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STUDIUM DER STRUKTUR UND FUNKTION DER TRANSPORTER MELIBIOSA D'ESCHERICHIA COLI, PER INFRAROT SPEKTROSKOPIE.Autor: DAVE COLL NATÁLIA. Jahr: 2002. Universität: AUTÓNOMA DE BARCELONA [ www.uab.es]. Ort der Lesung: FACULTAT DE MEDICINA. Ort der Vorbereitung: ESCOLA DE DOCTORAT I FORMACIÓ CONTINUADA. Inhaltsangabe: Die Transporter melibiosa (MelB) ist ein Membranprotein aus Escherichia coli akkumuliert Alpha oder Beta - galactósidos innerhalb der Zelle, dank der Energie, die von Kationen Na +, H + oder Li +, contrasportados, so simporte. Wir haben das Protein solubilizada im Waschmittel docecilmaltósido und gebrauchsfertige in Lipid d'E. Coli in vier verschiedenen Bedingungen für die Substrate: H +, Na +, H + und melibiosa, und Na + und melibiosa. Die Studie von MelB im H2O erfolgt über Infrarot Übertragung Spektroskopie ergab, dass das Protein Form enthält etwa 50% der Propeller, eine 20% Beta Blatt, eine 17% dreht Gegenteil, und 12% für andere Arten. Diese Daten wurden durch die Ergebnisse der sekundären Struktur, die in D2O. Die Quantifizierung der sekundären Struktur steht im Einklang mit dem Modell der sekundären Struktur bestehend aus 12 Propeller transmembranen. Die Ergebnisse zeigten auch Änderungen in den Strukturen, die durch sekundäre Substrate. Barrierefreiheit gesamten sekundären Strukturen der MelB die wässrige Lösungsmittel wurde durch kinetische Austausch D2O. Die Ergebnisse ergaben eine Erreichbarkeit von 54%, wenn sich der MelB inkubiert mit Na + und H +. Im Gegensatz dazu, den Zusatz von Zucker melibiosa führte zu einem Rückgang der Zugang zu den wässrigen Lösungsmittel in einer 5-10%. Eine detailliertere Analyse der Zugänglichkeit ergab, dass die Zugabe von Zucker schützt vor Beta Blatt. Die Analyse der Infrarot Spektren der MelB im H2O und D2O, die mit polarisierten Strahlung ergab Veränderungen in der Ausrichtung der Propeller als Substrat vereint. Es wurde festgestellt, dass für MelB kombiniert mit der H +, mit oder ohne melibiosa Propeller einen Winkel conl oder normale Membran 26Â °. Im Gegensatz dazu ist die Zugabe von Na + sinkt der Führung der Propeller zu 36Â °.
ICH CARACTERITZACIÓ DER PRODUCCIÓ VARIANTEN DER BAUCHSPEICHELDRÜSE RIBONUCLEASE MENSCHLICHEN DISSENYADES PRO ERWERBEN PROPIETATS CITOTÒXIQUES.Autor: BOSCH GRAU MONTSERRAT. Jahr: 2003. Universität: GIRONA [ www.udg.es]. Ort der Lesung: CIENCIAS. Ort der Vorbereitung: UNIVERSITAT DE GIRONA. Inhaltsangabe: Zur Untersuchung der molekularen Grundlagen der citotoxicitad der Bauchspeicheldrüse ribonuclease ist construyeronn mehrere Varianten dela HP - Rnasa utizando zwei Strategien distintas.En der ersten generarón Varianten des Enzyms resistent gegen die Maßnahmen der Inhibitor Protein ribonucleasas (RhI) durch den Ersatz von Abfälle, die in der Schnittstelle von Kontakt zwischen den ribonucleasas und (rhI). Der zweite Grund war, fügte hinzu RGD Oberfläche in Regionen des Proteins, die in die Bildung des Komplexes mit (Rhein). Dies war die Förderung der Interaktion zwischen dem Enzym gleichzeitig mit der Zellmembran und reduziert ihre intercción mit inhibidor.Se festgestellt, dass nur Varianten mit mehreren Substitutionen waren in der Lage zu vermeiden intercción mit dem Inhibitor. Die Studie der Anteil der Hemmung der Proteinsynthese in Zellen inkubiert mit jedem der Varianten zeigte sich, dass nur zwei von ihnen adqurían Eigenschaften citotóxicas.Sorprendentemente, variente mehr zytotoxischen zwischen diesen erwies sich als anfällig für HRI. Dies ist PE5, und stellt einen Wert von IC50 nur zwischen 5 und 15 Mal weniger als die von der onconasa. Dieses Ergebnis zeigt, dass die Empfindlichkeit ist nicht ein HRI facto eine zwingende Voraussetzung für die Toxizität von ribonucleasas.Así, keine der Alternativen Carrier Grund RGD zytotoxischen erworbenen Fähigkeiten. Die Analyse der Internalisierung der Alternativen radioaktiv markiert haben gezeigt, dass nur onconasa tatsächlich verinnerlicht während der ersten 7h Inkubation. Es entschied, auf diese Weise die Möglichkeit, dass die zytotoxischen Eigenschaften von PD5 sind das Ergebnis von mehr Effizienz der Endozytose. Es wurde auch festgestellt, dass die Zugabe von Boden RGD nicht in der Lage ist zur Förderung der Internalisierung von Proteinen enthält. Nach einem konfokalen Fluoreszenzmikroskopie wurde empezarón zu erkennen Varianten innerhalb menschlicher Zellen erst nach 24 h Inkubationszeit. Alle Varianten, die ein nicht eficíencia Katalysator mehr als 50% dela Tätigkeit der Proteinquelle, 5. RP. Dieses Ergebnis deutet darauf hin, dass wahrscheinlich die Struktur der aktiven Varianten wurde nicht betroffen drastisch durch die Substitutionen. Aber in allen Fällen gab es einen Rückgang von Thermostabilität im Vergleich zum 5. RP. Die Studie von intrazellulären Fahrstreifen der drei Varianten der HP - Rnasa (PE5, 5. und eine Alternative zytotoxischen aber nicht beständig Hri) zeigte sich, dass alle von ihnen folgen der gleichen Transport Strecke, was dazu führt, von der Oberfläche in Richtung Zelle Lysosomen. Dieser Weg wurde nicht beeinträchtigt durch den Zusatz von Medikamenten, die die lasvías Transit Rückschritt, wie Monensin und brefeldina A. Aber durch die bafilomicina A1, dient zur Neutralisierung Steigung Ph endosomal und Verlangsamung des Verkehrs endosonal haben Lysosomen. Laut diesen Daten, die Werte der citotocicidad der Varianten wurden erheblich nur in der Präsenz der Droge, dass der ribonuclease erreichen, die nach der Kreuzung Zytoplasma Membran System endosomal ab einem gewissen Punkt vor der Lysosomen. Charakterisierung macanismo der Zytotoxizität der Variante PE5 schlug vor, dass die Anwesenheit von einer zweiten Quelle dieses Proteins in drei Arg. gab ihm ein Signal der nuklearen Verkehr, deren Aufgabe es ist, für seine Position in diesem Fach. So, der Teil des Enzyms, die sich bei der Zytosol 8 aus der 563 n endosomas wird rasch in Richtung auf den Zellkern durch den Mechanismus der aktiven Transport Klassiker. Für seine Affinität xon rRNA, das Enzym, konzentriert sich unten in der Nukleolus, die wahrscheinlich macht seine katalytische Aktivität. Ebenso ist die Interaktion dela Variante PE5 mit Rezeptoren, die für den Transport zum Kern (importinas), der sich auf der Ebene der NLS, würde verhindern, dass die Bildung von komplexen enzima - Hri, so dass die Blockade des Enzyms durch seinen Inhibitor. Die Ergebnisse dieser Arbeit bieten eine neue Strategie für die Gestaltung ribonucleasas zytotoxischen basiert auf der Addition der NLS Segmente mit dem Ziel der Förderung der Kernenergie Transport von Enzymen. Diese Fähigkeit könnte überwinden Faktoren, die bisher als eindeutig gegen citotóxicidad der Bauchspeicheldrüse ribonuclease als Són, Són Empfindlichkeit des Enzyms HRI oder niedrige Internalisierung. PROTEINE RESERVE SENF GELB UND 1,3 - BETA - GLUCANASA POLLEN OLIVENÖL ALS STUDIE MODELLE VON ALLERGENEN PROTEINEN.Autor: PALOMARES GRACIA OSCAR. Jahr: 2004. Universität: COMPLUTENSE DE MADRID [ www.ucm.es]. Ort der Lesung: FACULTAD DE CC. QUÍMICAS. Ort der Vorbereitung: FAC. CC. QUÍMICAS, DPTO. BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR I. Inhaltsangabe: Die Forschung in dieser Dissertation konzentriert sich auf die Untersuchung und Charakterisierung von Proteinen alegénicas Senfgelb und Oliven Pollen. Insbesondere durchgeführt worden, strukturelle und immunologische Charakterisierung der N- und C-terminale Domänen von Ole und 9, wichtigsten Allergene Pollen Olivenöl Aktivität 1,3 - Beta - glucanasa, die sich in beiden Bereichen rekombinante Form, in der Hefe P.pastoris Und zur Homogenität gereinigt. Es hat sich gezeigt, dass 1,3 - Beta - glucanasas beteiligt sind in Prozessen der Kreuzreaktivität zwischen Pollen, Lebensmittel, Obst und Gemüse wurde Maus Modell der allergisch auf Ole und 9, in dem sich ein getestet prophylaktische Behandlung mit Fragmenten recombinants . Darüber hinaus hat eine Studie Mapping epitópico die C-terminal von Ole und 9 und analysiert die klinische Relevanz der beiden Bereiche recombinants. Auf der anderen Seite hat es der Vorläufer von Sin zu 1, die wichtigsten Allergene gelben Senf, Hefe P.pastoris, konnte seine Analyse der strukturellen und immunologischen Eigenschaften und vergleichen Sie sie mit denen der Wildnis. Diese Studie ist erlaubt, schlagen vor, dass das rekombinante Protein kann als ein Marker Bewusstsein Senf. Es wurde auch isoliert und eine neue Allergen Senf hohem Molekulargewicht. Dies ist ein Globulin 11S, No - 2, das war Struktur- und immunologisch. Schließlich ist die cDNA geklonten Codierung für Sin - 2 und analysiert die Eigenschaften dieser Reihenfolge. PLEGAMIENTO UND MONTAGE DER PROTÉINA DER ZELLTEILUNG FTSZ DER METHANOCOCCUS JANNASCHIL.Autor: OLIVA BLANCO M. ÁNGELA. Jahr: 2004. Universität: COMPLUTENSE DE MADRID [ www.ucm.es]. Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. Ort der Vorbereitung: CENTRO DE INVESTIGACIÓN BIOLÓGICAS-CSIC (MADRID). Inhaltsangabe: FtsZes eines der Proteine, intervienenen die divisionof Prokaryoten. Ensamblaen Website divisiónformando ein anillodenominado Ring Z, die den Rahmen, an dem der Rest wird für die Proteine rekrutiert, die in der Zellteilung. FtsZ ist hoch konserviert zwischen Prokaryoten und sogar Körper hat sich in den Chloroplasten und Mitochondrien von einigen eukaryontischen Organismen. Es handelt sich um ein Protein homolog zu eukaryotischen tubulin, und beide sind GTPasas mit dem gleichen tertiären Struktur. Tubulin erfordert eine große Anzahl von molekularen und cofactors chaperonas zum Erwerb ihrer nativen Struktur und Funktionen, während FtsZ der M.jannaschii scheint nicht zu haben, die gleichen Anforderungen und ist in der Lage, mal in vitro aus einem Staat denaturiert. Dieses Papier wurde analysiert die polymorphe von FtsZ Montage von M. Jannaschii und die Verwendung von Techniken der Elektronenmikroskopie und Bildverarbeitung wurde vorgeschlagen, dass die grundlegende Struktur dieses Proteins Montage ist ein Strang, bestehend aus zwei parallelen, die Protofilamente. Verschiedene lateralen Wechselwirkungen zwischen diesen Filamente geben Anlass zu verschiedenen Arten von Polymeren in der Studie. Schließlich haben wir analysiert, die Veränderung conformacionallnducido durch Hydrolyse von GTP Nukleotid sich FtsZ mit Kristallographie Beugung und Röntgen Die Struktur der protofilamento des Proteins hat gezeigt, dass sie die gleichen axialen Kontakte während der Montage der tubulin im mlcrotúbuios. Es zeichnet sich auch die Struktur der aktiven Seite des Proteins, und es wurde festgestellt, dass, um zu beobachten, ändern conformacional induziert die Nukleotid Hydrolyse ist erforderlich Studie von Nukleotid bindende Website insgesamt (die Schnittstelle zwischen zwei Moleküle), und nicht das Monomer (die Einerseits wurde das Datum).
STRUKTURELLEN UND FUNKTIONELLEN STUDIEN ÜBER DIE VERBLEIBENDE METALLOCARBOXYPEPTIDASA INHIBITOREN. VERORDNUNG ÜBER DIE EINLEITUNG DER PROTEINSYNTHESE DURCH OXIDATIVEN STRESS.Autor: O`LOGHLEN VELICIA ANA. Jahr: 2004. Universität: COMPLUTENSE DE MADRID [ www.ucm.es]. Ort der Lesung: FACULTAD CIENCIAS BIOLOGÍCAS. Ort der Vorbereitung: HOSPITAL RAMON Y CAJAL. Inhaltsangabe: Die Dissertation befasst sich mit der oxidativen Stress durch U2O2 Zellen PCI2 differenziert mit NGF, H2O2 produziert eine starke inhidirción Delo Synthese von Proteinen in der parallel mit der Erhöhung der fosfonlación der Eif2x, den Rückgang bei den fosfolación von eIF4E und 4E - BP1 und inhidición von Heutigen eIF4F und die poteina fosfatosa PP1. Zusätzlich zu allen, die U2O2 produziert Zelltod, die sich auf die Behandlung mit den antioxidativen N, acetil - cisteina (NAC). NAC Überprüfung verhindert inhateción dela sistesis poteica. Schließlich, zu identifizieren und rucieterizan eine neue Form von nicht rk eII4E quinusa MNK1, rufen sie MnK1B liegt im Herzen, und das ist auch in viel Gewebe. ANWENDUNG VON TECHNIKEN FLUORESZENZ UND RASTERKRAFTMIKROSKOPIE ZUR UNTERSUCHUNG DER WECHSELWIRKUNGEN LÍPIDO - PROTEÍNA MODELL MEMBRAN.Autor: MERINO MONTERO SANDRA. Jahr: 2004. Universität: BARCELONA [ www.ub.es]. Ort der Lesung: FACULTAD DE FARMACIA. Inhaltsangabe: Die Membran Proteine für zwischen 25 und 30% des Proteins in den Zellen und kann in einigen Fällen, die Mechanismen der Resistenz gegen bestimmte Medikamente. Es ist daher von großem Interesse für die Untersuchung von Proteinen in diesen Modellen biomiméticos wie proteoliposomas oder Kristalle 2D. Die Anwendung von Techniken manométricas, wie Rasterkraftmikroskopie (AFM), sowie bestimmte Methoden Fluoreszenz (Berechnung der Erhöhung der Oberfläche elektrostatische Potential und die Fluoreszenz Anisotropie), so dass die Untersuchung des Prozesses der Wiederaufbau des Proteins. Die Arbeitsgruppe Hypothese und Hauptziel dieser Arbeit war die detaillierte Untersuchung der Prozess der Auflösung von zwei Proteinen transmembranarias, porina Omp1 von Serratia Marcescens und Laktose permease von Escherichia coli (LacY), modelliert, um die Anwendbarkeit von Techniken, die für diese Art von Molekül, Cytochrom c und der melitina. Schließlich, so wurde festgestellt, daß sowohl proteoliposomas als Folien lípido - proteicas gewonnen wurden völlig stabil in Lösung und auf einer ebenen Untergrund. Die LacY Auflösen in POPC wurde kristallisiert in 2D und durch AFM, einen Boden dimérico. Die Zelle Parameter waren: a = 13,15 sm, s = 16,74 nm und = 116, im Einklang mit einer symmetrischen Typ p2 ist. STÖRUNGEN DES CIRCADIANEN UHR KASTANIE (CASTANEA SATIVA MIO.). WINTERRUHE WÄHREND DES WINTERS UND ALS REAKTION AUF DIE NIEDRIGEN TEMPERATURENAutor: RAMOS ARANGUREN ALBERTO. Jahr: 2005. Universität: POLITÉCNICA DE MADRID [ www.upm.es]. Ort der Lesung: E.TÉ.S. DE INGENIEROS DE MONTES. Ort der Vorbereitung: ESCUELA TÉCNICA SUPERIOR DE INGENIEROS DE MONTES.
Inhaltsangabe: Es waren in der Europäischen Kastanie cDNA-Klone der Gene CsTOC1 und CsLHY, Gegenstücke zu den Elementen des circadianen Oszillator Arabidopsis. Die zirkadiane Rhythmus der Boten-RNA von Genen CsTOC1 und CsLHY an der Wurzel, Stamm und Blätter von Kastanien Setzlinge wachsen in der üblichen Bedingungen von Licht und Temperatur (22Â ° C und LD) ist ähnlich dem beschriebenen für die Uhr Arabidopsis. Dieses Verhalten ist auch in den Bäumen Erwachsene in Zeiten des Wachstums. Es wurde festgestellt, dass während des Winters Keimruhe der Kastanie Berücksichtigung der Veränderungen in der Funktionsweise der circadianen Uhr in der Knospe wie in den Stamm: die Ebenen der Bote CsTOC1 und CsLHY nicht variieren und sind dauerhaft hoch. Eine ähnliche Unterbrechung der Induktion in den Blättern und Stielen der Setzlinge in Reaktion auf niedrige Temperaturen (4Â ° C). In Arabidopsis nicht induzieren diese Veränderungen als Folge von Kälte oder Winter, was darauf schließen lässt, die Existenz von Unterschieden in Teilen oder in die Mechanismen der Regulierung der Uhren in beiden Arten. Die Expression von Genen CsTOC1 und CsLHY Oszillator Kastanie endodurmientes oder ausgesetzt 4Â ° C ruft die circadiane Rhythmen, wenn sie auf 22Â ° C, was bedeutet, die Veränderung der relojo ist nicht, die für den Prozess der endodormancia aber eine direkte Folge der Ausstellung Ist es, die niedrigen Temperaturen. Dies bedeutet jedoch nicht ausschließen, dass solche Veränderungen könnten eine Rolle in der Entwicklung der gleiche. Es behandelt den Einfluss sie haben die Stoppuhr im Stoffwechsel der Bäume Schwellen, und wirft den verschiedenen Verhalten der braunen und Arabidopsis als Reaktion auf die niedrige Temperatur bedeutet, dass der Prozess der Akklimatisierung zu Woody Pflanzen in kalten Klimazonen gemäßigten müssen spezifische Charakteristika signifikant im Vergleich Mit dem jährlichen krautigen Pflanzen. SUBDOMAIN HELIXFILTER DMAK: KONFORMATIONSÄNDERUNGEN UND MITWIRKUNG IN DER FUNKTIONALEN ZYKLUSAutor: FERNÁNDEZ SÁIZ VANESA. Jahr: 2005. Universität: PAÍS VASCO [ www.ehu.es]. Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA. Ort der Vorbereitung: BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR - FAC. CIENCIAS. Inhaltsangabe: Diese Dissertation konzentriert sich auf die Untersuchung der C-terminalen helikalen Subdomain der Chaperon DnaK, was die Mehrheit der Hsp70 Proteine in E. coli. Diese Gruppe von molekularen Chaperonen ist weit verbreitet im Cytosol und in prokaryontischen und eukaryontischen Organellen. Sie beteiligen sich an einem breiten Spektrum von Aktivitäten, wie die Montage von Protein-Komplexen, Transport über Membranen, die Faltung von Proteinen de novo synthetisiert, wie auch in den solubilization von Protein-Aggregate in stressigen Situationen Zelle. Alle diese breite Palette von Aktivitäten wird durch einen Mechanismus, mit abgestimmten Konformationsänderungen in den zwei funktionellen Bereichen bestehen, dass Hsp70 Proteine. Wurden studierte mit Hilfe von biochemischen und biophysikalischen Methoden die Rolle der Propeller C-terminales von DnaK in alostérica Kommunikation zwischen den beiden Domänen des Proteins und Stabilität in der Mitte des Substrats bindend. Ebenso haben wir festgestellt, dass die Interaktionen ermöglichen den Anker der Propeller C-terminales über dem Zentrum von Substrat bindend, und daher die Regelung des Zugangs zu werden. Schließlich hat sie untersucht das Zusammenspiel von cochaperonas GrpE und DnaJ mit DnaK, und die Rolle des Substrats binding domain in dieser Interaktion, und ihre physiologischen Wirkungen. PROTEASEN ICH INHIBIDORS COM, UM EIN ESTUDIS VON MODELLEN PRO RELACIÓ ESTRUCTURA - FUNCIÓ ICH AGREGACIÓAutor: PALLARÈS GOITIZ IRANTZU. Jahr: 2005. Universität: AUTÓNOMA DE BARCELONA [ www.uab.es]. Ort der Lesung: FACULTAT DE CIENCIES. Ort der Vorbereitung: UNIVERSITAT AUTÒNOMA DE BARCELONA. Inhaltsangabe: In Studien haben diese These entwickelt Protease isoliert und komplexe Struktur mit ihren endogenen Inhibitoren durch X-ray crystallography, die in ihrer Detail enzymatische Mechanismen und inhibició. Auch diese Proteasen-Hemmer und wurden als Modelle von Proteinen ist nicht an Krankheiten, die in der Lage sind zu amiloidogenicas Strukturen des Staates insgesamt und / oder in vollem Umfang eingesetzt. STABILITÄT UND STABILISIERUNG VON PROTEINEN MIT DEM MODELL DER APOFLAVODOXINA VON ANABAENA PCC7119.Autor: BUENO FERNÁNDEZ MARTA. Jahr: 2005. Universität: ZARAGOZA [ www.unizar.es]. Ort der Lesung: FACULTAD DE CIENCIAS. Ort der Vorbereitung: FACULTAD DE CIENCIAS. ANALYSE UND UMSETZUNG VON STRATEGIEN FÜR WIRKSTOFFFORSCHUNG: SYNTHESE, QSAR UND MODELLIERUNG AUF DER GRUNDLAGE DER EMPFÄNGERInhaltsangabe: In dieser Dissertation entwickelten theoretischen Modelle für die Vorhersage der Vasodilatator-und Anti-HIV-Aktivität mit Methoden für die Berechnung der molekularen Deskriptoren in Kombination mit statistischen Methoden, um eine Beziehung zwischen der molekularen Struktur und die biologische Aktivität (QSAR-Methoden). Sie haben auch Berechnungen Interaktion fármaco-Rezeptor Typ von Docking-Methoden und hat eine organische Synthese aus einer Reihe von Cumarin - wie resveratol mit guten Vasodilatator. STRUKTURELLE STUDIEN LEKTINANTEIL ALGEN UND HÖHEREN PFLANZENAutor: NAGANO CELSO SHINITI. Jahr: 2006. Universität: VALENCIA [ www.uv.es]. Ort der Lesung: FACULTAD DE MEDICINA. Ort der Vorbereitung: INSTITUTO DE BIOMEDICINA DE VALENCIA. Inhaltsangabe: Das sind lectin (glico) Herkunft ist nicht immun Proteine, die über mindestens einen katalytischen Domäne nicht in der Lage ist, und gibt die Vereinigung reversibel Affe oder Oligosaccharide. Die lectin sind allgegenwärtig in Organisationen überall in der Evolution, die in vielen biologischen Prozessen, die beide physiologischen und pathologischen. Die räumliche Anordnung der Plätze der Gewerkschaft Zucker ist ein wichtiges Element bei der Anerkennung von glicanos auf der Zelloberfläche Das übergeordnete Ziel der Diplomarbeit war die Vertiefung der strukturellen und evolutionäre Aspekte der Pflanze lectin. Auf der einen Seite zeichnet sich die HCA lectin und HML der roten Meeresalgen Hypnea cervicomis und Hypnea musciformis, respectively. Diese lectin mit 90 Aminosäuren und ihre Sequenzen sind sehr ähnlich. Die elementaren estructutras HCA und HML besteht aus zwei Domänen mit jedem anderen Kollegen, die in Tandem-und zeigen keine Ähnlichkeit mit jedem Protein-Sequenz beschrieben. Wir schlagen vor, dass HCA und HML Gründungsmitglieder sind Mitglieder einer neuen Familie von Proteinen. Darüber hinaus konzentrierte sich auf die These, die Bestimmung der strukturellen Basis des Gleichgewichts dimero-tetramero pH-abhängiger lectin, dass einige der Stamm Diocleinae der Familie der Hülsenfrüchte Papilionoidae. Zu diesem Zweck wurde ein Ansatz verwendet, basierend auf molekularbiologischen Methoden (rekombinante Expression lectin nativen und mutierten), Biophysik (Saldo sedmentación) and Structural Biology (Bestimmung der Kristallstrukturen der lectin recombinates). Aufgrund des komplexen Systems der Verarbeitung Post-traduccional im Zusammenhang mit der Biosynthese von lectin von Impulsen, die Expression von rekombinanten Escherichia coli genannt lectin in der Gestaltung eines synthetischen Gens, die Kodifizierung der reifen Protein (alpha-Kette). Die lectin von Dioclea guianensis (r-aDguia) und Dioclea grandiflora (r-aDGL) in einem rekombinanten E. Coli aus seiner synthetischen Gene sind bioquimícamente nicht von ihren Kollegen isoliert von Samen. Es wurde erfolgreich bei der Generierung der Saldo dimero-tetrámero pH-abhängig von der lectina r-aDGL, tetrameric pH-Wert im Bereich von 4-8.5, durch drei Mutationen E123A, H131 N, K132Q. Die Existenz des Gleichgewichts dimero-tetrámero korreliert mit einem zurückgezogen Konformation des Loops 117-122, die sich nicht mit der Herstellung von Kontakten resíduos Untereinheiten des gegnerischen Vereins stabilisiert tetrameric unabhängig vom pH-Wert. THREE-DIMENSIONAL STRUKTUR DER DOMINI EXTRACEL - LULAR DER 4F2HC (CD98) HUMÀ.Autor: FORT I BAIXERAS JOANA. Jahr: 2006. Universität: BARCELONA [ www.ub.es]. Ort der Lesung: FACULTAD DE BIOLOGÍA. Ort der Vorbereitung: FACULTAT DE BIOLOGIA DE LA UNIVERSITAT DE BARCELONA. Inhaltsangabe: Die Familie von Transportern heterométicos Aminosäure (HATs) hat die einzigartige Eigenschaft des Seins, bestehend aus zwei Untereinheiten, eine schwere Untereinheit (HSHAT) und einer leichten Untereinheit (LSHAT) verbunden durch eine Brücke Schwefelkohlenstoff. Mutationen in jedem seiner Mitglieder sind verantwortlich für aminoacidurias erblich, wie intolerant lisinuria Protein (LPI) oder cistinuria. Diese Arbeit zeigt die Ergebnisse aus den Ausdruck in E. coli und die anschließende Reinigung der extrazellulären Domäne des menschlichen 4F2hc, einer der schweren Ketten von Transportern heteroméricos Aminosäure. Das wichtigste Ergebnis ist die Entscheidung der drei-dimensionalen Struktur dieser Domäne des Proteins und Kristallisation durch Röntgenbeugung Es gelöst hat zwei Arten von Kristallen, monoclinico zu 2,1 A (mit einem molekularen in der asymmetrischen Einheit) und ortorómbico auf 2,8 A (mit zwei Moleküle in der asymmetrischen Einheit koordiniert ein Zink-Atom). Die ectodominio der 4F2hc hat eine sehr ähnliche Struktur wie alfa-glucosidasas Insekten und besteht aus einer Domäne A, der ein Barrel (alpha / beta) 8 oder TIM Barrel und einen Domain-C, bestehend aus 8 Blätter Beta antiparalelas. Das Papier stellt die Struktur der 4F2hc und vergleicht mit bekannten Strukturen von glucosidasas Bakterien. Darüber hinaus stellt ein strukturelles Modell für rBAT, die andere Untereinheit schweren Transportern heteroméricos Aminosäure. Aber die Produktion i Reinigung dieses Proteins hat es uns ermöglicht, zu realisieren, auch Studien zur Funktion und Interaktion mit anderen Molekülen. Diese Arbeit versucht, die Informationen für die Untersuchung von Struktur-Funktion dieser Träger, sondern auch für die Untersuchung der verschiedenen Funktionen und Prozesse, in denen 4F2hc hga assoziiert in der liberatura, als Funktion der Integrine und tumorigenesis. |
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