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ERHALT D OPTISCH REINEN AMINOSÄUREN AUS EINEM REKOMBINANTEN SYSTEM.Autor: MARTINEZ RODRIGUEZ SERGIO. Jahr: 2004. Universität: ALMERÍA [ www.ual.es]. Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIAS EXPERIMENTALES. Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIAS EXPERIMENTALES. UNIVERSIDAD DE ALMERIA. Inhaltsangabe: Die Motivation für die Untersuchung von Prozessen und Methoden biocatalíticos ist zunehmend geprägt durch das Interesse an der Synthese von Verbindungen enantioméricamente Zigarren (CEPs). Die spezifische Aktivität von CEPs der Regel hängt von seiner quiralidad. Nur einer der beiden Isomere ist nützlich für ein Ende determínado, während der andere als Umweltverschmutzung. Die CEPs von der Industrie kann synthetisiert químícamente. Allerdings werden die meisten der Verbindung, die durch organische Synthese sind Mischungen racémicas zu lösen, bis seine Komponenten rein optisch, bevor er verwendet werden. Die Auflösung dieser Verbindungen können durch chemische und / oder biologische Agenzien, die auch cristalizacíón Salz estereoméricas, Kristallisation Lösungsmittel optisch aktiven Chromatographie und / oder enzymatische Verfahren. Alle diese Verfahren haben eine sehr begrenzte industrielle Anwendung wegen der niedrigen Rendite, der geringen Rentabilität und der starken umweltschädliche Auswirkungen der Umwelt. Die optisch reinen Aminosäuren haben eine große industrielle Bedeutung, weil von ihr Potenzial für die Verwendung in einer Vielzahl von Bereichen, einschließlich der pharmazeutischen und Lebensmittelindustrie, sowie mikrobiologischen und biochemischen Untersuchungen. Es hat seine Verwendung bei der Herstellung von Seren, als Lebensmittelzusatzstoff oder als Zwischenschritt bei der Vorbereitung von Medikamenten, Kosmetika, Pestiziden, Kunstleder und Umsetzung von chiralen Reagenzien in der organischen Synthese. Die L - aminoácidos natürliche oder proteinogénicos, lassen sich durch die Fermentation der natürlichen mikrobiellen Belastungen oder Mutanten. Aber auch andere Methoden sind für die Produktion von L - aminoácidos unnatürlich und D - aminoácidos. Es gibt verschiedene Methoden der chemischen Synthese von a aminoácidos. Die interessante aus der Sicht sind diejenigen, die industriellen Verbindungen niedrigen Kosten, die alle diese Prozesse auf zwei Methoden der Synthese: a) die Synthese von Strecker b) ein - cetoácidos ami Nation reduktiv. Beide Methoden führen zu einer racemisches Gemisch, muss gelöst werden, bevor verwendet werden. Dieser Schritt Reinigung Grenzen ihrer industriellen Anwendung, aufgrund der hohen Kosten und niedrigen erlösenden. Die Einschränkungen, die von der traditionellen chemischen Synthese führte zu der Suche nach anderen Methoden, die die direkte Entnahme von optisch reinen aas Dateien. Die Produktion von Aminosäuren L Sie rein optisch durch enzymatische Katalysatoren aus Mischungen racémicas D, L - hidantoinas monosustituidas an Kohlenstoff 5 ist ein günstiger und technisch einfacher als die Methoden der chemischen Synthese und quimioenzimática, abgesehen davon, dass sauberer. Dieser Prozess wird auch als "Prozess der hidantoina." Diese enzymatische Umwandlung in erster Linie, den Ring der hidantoinas D L - 5 - sustituidas synthetisiert chemisch hydrolysiert wird durch das Enzym hidantoinasa. Anschließend werden die Hydrolyse von N - carbamil Aminosäure produziert wird durch das Enzym N - carbamil - aminoácido amidohidrolasa (carbamilasa). Diese Reaktion erfolgt NH3, CO2 und der entsprechenden Aminosäure. Gleichzeitig wird die hidantoinasa hydrolysiert speziell Isomer ein oder anderen der hidantoina beginnt Racemisierung chemische oder enzymatische den anderen Isomer nicht hydrolysiert. Die Produktion von ein Enantiomer oder anderen aminoácído hängt von der estereoespecificidad von Enzymen, mit denen sie arbeitet. Die Chemie des Racemisierung hydantoins in der Lage ist, stark alkalischen von tautomerismo ceto - enólico, und die Geschwindigkeit hängt von der electronegatividad der Ersatz Kohlenstoff 5. Racemisierung Zeiten sind sehr hoch, was den Erwerb von 100% der D - aminoácido optisch reinem auf eine sehr geringe Zahl von hydantoins. Nur Geschwindigkeit racemizacíón 8 espontá 69c Zeile parahidroxifenilhidantoína und fenilhidantoína vor profitabel industriellen Beschaffung der entsprechenden D - aminoácidos. Deshalb hat die überwiegende Mehrheit der D L - hidantoínas ersetzt nicht racemizan spontan zu einer angemessenen Geschwindigkeit und Verlängerung encareciendo Erlangung Aminosäuren aus. Die Geschwindigkeit der Racemisierung von hidantoinas erhöht werden kann, um profitabel Nutzung der katalytischen Aktion des Enzyms hidantoín racemasa. Die gemeinsame Nutzung dieses Enzyms, D - hidantoinasa und D - carbamilasa ermöglicht die Umwandlung der hidantoina im D - aminoácido. Evídenciada enorme Verbesserung im Prozess der hidantoina nach Aufnahme des dritten Enzym, in unserem Labor sind die Erhöhung der Suche nach diesem Enzym in natürlichen Quellen, und der Bau eines rekombinanten multienzimático für die Umstellung insgesamt hydantoins racémicas bis D - aas optisch rein.
STUDIEREN AGAGDSL, EINE SPEZIFISCHE LIPASE BLATT EPIDERMIS AGAVE AMERIKANISCHE LAutor: REINA PINTO JOSÉ JUAN. Jahr: 2004. Universität: MÁLAGA [ www.uma.es]. Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIAS. Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIAS. Inhaltsangabe: Die oberen Etagen haben eine Deckung der Natur Lipidgehalt Futter der Antenne Teile des gleichen, und dass die externen Umwelt isoliert Umgebung. Diese Berichterstattung ist in erster Linie pflanzliche Kutikula und besteht aus einem biopolímero hydroxy Säuren Säuren von 16 oder 18 Kohlenstoffatomen. Dieses Polymer wird cutina. In dieser Dissertation Arbeit durchgeführt worden, eine Studie über ein bestimmtes Protein in der Haut der jungen Blätter der Pflanze Agave Amerikanische L. Das Klonen von cDNA aus der mRNA, kodiert ein Protein AgaGDSL zeigte sich, dass das Protein gehört zur Familie der Lipasen Typ II oder Lipasen GDSL. Der Ausdruck der mRNA, ist einzigartig auf dem Gebiet basalen jungen Blätter der Pflanze (30-35 cm) zu verwenden. Experimente inmunocitolocalización gezeigt, dass AgaGDSL befindet sich in der Epidermis Schicht von Zellen direkt unter der Anlage Oberhaut und auch seine Position in den meisten Bereichen der aktiven Wachstum auf dem Blatt positiv korreliert mit der Zunahme von Komponenten cuticulares (cutina, Wachse und cután) in einem solchen . Der Ausdruck dieses Proteins in einem heterologen aus E.coli nicht geben, das Protein in seiner aktiven Form nach mehreren Versuchen Induktion. MODELL KOMBINIERT UND STOFFWECHSELRATE REAKTOR, IN DER PRODUKTION VON L (-) - CARNITINA VON VERBINDUNGEN TRIMETILAMONIO DURCH E COLI.Autor: Sevilla Camins Angel. Jahr: 2005. Universität: MURCIA [ www.um.es]. Ort der Lesung: Facultad de Química. Ort der Vorbereitung: Facultad de Química. Inhaltsangabe: Dieser Speicher hat eine umfassende Studie, die Stoffwechselprozesse Ebenen, genomische und señalómicos die Biotransformation der Verbindungen trimetilamonio L - (-) carnitina von E.coli, die Optimierung der Synthese von Carnitin durch Analyse der experimentellen Ergebnisse und der Entwicklung von Detaillierte mathematische Modelle. Der erste Versuch gemacht, um die Optimierung der Biotransformation von Carnitin ist ein einfaches Modell des gesamten Prozesses (ua Cánovas., 2002). In diesem Modell hat die Fähigkeit zur Simulation und Vorhersage der Entwicklung der Stoffwechselwege, die an der Biotransformation. Nachdem es hat kombiniert die mittel- und Stoffwechsel Carnitin Ebenen von ATP und Coenzymen Rechnungshof, und zwar unter Berücksichtigung der Ansatz der Analyse Metabolische Flows (MFH). Darüber hinaus hat eine Pilotstudie zur Validierung der Ergebnisse, die in den früheren Modellen durch die Unterbrechung des bioproceso mit den wichtigsten Produkten der Gärung und Biotransformation von dem Substrat. Darüber hinaus haben wir modelliert und validiert und Signalwege die Genexpression der Komponenten des Stoffwechsels Carnitin, einschließlich der Transkription, Übersetzung und Prozesse degradativos, und mit der Angleichung hierarchischen Kremling und Gilles (2001). Die Ergebnisse dieser Studien haben Checkpoints in der Biotransformation von Carnitin sowohl makroskopischen (Reaktor) als mikrokosmischen Ebene (intrazelluläre). Hat nicht nur festgestellt, dass der Prozess ist abhängig von der ATP Biotransformation, sondern auch die zellulären Redox- Staat ist auch ein sehr wichtiger Faktor für die Optimierung. Darüber hinaus hat er den Mechanismus der Hemmung von Glukosestoffwechsel Carnitin und ein Weg zu vermeiden. Es ist auch ein Indikator für den Stand der bioproceso (cAMP-Konzentration), in denen Glukose wird als eine Quelle von Kohlenstoff. MOLEKULARE MECHANISMEN MODULIEREN, DASS DIE EXPRESSION VON FUNKTIONELLEN REZEPTOREN NICOTINICOS NEURONALE BEDEUTUNG VON DOMAINS CITOPLASMATICOS UND DIE AUSWIRKUNGEN VON PROTEINEN RIC3Inhaltsangabe: Das Ziel der Dissertation ist es, einen Beitrag zur Kenntnis der molekularen Mechanismen, die Einfluss auf die Ausprägung des neuronalen nikotinischen Rezeptoren. Die unmittelbaren Ziele waren: 1) Um zu bestimmen, den Einfluss von Domains citoplásmaticos bestimmte Art von Nikotinsäure-Rezeptor alpha 7 in ihrer funktionalen Ausdruck. Zu diesem Zweck wurde eine Umfrage durchgeführt von Mutagenese mit der Aminosäure Ala monitorizándose der Oberfläche-Rezeptor-Expression und funktionelle Aktivität. Die Ergebnisse zeigen, eine Schlüsselrolle in einer Region nahe anfipática Segment M4 in der Biogenese und Funktion des Rezeptors. 2) charakterisieren die Auswirkungen der CIP-3 über die Modulation der neuronalen nikotinischen Rezeptoren. Es analysiert die Wirkung dieser Proteine in der Biogenese und Transport-Rezeptor-Oberfläche. Ebenso identifiziert protéicos Domains, die in der Modulation der beiden Parameter. Die Ergebnisse legen nahe, eine zentrale Rolle des Proteins RIC-3 und die biologische Aktivität des Nikotinsäure-Rezeptor alpha-7.
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