Ebene der mutierten Stamm. Zur Identifizierung des regulón der PhoP haben zwei Studien: die Identifizierung transcripcionales Profiling mit DNA-Microarrays zu studieren Muster der Rede durch zweidimensionale Elektrophorese von Proteinen. Beide Experimente zeigten eine gute Korrelation, der Stärke unserer Studie. Die Ergebnisse deuten darauf hin, dass PhoP könnte, die an der Regulation der kontrollierten transcripcionales drei Routen: Der Umbau der Zelle Umschlag; metabolische Anpassung an den Mangel an Sauerstoff und die Reaktion auf Hitze Schock. Diese Reaktionen sind im Zusammenhang mit transcripcionales Lifestyle intrazelluläre M. Tuberkulose, und sind mit 8 s 4c5 oder Virulenz, also in der Mutante phoP Änderung könnte dazu führen, dass Dämpfung. Obwohl attenuierten Phänotyp der mutierten Stamm sollte vor allem auf die Mutation im Gen phoP, eigene Polymorphismen elterliche Belastung MT103 beigetragen haben könnten, um die phänotypischen Merkmale und Eigenschaften des Impfstoffs Mutante phoP, daher setzen wir Polymorphismen zu identifizieren, die Belastungen MT103 . Die Ergebnisse unter Verwendung von DNA-Microarrays zeigen den Verlust einiger Gene in den Stamm MT103 im Vergleich zu den Belastungen von Labor H37Rv.

Autor: REVERTER BRANCHAT GEMMA.
Jahr: 2006.
Universität: LLEIDA [www.udl.es].
Ort der Lesung: FACULTAD DE MEDICINA UDL.
Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUT UDL.