MICROBIAL METABOLISM

Autor: ALVAREZ PERAL FRANCISCO JOSÉ.
Jahr: 2002.
Universität: MIGUEL HERNÁNDEZ DE ELCHE [www.umh.es].
Ort der Vorbereitung: ESCUELA SUPERIOR DE INGENIEROS AGRÓNOMOS.

Inhaltsangabe: Die Gattung Candida gehören Hefe ascomicetáceas keine echten sexuellen Zyklus. Candida albicans ist ein Hefe Kommensale Mensch und Tier homeostermos. Seine Definition umfasst taxonomische Zellen vegetativen levaduriformes mit gemación multilateralen ohne Paarung. Präsentiert Anforderungen nahrhaften relativ einfach und wachsen können, in einem Medium, die eine grundlegende Quelle der organischen Kohlenstoff (Zucker), eine Quelle von Stickstoff (Ammoniumsalze), Phosphat und spezifischen Anforderungen bestimmter Vitamine und Aminosäuren (Biotin, Thiamin). Es wächst auch im Temperaturbereich inlcuidos zwischen 20 ° C und 40 ° C, ebenfalls zwischen 2 und 8 Einheiten von pH (Ungerade, 1988, 1994). Während in der Hefe von gemación, ist gut dokumentiert intrazelluläre Anhäufung von disacárdido nicht Reducer Trehalose (D - glucopiranosil - D - glucopiranosido), die Informationen zur Verfügung zu C.albicans ist knapp (Thevelein, 1996, François ua., 1997; Argà ¼ Elles, 2000). Die Synthese Trehalose erfolgt in erster Linie unter den Bedingungen des Mangels an Wachstum (stationäre Phase oder einem plötzlichen Beseitigung von Nährstoffen), und zwar vor allem als Widerstand Faktor, der Schutz und die Erhöhung der Stabilität in einer Vielzahl von zellulären Bedingungen Ernährungs- und Umweltfaktoren Stress (Fasten Ernährung Kampf thermischen oder osmotischen Oxidative Prozesse und Einfrieren oder Trocknen). In Pilzen und Hefen, Hydrolyse von physiologischen Trehalose ist fast ausschließlich an die Enzym trehalasa, desdoble der Trehalose in seine Bestandteile: 2 Moleküle Glucose. Es ist bekannt, die Existenz von zwei trehalasas mit verschiedenen subzelluläre Lokalisierung (zytosolischen und Vakuolenmembran oder außerhalb abhängig von der Art), und kinetische Parameter (neutrona und Säure) (Thevelein; 1996; Nwaka und Holzer, 1998; Argà ¼ elles -, 2000). C.albicans erreicht derzeit eine große klinische Bedeutung, da die Zahl der candiddiasis wurde dramatisch, die auf der einen Seite auf die steigende Anzahl von pacietnes inmunocompreometidos Fall von Aids Patienten, die mit Therapien gegen Krebs, Empfänger, Säuglingen und Ältere Menschen. Darüber hinaus ist die Verbreitung von resistenten Stämmen ist ein Ergebnis der Verwendung (Missbrauch) von Antibiotika und Chemotherapeutika. So erscheinen sehr oft chronische orale Candidiasis, die nur schwer zu heilen, da sie häufig in geschwächten Patienten, die sich als ein Sammelbecken für andere ansteckende viszeralen Organe. C.albicans ist auch ein Modell für die Forschung in ihrer Fähigkeit zu verhalten wie ein Pilz dimórfico, dh gibt es in zwei Arten: als Zelle levaduriformes (blastocoidios) und Strukturen miceliares (Hyphen und pseudohifas). Es hat sich gezeigt, dass es einen direkten Zusammenhang zwischen dem Prozess des Übergangs morphologischen levadura - micelio und den Erwerb von Pathogenität während der Kolonisation des Gastlandes Gewebe (Quoten, 1988, 19974; Kà ¶ hler ua., 1996; Lo ua. , 1997). Der Übergang morphologischen levadura - micelio ist ein komplexer Prozess, in dem intevienen verschiedenen externen Faktoren, die Herstellung von Signalen auslösen morphologische Veränderungen (Brown und Gow, 1999; Ernst, 2000). Gibt es widersprüchliche Erkenntnisse über die Mobilisierung von Trehalose als ein Erfordernis der Energie, die für eine solche Veränderung (ua Sullivan. 1983; Ram ua. 1984), dies war eines der zentralen Ziele, die in diesem Projekt: Analyse von Schwankungen in Trehalose während der Stoffwechsel ändern dimórfico levadura - micelio von C.albicans induziert insbesondere durch den menschlichen Serum. Zu diesem Zweck haben segudio zwei Ansätze experimenteller Grundlagenforschung: 1 - Messen von Trehalose zusammen mit Variationen von hydrolytischen Enzymen und biosintéticas in verschiedenen Bedingungen Induktion von progrma dimórfico. 2 - Analyse des Verhaltens der doppelten mutierten tps1/tps1, mangelt es an beiden Allelen des Gens Kodierung der tehalosa - 6P synthetase und daher nicht in der Lage zu akkumulieren Trehalose. Zusammen, unsere Beobachtungen stehen im Einklang mit der Vorstellung, dass die Hydrolyse von Disaccharid ist nicht eine bevorzugte Energiequelle für die Lebensfähigkeit dieses Dimorphismus in der Hefe. Es erlaubt uns auch, um nach links durch lomenos - die trehalasa externen spielen eine wichtige Rolle in diesem Prozess Morphologie. Wir Disc 8 utido bin 1869 pliamente diesen Vorschlag, die offen mit dem Vorschlag einverstanden, die in den beiden vorangegangenen Studien (ua Sullivan., 1983; Ram ua., 1984), deren Autoren empfehlen aktive Beteiligung der hydrolase bei der Mobilisierung Trehalose. Wir haben vertieft in anderen einschlägigen physiologischen Aspekte über die Rolle der Trehalose in diesem levdura opportunistischen. Die Daten in unserer Arbeit bestätigen die Beteiligung der Disaccharid in Prozessen im Zusammenhang mit der Wiederherstellung der aktiven Zelle Wachstum inmitten frisch stationären, als auch die rasche Reaktion auf plötzliche metabolischen Veränderungen in der Umgebungsbedingungen (Temperatur Variationen oder vielleicht auch Serum) C.albicans Ist äußerst empfindlich gegenüber Hitze Schock Behandlung der schweren (52,5  ° C für 5 min), wo es wächst exponentiell in der mittleren mit Glukose. Statt diese Zellen haben das Phänomen conoci8do als "Adaptive Response", die es ermöglicht, sie zu erreichen, einen Zustand der thermischen Toleranz, vorausgesetzt, dass zuvor wurden bei einer Temperatur inkubiert leicht (42 ° C). Diese Schutzwirkung, Ergebnisse auf andere Arten von Stress, ist auf die Aktivierung der trehalosa - 6P synthetase. Das doppelte mutierten tps1/tps1 wurde ein nützliches Werkzeug in unseren genetischen Studien. Während blastoconidios der mutierten tps1/tps1 sind kompetent in die morphogenetischen Programm, das Niveau ihrer miceliación war weniger als die, die in freier Wildbahn Art Zellen, gesammelt auf der gleichen Stufe des Wachstums. Dieser Mangel könnte auf die tiefgreifende Veränderung der Art und Weise, glucolítica in diesem mutierten, wenn wachsende Zucker als Quelle von Kohlenstoff, die einen Mangel manifestiert sich als abhängig von der Temperatur. Dementsprechend, die Bildung von Hyphen ist praktisch Null in Zellen tps1/tps1 exponentielle preincubadas über dem Durchschnitt YP YP + + Glucose oder Fructose, während Induktion in YP allein (Hefeextrakt 1% Pepton 2%) produziert einen Bruchteil sehr ähnlich germinativos Röhren. Auch der Ersatz von Glucose und Fructose durch galactos oder Glycerin erhöht das Niveau der Dimorphismus in einem entsprechenden Grad, während Acetat fördert einen leichten Rückgang. Die Anwesenheit von Ethanol ist sehr schädlich für den Wandel dimórfico insbesondere in Form von mutierten. Im Laufe der Arbeit, wir machen eine überraschende Beobachtung, die extreme Empfindlichkeit der mutierten tps1/tps1 zu oxidativen Substanzen (wie H2O2 speziell). Deshalb haben wir ein Kapitel gewidmet, um die Untersuchung dieses Prozesses. Die Zellen hospedadoreas haben Reaktionsmechanismen estrás, die in einer koordinierten Art und Weise (Estruch, 2000). Eines ist das System abhängig von Sauerstoff, und wenn der Pilz interagiert mit dem Membran der nuetróflilo steigert die Aktivierung oxidasas, mit der anschließenden Reduzierung von O2 molekularen Superoxid Anion (O2). In vacuolas fagocíticas, O2 wird entweder spontan aufgrund der geringen pH-Wert oder catabólicamente durch die Wirkung der Superoxid Dismutase im Wasserstoffperoxid (H2O2). Sowohl O2 als H2O2 sind Agenten Mikrobizide. Einige Studien deuten darauf hin, dass im S.cerevisiae und zu einem höheren Grad an C.albicans, wenn Pflanzen unterliegen niedrigen Konzentrationen von reaktiven Sauerstoffverbindungen (ROS), wie H2O2, OH und O2, sind gegen weitere Exposition gegenüber Konzentrationen meisten in der Lage sind, Hoch. Von midmo Weg, wenn S.cerevisiae ist Gegenstand einer milden thermischen Belastung, erwirbt Schutz gegen H2O2, (offen Toleranz), aber dieser Schutz ist niedriger, wenn der Prozess erfolgt in umgekehrter. Bis jetzt, diese Effekte sind unbekannt in C.albicans. Auf der Grundlage unserer Arbeit, können wir feststellen, dass die Trehalose schützt die Zellen levaduriformes Gesicht schwere oxidativen Ausstellungen. Allerdings ist die Anhäufung von Disaccharid offenbar nicht erforderlich, während die adaptive Reaktion auf oxidativen Stress, ein Prozess, der wir glauben, bestimmt, die im Verlauf der Infektion in-vivo durch diese opportunistischen Erreger. Darüber hinaus ist die schützende Rolle der Trehalose scheint sich ausschließlich auf Oxidationsmittel, die in weniger offensichtlich im Vergleich zu anderen Arten von Stress. Zusätzlich schlagen wir vor, dass die Reaktion auf ROS umfasst zwei Phasen: eine erste Verteidigung sofort induziert werden direkt von den Künstlern und stressig, dass die Anhäufung von Trehalose, während die zweite manifestiert sich nach einem Meter warten, bevor operativen und ist abhängig uan Route Noch nicht identifizierten. In Abwesenheit von Trehalose Synthese von dieser zweiten Mechanismus würde der nach einem früheren Kontakt mit einer mäßigen Exposition und nicht tödliche Agent stressig. Das Fehlen der Ausdruck der mRNA in Anwesenheit von H2O2, in Verbindung mit der vernachlässigbar Wirkung von cicloheximida über Unternehmen Tsp1 führt uns zu deuten darauf hin, dass die Aktivierung der Trehalose synthetase abhängig H2O2 wird durch eine Änderung postraduccional des Enzyms. Ein Höhepunkt dieses Berichts ist die große Repertoire Methodik, die ua: Bestimmungen konventionellen mikrobiologischen Prüfung ezimáticos herkömmlichen Techniken electroforéticas Verfahren und Molekularbiologie (RNA Analyse). Unter der Leitung von meinem Direktor, ich habe ein Postdoctoral kurzen Aufenthalt (ein Monat) im Labor der Leitung von Dr. Carlos Gancedo, die erlaubte mir, dass sie nicht nur schneller, Lernmethoden nicht in der Abteilung für Murcia, sondern auch um einige wertvolle Ergebnisse. Schließlich, betonen, dass die Gültigkeit meiner Arbeit wird unterstützt durch die Veröffentlichung von drei spezialisierte Monographien, deren Fundstellen folgt. Sie ist in der Bearbeitung der Bühne, die vierte wissenschaftliche Artikel.

Autor: SANZ CARDONA EVA.
Jahr: 2005.
Universität: ALICANTE [www.ua.es].
Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIAS.

Inhaltsangabe: Die LAS ist ein tensioctivo breite Anwendung in Reinigungsmittel. Nach seiner Rolle, es wird Abwasser, und schließlich akkumuliert entlang der biorresiduos generiert mit der Behandlung dieses Wasser in der Abwasserreinigung Anlagen (Kläranlagen). Die spanische Gesetzgebung besagt, dass diese biorresiduos behandelt werden für die Verwendung prefentemente Material, destacanco Kompostierung als potenzieller delas empfohlen für die Neubewertung Garantie sanitaraia und ökologischen Fragen. Die LAS ist ein xenobiótico biologisch abbaubar mesófilas und aeroben Bedingungen; Lage temófilas Aerobic, Klärschlamm Kompostierung geziemt, ein Prozess, es ist bekannt, dass das Molekül deutlich reduziert die Konzentration. Wir untersuchten die Wirkung von Wärme und Ernährung Faktoren in der mikrobiellen Populationen, die aus einem Prozess der industriellen Kompostierung von Klärschlamm aus städtischen WPP.

Autor: GONZÁLEZ PÁRRAGA MARIA DEL PILAR.
Jahr: 2006.
Universität: MURCIA [www.um.es].
Ort der Lesung: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE BIOLOGÍA- UNIVERSIDAD DE MURCIA.

Inhaltsangabe: In den letzten Jahren gab es ein wachsendes Interesse in der Forschung auf die Bildung von Sauerstoff-Spezies Reactivas in Reaktion auf die verschiedenen Umweltmedien Stress-Situationen. Gleichzeitig hat dies geschah zu einer Zunahme der Arbeit auf die Hefe C. Albicans, die als die meisten opportunistischen Organismus ernsthaft beeinträchtigt die menschliche Bevölkerung inmunocomprometida. Daher ist unsere Arbeit war primär auf der Analyse der Reaktion dieser pathogenen Hefe zu einem starken oxidativen Stress, und insbesondere die Reaktion der Antioxidans-Enzym-Systeme, die in den Schutz gegen zellulären oxidativen Stress. C. Albicans gehört zu einer Gruppe von Pilzen ascomicetos bilden Hyphen und pseudohifas. Es fehlt der sexuellen Zyklus, in anderen Worten, eine permanente diploid. Es ist ein Hefe dimórfica können interconvertirse zwischen zwei Formen: Blastoconidios und Hifas, das ist sehr nützlich, um die Verwendung als Modell in der Zelle Studien über die Entwicklung Prozesse. Die dimorphism ist ein Prozess, ist genetisch regulierten und in der Tat die Bildung von Myzel hängt davon ab, ob die Expression bestimmter Gene. Dieser Übergang von der Hefe bis Myzel Virulenz ist ein Faktor, und wie miceliar vorherrschende in der Phase der Kolonisation invasive Gewebe. Der natürliche Lebensraum von Candida albicans ist im Zusammenhang mit der menschlichen, die nur dazu führen, dass oberflächliche Mykosen bei gesunden Menschen nach wie vor die wichtigste opportunistische Erreger bei immungeschwächten Personen. Alle aeroben Organismen als Ergebnis entweder den eigenen oxidativen Stoffwechsel der Zellen oder die Zugabe von externen Akteuren generiert Reactivas Oxygen Species, die dazu führen, dass die Lipid-Peroxidation und Oxidation von Proteinen kann auch dazu führen, dass Mutationen in der DNA kommen. Eines der größten Quellen für Reactivas Sauerstoff-Spezies in Säugerzellen sind fagocíticas Immunsystem indem sie zeigen, dass eine der Funktionen dieser reaktive Spezies ist die Zerstörung von Krankheitserregern. Das Gleichgewicht zwischen Produktion TIERART REACTIVAS SAUERSTOFF und die antioxidative Kapazität der Agentur bestimmt das Aussehen von Staaten, der Gesundheit oder Krankheit. Zur Milderung solcher Aussagen Agenturen haben ein komplexes System entwickelt, Antioxidans, die auch nicht-enzymatische Antioxidantien wie Carotinoide, Glutathion, Ascorbat, und wahrscheinlich Trehalose, y. ... Einschließlich Enzym Katalase, MO, SOD Glutathion Peroxidase oder ... Unter den Antioxidans-Enzym nicht sehen tripéptido tiólico Glutathion und der Disaccharid Trehalose, da ein großer Teil dieser Arbeit konzentriert sich auf die Studie. Die GSH wird für eine Vielzahl von Enzymen, wie zB die Verminderung Macht. Es ist weit verbreitet in der aeroben Organismen in verschiedenen zellulären Kompartimenten. Zu den Funktionen der GSH bemerkenswert: Es ist eines der wichtigsten Beschützer der Integrität versus zellulären oxidativen Stress und beteiligt sich an der Aufrechterhaltung der Redox-Umgebung im Inneren der Zellen. Ein weiteres Molekül mit potenziellen antioxidative Kapazität ist die Trehalose. Es ist ein Disaccharid nicht Reducer, bestehend aus 2-Moleküle von Glukose, die als Beschützer der Zellen durch seine Rolle als Stabilisator prots und MBS. Solche Mechanismen der Differenzierung und Entwicklung. Die Doppel-homozygot mutierten tps1/tps1 in dieser Studie verwendet wurde unterbrochen, in der 2 Allele eines Gens, die in der Synthese von Disaccharid (Enzym trehalosa-6P-Synthetase) und ist daher nicht in der Lage zu akkumulieren Trehalose. Unter den Antioxidans-Enzym, die wir untersucht haben: Die Catalasa, Glutathion Reductasa, Glucosa-6P-Deshidrogenasa, Superoxide Dismutase und Glutathion Peroxidasa. In Übereinstimmung mit den vorliegenden 8 aß, bevor a72 riormente, dieser Bericht vorgeschlagen, die folgende Ziele verfolgt: 1.