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PERFORMANCE IN VITRO, DE LA RECOMBINAISON DE GÈNES ALLÈLES D'MYOSTATIN POUR APPLICATION DANS LA PRODUCTION ANIMALE.Auteur: FERNÁNDEZ DEL NACIMIENTO CRISTINA. Année: 2003. Université: COMPLUTENSE DE MADRID [ www.ucm.es]. Lieu de l'exposition: FACULTAD DE VETERINARIA. Lieu de préparation: FACULTAD DE VETERINARIA. Résumé: Le myostatin est membre de la famille des facteurs de croissance et de la transformation (TGFbeta), responsable de l'inhibition du développement de la masse musculaire. Les bovins avec des mutations inactivantes dans myostatin présente une augmentation substantielle de leur masse musculaire connue sous le nom de hipertrofía muscle ou cularidad. Cette augmentation muscle est également accompagnée d'une diminution sensible de la quantité de matière grasse qui entraîne une nette augmentation de la valeur économique de leurs chaînes. La connaissance accrue de la structure et la fonction de myostatin a initié le développement de méthodologies pour gérer votre exploitation ou d'éviter des effets indésirables associés au phénotype culón. Dans la première ligne de l'enquête dans cette thèse a été soulevée à créer un système qui permet d'explorer reversbilidad hypertrophié phénotype phénotype à la normale. Cela a realiz mangé la construction d'une "Mstn OFF à ON." Dans ce système, la troisième d'exon de myostatin est tête en bas, mais est susceptible de revenir à la situation en permanence par le système Cre / lox, en utilisant une variante de lox Muté. Ce système a été testé in vitro et dans un système bactérien, qui a démontré sa capacité à se déplacer d'un actif à la configuration inactifs, en gardant également, dans ce dernier Etat. En revanche, quand il y avait une étable intégration par recombinaison homologue dans les cellules ES murines, n'a pas réussi à inverser la configuration actuelle, probablement due à l'utilisation d'un promoteur trop faible pour l'expression de la Cre - recombinasa s'avérer suffisant pour lox muté utilisés. Bien que cette voie de recherche a été arrêtée à ce stade, ces résultats soulignent la possibilité d'utiliser des vecteurs Cre mieux en mesure d'atteindre attendus recombinaison entre lox muté. La deuxième ligne d'étude de cette thèse a été à la création et à l'évaluation des différents allèles de myostatin potentiellement dominant négatif. Le phénotype culón typique ne présente état homocigosis, d'où l'intérêt indéniable de l'obtention d'élevage de veaux hétérozygotes culones industrielles traversées, ainsi que les possibilités d'application de ces allèles postnatale pour éliminer les effets associés à périnatale phénotype culón. Nous avons soulevé trois allèles dominants négatifs potentiellement capables de vaincre le rôle de la myostatin sauvages en sa présence. Ces trois variantes sont conçus d'une façon qui empêche sa liaison à des récepteurs membranaires spécifiques pour impedimiento estérico. Depuis cette stratégie de domination négatifs dépendent surtout de la capacité des dimerización entre monomères sauvages et mutantes monomères ont effectué deux essais iteracción à confirmer que l'union entre monomères n'a pas été perturbée. Ces essais ont confirmé que le dominant négatif conçu trois solutions sont parfaitement capables de former dimères de monomères sauvages, et en outre, que cette union n'est pas significativement différent de l'union entre deux monomères sauvages. Par conséquent, les allèles conçu rencontré la première condition préalable à une stratégie de domination négative.
IDENTIFICATION DES GÈNES À EXPRESSION DIFFÉRENTIELLE DANS LE TISSU MUSCULAIRE DU BÉTAIL APPARTENANT À L'GÉNOTYPE DE MYOSTATIN (MUTATIONS NT821 (11))Auteur: CALONGE ERREJON M. ESTHER. Année: 2004. Université: COMPLUTENSE DE MADRID [ www.ucm.es]. Lieu de l'exposition: FACULTAD DE VETERINARIA. Lieu de préparation: FACULTAD DE VETERINARIA. Résumé: Le premier objectif de cette thèse est de comparer les modes d'expression des animaux de l'espèce bovine de race asturien dans les vallées touchées pro- hypertrophie musculaire induite par une suppression de 11pb dans le myostatin gène, par rapport à la normale des animaux. Le deuxième objectif est l'identification des gènes qui sont exprimés. Diferencialmente et enfin la relation de ces gènes et de voies métaboliques dans lesquelles ils participent, avec l'apparition de l'hypertrophie musculaire. Cette utilise la technique de l'étude d'expression différentielle "Differential Display" et le résultat est vérifiée par la technique de "QUANTITATIVE PCR." Les échantillons utilisés sont les muscles des animaux de race asturienne des vallées des trois génotypes possibles pour la suppression 11 . Se détecter les gènes qui s'expriment différemment chez les animaux à l'hypertrophie à l'égard de normales.Algunos gènes sont venues accroître expression et les autres montrent une diminution. Gènes sont liés à la transduction du signal, le métabolisme des lipides, cycle cellulaire, de différenciation et le métabolisme du muscle energetico.Se obtenir une vue d'ensemble des itinéraires activés dans le muscle squelettique différencié des autres gènes avec des fonctions peu connues ou totalement inconnues, Ils ouvrent de nouvelles voies dans le Étude de l'hypertrophie du muscle bovin. ÉTUDE DU MÉTABOLISME DE L'ÉNERGIE DU SPERME DE PORCS ET DE LEUR IMPACT SUR LA CONCEPTION DES DILUANTS OPTIMISÉ POUR LA CONSERVATION DE SPERME REFROIDI.Auteur: MEDRANO DIAZ ANTONIO ARVELO. Année: 2004. Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA [ www.uab.es]. Lieu de l'exposition: FACULTAD DE VETERINARIA. Lieu de préparation: ESCUELA DE POSTGRADO. Résumé: Le premier objectif de cette étude était de déterminer les mécanismes des différents monosaccharides, l'utilisation de l'énergie (du glucose, le fructose, manosa et sorbitol), par le sperme de porc. Pour ce faire, les spermatozoïdes ont été incubés sans substrat de l'énergie et avec différents hexosas. Les concentrations utilisées dans le hexosas était 10 mM de, à condition qu'ils voulaient pour déterminer l'effet du temps d'incubation, et lmM, 5mM 10mM, 20 mM de, 50mM quand ce qui était prévu était de déterminer l'effet de la concentration de substrat métabolisable. Le incubaciones ont été effectués sur 5 mn., 15 mn., 30 mn., Et 60 minutes. Dans le cas de l'impact du temps, et pendant 60 minutes pour discuter de l'effet de concentration. The incubaciones were conducted in an environment of Krebs-Ringer-Henseleit devoid of energy substrates. Suite à ces incubaciones "identifié fois de la faisabilité et de l'état de acrosomas comme marqueurs de l'état fonctionnel du sperme. Ont également été identifiés intracellulaires de métabolites de l'énergie, tels que le glucose 6-phosphate, glycogène et de l'adénosine triphosphate (ATP). Outre, nous avons également mesuré le taux de formation de L - Lactato extracellulaire de la glucólisis et le CO2 comme un produit final du cycle de Krebs. La principale conclusion tirée de cette étude était que les monosaccharides glucose, est utilisé de préférence par le sperme de porc. Ce glucose est métabolisé principalement par la voie glucolítica (par 99%). Lastly, the control of the means of consumption of glucose is basically on two points, the first modulation of the activity hexoquinasa, and the second modulation of the Pyruvate kinase activity. Complémentation Comme l'étude antérieure, également étudié la cinétique du comportement des principales activités enzymatiques qui contrôlent l'itinéraire glucolítica, comme hexoquinasa, qui réglemente la phosphorylation de la première monosaccharides, et Pyruvate kinases, qui régit la mise en place du produit final de la glucólisis Dans le cycle de Krebs. Ces études ont montré que la hexoquinasa a beaucoup plus d'affinités en vue de glucose en comparaison avec les autres monosaccharides, étudiés, tandis que les kinases Pyruvate montre sa grande dépendance à l'égard de l'activité intracellulaire de l'équilibre entre les niveaux de bifosfato adénosine diphosphate (ADP) et de l'ATP, qui permet le contrôle Très sensibles à extraire de l'énergie à travers le flux glucolítico. Enfin, nous avons aussi évalué l'évolution des déchets dans la tyrosine phosphorylation de sperme de porc. Extraits cellulaires ont montré une tendance cohérente avec une bande de phosphorylation de la majorité à 45 Kda poids. Ce motif n'a pas subi de changements significatifs après incubation avec l'une quelconque des sucres. Ce résultat indique un manque de mesures spécifiques en modulant les sucres sur la fonctionnalité de porc sperme. Un autre objectif était d'évaluer l'utilisation des substrats pas glucolisables, et ne sont donc pas utilisables dans tout le glucólisis, de l'énergie, comme le citrate et ellactato par une partie du sperme de porc. Modèle expérimental de fusion et les temps d'incubation est la même que celle décrite ci-dessus pour les monosaccharides,. Incubaciones également été menées dans un environnement de Krebs - Ringer - Henseleit dépourvues de sucres, et les mesures des résultats étaient les mêmes dans la première phase de ce travail. En outre, dans ce cas, on a déterminé le comportement cinétique de l'activité lactate déshydrogénase (LDH), un point de contrôle sur l'entrée des substrats dans le cycle de Krebs. Cette étudié a créé la LDH présence d'un type spécifique de sperme dans le sperme de porc, qui a été mise en évidence par Western blot et confirmée par les résultats d'immunocytochimie, ce qui témoigne d'une réaction positive dans la pièce principale de la queue, avec un 8 bilingue Marque d8d l dans intermédiaires pièce. La principale conclusion qui peut être déduite à partir des résultats obtenus avec les substrats ne glucolisables était que le sperme de porc peut être utilisée de manière efficace l'esprit comme la seule source d'énergie aussi bien que le citrate de lactate, l'utilisation de ces supports a eu lieu. À travers les filières énergétiques contrôlées par LDH, c'est-à-dire essentiellement le cycle de Krebs, le taux d'écoulement est également étroitement réglementée par intracellulaires de l'ATP. A également été évaluée dans ce cas, l'effet de l'incubation avec citrate ou du lactate sur le plan de la phosphorylation de résidus tyrosines. Dans ce cas, l'éclosion avec 10 mM de citrate ou du lactate il y avait une augmentation notable de l'intensité de tous les groupes, en particulier celui de 45Kda, bien qu'il ne soit pas apparu importants changements dans la structure des groupes spécifiques de phosphorylation, ce résultat indique aussi un manque de L'action sur des substrats fonctionnalité sperme. Le but ultime de nos travaux est la conception expérimentale de quatre formules, qui associent un monosaccharides à différentes concentrations avec un substrat pas glucolisable (à différentes concentrations de citrate ou du lactate), dont le principal objectif est d'étudier l'impact de ces changements sur le type spécifique De l'approvisionnement énergétique à long terme de refroidissement. Sous-jacent but de cette étude était d'obtenir les informations pour l'obtention d'un solvant de conservation de sperme de porc réfrigérée pour parvenir à dépasser 7 jours de la conservation entre 15 et 17Â ° C. Pour évaluer l'efficacité de ces quatre formules dans la préservation du sperme de porc réfrigérée ont été mesurés Paramètres suivants: Les pourcentages de faisabilité et acrosomas modifiées, comme des indicateurs de l'état fonctionnel des spermatozoïdes, le taux de lactate de formation, les épreuves de résistance Osmótica (TRO) et de la Résistance Hiperosmótica (HRT), comme preuve d'une plus grande significanción d'évaluer la qualité des spermatozoïdes l , Comme cela a été décrit dans des publications précédentes. La conclusion d'un média qui contient des niveaux élevés de glucose (toujours inférieures à celles contenant le plus largement utilisé commerciale diluants), et des niveaux relativement bas de lactate en tant que source d'énergie de remplacement permet pour la préservation de sperme de porcs à des températures entre 15 et 17Â ° C pendant une période de plus de la même observé dans les communications diluants utilisés largement, comme le BTS. Par conséquent, une conception optimisée des sources d'énergie glucolíticas plutôt glucolíticas est essentielle pour l'amélioration de diluants de sperme porcin réfrigération. L'ANALYSE DE GÈNES CANDIDATS ET QTL LIÉES À LA PROLIFICITÉ ET LA SURVIE DES PORCELETS DANS UN IBERIAN X MEISHAN -F2 LA POPULATIONAuteur: TOMÁS SANGENÍS ANNA. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA [ www.uab.es]. Lieu de l'exposition: FACULTAD DE VETERINARIA. Lieu de préparation: FACULTAD DE VETERINARIA. Résumé: La recherche de cette thèse a été développée dans le cadre d'un projet actuellement en cours, connu sous le nom MeIbMAP projet, dont l'objectif principal est d'acquérir des connaissances sur la génétique de l'architecture des traits économiquement importants liés à l'efficacité dans la reproduction des porcs. Pour remédier à ce problème, un F2 pilote de la population a été créé à partir de trois ibérique verrats et 18 Meishan truies. Ces deux races mères étaient choisis en fonction de leurs grandes différences phénotypiques pour presque tous les traits de la reproduction. Cette thèse fait état des résultats obtenus auprès de la performance d'un unidimensionnel et d'une à deux dimensions du génome et visant à identifier des lieux caractère quantitatif (QTL) liées à la taille des traits, et la caractérisation physiologique de trois gènes candidats et de leurs associations avec les performances de reproduction Des truies et de la vitalité et de variables physiologiques liées à la survie des porcelets nouveau-nés dans les premières heures de vie. Les performances d'un unidimensionnel analyse révèle quelques génome échelle QTL ayant des effets significatifs sur le nombre total de porcelets nés (TNB) et le nombre de porcelets nés vivants (NBA). L'effet conjoint de ces QTL explique presque 13% du total de la variance phénotypique des deux traits de caractère. A deux dimensions permettant de numériser plusieurs QTL et de leurs interactions a permis l'identification d'un grand nombre de régions du génome impliquées dans le contrôle génétique de la taille des traits. Les principaux effets de ces QTL sont imputables à la domination et epistasis effets, c'est-à-dire Pour le non héréditaires fraction de la variance génétique, apporte un éclairage sur la complexité de l'architecture de la reproduction génétique traits qui exposent faible héritabilité valeurs. Schémas d'interactions complexes, qui se caractérise par la participation de plus d'un type de epistasis, ont été présentés par la quasi-totalité QTL interaction paires. Le récepteur de la prolactine porcin (PRLR) gène a été choisi comme candidat parce que deux polymorphismes génétiques de ce gène a été précédemment lié à la taille par plusieurs auteurs et aussi parce que les souris knock-out déficiente pour PRLR montré défectueux multiples phénotypes de reproduction. Nous avons séquencé la région codante complète de la viande porcine PRLR gène et retrouvé six autres SNP conservatrice dans l'exon 10, qui tout à l'encode intracytoplasmique domaine de la protéine, ce qui révèle un important excédent de nonsynonymous substitution. Huit isoler les haplotypes ont été trouvés dans la ibérique X Meishan population et dans plusieurs races porcines à des fréquences différentes. Les résultats de l'étude de l'association entre PRLR génotypes et semer la reproduction des traits révélé des effets significatifs de PRLR les haplotypes sur le nombre de corps jaunes. En outre, les effets des tendances ou suggestives de la PRLR polymorphisme ont également été trouvés pour la fréquence cardiaque à la naissance, la température rectale et la saturation de l'oxygène 1 h après la naissance, et de temps à la première téter. Nos résultats confirment les effets de la viande porcine PRLR gène sur le taux d'ovulation, et de suggérer qu'il pourrait également jouer un rôle dans la survie des porcelets pendant les premiers jours de vie. La dopamine hydroxylase intervient (DBH) de gènes codant pour une enzyme de la catecholamine biosynthétiques parcours qui catalyse l'hydrolyse de la dopamine et de noradrénaline. Catécholamines participent à la régulation du développement et de l'ovaire fonction gonadique chez l'adulte. Le DBH gène a été choisi en raison de l'existence de la reproduction chez les souris modifiées phénotypes avec une cible perturbation de ce gène. Séquençage partiel d'un fragment de la viande porcine DBH ADNc de différentes races porcines a révélé la présence de 6 polymorphismes de nucléotides, dont deux ont abouti à des remplacements d'acides aminés. Ces non conservatrice mutations ont été génotypés dans le F2 ressource la population identifier les haplotypes trois différents. L'association d'étude de la reproduction et la survie des traits DBH montré que le gène est significativement corrélée à la température rectale, une heure après la naissance et le temps de la première colostrums apport, suggérant que le DBH peut être un gène candidat postnatale précoce pour la survie des nouveau-nés porcs. Additional suggestives effets de ce gène ont également été trouvés 8 pour engourdir 6d6 -er de tétines et de poids à la naissance. Enfin, le DBH porcin gène a été placé par RH cartographie sur le chromosome 1 près la q- télomère. Les protéines osseuses morphogénétiques récepteur 1 (BMPR1B) gène a été choisi comme candidat parce que d'un seul gène d'acides aminés de substitution (Q249R) dans la viande ovine BMPR1B était associé à la Booroola phénotype (FecB), qui provoque hyperprolificity dans Merino brebis. Le BMP système joue un rôle important dans la régulation de la fonction ovarienne par le contrôle de la prolifération et de cytodifferentiation de la granulosa cellules ainsi que ovocyte développement. Nous avons identifié trois silencieux polymorphismes de nucléotides dans l'exon 10 de ce gène. Ces polymorphismes conduit à l'identification de quatre haplotype qui ont été trouvés les séparant, à des fréquences différentes, dans plusieurs races porcines. Étude de l'association entre les BMPR1B polymorphismes et les performances de reproduction des truies Meishan X ibérique n'a pas donné des résultats significatifs. Seuls les effets suggestifs été trouvée pour prolificité en première parité, indiquant que BMPR1B n'est pas un gène majeur pour la reproduction chez le porc.
AMÉLIORATION GÉNÉTIQUE DES CARACTÈRES MORPHOLOGIQUES CHEZ LES OVINS REPRODUCTEURS CHURRAAuteur: RODRÍGUEZ ALVAREZ ROBERTO. Année: 2005. Université: LEÓN [ www.unileon.es]. Lieu de l'exposition: FACULTAD DE VETERINARIA. Lieu de préparation: FACULTAD DE VETERNARIA. Résumé: L'objectif de cette thèse est de concevoir une méthode de classement des caractères' aptitude du corps morphologie de lait de brebis. Dans une première expérience sont penchés sur un total de dix caractéristiques simple récit, ponctué selon une échelle linéaire de 1 à 9, et deux mesures objectives, le poids et la hauteur à la croix. Ils ont également visité des 18 troupeaux de race Churra noyau de sélection. Nous avons 4732 dossiers de 2809 moutons. L'héritabilité estimée pour la simple caractéristiques descriptives ont été retrouvés dans la fourchette de 0,05 à 0,17, et repeatabilities entre 0,12 et 0,47. Tenant compte de ces paramètres, ainsi que d'autres aspects pratiques de la facilité de pointage, nous avons retenu quatre caractéristiques descriptives simples offrant les meilleures caractéristiques pour l'inclusion dans le projet de système de notation: hauteur (HNE), aplomos des pattes de derrière (POS), l'inclinaison Des talons (TAL) et la largeur de la croupe (ANC). En outre, elle a ajouté une dimension mondiale, appelé aspect général (APAR). Les expériences II et III, a eu lieu la mise en œuvre du système proposé, à la première étape et l'étape ultérieure de l'application pratique. L'expérience II est valorisée 96 moutons en trois visites consécutives. La distribution des scores pour les cinq personnages approchés normale. L'objectivité de la méthode, il a été assez bonne, avec une répétabilité de scores entre 0,33 et 0,46. L'expérience III a visité 23 troupeaux du noyau de sélection de race Churra. Le dossier est constitué de 10189 dossiers, ce qui correspond à 3977 moutons. Par l'analyse génétique des données à l'aide d'un modèle animal de répétabilité. Les effets fixes considérés sont, par ordre d'importance, rondes de qualification, le nombre de naissance et le mois de lactation. L'héritabilité étaient estimés 0,19, 0,18, 0,24, 0,14 et 0,17, pour les caractères HNE, POS, AS, l'ANC et l'APAR, respectivement. Ces valeurs permettent l'amélioration génétique de ces caractères grâce à la sélection. Le fort coefficient de corrélation entre les multiples APAR et les quatre traits simples descriptives (0,75) et les corrélations génétiques estimées élevé (en valeur absolue entre 0,51 et 0,80), montrent que parmi les quatre traits simples descriptive est possible d'obtenir un indice qui refléterait un Appropriée et suffisante mérite global morphologie du corps. Les corrélations génétiques entre les caractères de morphologie et de la morphologie du corps mammaire sont faibles ou modérées dans le sens favorable. Le montant estimatif des corrélations génétiques entre les caractères laitiers et les caractères morphologiques étaient si faibles qu'il ne s'attend pas à des changements importants dans la morphologie des races ovines corps soumis à un processus de sélection pour augmenter la production de lait, et inversement. L'objectif de cette thèse est de concevoir une méthode de classement des caractères' aptitude du corps morphologie de lait de brebis. Dans une première expérience sont penchés sur un total de dix caractéristiques simple récit, ponctué selon une échelle linéaire de 1 à 9, et deux mesures objectives, le poids et la hauteur à la croix. Ils ont également visité des 18 troupeaux de race Churra noyau de sélection. Nous avons 4732 dossiers de 2809 moutons. L'héritabilité estimée pour la simple caractéristiques descriptives ont été retrouvés dans la fourchette de 0,05 à 0,17, et repeatabilities entre 0,12 et 0,47. Tenant compte de ces paramètres, ainsi que d'autres aspects pratiques de la facilité de pointage, nous avons retenu quatre caractéristiques descriptives simples offrant les meilleures caractéristiques pour l'inclusion dans le projet de système de notation: hauteur (HNE), aplomos des pattes de derrière (POS), l'inclinaison Des talons (TAL) et la largeur de la croupe (ANC). En outre, elle a ajouté une dimension mondiale, appelé aspect général (APAR). Les expériences II et III, a eu lieu la mise en œuvre du système proposé, pr 8 imero dans 9a2 stade expérimental et ultérieurement de l'application pratique. L'expérience II est valorisée 96 moutons en trois visites consécutives. La distribution des scores pour les cinq personnages approchés normale. L'objectivité de la méthode, il a été assez bonne, avec une répétabilité de scores entre 0,33 et 0,46. L'expérience III a visité 23 troupeaux du noyau de sélection de race Churra. Le dossier est constitué de 10189 dossiers, ce qui correspond à 3977 moutons. Par l'analyse génétique des données à l'aide d'un modèle animal de répétabilité. Les effets fixes considérés sont, par ordre d'importance, rondes de qualification, le nombre de naissance et le mois de lactation. L'héritabilité étaient estimés 0,19, 0,18, 0,24, 0,14 et 0,17, pour les caractères HNE, POS, AS, l'ANC et l'APAR, respectivement. Ces valeurs permettent l'amélioration génétique de ces caractères grâce à la sélection. Le fort coefficient de corrélation entre les multiples APAR et les quatre traits simples descriptives (0,75) et les corrélations génétiques estimées élevé (en valeur absolue entre 0,51 et 0,80), montrent que parmi les quatre traits simples descriptive est possible d'obtenir un indice qui refléterait un Appropriée et suffisante mérite global morphologie du corps. Les corrélations génétiques entre les caractères de morphologie et de la morphologie du corps mammaire sont faibles ou modérées dans le sens favorable. Le montant estimatif des corrélations génétiques entre les caractères laitiers et les caractères morphologiques étaient si faibles qu'il ne s'attend pas à des changements importants dans la morphologie des races ovines corps soumis à un processus de sélection pour augmenter la production de lait, et inversement. L'ANALYSE DE GÈNES CANDIDATS ET À L'ÉTUDE DE L'EXPRESSION DES GÈNES DANS LES LIGNES LAPIN SÉLECTIONNÉ DIVERGENTEMENTE POUR UTÉRIN CAPACITÉ.Auteur: Merchán Acedo Maria Isabel. Année: 2006. Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA [ www.uab.es]. Lieu de l'exposition: Facultat de veterinària. Lieu de préparation: Facultat de Vaterinària.
Résumé: Les travaux de recherche de cette thèse s'inscrit dans un projet plus vaste (AGL2001 - 3068 et AGL2005 - 07624), dont le principal objectif est de déterminer quel est le plus grand gène qui détermine les différences observées dans la taille de la litière en deux lignes lapin Selected divergentemente de l'utérus Capacité (CU). Cela a créé une population F2 du croisement expérimental 16 lapins (3 hommes et 13 femmes) de la ligne choisie pour le personnage capacité utérine (CU +) et 8 lapins (3 hommes et 5 femmes) de la ligne choisie en contradiction avec la capacité de l'utérus ( CU -). Cette thèse présente les résultats obtenus à partir de l'analyse de 5 gènes candidats et associés, physiologiques étude d'association 3 d'entre eux avec les différentes composantes de la taille caractéristique de la litière. Il montre également les résultats de l'analyse des écotechnologies produite à partir de banques de gènes ovaire, utérus et oviducte de lapins afin de caractériser l'expression des gènes dans ces tissus et d'identifier des séquences de gènes non encore décrites dans le lapin. Le gène uteroglobina a été choisie parce qu'elle encode la principale composante de la sécrétion de protéines par utérin lapin et son potentiel physiologique rôle dans l'implantation. Nous avons séquencé un fragment de 3703 pb, qui reprend une partie du promoteur région 3, les exons et les introns à leur partie de la région 3 'flanqueante. Nous avons identifié 6 SNP dans la région du promoteur du gène étaient mixtes segregando en 2 haplotype sur les lignes + et CU CU -, mais ne semblent pas avoir été associés à la ligne parce qu'ils n'ont pas alléliques différentes fréquences. Le gène récepteur de la progestérone la moitié des effets de la progestérone, prenant la parole sur l'ovulation, facilite la création et le maintien de la grossesse, favorise le développement de la glande mammaire et réglemente le comportement sexuel. Nous avons séquencé 3702 Anonyme qui comprenait une partie du promoteur, de la région 5'UTR, presque toute la région de codage et de la région 3'UTR. Nous avons identifié 5 SNP: 1 HNS silence dans l'exon 7, 1 SNP dans le promoteur et 3 dans la région 5'UTR cette collaboration segregan deux lignes dans les haplotypes CU CU + et - avec des fréquences différentes. L'étude réalisée en partenariat traversant la F2 de CU + X CU - entre le SNP et promoteur des caractères de reproduction a révélé un effet significatif sur les totaux Né Né et vivant, ce qui porte le gène PGR pourrait être le plus grand gène responsable de la différence entre les lignes CU + Et CU. Le SNP est en quatre lignes spécialisées sécrétant lapins utilisés pour produire de stocks commerciaux. Le gène IGF1 a été sélectionné sur la base des résultats des expériences menées in vivo et in vitro: pour les souris knock-out ce gène a montré que la IGF1 est indispensable au bon développement de l'embryon et des études embryon avant implantacionales de l'homme et le lapin révélé l'IGF1 stimulé La prolifération des cellules, la promotion du développement embryonnaire et empêché apoptose. Il a été séquencé la région de codage de la forme de l'ARNm gène IGF1 lapin (406 Anonyme), mais n'a pas trouvé de nucléotides variation entre les animaux et les lignes + CU - CU. Le gène oviductina encode une protéine qui est synthétisée dans l'oviducte de mammifères principalement au cours de l'œstrus, la fertilisation et le développement embryonnaire précoce, et qui interagit avec les oeufs, le sperme et les embryons oviductales et de l'utérus. Malgré le fait que la fonction biologique est inconnu, aurait un impact positif sur la formation, la mobilité et la viabilité du sperme, la fécondation et les premiers stades du développement embryonnaire. Il a été déterminé la structure du gène OVGP1 lapin, qui s'étend sur environ 13 ko et est analogue à celle décrite dans d'autres espèces, et a été étudié l'expression des gènes. Le messager apparaît principalement dans oviducte, mais aussi dans l'ovaire et l'utérus, et à un niveau beaucoup plus bas, même dans les tissus autres que la reproduction. Oviducte son expression semble pas varier de manière significative au début de la grossesse, ni parmi les animaux sur les deux lignes, au moins dans les 62 h après monta. Sur les 11 SNP présents à la messagerie, SNP G/C12903 yC/G12944 de l'exon 11 identifie deux changements aminoacídicos: Gly / Arg et Ala / Gly, respectivement. Le résultat de l'étude de l'association entre le génotype d'un microsatellite trialélico présents dans le promoteur et de la reproduction des caractères révélé un effet significatif sur les caractères et les totaux Né Né Alive. L'étude d'association entre le SNP C/G12944 et de la reproduction des caractères montré un effet significatif sur Live vifs et Survival Embrionaria. Bien que ces résultats suggèrent que le gène OVGP1 pourrait être un gène avec quelques-unes des plus grandes composantes de la taille, il semble être le gène responsable de la différence entre les lignes que les allèles favorables sont conformes CU. Le gène TIMP1 a été choisie parce qu'elle encode une protéine qui participe à divers procédés de reproduction (l'ovulation, le développement embryonnaire, l'introduction de blastocitos, maturation du col de l'utérus, l'endomètre et du cycle de l'involution utérine post-partum) et inhibe l'apoptose, favorise la croissance et la stéroïdogénèse et la survie cellulaire . Nous avons déterminé la séquence du gène TIMP1 lapin promoteur, et nous avons trouvé un SNP secrétant en 2 lignes. L'étude d'association entre le SNP et de la reproduction des caractères indique un effet significatif sur le nombre d'embryons Implantados, suggérant que le gène TIMP1 pourrait être plus élevé pour un gène de l'implantation. Enfin, nous avons généré de gènes de l'ADN des échantillons provenant de l'ovaire, l'utérus et oviducte de lapins prises pour 5 heures, 62 h et 5 jours après monta respectivement. Nous avons isolé et séquencé 623 des clones, dont 466 ont été classés comme valide, à savoir les séquences étaient de bonne qualité égale ou supérieure à 100 pb, et ne correspondait pas à tránscritos de l'ADN mitochondrial. Sur le total valable EST, 386 correspondent à différents ARNm, dont 36 n'avaient pas été décrits précédemment, 48 ont montré la similitude de séquences signalés précédemment, mais non classé, et 302 autres ont montré la similitude de séquences classé, mais surtout (262), ils n'ont pas été décrits Dans le lapin. Ce résultat est le reflet de la fin du développement de la génomique lapin, comparé à d'autres espèces. |
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