NATÜRLICHE PRODUKTE BIOTECHNOLOGIE

Autor: MARTINEZ ARTEAGA BASELGA ROCIO.
Jahr: 2005.
Universität: AUTÓNOMA DE MADRID.
Ort der Lesung: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGIA CSIC.
Ort der Vorbereitung: CENTRONACIONAL DE BIOTECNOLOGIA CSIC (UAM).

Inhaltsangabe: Wir haben gezeigt, wie der Bus in die Abschrift eines der Gruppenmitglieder dcw (ftsZ) verursacht physiologische Wirkung: Neben den nicht gespalten, die Zellen verlieren ihre Tragfähigkeit. FtsZ ist ein Protein essentiell für die Teilung Escherichia coli. Das Fehlen dieses Proteins führt zu den filamentation, und die Zellen wachsen, aber nicht in der Lage sind zu teilen. In Ermangelung von FtsZ, verlieren die Fasern ihre Lebensfähigkeit in einem Zeitraum von zwei Stunden. Rentabilität wiederhergestellt ist, wenn das Niveau der FtsZ sind wieder auf den ursprünglichen Werte in der elterlichen Belastung. Die Verwendung von Gen Arrays hat uns ermöglicht, zu analysieren, die Muster der Genexpression in drei verschiedenen Bedingungen; Ausdruck ftsZ, in der Abwesenheit von seiner Rede und Wiederherstellung. Ebenen der tránscrito Gruppe ribosomalen Gene zeigen einen steilen Rückgang nach dem Anschlag in der Gentherapie Ausdruck ftsZ und während der Wiederherstellung nicht zurückgewonnen werden. Während der Wiederherstellung der Genexpression ftsZ, fügen Schichten von tránscrito von Genen in der Antwort auf Schäden an DNA und Gene, die im Stoffwechsel biosintético (anabolismo Nukleotid, und Aminosäurenstoffwechsel Central Vermittler). Zur Validierung der Ergebnisse der Gen Arrays quantifiziert Ebenen tránscrito einige relevante Gene (zB ftsZ, clpP, uvrC) durch RT-PCR. Quantifizierung Ebenen tránscrito solcher Gene weitgehend bestätigt die Ergebnisse mit Gen Arrays. Die transkriptionelle Reaktion beobachtet schlägt vor, mögliche Mechanismen, die die Zelle nimmt, sich auf ein Leben in der Abwesenheit von Spaltung und wie können sie Einfluss auf die Aktionen der lebensfähigen gehören Verwässerung der Kulturen. Wenn Sie feststellen, dass die Haltestelle in der Abteilung provoziert eine Antwort in der insgesamt Transkript, haben wir den gegenteiligen Effekt, dh, wenn die Veränderungen in der physiologischen Bedingungen eine Auswirkung auf die Höhe der tránscrito Gruppe dcw, die größte Gruppe von Genen, der Spaltung und Synthese von Peptidoglicano. Wir analysieren das Niveau der tránscrito von Genen Gruppe dcw durch RT-PCR zu überprüfen, ob physiologische Bedingungen, unter denen die Expression dieser Gene. Die Expression von Genen in der Gruppe dcw ist, die von physiologischen Bedingungen, so dass sie wachsen exponentiell Kulturen, ist höher inmitten reich inmitten Armen. Diese Ergebnisse zeigen, dass die Geschwindigkeit des Wachstums produziert einen Einfluss auf die Höhe der tránscrito Gruppe dcw.

Autor: PALOMINO DEL CASTILLO CARMEN.
Jahr: 2005.
Universität: AUTÓNOMA DE MADRID.
Ort der Lesung: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGÍA - CSIC.
Ort der Vorbereitung: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGÍA.

Inhaltsangabe: Streptomyces lividans ist ein Gram-positive Bakterien, sondert große Menge von extrazellulären Enzymen (Gilbert et al., 1995). Das Bakterium wurde als Host-System für die Produktion von rekombinanten Proteinen (Gilbert et al., 1995), aber auch die Leistung und die Verbesserung der Produktion dieser Proteine, einige industrielle Anwendung, bedarf es einer ausführlichen Untersuchung und Identifizierung von Engpässen Die Mechanismen, die in die extrazelluläre Sekretion von Proteinen in Strptomyces. Der Mechanismus der allgemeinen Transport-Proteine (sec) beginnt mit der Anerkennung und der Interaktion mit intrazellulären Maschinen-Sequenzen aminoterminales Sekretion von Proteinen. Zwei Hauptwege wurden in verschiedenen Bakterien auf der einen Seite, den Mechanismus durch SecA / B Protein-Sekretion führt zu der Membran Form postraducional (Beck et al., 2000) und auf der anderen Seite, durch den Mechanismus der GFP Maschinen, Von Ffh und scRNA und Empfänger FtsY laufen, die Proteine an der Membran, die zu Beginn ihrer Synthese für die Translokation durch die Membran Kanal oder translocón, viele dieser integrale Membranproteine, wie im Fall von E. coli (2005 ). Wir haben keine gefunden Gen Homologe SecB in Streptomyces lividans, aber sie sind vorhanden, die Gene von Maschinen GFP, ffh, scRNA und ftsY (Palacín et al., 2003). Ffh und scRNA bilden die GFP von S.lividans (Palación et al., 2003). Mit dieser Arbeit haben wir ein völlig von Ffh, FtsY Modell-und Protein-Sekretion, alpha-amilasa und agarasa, im Zytoplasma der Zelle Mutante pepetidasa Signal für die Mehrheit (Y62) (Palomino und Mellado, 2005), wo das Muster der Sekretion ist zurückgegangen (Palación et al., 2002), was darauf hinweist, dass die GFP ist in den Mechanismus für die Sekretion von diesem Bakterium. Darüber hinaus wurde festgestellt, dass die Mutante Y62 hat einen Einfluss auf die Höhe der Ffh und FtsY in der Membran, da beide Komponenten steigen, finden sich in Form von ocmplejos bestehend Ffh, FtsY und preproteína pre-alpha-Amylase. Dank der miscroscopía Immunfluoreszenz haben wir gesehen, die Position des SRP-Komponenten an den einzelnen Standorten der Hyphen der Mutante Y62 vor den wilden Stamm diffus. Dieser Ort erinnert sich die Position spezifische mikroskopische translocón gepaart mit GFP. Es wurde ein Phänomen Anhäufung Vermittler von Ffh, Ihren Empfänger und preproteínas, in der Membran des Endoplasmatischen Retikulum von eukaryotischen Zellen, wenn es keine transolocón verfügbar (Gesang und Kohl., 2000). Eine ähnliche Situation kann sich in S.lividans in Abwesenheit von peptidasa Signal Mehrheit, tritt auf, wenn die Verarbeitung führend Peptid kann dazu führen, dass eine ineffiziente temporären Block in der translocón. Schließlich Ffh und FtsY gepaart mit pre-alpha-Amylase bilden ein komplexes Membran sind auch im Zusammenhang mit Membran-ATPase SecA, was darauf hinweist, dass die Proteine transportiert werden, um die Membran von der GFP, die für die Aktion der SecA für die Translokation.