BAKTERIELLE PHYSIOLOGIE

Autor: MALLORQUÍ FERNÁNDEZ NOEMÍ.
Jahr: 2003.
Universität: GIRONA [www.udg.es].
Ort der Lesung: CIENCIAS.
Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIAS DE LA UDG.

Inhaltsangabe: Das vorliegende Papier konzentriert sich auf die Studie paartir verschiedenen Ebenen der Carotinoide Arten von braunen Grünen Schwefel Bakterien (GSB, in der englischen Grüne Schwefel Bakterien). Das übergeordnete Ziel ist es, herauszufinden, was die Funktion dieser Pigmente enestos Mikroorganismen sowie die Erweiterung der Kenntnisse über ihre Struktur und entrcciones mit dem otres Pigmente der photosynthetischen Apparat. Der erste Teil, eine Methode cromotografía Flüssigkeit hoch rasolución (HPLC) für anilizar zu präziser und schneller carotenides von unterschiedlichen Stämmen der GSB (Kapitel 3). Diese Methode zeichnet sich durch eine purificaciín precvia von Auszügen Pigment durch Spalten von Aluminiumoxid zu entfernen cateroclorofilas (BLLS). Diese permitó analysiert mit einer hohen Auflösung und etan nur 45 Minuten. Der verschiedenen chromatographische Karriere Carotinoide und deren Vorprodukten sowie configuaraciones trans- und cis- ihre isómeros.El zweiten genetischen Methoden, die aus einer Änderung der Methode der Borrego und Garcia Gil (1994) und damit die Trennung verlangt, dass alle Arten von Pigmenten , Die beide von culrivos rein wie Probe Komplexität. Ein konkretes Beispiel war das alte Sedimente in der Umgebung von Lake Banyoles. In diesen Sedimenten (0,7-1,5 Millionen Jahren antigà ¼ Alter) detectron, unter anderem Pigment, Carotinoide bestimmte Arten von braun GSB in denen die Präsenz deestas Bakterien in den See in Banyoles ya des Pleistozän niedriger. Dieses erste Kapitel analysiert die Carotinoid der Cholrobium (Chl.) phaeobacteroides CL 1401 durch Flüssigkeitschromatographie gekoppelt mit der Spektrometrie masaa (LC-MS/MS), um zu bestätigen, seine Identität und seine Molekulargewicht. Wir analysieren auch die Wirkung von Temperatur, Licht und verschiedenen oxidierenden Substanzen reduzieren und auf der xomposición quantitative und calitativa der carotnoides und BCLS dieser especie.Estos Experimente permitieroon bestätigen die lichtempfindliche delas BCLS und trans- Isomere / cis-Endo-bicyclo verschiedener Carotinoide sind keine Artefakte, die während Handhabung der Proben, sondern sind Bestandteile der photosynthetischen Apparat dieser Mikroorganismen. Kapitel 4 umfasst die Physiologie Experimente mit einigen Arten der GSB, das sich auf die Aufklärung der Mechanismen in dynamischen Synthese der verschiedenen Pigmente (BCL Antenne, BCL ai Carotinoide) während das Wachstum dieser Arten. Diese Forschung auch überwachen Variationen in der Zahl der CR während der Anpassung Prozess leiten. Von der cuantificaciín der BCL663, der erste Abnehmer in der Transportkette Elektron in der GSB, berechnen wir die Anzahl der RC. Die Schätzung der Beziehung RC / clorosoma statt, die erste von biometrischen Daten estequiométricos und bei der bibligrafía und dann von der experimentellen Daten dieser Arbeit. Die vuen Anpassung zwischen verschiedenen Schätzungen gab Kraft estequiométrico berechnete Wert, die durchschnittlich rund 70 CR von clorosoma. In diesem Kapitel der Physiologie studierte auch variriones in den Beziehungen transeuropäischen / cis-Endo-bicyclo zwischen wichtigen Carotinoide Arten von braun GSB.Las Beziehungen berechnet für culrivos nicht resentaron Unterschiede in Bezug auf die Bedingungen für die Beleuchtung werden. In den beiden Bedingungen untersucht, hoher und niedriger Intensität, den Wert der Beziehung transeuropäischen / cis-Endo-bicyclo wurde aproxomadamente, 2. In clorosomas isoliert aus verschiedenen cepar braun GSB auch das Verhältnis in etwa 2, sowohl für die isorenierateno (isr) und der B - isore 8 niearate 5cc nicht (B - isr). In natürlichen Populationen von Chl. Pheobacteroides dieser Beziehung war auch 2 trans- Isomere cis- Isomer für jeden, wobei sowohl in Tiefe und konstant über die Zeit. Schließlich wird in Kapitel 5 präsentiert einen molekularen Marker, erlaubt die Identifizierung von bestimmten Arten von braun GSB. Trotz seiner ursprünglichen Planung wurde auf der Grundlage eines Gens, die in der Synthese von Carotinoiden (crtY, die für ein Paar licopeno cyclase) die endgültige Reihenfolge aus, die wir erhalten haben, die encebadores selektiven ist ralcionada mit der Familie der protínas der Policétido - ceto - sintasas (PKT). Dennoch, die neue Tool kann sehr nützlich sein für anspruchsvolle Arten braun GSB Bezug auf die grünen in gemischten Bevölkerung, wie sie in natürlichen Umgebungen und öffnet die Tür zur Zukunft mikrobielle Ökologie Experimente mit Techniken wie PCR in Echtzeit, die es zulassen würden, selektive Überwachung Von polblaciones Arten braun GSB in der ecositemas natürlich.

Autor: AZUA PEREZ IÑIGO.
Jahr: 2004.
Universität: PAÍS VASCO [www.ehu.es].
Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA.
Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA.

Inhaltsangabe: Die marinen Aggregate, allgegenwärtig und unterschiedlicher Herkunft, bereichert der organischen Substanz und der stark kolonisiert durch Mikroorganismen. Sie haben die Mittel, mit körperlichen Zerfall, differentielle Sedimentation und biologische Zersetzung, und die Teilnahme an den Ersatzteilmarkt, und Zersetzung von organischen Stoffen Sedimentation im Meer. Die Zersetzung procariótica beinhaltet Atmung, Biomasse und / oder Löslichkeit Aggregat. Beide Lebensräume, und flüssige Phase, die beiden Gemeinschaften procarióticas, lebt frei und klebte mit verschiedenen morphologischen, physiologischen und taxonomischen. Das Ziel dieser Arbeit ist die Analyse der organischen Zersetzung procariótica der marinen Aggregate. Es wird verstiftet in Prokaryonten und Wohnen freien primären hydrolytischen Angriff, die Einbeziehung der organischen Substanz freigesetzt und Biomasse. Es werden drei Arten von Aggregaten: Aggregate oligotroph Meeresgewässer und zwei Arten von Aggregaten im Labor, Aggregate und natürliche fitoplanctónicos. Das Aggregat fitoplanctónicos, mit reichlich Verbindungen leicht verwendbares, zu simulieren, die während des massiven Wachstum fitoplanctónico. Die simulierten natürlichen zu gregados verarmten und mehr feuerfesten durch Aggregation der verschiedenen marinen Partikeln. Beide prokaryotischen unterscheiden sowohl in der Hydrolyse in der Herstellung von organischen Verbindungen. Die frei lebenden bekundet Enzyme hidrolíticos und Transportsysteme mit größerer Affinität aufgrund der Knappheit an Nährstoffen. Diese Unterschiede erklären, die Kinetik multiphasic beobachtet in marinen Systemen. In der gesamtwirtschaftlichen fitoplanctónicos die procariota Sie nutzt seine überlegene Haftung durch Hydrolyse, während natürliche Aggregate, ärmsten, gibt es keine Unterschiede zwischen Prokaryoten. In der procariota beigetreten oligotroph Gewässern präsentiert oben dauert nur wenig Teilchen abgewickelt und vermutlich neu gebildet. In der gesamtwirtschaftlichen fitoplanctónicos und natürlich, gibt es eine adaptive Strategie, Rückgang in der Verbreitung und der Erhöhung der Zahl der Zugehörigkeit, da es zu einer Verbesserung der Grad der Kolonisierung und verarmen quantitativ und qualitativ Aggregate. Aggregate sind Zentren der hohen Aktivität und ein starkes Wachstum prokaryotischen erst vor kurzem gebildet. Da wir kolonisiert und degradiert chemischen Veränderungen auftreten und nicht mehr zu einem günstigen Lebensraum. In der gesamtwirtschaftlichen fitoplanctónicos neu formierte durch Hydrolyse und Prozesse gekoppelt sind. Doch während ihrer Zersetzung ist entkoppelt durch eine Verringerung, während die restlichen hohen Hydrolyse. Aufgrund desacomplamiento ist solubilizan organische Verbindungen in der flüssigen Phase zur Förderung des Wachstums von gesellschaftlichen Leben. So, Marine Aggregate als Enzym Reaktoren, daß Release organischen Substanz während seiner Ablagerung, die erklären, würde dazu beitragen, die Wachstumsraten Erreichen der prokaryotischen Leben frei.

Autor: JIMÉNEZ BELENGUER ANA ISABEL.
Jahr: 2004.
Universität: POLITÉCNICA DE VALENCIA [www.upv.es].
Ort der Lesung: Dep. Biotecnologia.
Ort der Vorbereitung: Universidad Politécnica de Valencia.

Inhaltsangabe: Geschlecht Helicobacter umfasst 23 Arten von Bakterien microaerófilas. Das Studium ist mit Helicobacter pylori, die verantwortlich ist für 90% aller Magengeschwüren und in engem Zusammenhang mit der Entwicklung von Magenkrebs. Die Mechanismen der Übertragung dieser Organismus sind nicht ganz sicher. Ihre Präsenz wurde in den Kot, Trinkwasser, Milch und Gemüse, aber in sehr wenigen Fällen wurde isoliert. Es ist vor kurzem vorgeschlagen worden, daß mit Helicobacter pylori kann resistent gegen Chlor und Ozonkonzentrationen für potabilizar Wasserversorgung. Außerdem, experimentelle Studien haben gezeigt, dass in Bezug auf die Umweltbelastung dieser Mikroorganismen können eine Phase möglich, aber nicht landwirtschaftlicher (VNC), die, obwohl nicht in der Lage zu werden, erhalten verschiedenen metabolischen Aktivitäten und ausdrückliche Virulenz Faktoren. Die Induktion von diesem Zustand VNC, die durch morphologische Veränderungen (Umzug in Form cocoide) vorgeschlagen wurde als möglicher Mechanismus für das Überleben in der Umwelt, die Förderung ihrer Übertragung. Dieses Papier hat das Überleben eines Stammes von H. Pylori Zugehörigkeit zu unserer Sammlung, in verschiedenen Ausführungen bei verschiedenen Temperaturen aquatischen Mikrokosmos. Es wurde festgestellt, dass die Zellen von H. Pylori gehalten Phosphatpuffer Kochsalzlösung PBS zu 11Â ° C, kultiviert für 12 Tage, während sie in Chlorwasser nicht auf der gleichen Temperatur, landwirtschaftlicher bleiben bis 5 Tagen. Auch bei niedrigeren Temperaturen die cultivabilidad im PBS bleibt länger, und kultivierbaren Zellen werden erkannt, bis die 22 Tage. Wir stellen auch fest, die Existenz der schräg- lebensfähigen nicht landwirtschaftlicher beide Oberfläche Wasser und in PBS. Bei der Bewertung der das Überleben des Stammes HBTC6 H. Pylori in Anwesenheit von Chlor wurde, während seine cultivabilidad ist sehr kurz, nur 5 Minuten anhalten Helixfilter Formen und cocoides zu 24 Stunden. Exposition. In der gesamten Studie, die alle Mikrokosmos konstant geblieben verschiedene Parameter, wie zum Beispiel rRNA und DNA, sowie die Produktion von Katalase und Urease, Enzyme, die bei der Virulenz. Diese Ergebnisse demonstrieren die fortgesetzte Präsenz der lebensfähigen Zellen nicht landwirtschaftlicher (VNC) von H. pylori in aquatischen Systemen über lange Zeiträume. Eine der größten Sorgen ist, ob diese Formen sind potenziell ansteckend. Dies beinhaltet die Bestimmung der Fähigkeit dieser Zellen kultiviert werden. Das Streben nach Wachstum Medien abrufen können, dass diese microorrganismo Ihren VNC ist auch entscheidend für ihre Isolierung aus Umweltproben. In dieser Arbeit, die wir getestet haben 15 Wachstum Medien, um festzustellen, ob von H. pylori Zellen in einem Zustand VNC wieder ihre Fähigkeit zur Replikation. Obwohl es konnte nicht wiederhergestellt werden, indem Kultur Platte zeigen die Ergebnisse, die Persistenz lebensfähiger Formen, in allen von ihnen, auch 14 Tage nach ihrer Inkubation, die indca Aufrechterhaltung eines bestimmten Stoffwechselstörungen Potenzial.

Autor: Hernández Romero Diana.
Jahr: 2005.
Universität: MURCIA [www.um.es].
Ort der Lesung: Facultad de Biología. Universidad de Murcia.
Ort der Vorbereitung: Facultad de Biología.

Inhaltsangabe: Das Polyphenol oxidasas (PPO) sind Enzyme, Phenole mit Sauerstoff oxidiert. Sie sind in lacasas und tirosinasas und Enzyme sind von großem Interesse sowohl Biotechnologie (für den Einsatz in der Abbauprodukte widerspenstig, in der Papierindustrie, die Farbstoffe und Pigmente, etc.) für ihre Mitwirkung an der Biosynthese melaninas, dass sie sind in der Regel schwarz oder Braune Pigmente, die in vielen Rollen, die meisten von ihnen für den Schutz. Wurden in das Genom von Ralstonia solanacearum bis zu vier potenziellen Genen kodiert Enzyme, die möglicherweise mit PPO. Zu den Zielen der Dissertation hebt die Erkennung und Optimierung dieser Aktivitäten in der PPO R. Solanacearum, Mutagenese der potentiellen Gene verantwortlich für die Aktivitäten und die Reinigung und Charakterisierung von Enzymen mit PPO. Ein weiteres Ziel wird auf der Grundlage einer Bewertung der Auswirkungen der Addition der Phenole in der Physiologie von R. Solanacearum sowie der möglichen Auswirkungen auf die Infektiosität der Mutanten im Vergleich mit der wilden Sorte. Durch den Bau von null Mutanten durch homologe Rekombination haben wir die mutierten Gens, die in den verschiedenen Aktivitäten, die kodieren PPO. Nach der gewonnenen zellulären Auszüge aus dieser Mutanten Blick auf den Verlust eines PPO spezifische Aktivität im Zusammenhang mit jedem der mutierten Gene, die jedoch nicht einverstanden mit der vorherigen Zustimmung der Genprodukte, so schlagen wir vor einer Änderung in der Nomenklatur von sich selbst, also Dass das Produkt des Gens RSc0337 ist ein tirosinasa, Gen RSc1501 ist ein Catechol-O-Methyltransferase und Oxidase Gens RSp1530 kodiert ein laccase. Er wies die Studie der Gentherapie RSp0656 von kodiert ein Protein, der Widerstand gegen Kupfer CopA und daher nicht kodiert ein PPO. Es wurde Reinigung Produkte protéicos dieser Gene, sowie eine biochemische und kinetische Charakterisierung der gleichen, die in den Fall der tirosinasa größere Affinität für Tyrosin, dopa, was dazu führte, für die Entwicklung eines Patents durch unsere Gruppe auf den Prozess der Beschaffung L - Dopa mit tirosinasa R. Solanacearum. Im Anschluss an die Arbeit der Charakterisierung dieser Enzyme, können wir eine Reihe von Kriterien, die es ermöglichen, strukturelle Differenzierung der tirosinasas der Catechol-O-Methyltransferase oxidasas abhängig von den Eigenschaften der resíduos aminoacídicos der Nähe zu den Zentren von Kupfer. Ein weiteres wichtiges Ergebnis ist festzustellen, wenn adicionamos phenolischen Verbindungen in Kulturen R. Solanacearum, wo wir eine größere Sensibilität, die ihnen von Mutanten, die in der PPO, was darauf schließen lässt, die Einbindung dieser Prozesse in der Entgiftung von diesen Verbindungen, Prozesse, die eine physiologische Erklärung In der Verteidigung das Bakterium vor dem Angriff auf die Pflanze, produziert diese Verbindungen als Reaktion auf verschiedene Stress, wie zB Infektionen durch einen Erreger. Darüber hinaus haben wir auch in der Lage zu beobachten, die Synthese von melaninas und andere Pigmente im Zusammenhang mit den Aktivitäten in der PPO R. Solanacearum. Schließlich waren wir nicht in der Lage zu zeigen, ein Verlust der Infektiosität im Zusammenhang mit dem Fehlen eines konkreten PPO, die im Prinzip könnte erklärt werden durch die Tatsache, dass der Erreger ist ein multifaktorieller Prozess, bei dem die Beeinträchtigung eines PPO konnte nicht ocasonar Effekt wie phenotypically unklar, wie Werden sichtbar auf ein qualitativer Test für die Pathogenität.

Autor: URETA BARRIOS ANA CLAUDIA.
Jahr: 2005.
Universität: POLITÉCNICA DE MADRID [www.upm.es].
Ort der Lesung: ESCUELA TÉCNICA SUPERIOR DE INGENIEROS AGRONOMOS.
Ort der Vorbereitung: ESCUELA TECNICA SUPERIOR DE INGENIEROS AGONOMOS.

Inhaltsangabe: Die Symbiose Rhizobien-leguminosas gibt es zwei wichtige Enzyme, die den Metabolismus von molekularen Wasserstoff (H2): nitrogesanas und hydrogenase. Die nitrogenasa katalysiert die Reduktion von atmosphärischem Stickstoff zu Ammoniak und diesen Prozess mit der Produktion von Wasserstoff. Das Wasserstoffgas ist verloren, da es sich um eine Verschwendung von Energie in den Prozess der Stickstoff-Fixierung. Die hidrogenasas katalysiert die Oxidation von Wasserstoff molekularen protenes. Elektronen aus der Oxidation von Wasserstoff in die Atmungskette bis zur endgültigen Akzeptor Sauerstoff ist, und dieser Prozess kann in Verbindung mit der Produktion von Energie (Ruíz-Argà ¼ So et al, 2000). Das Recycling von Wasserstoff wurde im Zusammenhang mit einer Erhöhung der Anlagenproduktivität durch die Erhöhung der Energieeffizienz in der Symbiose Rhizobien-leguminosas. Die hydrogenase ist ein Enzym heterodimérica, dass diese in Verbindung mit der Membran und enthält eine aktive bimetálico [NiFe] in der größten Untereinheit. Die Aufnahme von Nickel in den Herzen der hydrogenase aktiv ist ein wesentlicher Schritt in der Synthese des Enzyms. Es wurde festgestellt, dass die Verfügbarkeit von Nickel Grenzen der Ausdruck der hydrogenase-Level-Verarbeitung Untereinheit des Enzyms. Es wurde festgestellt, dass die Verfügbarkeit von Nickel Grenzen der Ausdruck der hydrogenase-Level-Verarbeitung Untereinheit des Enzyms in Pflanzen, die im Vermiculit (Brito et al, 1994), aber es ist nicht bekannt, ob diese Einschränkung besteht unter natürlichen Bedingungen für die Kultivierung. Die Ziele dieser Arbeit sind: 1-Zur Analyse der Ebene der Nickel Boden als mögliche limitierende Faktor in der Arbeit der Ausdruck hydrogenase in landwirtschaftlich genutzten Böden für diese Studie untersuchte die Auswirkungen der Zugabe von Nickel in den Boden. Wir ausgewählten 6 landwirtschaftlich genutzten Böden repräsentativ für die Gemeinschaft von Madrid identifiziert, die ihre physikalisch-chemischen Eigenschaften. Diese Böden wurden als Substrat für das Wachstum der Erbse (Pisum sativum) geimpft mit einer Belastung hydrogenase positive R.leguminosarum. Die Analyse von Wasserstoff in bacteroides Stoffwechsel dieser Pflanzen haben gezeigt, dass weder die in diesen Böden reicht nicht aus, um der Wiederverwertung zu 100% der Wasserstoff produziert in den Prozess der Stickstoff-Fixierung. Als Strategie für die Überwindung der Einschränkung Nickel wurde, die von einem Stamm effizientere Verwertung von Wasserstoff. Diese Ergebnisse wurden korreliert mit Tests, wo wir inmunodetección erforscht die Wirkung von Nickel in der Verfolgung der größten Untereinheit des hydrogenase und sah, dass die Verarbeitung Enzym hängt davon ab, die Ebenen von Nickel in den Boden. Die Ergebnisse deuten darauf hin, dass geringe Mengen an Nickel aus dem Boden sind ein limitierender Faktor für die hydrogenase Aktivität in der Symbiose R.leguminosarum-guisantes. 2-Zur Beurteilung der Vorteile im Zusammenhang mit der Anwesenheit von hydrogenase in inoculators rizobaianos. Zur Beurteilung der Leistungen im Zusammenhang mit der Anwesenheit von hydrogenase in inoculators rizobianos, ein integriertes System von hup Rhizobien leguminosarum bv viciae Stämme hydrogenase negative noduladoras der Zeit (Vicia sativa) mit einem minitransposón (TnHB100, Báscones et al, 2000). Dieses System hat es ermöglicht die Integration in eine stabile Gruppierung hup in das Genom des Bakteriums erhalten. Wir haben uns zwei Stämme mit Einsätzen in Websites irrelevant Genom und analysiert die Aktivität und das Verhalten hydrogenase symbiotische. Einer der Stämme zeigten signifikante Erhöhungen der Akkumulation von Stickstoff verbundenen Präsenz der Recycling-Fähigkeit von Wasserstoff. 3-Durchführung einer vergleichenden Analyse der Genome von Rhizobien-Stämmen von leguminosarum der Lage zum Ausdruck bringen das System hydrogenase. Der Vergleich wurde genotypische Stämme R.leguminosarum UPM791, Inhaber des Systems hup und 3841, deren Genom sequenziert wurde, mit 8 microarr 426 opa DNA generiert für die Belastung 3841. Vor der vergleichenden Studie bestätigt, dass das System hup ist richtig ausgedrückt in der Belastung 3841. Der Vergleich ergab, dass 78% der Gene wurden in den beiden Stämmen konserviert, was darauf hinweist, dass diese microaarays sind nützlich für die Analyse der Faktoren, die bei der Kontrolle der Expression des hydrogenase der UPM791.