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FUNKTIONELLE ANALYSE UND AUSDRUCK VON ENTEROCINA ALS - 48 IM ENTEROCOCCUS FAECALIS UND ÜBERTRAGUNG AUF ANDERE MILCHSÄUREBAKTERIENAutor: FERNÁNDEZ RODRÍGUEZ MATILDE. Jahr: 2003. Universität: GRANADA. Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIAS. Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIAS. Inhaltsangabe: Die enterocina AS-48 ist ein Rundweg von Peptid enterococcus faecalis, der zeigt ein breites Spektrum von Maßnahmen gegen viele pathogene Bakterien über Lebensmittel-und alterantes von ihnen. Dieser Bericht wurde abgeschlossen Charakterisierung der genetischen Region, die für den Charakter AS-48 geklonten in pAM401, bestehend aus Gene als 48ABCC1DD1EFGH-, die wie-48A ist die strukturelle Gen. Die Charakterisierung der Produkte, die mit den letzten vier Gene, obtenidamediante phänotypische Analyse von Mutanten mit Einfügung transposoón Tn5 und Anwendungs-Software für hohe Zuverlässigkeit, hat ergeben, dass Gene als 48EFGH-Kodifizierung eines Förder-Art-ABC, die in der Selbstverwaltung versus AS-48. In diesem Transportsystem hat die Rolle der As-48G, die verbindlich sind Domains der ATP-und Protein-As-48EH präsentieren vier Domains Expansion Membran, während die Protein-48F Wie könnte die Erhöhung der Wirksamkeit der Fördertechnik. Die Analyse der Transkription in der Region-48 von Northern Blot mit den Ergebnissen aus Studien in Ergänzung trans-Gene-wie 48ABC in pAM36e durchgeführt, führte zu dem Schluss, dass die Region-48 ist in zwei operons konstitutiven Ausdruck (As-48ABC und-48C1DD1EFGH), obwohl die derzeitige interne Promotoren reguliert die Expression von Genen wie 48BC-und-48EFGH. Die Region-48 wurde in Bakterien kloniert Eigenvektoren von ácidoláctico (plL253-81 und pEM76-81), aber keines der neuen Konstruktion hat sich ebenso wie die Wirksamkeit der pAM401-81 in der Meinungsäußerung und der Widerstand gegen den AS-48. Die Übertragung der Region-48 Stämme von Biotech-Interesse wurde erfolgreich in Lactococcus, Lactobacillus und E.faecium. Die ersten beiden zeigte nur eine schwache Ausprägung der Widerstand, während alle Stämme von E.faecium verarbeitet das Zeichen zum Ausdruck bringen, die ähnliche Wirksamkeit der wilden Stamm,. Faecalis S-48. Dieses Ergebnis ist von großem Interesse für sie isoliert von Lebensmitteln, Mangel an Virulenzdeterminanten, die in naher Zukunft kann in fermentierten Lebensmitteln zu erhalten, die umgesetzt werden, ohne Schwierigkeiten. ANALYSE DER ZUSAMMENSETZUNG DER REGULÓN LEXA IN DER DOMÄNE BAKTERIUM.Autor: JARA RAMÍREZ MÓNICA. Jahr: 2004. Universität: AUTÓNOMA DE BARCELONA. Ort der Lesung: CIENCIAS. Ort der Vorbereitung: ESCUELA DE POSTGRADO.
Inhaltsangabe: Frühere Studien in unserem Labor haben analysiert den Inhalt der regulón LexA von gamma Proteobacteria (Erill ua., 2003). Entlang der gleichen Linie, die derzeitige Arbeit beschäftigt sich mit der Beschreibung der regulón anderen Familien Domain Bakterien: Geobacter sulfurreducens, wie ein Vertreter der Gruppe Desulfuromonas, die zu den Delta Zweig der Proteobacteria: Fusobacterium nucleatum, Stamm Fusobacteria; Mikroorganismen, die Alpha Klasse der Proteobacteria und gram-positive Bakterien. Zunächst verpflichtete sie sich identifizieren Boxen Gewerkschaft zu LexA von Mikroorganismen G.sulfurreducens und F.nucleatum, was geklont und secuenciaron ihren jeweiligen Gene lexA. Nach sobreexpresar und reinigen die jeweiligen Proteine wurden zu testen Verzögerung elektrophoretische und footprinting, bei denen zwei Gründe für die Bindung an LexA: GGTT N2 C N4 G N3 PKA G.sulfurreducens und TGTATC N12 TACA zu F.nucleatum. Weiter haben wir studiert die Verteilung von "in silico" die Gründe beschrieben, in jedem Genom. In beiden Fällen sind die einzelnen Gens, das ein Teil der lexA, die sich unter der Kontrolle des Proteins LexA der Moosbeeren dinB. In G.sulfurreducens Gen recA, neben der nicht im Besitz der Grund LexA und nicht beitreten, wie ein Protein, einen konstitutiven Ausdruck im Vergleich zu den Schäden in der DNA. Im Gegensatz dazu ist das Gen recA der F.nucleatum ist induzierbaren von DNA-Läsionen aber es ist nicht geregelt direkt von lexA. Sobald diese beiden beschriebenen Mikroorganismen an die Studie von Mikroorganismen, die der Alfa Klasse Proteobacteria und gram-positive Bakterien. Da die Boxen LexA dieser Mikroorganismen bereits wussten, war, um diese Gründe in ihren Genomen. Nach der Analyse der Ergebnisse biocomputaiconales, in jedem Fall war die Validierung dieser Ergebnisse experimentell Wahl eines Mikroorganismen als Vertreter. Im Falle der Proteobacteria Alfa wurde gewählt, um Sinorhizobium meliloti, und als Gramm - positiv Bacillus subtilis und wurden gewählt. In beiden Mikroorganismen experimentellen Daten haben fiel vollständig in die "in silico". Die Menge der Ergebnisse hat gezeigt, dass es eine große Variabilität in der Inhalt der regulón LexA in der Dominion Bakterien. Dies legt nahe, die Existenz einer wichtigen horizontalen Gentransfer in der Domäne Bakterien in dem, was auf diesem regulón. GENETIK UND MOLEKULARBIOLOGIE DER ANÄMIE VON FANCONI.Autor: CALLÉN MORÉU ELSA. Jahr: 2004. Universität: AUTÓNOMA DE BARCELONA. Ort der Lesung: ESCUELA DE POSTGRADO. Ort der Vorbereitung: ESCUELA DE POSTGRADO. Inhaltsangabe: Fanconi-Anämie (FA) ist eine autosomal rezessive genetische Störung in der Natur und zeichnen sich durch einen schweren Fehler der Geburt, Knochenmark Scheitern und eine hohe Bereitschaft zum Erwerb von soliden Tumoren und akuten myeloischen Leukämie. Die FA Zellen, besitzen eine hohe chromosomale Instabilität sowohl spontane und induzierte Agenten Induktivitäten Links Crusaders. Weitere Features sind die zellulären Reaktion auf oxidativen Schäden, Störungen in der zellulären Zyklus, hohe Apoptose Regulierung der Transkription und armen telomeric Dysfunktion. So weit, so beschrieben wurde, dass es 12 Gene, kann dazu führen, dass verschiedene Krankheiten, aber nicht alle von ihnen wurden geklont und charakterisiert. Unter ihnen NAFEC ist das am häufigsten mutierte gefunden in der Bevölkerung und präsentiert ein breites Spektrum von Mutationen, große Streichungen einer wichtigen. Ein tieferes Verständnis der Biologie dieser Krankheit wird es uns ermöglichen, sich einen umfassenderen Blick auf die Reparatur adaño in der DNA als Reaktion auf die spezifischen Agenzien sowie ein besseres Verständnis der molekularen Interaktionen zwischen den verschiedenen genetischen Syndromen und haben eine unbestreitbare Diagnose Und therapeutischen Wert. In dieser Diplomarbeit wurden die vier wichtigsten Ziele und allgemeinen, die sind: Um potenzielle Verbindungen zwischen den característics hämatologischen Krankheiten und einige der zellulären Eigenschaften, wie zB eine Verkürzung telomérico und numerischen oder strukturellen Chromosomenanomalien. * Characterize genetisch zu den Menschen, die von Fanconi-Anämie Spanisch. * Untersuchung der Rolle der FA Route in der Biologie und Wartung telomérico. * Um die Molekularbiologie des FA Route in der Antwort auf genomischer Schäden. Mit der Studien durchgeführt, es wurde eine Verkürzung telomérico beschleunigte sich in Fanconi Patienten begleitet durch eine Erhöhung der Zahl der Fragmente extrateloméricos und Fusionen, auch wenn dies über Fusionen Terminals erfolgt unabhängig von der Anwesenheit von TRF2 im telómero. Darüber hinaus ist diese Kürzung nicht in direktem Zusammenhang mit der Schwere der Erkrankung an Blut. Wenn es sich jedoch mit dem Blut Krankheit Häufigkeit der spontanen Chromosom Bruch. Darüber hinaus wurde abschließend untersucht und charakterisiert die Bevölkerung Fanconi Spanisch, wobei der Schwerpunkt auf die Träger der Mutationen in dem Gen NAFEC und die Zigeuner Bevölkerung, besitzen häufiger Träger der Mutationen in NAFEC weltweit. Ein wichtiger Tipp aus diesen Studien ist die Einbeziehung der Geschichte H2AX innerhalb der Fanconi Strecke in Reaktion auf die irradicación mit UV - C. IDENTIFIZIERUNG DER KANDIDAT FÜR DAS AMT DES GENS NSV ÜBERTRAGENEN RESISTENCIAL VIRUS FLECKEN NEKROTISCHEN MELONE (MNSV) DURCH KLONEN POSICONALAutor: MORALES GERMAN MÓNICA. Jahr: 2004. Universität: AUTÓNOMA DE BARCELONA. Ort der Lesung: ESCOLA DE POSTGRAU. Ort der Vorbereitung: ESCUELA DE POSTGRADO. Inhaltsangabe: Die Melone (Cucumis melo L.) ist ein Gemüse von großer wirtschaftlicher Bedeutung, in denen es viele genetische Verbesserung. Eines der Ziele dieser Programme ist die Einbeziehung der genetischen Resistenz gegenüber Krankheitserregern, die zu erheblichen wirtschaftlichen Verlusten in dieser Kultur. Das Virus der nekrotischen Flecken der Melone (MNSV) ist ein Carmovirus endemisch, der Familie der Cucurbits gewachsen unter Gewächshaus. Der einzige Widerstand beschrieben bisher im Vergleich zu MNSV wird von der rezessiven Gen nsv Melone. Dieser Widerstand wirksam ist im Vergleich zu der überwiegenden Mehrheit der bekannten Isolate des Virus. Wenig ist bekannt über den Mechanismus der Widerstand aus der Interaktion MNSV / nsv. So, die Untersuchung von dieser Widerstand durch das Klonen des Gens nsv wird es uns ermöglichen, Verständnis für die Strategie, die von dem Virus zu infizieren der Pflanze und diese Informationen benutzt werden kann, um mit diesem Virus. Wenig ist bekannt über den Mechanismus der Widerstand aus der Interaktion MNSV / nsv. So, die Untersuchung von dieser Widerstand durch das Klonen des Gens nsv wird es uns ermöglichen, Verständnis für die Strategie, die von dem Virus zu infizieren und der Anlage dieser Informationen verwendet werden können für eine bessere Kontrolle des Virus. Das Hauptziel dieser Arbeit ist das Klonen des Gens nsv durch Positionsattribut Klonen Strategie. Erstens, das Gen nsv wurde abgebildet in der Gruppe ligamiento 11 der genetischen Karte von Melone, die in unserem Labor. Dann, eine Bevölkerung von 69 LDHs wurde verwendet, um Marker AFLPs und RADPs im Zusammenhang mit der Gentherapie nsv durch die Strategie der "Bullked Segregant Analysis." Zwei hochauflösende genetische Karten wurden in zwei verschiedenen Bevölkerungsgruppen, ein F2 von 408 Personen Und BC1 von 2727 Personen. Die Marken flanqueantes und dass cosegregaban mit dem ersten Gen Bevölkerung LDHs wurden in Marker PCr werden leicht in diesen großen Bevölkerungsgruppen. Darüber hinaus wurden zwei genebanks der BACs Melone, aus einer Genotyp resistent MNSV und ein anderes von einem Thema, erörtert wurden mit diesen Markern und verdient eine physikalische Karte der Region des Gens nsv durch chromosomale Fuß. Die Bevölkerung F2 Marker flanqueantes Gen 1L3 und 5B3sp6 getrennt waren, um 4 recombinants, während die Bevölkerung BC1 Marker flanqueantes wurden 1L3 und 10O16sp6 bis 20 die Zahl der recombinants zwischen ihnen. Die räumliche Distanz Beziehung / genetischen Abstand in dieser Region des Genoms Melone wurde auf 228 kBit / cM, optimale Beziehung zur Durchführung der Positioniergenauigkeit Klonen des Gens. Schließlich ist zu ermitteln, die BAC 1-21-10 mit körperlich Gen nsv. Die Existenz von microsintenia im Ver- Region des Gens nsv mit einer Region des Genoms von Arabidopsis erlaubt die Identifizierung eines Kandidaten Gen für nsv für schnell. Wir haben den Faktor Beginn der Übersetzung 4E (eIF4E) als Kandidaten für das Amt des nsv, die zuvor als verantwortlich für die Resistenz gegen potyvirus Pfeffer, Erbsen und Salat. Die Entwicklung einer PCR Marker von eIF4E Melone bestätigt, dass es cosegregaba mit dem Gen nsv in Populationen F2 und BC1. Als nächstes wird die vollständige Sequenzierung von cDNA von eIF4E ergab, dass der einzige Unterschied zwischen allelic Sequenzen resistent und anfällig Allele von zwei lag in der Nukleotidsequenz, was zu einer Änderung der Aminosäure Position 228 des Proteins: ein in der Leucin Genotyp widerstehen 8 Einheit a. M. 365 NSV und ein Histidin in den beiden Genotypen anfällig. Wahrscheinlich, diese Mutation in der eIF4E ist verantwortlich für den Widerstand in PI161375. ISOLIERUNG UND CHARAKTERISIERUNG EINER TRANSKRIPTION FAKTOR BEI DER REGULIERUNG DER GENEXPRESSION IN XYLANASE FUSARIUM OXYSPORUM.Autor: CALERO NIETO FERNANDO JOSE. Jahr: 2004. Universität: CÓRDOBA. Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIAS. Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIAS.
Inhaltsangabe: F. Oxysporum Infektion Geheimnis für viele extrazelluläre Enzyme, die verantwortlich sind für die Verschlechterung der Pflanze Wand ihres Gastlandes Pflanzen. Eine wichtige Gruppe von diesen Enzymen wird das komplexe xilanolítico ist verantwortlich für die degradarel polímerode xilanoque apareceen Bruchteil hemicelulósicade Wand-Anlage. Es ist das Gen isoliert foxlnR kodiert für ein Protein, welches eine DNA-bindende Domäne von der Art der binúcleo Zink. Dieses Gen hat eine basale Transkription induziert, die vorübergehend in der Gegenwart eine Quelle von Kohlenstoff-induzierende als xilano von Hafer Kleie und unterdrückt werden, die in Anwesenheit von repressiven Kohlenstoffquellen, wie Traubenzucker. Das Protokoll der foxlnR nicht beeinflusst durch den pH-Wert, obwohl seine Umwelt quantitativ Induktion tritt zu verschiedenen Zeitpunkten in Abhängigkeit von der pH-Wert des Wachstums des Pilzes. Die inactivaciónde foxlnR führt zu der Unfähigkeit, eine Halo Hydrolyse von xilano farbigen festen in den mittleren und unteren Aktivität in Bezug auf die Induktion Xylanase in flüssigen Medium. Im Gegensatz zu dem, was in freier Wildbahn Belastung in den defizienten Mutante in dem Gen foxlnR Gene xy12, xy13, xy14, xyl5 Und xyl6 nicht erhöhen ihre Protokoll im Hinblick auf die Induktion. Diese Daten indicanqueel Produkt von Gen foxlnR als reguladortranscripcional komplexen xilanolítico. Im Gegensatz zu, was passiert, in der Art der Gattung Aspergillus, Überexpression des Gens foxlnR nicht mit einem Anstieg in der Expression von Genen, xy13, xyl4 Und xyl5 und F. Oxysporum, sondern im Gegenteil, es sinkt, während seine Induktion beginnt früher. Das Produkt des Gens foxlnR übt seine Wirkung durch Bindung direkt in den Bach 5'GGCTAA 3 'Präsenz in der Region promotorade die geneses tructurales, comose hat demostradoen dieser Arbeit im Fall von Gen xy14. Sie schlägt vor, einen Mechanismus für die Regulierung von Genen, die das komplexe xilanolítico mit der Leistung des Produkts des Gens foxlnR, complejoHapy der / s Protein / scapaces Anerkennung der Rolle secuenciacon Repressor AGAA. Dieses Papier zeigt zum ersten Mal die Beteiligung von Genen, die das System seit xilanolítico verändern foxlnR Ebenen der Gen führt zu einer Störung des Verhaltens patotípico F. Oxysporumf. Sp. Lycopersici. CHARAKTERISIERUNG VON GENEN, DIE IN DER ORGANOGENESE BLATT IM ARABIDOPSIS THAILIANAAutor: JOVER GIL SARA. Jahr: 2004. Universität: MIGUEL HERNÁNDEZ DE ELCHE. Ort der Lesung: UNIVERSIDAD MIGUEL HERNANDEZ. Ort der Vorbereitung: UNIVERSIDAD MIGUEL HERNANDEZ. Inhaltsangabe: Um Beiträge für die Entwicklung der kausalen Analyse der Blätter von Pflanzen, wir erhalten haben, und studierte verschiedenen mutierten Stämmen von Arabidopsis thaliana Vorlage Änderungen des Blattes Morphologie, die wir genannt incurvata (icu) und Rotunde (Rum). Das Blatt Klingen des vegetativen Mutanten wurden icu recurva direkt in den Strahl, anstatt sich fast wie das Niveau der wilden Stämme, was nahe legt, dass einige Verfahren im Zusammenhang mit der Spezifikation oder der Aufrechterhaltung der dorsoventralidad Blatt ist verändert. Die Blätter der Mutanten Rum sind breiter und gerundet auf freier Wildbahn, das ist ein Indiz für die Störung der Teilung oder die Expansion der Zellen, die zur Organogenese des Blattes. Wir haben charakterisiert Genetik und molekularen 9 rezessiven Mutationen Zugehörigkeit zu Gruppen de'complementación ICU8, ICU9 und ICU15 zur Gründung durch Positionsattribut Klonen, die neu sind Allele hipomorfos oder keines der Gene HYPONASTIC LEA VES1 (HYL 1), ARGONAUTE1 (AGO1) und HUA Unsere Allele hen1 und hyl1 sind angeblich ungültig und verursacht Phänotypen ähnlich wie zuvor beschrieben. Die Allele ag01 - 51 und ag01 - 52 sind hipomorfos und verursachen radialización und adaxialización teilweisen oder vollständigen vegetativen einige Blätter. Blätter nicht radializadas dieser Mutanten ag01 zeigen einen Übergang zwischen den Stiel Schwebezustand und vieles mehr schrittweise als in wilder Typ. Darüber hinaus, die Epidermis der peciolos von Mutanten ag01 - 51 und ag01 - 52 zeigen charakteristische morphologische Merkmale der Blattspreite. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, die Beteiligung des Gens AGO1 in der Spezifikation und / oder der Aufrechterhaltung der dorsoventralidad und proximodistalidad der Klinge. Wir molekular charakterisiert Genetik und zwei Allele insercionales, rezessiv und wahrscheinlich Null (icu4 - 3 und icu4 - 4), und zwei aus, semidominantes eindringen und die Funktion (icu4 - 1 und icu4 - 2) Gens ICU4, die Positioniergenauigkeit Analyse hat gezeigt, dass kodiert ATHS - 15, ein Transkriptionsfaktor der Familie Homeodomain / Leucin Zipper 111 (HD - Zip 111). Allele icu4 - 3 und icu4 - 4 nicht zu einem mutierten Phänotyp, dass das Gen ICU4 und einigen anderen Mitglied ihrer Familie sind funktionell redundante Geist. Die Allele icu4 - 1 und icu4 - 2 sind Träger der Mutation in einer Sequenz zur Ergänzung der microARN miR165 und miR166, und zu einer Erhöhung der Konzentration der mRNA Gen ICU4 die sich vor allem in den Blättern. Die Mutanten icu4 - 1 und icu4 - 2 präsentiert vegetativen Biegung der Blätter, verzögerte Blüte und der Übergang von der Jugend- und Erwachsenenbildung Blätter, und Fehlentwicklungen in der Entwicklung der Wurzel und Stamm, sowie eine Unempfindlichkeit gegenüber moderaten ABA yal NaCl während der Keimung. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass ICU4 ist negativ durch ein microARN und die Teilnahme an der Entwicklung von Wurzel und Stamm Gefäßen, in der Rolle des meristemos und bei der Festlegung der Polarität des Blattes. Wir haben umfassende Analyse der Genexpression in Pflanzen ag01-51/ag01-51 und icu4-1/icu4-1 durch Hybridisierung auf Microarrays validiert durch quantitative RT-PCR, haben wir Gene direkt oder indirekt durch AGO1 und ICU4. Es ist anzumerken, dass unter den deregulierten Gene in der Mutante icu4 - 1 sind einige, die in den Antworten auf Stress und in den Stoffwechsel und die Signalisierung bestimmter Hormone, einschließlich der ABA. Wir haben erreicht doppelt mutierten Allele von Synergien zwischen mehreren der Gene AGO1, HEN1, HYL 1, HASTY (HST), und ICU 8 4, dass die gleichzeitige 4ab nfirman genetisch, dass die funktionale Beziehung wird davon ausgegangen, zwischen den ersten vier, die bewährte Komponenten oder Wahrscheinlichen Maschinen auf dem Weg der microARN sowie ICU4, das ist ein Ziel eines microARN. Wir molekular charakterisiert Genetik und zwei Mutanten ron2, die sich als Träger der rezessiven Allele neue und hipomorfos Gen LEUNIG (LUG), die für ein correpresor transkriptionelle die erstmals seine Beteiligung an der Entwicklung der Blüte. Unsere Ergebnisse zeigen, dass RON2 (LUG) beteiligt sich an der Kontrolle der Größe und Form der Blätter, wie sie an die Prozesse der Zelle Expansion ist nicht polaren, die möglicherweise durch die transkriptionelle Regulierung von Genen im Zusammenhang mit Wachstum. STRUKTURELLEN UND FUNKTIONELLEN ANALYSE VON GENEN CRGB UND MWC - 1A DER MUCOR CIRCINELLOIDESAutor: Gómez Mateo Jorge. Jahr: 2004. Universität: MURCIA. Ort der Lesung: Facultad de biología. Ort der Vorbereitung: Facultad de Biología. Inhaltsangabe: Mucor circinelloides ist ein filamentöses Pilz, die eine weite Verbreitung. Es gehört zu der Klasse Zygomycetes, zeichnet sich durch eine sexuelle Fortpflanzung durch Zusammenlegung gametangios einreichen Pilzen erzeugt werden generell cenocíticos und produzieren Sporen aflageladas und unbeweglich. Das Licht wird imlpicada bei der Regulierung von vielen metabolische Prozesse und die Entwicklung in vielen unterschiedlichen Organismen. In der Pilze, das Licht, die bei der Regulierung viele Prozesse, die wichtigsten Studien über die Kontrolle der Genexpression durch Licht waren, die in den ascomiceto Neurospora crassa, eine Agentur, die charakterisiert diesen Prozess tiefer auf der molekularen Ebene in zigomicetos Phycomyces blakesleeanus und Mucor circinelloides. Der Stamm der wilden Pilzen erzeugt werden Mucor circinelloides präsentiert gelblichweiß in der Dunkelheit, die in einem gelben schwer zu beleuchtet werden durch die Induktion der Synthese von b - Carotin. Die komplette Streichung des Gens crgA in diesem seinesgleichen eliminiert das Erfordernis der Licht für die Synthese von Carotine im mushroom laichen führt zu einer sobreacumulación sowohl in Bezug auf Licht und Dunkel. Die Tatsache, dass die "null" mutierten weiterhin reagieren auf Licht zeigt jedoch, daß es noch andere Gene, die in den Ausdruck induziert d von genescarotenogénicos durch Licht. Das Hauptziel dieser Arbeit war daher die Festlegung anderer Gene, die bei der Regulierung der Synthese von Carotine durch Licht. Unter den Kandidaten werden Gen Homologen crgA, Auseinandersetzung mit seinen Kollegen Charakterisierung und die Gene zu Gene WC - 1 und WC - 2 N. Crassa und ihre anschließende Charakterisierung. Nach Ablauf Analyse hat gezeigt, dass es eine Verdoppelung der Region des Genoms von M. Circinelloides wo das Gen crgA. In der Kopie der Vervielfältigung wurde analysiert das Gen crgB, die verschlüsselt einem Protein, das hat eine Struktur, ähnlich wie die Domänen des Proteins CrgA. Die Expression von Genen, crgB wird durch crgA und induzierbare von Licht, mit einem charakteristischen Muster der Anhäufung von Gesandten frühzeitige Reaktion Gene, und dazu gehört auch fotoadaptación. Der Träger Region des Gens crgB wurden identifiziert und wiederholt Palindromzahl Sequenzen in anderen Gene durch das Licht von M. Circinelloides und wer beteiligt sein könnten bei der Regulierung der Gene crgB durch Licht. Experimente wurden Unterbrechung und Schweigen Gen crgB, die schlug vor, dass das Gen crgB spielt eine wesentliche Rolle bei der M. Circinelloides. Nach Durchschreiten eines genoteca genomische DNA des Stammes der wildlebenden Mucor circinelloides mit Sonden von Genen WC - 1 und WC - 2, hat das Gen geklont tzf - 1 diese Zahl mit Eigenschaften eines Proteins Transkription Faktor durch die Anwesenheit zwei Domains Zink - Finger Und dessen Rede ist vollkommen abhängig von der Gen crgA. Durch die Verstärkung durch PCR mit Primer entsprechend der erhaltenen Region des LOV Domäne der fototropinas Anlage, auch in das Protein WC - 1 von Neurospora crassa wurde geklont cDNA- Fragment eines Gens mwc - 1a diese Zahl mit einem hohen Proteingehalt Homologie zu den Protein codiert durch das Gen WC - 1 N. Crassa. Der Ausdruck mwc - 1a wird leicht unterdrückt durch Licht, die das Gen crgA notwendig für die Meinungsfreiheit in der Dunkelheit. In Experimenten Schweigen der Genexpression mwc - 1a isoliert transformants nicht in der Lage zu reagieren, um Licht. Analyse dieser transformants deutet darauf hin, dass das Gen mwc - 1a wird nicht in der Kontrolle der carotenogénesis von Licht, sowie alle Gen mit Homologie zu mwc - 1a ist verantwortlich für die Überwachung. IDENTIFIZIERUNG UND CHARAKTERISIERUNG DER ZELLULÄREN KOMPONENTEN, DIE IN DER SIGNALÜBERTRAGUNG IM SYNECHOCOCCUS VS. PCC 1942Autor: BURILLO SANZ SERGIO. Jahr: 2005. Universität: ALICANTE. Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIAS. Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIAS.
Inhaltsangabe: Die Fähigkeit der Cyanobakterien zur Anpassung ihrer Funktionen und Stoffwechsel an sich verändernde Umweltbedingungen abhängig von zellulären Komponenten, die weitgehend unbekannt. Das Ziel dieser Arbeit war es, zur Verbesserung des Wissensstandes über die entsprechenden Netze der Interaktion zwischen den Elementen, die in Signal Transduktion von Stress Stickstoff, sowie schaffen Verbindungen zwischen Regulierung von Stickstoff Mangel und globale Reaktionen auf stressige Situationen, die Begrenzung der Stickstoff Ein Induktor wirksam. Es dauerte bis die Suche nach Interaktionen zwischen Proteinen des Interesses (NtcA, NblS, NbIR, NrtC und IIP) vs Synechococcus PCC 7942 und wurden konstruiert und analysiert Genbanken zu finden Proteine, interaccinan mit PII in das System der doppelten hybride Hefe. Das "N" - acetil Glutamat Kinase (NAGK) und das Protein wurde PipX ( "PII interactin Protein X") wurden nach dieser Methode. Die Interaktionen zwischen PII - NAGK und PII - PipX, sowohl Roman validiert wurden in der Folge mit verschiedenen experimentellen Ansätzen gezeigt, dass die erste von denen ist in der erhaltenen Organismen, führen Photosynthese oxigénica und der zweite in Cyanobakterien. PipX interagiert mit NtcA, das verbindet die beiden wichtigsten Regulatoren des Metabolismus von Stickstoff in Cyanobakterien. Die Bioinformatik Analyse und Koevolution der Wechselwirkungen NblS - SipA bzw. Köder und Beute auf Stimmen in der genebanks in dieser Arbeit vor den möglichen Erhaltung dela entsprechende Interaktion in Cyanobakterien. AUSDRUCK DER KLAGEBEFUGNIS DDVA DER MYXOCOCCUS XANTHUS FESTGESTELLT UND IHRE ABHÄNGIGKEIT VON GENEN KARTE, SÜD - 2 UND SÜD - 5Autor: Abellán Martínez María. Jahr: 2005. Universität: MURCIA. Ort der Lesung: Facultad de Biología. Universidad de Murcia. Ort der Vorbereitung: Facultad de Biología. Universidad de Murcia. Inhaltsangabe: Das Gen carD von Myxococcus xanthus ist in der Regulierung der zwei unabhängige Prozesse dieses Bakterium, carotenogénesis und mehrzelligen Entwicklung, und ist auch an der Kontrolle über die 1% der Gene, die zum Ausdruck gebracht während des vegetativen Wachstum. Unter ihnen ist ddvA, deren Ausdruck, sehr hoch in den wilden Stamm, zunichte gemacht im Hintergrund mutierten carD. Um die Suche nach neuen Genprodukte, die mit CarD, haben wir eine Reihe von Mutationen, die Mutationen Süden, die Beseitigung der Auswirkungen von Mutationen carD auf die Expression von ddvA, nicht auf Prozesse carotenogénesis und mehrzelligen Entwicklung. In diesem Papier haben wir zwei dieser Mutationen, die Mutation Süd - 2 und die Mutation Süd - 5 vor dem Klonen von der gleichen phänotypischen durch Ergänzung. Die Studie nur Stämme, die Mutationen Süd angegeben und Stämme, die diese Mutationen und die Streichung des Gens carD zeigt an, dass keines dieser Übungen Schutz- Mutationen an sich keine Auswirkungen auf die Prozesse der carotenogénesis und Entwicklung von mehrzelligen oder auf die Expression von ddvA, und sie In der Lage sind, zu entfernen, die Auswirkungen der Streichung von carD auf die Expression von ddvA mit der gleichen Effizienz, mit der Beseitigung der Auswirkungen der anderen Mutationen carD. Die Wirkung der Mutation Süd - 5 ist durch die Einführung in das Genom von M. Xanthus ein Fragment von 6984 Bp DNA, von einer genoteca der chromosomalen DNA von M. Xanthus, verursacht eine Ergänzung deutlich. Der ORF scheint, daß die für diese Ergänzung bestimmt ein ATPase in der Klasse AAA +, obwohl es zu sein scheint keinen Unterschied in der Sequenz dieses Gens und ihre Träger zwischen den wilden Stamm und der Stamm der Durchführung der Mutation Süd - 5. Um die Beziehung zwischen dieser Mutation Schutz- und ORF der ATPase durchgeführt wurden Experimente der Meinungsäußerung und Überexpression der letzteren ORF zeigen, dass das Gen eine niedrige Niveau der Meinungsäußerung und dass seine Träger ist nicht durch CarD noch Süd - 5, und Dass der beobachtete Effekt ist nicht eine Folge der erhöhten Dosen der ATPase. Test doppelt hybride in Hefe noch nicht identifizierten eine physische Wechselwirkung zwischen CarD und ATPase, aber die letzteren selbst, im Einklang mit der Struktur oligomérica von AAA + Proteinen. Die Streichung des Gens der ATPase berührt weder die Expression von ddvA, sowohl die An- und Abwesenheit von einer Mutation carD der Mutation Süd - 5 oder beides, weder zu haben scheint keine Auswirkungen auf die Prozesse der carotenogénesis und Entwicklung mehrzelligen. Die unterdrückende Wirkung der Mutation Süd - 2, die nach der Verarbeitung verschiedener Experimente, die Rückkreuzung und cotransducción zu sein scheint im Zusammenhang mit dem Ort ddvA und eine Entfernung von 10 KB, durch die Einführung in das Genom von M. Xanthus ein Fragment von 4344 Basispunkten Liegt 10 KB Vorfeld der ddvA, verursacht eine Ergänzung deutlich, die sich auch mit jedem subfragmento kleinere, die in der ursprünglichen Stück. Allerdings ist die Folge von dieser Strecke von DNA eines Stammes, die die Mutation Süd - 2 stellt keine Unterschiede mit der gleichen Reihenfolge der DNA Fragment des wilden Stamm. Eine solche Ergänzung ist auch erkennbar, wenn das Fragment von 4344 Basispunkten oder einem der subfragmentos getestet ist integriert in eine Website heterologe Genom von M. Xanthus. Unabhängig, es hat eine Analyse der Klagebefugnis ddvA. Die Lage des Gens ddvA Downstream und gekoppelt traduccionalmente ein Gen bestimmt, dass ein möglicher Faktor Sigma der Familie SCD, zusammen mit anderen Kommentaren, die Möglichkeit, dass DdvA sie waren ein Faktor gegen Sigma. Die Generation von Fusionen Comp 8 scripcio 572 rung lacZ Gens und Stämme, die Streichungen in den beiden Gene zitiert hat zwei mögliche Upstream liegt Promoter Regionen von Genen identifiziert, die sich durch die möglichen positiven und negativen Faktor Sigma von DdvA. Beide bemühen sich auch positiv durch das Protein CarD. Es hat auch analysiert, die Abhängigkeit der CarD zwei neuen potenziellen Partnern Faktor Sigma ECF - Faktor gegen Sigma M. Xanthus zeigten, wie in einem Fall, so dass sie bereits drei Systeme Faktor Sigma ECF - Faktor gegen Sigma auf M. Xanthus geregelten Durch das Protein CarD. BEZIEHUNG STRUKTUR / FUNKTION UND ENTWICKLUNG DER METALOTIONEÍNAS SÄUGETIEREN UND GEFLÜGEL. MOLEKULARE INTERAKTIONEN VON METALOTIONEÍNASAutor: TÍO BARRERA LAURA. Jahr: 2005. Universität: BARCELONA. Ort der Lesung: FACULTAT BIOLOGÍA. Ort der Vorbereitung: DEPARTAMENTO DE GENÉTICA - FACULTAD DE BIOLOGÍA - UNIVERSITAT DE BARCELONA. Inhaltsangabe: Die metaloproteínas sind eine Gruppe von Proteinen, die sich vor allem durch die Anwesenheit von Metall Atome wie funktional. Diese Metallionen sind von entscheidender Bedeutung für die richtige Struktur, Stabilität und / oder Funktion von Proteinen. Nahezu ein Drittel der gesamten Protein kann metaloproteínas und innerhalb dieser großen Gruppe gehören metaloproteínas (MT). Diese zeigen einige Merkmale, die es von anderen metaloproteínas: * Das Metall Ionen ist immer koordiniert durch Links zu den Protein Thiol-Anteils die Art der cisteínas präsentieren S in der Polypeptidkette (Cys). * Es sind kleine Molekulargewicht (ca. 12 kDa). * Sie haben ein sehr hoher Prozentsatz der Cys in seiner Zusammensetzung (etwa ein Drittel der gesamten Aminosäuren), die ihnen ihre hohe Kapazität Schwermetall Chelatbildner. In Säugetieren wurden isoliert für bis zu vier codierende Gene für metalotioneínas (Isoformen NMTI, MTII, MTIII, MTIV). Diese Gene sind alle in der gleichen chromosomalen Region, die die "Cluster metalotioneínas", wird als das Ergebnis der evolutionären Prozesse des Gens Doppelarbeit. In der menschlichen Spezies, einige Familie (MTI) noch ein höheres Maß an Doppelzüngigkeit, Doppel- subformas (MTIa, MTIb usw.), die weltweit ist unbekannt funktionelle Bedeutung. In anderen Säugetieren, wie die Maus, wurde nur die Existenz von einem Mitglied aus jeder Familie (MTI zu MTIV). Es gibt eine große Ähnlichkeit zwischen den verschiedenen TM Isoformen der gleichen Art: Maus Unterschiede aminoacídicas zwischen 15 aa (MTI MTII) und 27 aa (MTI - MTIV). Diese Ähnlichkeit ist akzentuiert zwischen denselben Proteinen aus verschiedenen Arten (zwischen MTIV Maus und der menschlichen gibt es nur 4 Substitutionen der unter a bis e). Im Gegensatz dazu gibt es große Unterschiede in den Anwendungsbereich der Muster der Expression dieser Isoformen. Während MTI und MTII fasst überall, aber vor allem in der Leber und Niere nach Metall Vergiftung, MTIII und MTIV haben eine besondere Ausprägung, sintetizándose nur im Nervensystem und in der geschichteten squamösen Epithel werden. Alle MT sind gleichzeitig in decidual Gewebe. In der Arbeitsgruppe hatte zuvor studierte die Fähigkeiten coordinativas der ITNs und MTII, so dass in Anbetracht der Unterschiede in der Sequenz und Muster der Ausdruck präsentiert, war es angebracht, auch an die MT4 und vergleichen ihre Leistung mit ihrem Vorgänger. Da die metalotioneínas bei Vögeln Einfügung amonoacídica an der selben Stelle wie MTIV, und eingedenk dessen, dass die Studien der Evolution setzen MTIV näher zu ihnen nicht MTI ist die geplante Kapazität Studie coordinativa der ckMT (Metallothionein Huhn) und ihre Domains, um zu prüfen, ob Mehr ähnelte das Verhalten von MTV oder MTI. Der MT System von Drosophila melanogaste umfasst 4 Isoformen (MTO, MTN, ERM, BAT), die bekannt ist Merkmale coordinativas der ersten beiden. Angesichts der insgesamt Unwissenheit über mögliche Wechselwirkungen von MT's als rechtzeitige Studie Zwei Hybrid mit dem Ziel, und eine Bibliothek D.melanogaster Erwachsenen. Zusammenfassung der wichtigsten Daten der Arbeit sind: * MT4 hat es vorgezogen, zu koordinieren monovalenten Metallen. * CkMT verhält sich in einer Art und Weise wie die MT12 in Anwesenheit von zweiwertigen Metall- und MT4 in Anwesenheit von monovalenten Metall. * Cl - Ionen und S2 - offenbar eine wichtige Rolle bei der Stabilisierung einige MTs und je nach Metall koordinieren. In den zwei hybride Experimente haben obtendio 17 Klone, die positiv: * Tioredoxina Peroxidase: Interaktion festgestellt worden ist, ein Prozess GST pull-down. * Hmólog von Guanin ng Protein. * Vhac39 dann war, dass die Reihenfolge geklont wurde in der Lage, die nicht mit ihrer Muster der Lesung, die ein Protein der unter a bis e nicht in jedem bisher beschrieben. Dieses Ergebnis ist negativ. ENTWICKELN PROTOKOLLE FÜR DIE REGENERATION PFLANZEN ÜBER EMBRIOGENESIS SOMÁTICA UND TRANSFORMATIONELLE WEINSTOCK (VITIS VINIFERA L.)Autor: LOPEZ PEREZ ANTONIO JOSE. Jahr: 2005. Universität: MURCIA. Ort der Lesung: FACULTAD DE BIOLOGÍA. Ort der Vorbereitung: UNIVERSIDAD DE MURCIA.
Inhaltsangabe: Der Bericht präsentiert die Forschung befasst sich mit den beiden wichtigsten Ziele: 1 - Entwicklung eines Protokolls für die Regeneration von Pflanzen von Reben embriogenesis somatischen. 2-Um die grundlegenden Parameter für die Transformation von Zellen durch embryogenic Hornhautpflege cocultivo mit agrobacteium tumefaciens. Die Ergebnisse haben dazu geführt, dass das erste Ziel, ein Protokoll für die Regeneration von Pflanzen von Reben somatischen Embryogenese in drei Sorten von Tafeltrauben (purpurroter samenlos, sugraone und Geschenkartikel Marian). Die Art der explanto (Antheren oder Eierstöcke), dem Nachtrag zum Nährboden von Aktivkohle und Morphologie der differenzierten somatischen Embryonen aus embryogenic Hornhautpflege sind die drei Faktoren, die sich auf die Effizienz des Protokolls für die Regeneration. Sobald embryogenic Schwiele und das Protokoll für die Regeneration, befasste sich mit der Transformation von pflanzlichen Zellen mit Bodenbakterium in purpurroter kernlosen Sorten und sugraone. Die Einführung eines Verfahrens, mit einem hohen Wirkungsgrad wurde gliedert sich in drei Phasen: 1-Struktur der entsprechenden Konzentration des Antibiotikum Kanamycin. Die Versuche zeigten, dass Kutteln embriogénicos purpurroten kernlosen und sugraone zeigten unterschiedliche Empfindlichkeit gegenüber Kanamycin. Während in den purpurroter kernlosen Sorte inhibiert die Differenzierung von Embryonen mit 20 mg / l Kanamycin, in der Reihe sugraone hat 50 mg / l. 2, - Einfluss der Belastung Bodenbakterium und die Dichte des Inokulums. Transformation Studies befasste sich mit zwei verschiedenen Stämmen von Bodenbakterium (EHA 105 und C58 (pMP90)). Selbiges gilt für die beiden Stämme wurden in verschiedenen Dichten Inokulum (DO600 = 0,06 und 0,2). In allen Fällen ist der Stamm EHA 105 zeigte eine größere Effizienz und zeigte, dass die Dichte des Inokulums effizienter war unterschiedlich je nach Sorte (0,06 in purpurroter seedles und 0,2 in sugraone). 3-Effect-Methode von Kultur. Experimente, die in diesem Stadium der Schluss gezogen, dass der Anbau von embryogenic Hornhautpflege nach Infektion und cocultivo Bodenbakterium mit Membran auf die Stärkung der Effizienz des Transformationsprozesses. Die wachsende Hornhautpflege embrogénico auf Membran erlaubt, mehr von transgenen Embryonen und regenerieren schließlich Transgene Pflanzen purpurroter kernlosen und sugraone. ENTWICKLUNG VON MIKRO- UND SEINE ANWENDUNG AUF DEN ANBAU VON SENEGAL SEEZUNGE (SOLEA SENEGALENSIS)Autor: PORTA PELAYO JAVIER. Jahr: 2005. Universität: MÁLAGA. Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIAS. Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIAS, UNIVERSIDAD DE MÁLAGA. Inhaltsangabe: S.senegalensis ist eine Spezies mit hohem wirtschaftlichen Interesse, die sich in der Anfangsphase ihrer Ernte. Daher bedarf es für die molekulare Werkzeuge zur Untersuchung der genetischen Merkmale der Zuchttiere, sowie deren Entwicklung im Laufe der aufeinander folgenden Generationen von Anbau. Die Ziele dieser Arbeit sind: 1-Abruf demarcadores Mikrosatelliten für die Arten S.senegalensis. 2-Valuing diese Werkzeuge für die Charakterisierung der genetischen Zuchttieren eines Unternehmens in der Branche. 3-Studium der genetischen Variabilität der verschiedenen Akteure mit unterschiedlichen Bestände reproduktive Verhalten. 4-Spieler Umschichtung Bestand eines Unternehmens in der Branche in fünf Tanks Schätzer durch die Verwandtschaft, damit Optimierung der Ressourcen Lager. 5, - Entwicklung einer PCR mehrere automatische Werkzeug für die Anwendung der Studie in diesem Stammbaum der Arten. Die Ergebnisse und Schlussfolgerungen sind nachfolgend dargestellt. 1, - wurden isoliert microsatellite loci 15 Arten Solea senegalensis und anderen 3 angepasst Solea solea s.senegalensis zu studieren, die ein nützliches Instrument für die Untersuchung von genetischen und natürlichen Populationen gezüchtet. 2 - Die komplette für die 5 loci: AF441385, AF441387, AF441389, AF41390 und AYA426693 hat gezeigt, entsprechende Merkmale zur Durchführung der genetischen Analyse von pdigrí Kultur unter Bedingungen. 3-Stammbaum Studien, die über einen Zeitraum von Putting in einem Unternehmen zeigen, dass eine Frau und zwei Männer wurden, die für mehr als eine Million Nachkommen, die einen Eindruck von der hohen Leistungsfähigkeit der reproduktiven dieser Spezies. 4 - Die Gruppe der 8 loci: AF441385, AF441387, AF441388, AF441389, AF441390, AY426692, AY426693 und AF173849, bewährt haben, in der Charakterisierung der genetischen Gruppen sowohl intern entwickelte und wild. Es hat sich auch bewährt bei der Schätzung der Werte der Verwandtschaft in Ermangelung von Daten Stammbäume. 5 - Die genetische Analyse von mehreren Gruppen von Züchtern gefangen in der Bucht von Cadiz zeigen, zu einer repräsentativen Stichprobe von einer wilden homogene Bevölkerung. Die genetische Charakterisierung der Bevölkerung durch 8 loci ergab hohe Werte der genetischen Variabilität, mit einer durchschnittlichen Anzahl der pro Locus Allele von 15,1 und eine hetrocigosidad erwarteten 0,84. Diese Werte sind in der Größenordnung von den in verschiedenen marinen Arten. 6-Genetische Analyse von Gruppen von Menschen in Gefangenschaft geboren und als Spieler in mehreren Einrichtungen widmet sich dem Anbau von S.senegalensis zeigen Werte der genetischen Variabilität viel geringer als die Ausstellung von Einzelpersonen in der natürlichen Umwelt. Diese drastische Reduzierung der Ebenen der Variabilität ist auf die Aufnahme von Zuchttieren zu einer hohen Zahl von Personen mit engen Beziehungen der Verwandtschaft. 7 - Die weit verbreitete Nutzung von Einzelpersonen in Gefangenschaft geboren, die starke Effekte von Selektion und genetische Drift, die durch künstliche Bedingungen des Anbaus, der Ignoranz der verwandtschaftlichen Beziehungen zwischen Individuen, die hohe Kapazität der reproduktiven und den Handel mit Tieren zwischen Einrichtungen, führte zu einer signifikanten Verschlechterung Der genetischen Variation in einem großen Teil der Lager-Player in der Zusammenarbeit bei der Untersuchung dieser Art werden. 8 - Die erheblichen Verlust an genetischer Variation dieser home gewachsen Lager kann sich negativ auf die Anpassungsfähigkeit dieser Gruppen. Darüber hinaus ist die Aufnahme in die Viehzucht eine große Anzahl von Einzelpersonen aus schweren Engpässen kann dazu führen, dass eine beträchtliche Erhöhung der Inzucht in den nächsten Generationen zu 8 Ndo efec 59b Husten Nebenwirkung aus homocigosis und daher ungeeignet für die Verlegung Fundament der Zukunft der Ernte Dieser Spezies. 9 - Die Nutzung dieser genetischen Werkzeugen zu lösen viele Zweifel Anbau dieser Arten, und in ihrer reproduktiven Verhalten. Dieses Wissen würde es uns ermöglichen, eine gründliche Kontrolle der Vervielfältigung und damit eine ordnungsgemäße Auswahl der Personen, die als Nährboden, um die Erhaltung der bestehenden genetischen Ressourcen. 10, wurde entwickelt, einem automatisierten Instrument für die Analyse von 5 Mikrosatelliten-Loci durch mehrere PCR-Methode. Diese Methode reduziert die Zeit und Kosten für die Kunst, Minimierung der Handhabung und damit auch die Gefahr der Fehlerbehandlung. Um solche Analyse ist nur eine kleine Menge an DNA, die durch nicht-invasive Methoden. Außerdem ist die Standardisierung von loci erlaubt Mitarbeiter zu vergleichen Ergebnisse aus verschiedenen Laboratorien. ICH TRANSKRIPTIONELLE KONTROLLE ZU LOSTÈRIC GEN CARNITIN PALMITO - TRANSFERASA 1B (CPT1B).Autor: RELAT PARDO JOANA. Jahr: 2006. Universität: BARCELONA. Ort der Lesung: FACULTAD DE FARMACIA. Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE BIOLOGÍA - UNIVERSITAT DE BARCELONA. Inhaltsangabe: Der Anstieg der Triglyceride und des acil-CoAs kann auftreten, in den Fällen, in der Fettleibigkeit oder Insulin hypersecretion und ihre Anhäufung in den peripheren Geweben wie Muskel-oder Pankreas kann sich auf die Aufnahme von Glukose und Funktionalität von Beta-Zellen, respectively. Controlling Ebenen der Fettsäuren in frühen Stadien von Adipositas und Diabetes Typ2 würde, wie dies reduzieren Hyperinsulinämie und Insulinresistenz und die damit verbundenen lipotoxicidad vermeiden, die durch die Ansammlung von Fett sind metabolisiert wird mitochondriale beta. Dies ist ein fein regulierter Prozess, stellt einen kritischen Punkt am Eingang der Fettsäuren der mitochondrialen Matrix. Aufgrund ihrer Hydrophobie, lange Kette Fettsäuren sind nicht in der Lage, durch die Membran der Mitochondrien und erfordern ein Shuttle-System, das System Carnitin palmitoiitransferasa. Dieses System besteht aus drei Enzyme katalysieren, die Translokation der langen Kette Fettsäuren durch einen Mechanismus abhängig Carnitin. Es ist ein System reguliert hauptsächlich durch das Enzym Carnitin palmitoiitransferasa1 (CPT1), die katalysiert die Bildung von tioésteres der acils-CoA der langen Kette Fettsäuren Carnitin, acilcarnitinas Generierung in der mitochondrialen Membran außerhalb. Die CPT1 ist ein Protein kontrolliert Transkriptions-Ebene und Ebene alostérico durch ihre physiologischen Inhibitor, malonil-CoA. Zur Untersuchung der Mechanismen der Regulation der Transkription der CPT1B verwendet wurden 380 bp Region des Projektträgers des menschlichen CPT1B, wo sie bereits markiert ein Element der Reaktion auf Peroxisome proliferators-Rezeptor aktiviert (PPAR), eine Reaktion auf Faktoren miogénicos der Familie MyoD. Die Ergebnisse der Experimente transiente Transfektion beschreiben eine synergetische und kooperative Mechanismus zwischen PPARalfa und MEF-2c in den Ausdruck der menschlichen CPT1D, als auch eine Wirkung ransactivador zwischen PPARalfa und PPARdelta auf Promotor untersucht. Parallel hat die Beteiligung der aG / C Reaktion auf Faktoren der Familie Sp in der basalen Promotor-Aktivität untersucht. Parallel hat die Beteiligung der aG / Cde Reaktion auf die Faktoren Arbeit Sp Familie in der basalen Aktivität des Projektträgers und das Gen Transaktivierung von PPARalfa, durch die Vereinigung der Transkriptionsfaktoren Sp1 Faktor für die DNA. Neben delas beschrieben funktionelle Interaktionen wurden in-vitro-physikalischen Wechselwirkungen zwischen PPARalfa und MEF-2C und zwischen PPARalfa und Sp1. Die Studie über die Regulierung der Enzym-Aktivität von CPT1 wurde kloniert und charakterisiert Enzym CPT1B Schweinefleisch und haben Protein quiméricas zwischen CPT1A Ratten und CPT1A Schweinefleisch, mit dem Ziel der Lokalisierung Regionen des Proteins wichtig für die Bestimmung der kinetischen Konstanten dieser Enzyme, vor allem Diejenigen, die Einfluss auf die Empfindlichkeit malonil-CoA des Proteins. Aus den Ergebnissen geht hervor, dass die kinetischen Eigenschaften CPT1B Schweinefleisch kommt zu einem isotipo A, trotz eines hohen Aminosäure Identität mit isotipos Mit dieser Chimären zwischen CPT1A Ratten und Schweine CPT1A bestätigen die Existenz einer beherrschenden positive und eine negative dominant in der N - Terminal Region isotipo A CPT1. Er stellt abschließend fest, dass die C-terminale Region CPT1 verhält sich wie eine einzige Domänenfunktionsebene. Schließlich ist das Papier beschreibt einen Mechanismus unabhängige malonil-CoA in der Aktivierung des Systems durch die CPT synthetische Verbindung C75. SOBREEXPRESSIÓ EN L'-REZEPTOR-ANTAGONISTISCHEN D'INTERLEUCINA - 1 (IL- 1RA) ELS ILLOTS PANCREÀTICS. EFECTES AUF VIABILITAT, FUNKTION ICH REGENERACIÓ VON IHNEN CÈL - LULES DER BETA-VERSION VERFÜGBAR.Autor: TÉLLEZ BESOLI NOÈLIA. Jahr: 2006. Universität: BARCELONA. Ort der Lesung: FACULTAD DE MEDICINA. Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE MEDICINA.
Inhaltsangabe: Die Transplantation von Pankreas-Inseln ist eine aufstrebende Therapie für die Behandlung von Typ-1-Diabetes mellitus. Frühere Untersuchungen in unserer Gruppe haben gezeigt, dass während der ersten Tage nach der Transplantation von Inseln, wo es einen Verlust von über 60% der Masse zunächst transplantiert, gibt es eine Erhöhung der Expression von IL-1. Der Rezeptor-Antagonist des Interleukin 1 (IL-1Ra) ist ein natürlicher Antagonist, konkurriert mit dem IL-1, um sich mit den Typ-1-Rezeptor, aber nicht das Signal transduction. Die Annahmen, auf denen sie basieren diese Arbeiten ist, dass proinflamatoria Zytokin, IL-1, ist an der Transplantation nicht. Ernennung der Überexpression von IL-1Ra als eine Strategie zur Verbesserung der Prognose der singénico Transplantation von Pankreas-Inseln. So, das übergeordnete Ziel der Studie ist es, festzustellen, ob Überexpression von IL-1Ra in den Inselchen pancréaticos schützt Beta-Zellen von den schädlichen Wirkungen von IL-1 auf dem Inselchen in der Kultur und verbessert die Prognose Transplantation. Für den gesamten Zeitraum Studie verwendet wurden Inselchen von Lewis Ratten, die infiziert waren mit 6,26 x 106 pfu des Adenovirus, kodifiziert durch die grün fluoreszierenden Protein-Gen Arbeitsorganisation (Ad-GFP), Beta-galactosidasa (Ad-LacZ) oder durch den Rezeptor atagonista IL-1 (Ad-IL-1Ra). 48 h nach der Infektion, 100% der Blöcke infiziert waren und 30% der Zelle sinsulars drücken die Transgens. Die Inseln waren von 50U/ml IL-1beta während 48h, nach dieser Zeit wurden in Paraffin und verarbeitet für die Immunhistochemie. Die Exposition der Insel proinflamatoria Zytokin IL-1 führte zu einer Erhöhung der Hemmung der Apoptose die Replikation von Beta-Zellen, die rückgängig gemacht wurden durch die Überexpression von IL-1Ra. Später, Gruppen von 500 Inseln mit infizierten oder nicht infizierten Adl-lL-1Ra transplantiert wurden unter der Kapsel Mieten Lewis diabetische Ratten durch Injektion einfache estreptozotocina. Das Inselchen Transplantationen wurden nach 3, 10 oder 28 Tagen nach der Transplantation und verarbeitet wurden für die Immunhistochemie. Die Transplantationen Inselchen sobreexpresaban 1Ra zeigte ein hohes Maß an Apoptose (bestimmt für die TUNEL-Technik) der Beta-Zellen, die unter Kontrolle Transplantationen zu allen Zeiten untersucht. Die Replikation von Beta-Zellen (Ermittelt durch Aufnahme von BrdU) wurde angeregt Transplantationen nur 10 Tage, obwohl die Inseln waren unter den Bedingungen der Hyperglykämie, wo es erwartet Stimulation delas Beta-Zell-Replikation. Stattdessen werden die Transplantate Inselchen sobreexpresaban 1Ra zeigte ein hohes Maß an Beta-Zell-Proliferation stimuliert respektieren, die sich in einer normalen Bauchspeicheldrüse. Schließlich Überexpression von IL-1Ra führte zur Erholung des Körpers von Beta-Zellen (bestimmt durch die Morphometrie) verlor in den ersten Tagen nach der Transplantation von Inselzellen. Die positiven Effekte der Überexpression von IL-1Ra auf die Lebensfähigkeit und die Verbreitung von Massen-Beta-Zellen führte zu einer besseren Prognose Transplantation von Inselzellen, und dass 100% der Tiere mit 800 transplantierten Inselzellen sobreexpresaban 1Ra wieder die normoglicemia zu 14 Tage nach der Transplantation, aber Nur 40% der transplantierten Inselzellen Kontrolle wieder an Diabetes. Aus diesen resutlados dem Schluss, dass IL-1 beteiligt ist in der Transplantations-Versagen und muss eine zentrale Rolle spielen, denn nur Block seine acicón deutlich verbessern die Prognose der Transplantation.
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