VETERINARY MICROBIOLOGY

Auteur: LACOMBE ANTONELI ÁNGELA.
Année: 2003.
Université: EXTREMADURA [www.unex.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE VETERINARIA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE VETERINARIA.

Auteur: BAU PUIG MARTA.
Année: 2004.
Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA [www.uab.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAT DE VETERINÀRIA.
Lieu de préparation: ESCUELA DE POSTGRADO.

Résumé: Dans ce rapport de thèse de doctorat a étudié mycobiota de mûrissement des raisins à des périodes différentes, dans le but d'identifier les espèces ocratoxígenas présents. Cela a été échantillonnés 7 vignobles distincts, situés principalement dans la côte méditerranéenne espagnole, en 2001,2002 et 2003. Il a également analysé la capacité à produire de l'ochratoxine A potentiellement produire des souches isolées dans cet échantillon. D'autre part, ont été caractérisés au niveau moléculaire 226 souches du genre Aspergillus la section Nigri potentiellement ocratoxígenas: 53 souches appartenant aux espèces A.carbonarius et 173 souches appartenant à l'agrégat A.niger. Toutes les souches de l'étude moléculaire isolement de raisins provenant de différentes origines géographiques: l'Espagne, la France, la Grèce, Israël, Italie et Portugal. Le mycobiota predomiante de vignes Espagnols échantillonnées appartiennent au genre Alternaria, Cladosporium et Aspergillus, alors que le sexe Penicillim représenté moins de 3% des isolats. La forte incidence de Alternariose. Et Cladosporium sp. Lors du premier prélèvement, diminué avec le temps de maturation des raisins, tandis que la présence de Aspergiullus spec. Augmenté de façon significative. Dans tous les cas, d'importantes différences dans l'incidence de ces genres dans chaque période d'échantillonnage. Durant les trois années de l'échantillonnage des raisins ont été isolés parmi un total de 1812 souches d'Aspergillus sp., Parmi lesquelles 13 seulement ont été identifiés comme A.ochraceus, tandis que 1423 ont été identifiés comme appartenant à l'agrégat A. Niger, et 226 comme A.carbonarius . Le seul isolement identifié comme P.verrucosum parmi 214 souches de Penicillium spp.aisladas montré la capacité de produire citrinina mais pas OA. Les isolats d'Aspergillus la section Nigri represenarona environ 90% des souches isolées sexe. Bien que présentée dans toutes les périodes d'échantillonnage, de la présence d'espèces ajoutées A.niger et A.caronarius était sensiblement plus élevé dans la récolte. En outre, le nombre de aislamien toux au milieu DRBC plus élevé que dans les accords multilatéraux environnementaux, mais ces différences ne sont pas significatives. Le pepetias raisin analysés pas de contamination fongique, il est supposé que la contamination des champignons producteurs de l'arthrose dans le raisin provient de la surface du fruit. En ce qui concerne les résultats obtenus dans l'étude de l'arthrose de production des souches isolées à partir de vignobles Espagnols, a montré l'importance de la contribution de A.carbonarius de la pollution dans l'arthrose, et donc de raisin dans le vin. Cette affirmation procède non seulement de l'incidence élevée d'introduire cette espèce dans le raisin, en particulier dans la récolte, mais aussi le pourcentage de souches produisant un 100% dans la présente étude. La gamme d'agriculture biologique dans la production de cette espèce OA était 0,06-477 µ g / g de milieu de culture. En termes d'autres espèces d'Aspergillus la section Nigri isolés, seuls 0,7% des isolats de ajoutant A.niger prouvé ocratoxígenos, dans une gamme OA de 0,05-231 µ g / g de milieu de culture, si aucun des isolats produites unisériés OA . Il a été également détecté la production de OA par d'autres espèces d'Aspergillus non la section Nigri. Ainsi, 7 des 13 isolats A.ochraceus, et 3 sur 6 à A.mellus produites OA. Aussi 3 isolats A.ostianus et 6 de A.aliaceus étaient producteurs. Certaines de ces espèces OA produire en grande quantité, mais sa faible incidence dans les raisins fait de l'importance en tant que source de contamination est faible. En ce 8 au goujon 6fb io moléculaire A.carbonarius, a été caractérisée par RAPD et le séquençage de la région ITS - 5.8S de l'ADNr 53 souches isolées à partir de raisins provenant de différents pays européens. Quarante-neuf des souches avait un modèle très similaire de RAPD et le séquençage de la région ITS - 5.8S pratiquement identiques. Toutes ces souches OA produite en quantités différentes. Les 4 souches ont montré un modèle différent de RAPD et le séquençage de la région ITS - 5.8S différente des autres, en plus d'être le seul non producteurs souches de l'arthrose. Ces isolats pourraient représenter une nouvelle espèce en vertu de l'article Nigri. En outre, l'étude moléculaire a ajouté A.niger ont été caractérisées 173 souches provenant de différentes origines géographiques, à l'aide d'une technique de RFLP dans la région ITS - 5.8S de l'ADNr. Toutes les souches regroupées en 2 modes RFLP décrit précédemment: type N (43% des souches) et T (57% des souches). Il a détecté la production de OA dans 20 des 173 souches (11,6%). Toutes les souches ocratoxígenas montre le schéma de type N.

Auteur: MARTÍNEZ PULGARÍN SUSANA.
Année: 2004.
Université: COMPLUTENSE DE MADRID [www.ucm.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE VETERINARIA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE VETERINARIA.

Résumé: S. Aureus est un micro-organisme ubiquitaire provoquant diverses maladies chez les humains comme chez les animaux. En médecine vétérinaire insiste surtout pour son implication dans les infections intramammaires, qui provoquent des pertes économiques importantes dans la production de bovins, d'ovins et de caprins. Ces dernières années, il est apparu clairement que S. Aureus est capable de intemalizarse, survivre et parfois multiplié dans différents types de cellules, y compris les cellules fagociticas, ce fait peut contribuer à la persistance de l'infection dans le corps pour protéger les bactéries de l'activité de Le système immunitaire et les traitements antibiotiques et à faciliter sa diffusion. Cette intracellulaire survie peut être detellllinada par la capacité de S. Aureus pour faire face à l'action de bactéricide résultant de l'oxydation du métabolisme des cellules eucaryotes. Dans M. bactéries telles que la tuberculose, C. jejuni et H. Pylori a été démontré que la la catalase, une enzyme responsable de la dégradation du peroxyde d'hydrogène produites au cours du métabolisme et de l'oxygène moléculaire dans l'eau, est essentiel à leur survie en elinterior de divers Types de cellules, cependant, dans S. Aureus n'a pas été déterminée avec précision à ce jour, le rôle éventuel de cette enzyme dans sa pathogenèse. De même, bêta toxina, une enzyme qui agit détériorée esfingomielina présent dans les membranes cellulaires, pourrait être important pendant le cycle de vie intracellulaire S. Aureus, les participants, ainsi que d'autres esfingomielinasas bactéries dans la ventilation de la vacuola fagocitica et la libération ultérieure de la Bactéries pour le cytoplasme de la cellule infectée et induire l'apoptose des cellules par l'intermédiaire de la libération de céramide. Toutefois, la contribution éventuelle de la bêta toxina la pathogenèse de S. Aureus n'a pas été concluante montré jusqu'ici. Sur la base de ces faits, l'objectif principal qui a été évoquée pour cette thèse de doctorat a été detellllinar le rôle éventuel de la catalase et le bêta toxina, ainsi que l'effet combiné des deux, dans la pathogenèse de S. Aureus. Ce simple des mutants ont été construits par des gènes delección katA (la catalase négative) et hlb (bêta toxina négatif) et une double mutantes par delección des deux gènes d'une souche de S. Aureus, 2386, qui a été isolé à partir d'un cas clinique de Mamitis chez les bovins, et comparé le comportement de mutants avec celui de la souche mère biologique utilisant différents modèles. Plus précisément, ils ont étudié leur capacité de survie intracellulaire sur la ligne à macrophages murins J774A.1 et le linca epitclialmamaria bovins AMC - Ty sa souris de virulence dans un modèle expérimental de l'infection, par l'estimation du DLSO. Lors d'essais, de la survie intracellulaire dans la ligne cellulaire J774A, il n'a trouvé aucune différence statistiquement significative attribuable à la catalase ou la bêta toxina. En ligne cellulaire AMC - T, cependant, l'absence d'activité de la catalase touchés fom1a sensiblement à la propagation de bactéries dans les premières heures postinfección. Ce résultat donne à penser que la catalase favorise la prolifération intracellulaire S. Aureus dans les cellules épithéliales mammaires bovins, contribuant à la défense de la bactérie au cours des premières heures postinfección, mais n'a pas une influence significative sur la survie de S. Aureus à l'intérieur de cellules de macrofágicas murins, révélant L'existence de différences dans le poids relatif du système cytotoxique oxigeno - dependiente l'activité bactéricide de ces deux types de cellules. La lignée cellulaire AMC - T ont été observés également des différences significatives en faveur des mutants bêta toxina négatif de la persistance de bactéries intracellulaires mais pas leur prolifération. La bêta toxina ne joue donc un rôle important dans la prolifération des intracellulaire S. Aureus dans les cellules épithéliales mammaires bovins, présentant toutefois une légère incidence sur la persistance de ces cellules dont 8 n'étaient pas -p 6d8 roduce dans les cellules macrofugicas murins, qui Pourraient être liés à la composition différente dans esfingomielina de ces deux types de cellules. Enfin, dans les études menées avec le double mutant a été retrouvé différence statistiquement significative en faveur de ce dans les deux lignées cellulaires utilisées. Ces études montrent que la catalase et la bêta toxina agir de façon synergique au cours du cycle de vie intracellulaire de S. Aureus, de sorte que l'absence de traduction simultanée deux enzymes entraînant un retard dans la prolifération des intracellulaire S. Aureus bovins dans les cellules épithéliales mammaires Et d'une augmentation remarquable de leur persistance dans les deux types cellulaires étudiés, ce dernier à la suite, éventuellement à partir d'un plus faible pouvoir pathogène de la cellule. Essais vi1111enciaen le modèle de souris (DLSO) indiquent que la catalase et la bêta toxina, par eux-mêmes. Non JUégan un rôle déterminant dans la virulence de S. Aureus, toutefois, l'effet combiné de ces deux enzimasjuega un rôle detellninante dans la virulence de la bactérie dans ce modèle. La plus grande permissivité intracellulaire de la réplication et de la persistance, ainsi que la plus faible pathogénicité, manifestée par le double mutant, font de lui un bon candidat à une éventuelle utilisation comme vaccin atténué contre le processus causés par S, doré.

Auteur: DE LA TORRE MARTÍNEZ MARIA EUGÈNIA.
Année: 2005.
Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA [www.uab.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAT DE VETERINARIA, UAB.
Lieu de préparation: FACULTAT DE VETERINARIA, UNIVERSITAT AUTÒNOMA DE BARCELONA.

Résumé: La salmonellose toxiinfección est transmise par les aliments produits et sous-produits animaux plus important dans les pays développés. Pour cela, il faut ajouter l'apparition de souches de Salmonella multirésistante due principalement à l'utilisation abusive des antimicrobiens dans les animaux des fermes. Ces faits justifiant la nécessité d'une surveillance épidémiologique et l'étude de Salmonella monde. Cela exige l'identification et la caractérisation des méthodes adaptées, ce qui peut être utile d'établir des relations de similitude entre les souches isolées et de détecter, à l'origine de flambées de maladies, ce qui permet le suivi comparables au niveau mondial. Lorsque, en l'an 1997 en Espagne, a été isolé pour la première fois la souche de Salmonella monophasique formule antigénique (4,5,12: :-), ont mené diverses études épidémiologiques afin de déterminer leur origine possible. Ce «nouveau sérotype« souvent présenté un profil de multirésistance R-ACSSuT-GSxT avec fagotipo U302 plus de 55% des cas. L'utilisation de différentes méthodes de caractérisation (détermination du profil restreint par électrophorèse en champ pulsé (ECP), le profil plasmidique, le antibiorresistencia et fagotipo) de déterminer les éventuelles relations génétiques de 48 souches de Salmonella enterica subsp. Enterica échantillons provenant de la viande de porc en Catalogne, isolé dans notre laboratoire au cours de la période entre 1998 et 2000. Vingt-trois de ces souches appartenant à S. Enterica (4,5,12: :-), 24 S. Typhimurium Enterica sérotype (4,5,12: i: 1,2) et une souche de S. Enterica (4,5 , 12 :-:-). Après combinant ECP profils obtenus avec l'utilisation de deux enzymes de restriction (XbaI et BlnI), on a observé que les 48 souches ont été regroupées en 7 modes de restriction combiné (XB profil). Les 23 isolats de sérotype (4,5,12: :-) et 10 souches de sérotype Typhimurium était le même schéma. Trois de ces 10 souches isolées avec fagotipo U302 pendant les premières années de l'étude, à leur tour partagé le profil plasmidique et le profil de polypharmacorésistance caractéristique de la souche monophasique. De l'analyse des relations entre les souches de l'étude, nous avons conclu que la nouvelle phase de sérotype était en fait une variété monophasique sérotype Typhimurium U302. Un facteur à prendre en compte dans les études épidémiologiques et les épidémies, est le temps nécessaire pour établir les relations entre les souches isolées d'échantillons cliniques et de déterminer l'origine possible de la même chose. Un outil mis en place de façon préliminaire et avec un degré de fiabilité de ces relations seraient utiles. Le profil biochimique classique pour la caractérisation et l'identification des souches de Salmonella, a seulement à l'esprit les résultats positifs ou négatifs par rapport à certains substrats servant à identifier les différentes sous-espèces de ce genre. Avec notre deuxième étude, nous déterminons les relations entre 135 isolats de Salmonella appartenant à des sérotypes multiples, y compris des souches de la variété monophasique, en utilisant les données de la cinétique biochimique des tests utilisés pour identifier les sous-espèces de Salmonella. Le biotipazo donné six grands groupes qui incluent les 94% des souches (n = 127). Le pourcentage de similitude au sein du même groupe a été supérieure ou égale à 95%. Certains de ces groupes ont été observés non seulement les souches appartenant au même sérotype, mais également des variétés phénotypiques. Les autres isolats (n = 8), les groupes formés d'une seule isolée. Cette suggestion 8 iere que 3a0 données de la cinétique des réactions du métabolisme utilisés pour identifier et biotipar la sous-espèce de Salmonella enterica, peut être utilisée pour déterminer une première relation entre les isolats en un court laps de temps.

Auteur: ALVAREZ GONZALEZ BEATRIZ.
Année: 2005.
Université: OVIEDO [www.uniovi.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE BIOLOGIA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA.

Résumé: L'agent pathogène Flavobacterium psychrophilum salmonidés est une maladie causant l'eau froide. Cette maladie provoque des pertes économiques significatives dans les fermes, et il existe un système efficace de prophylaxie. Malgré la grande importance de cette maladie, on sait peu de choses sur les mécanismes de la pathogénicité de F. Psychrophilum. Le présent travail a conçu un nouveau milieu de culture solide pour améliorer la récupération de cellules viables à la culture du liquide, et ont développé un certain nombre de méthodes telles que la conjugaison, de la transformation et des vecteurs d'expression, qui permet la manipulation génétique de F. Psychrophilum. Utilisation de la technologie mise au point ont permis d'obtenir un certain nombre de caractères mutants décrits comme impliqués dans la virulence de F. Psychrophilum (motilité, l'activité protéolytique extracellulaire et de limiter la croissance en l'absence de fer). Parmi ces mutants, dans le rapport a été étudié connu comme FP523, qui a été présenté simultanément dans les trois défauts de caractères phénotypiques ci-dessus et une diminution de la virulence. En outre, cette mutation a aussi montré des altérations de la croissance et une augmentation de la sensibilité et de DCT, contrairement à la souche parentale, a été en mesure de former un biofilm. Le gène interrompu dans ce mutant, appelé tlpB, codifiée tioldisulfuro oxydoréductase impliqués dans la réduction des ponts disulfure dans la protéine periplásmicas.

Auteur: VIDAL GALLEGO ANA BELEN.
Année: 2005.
Université: LEÓN [www.unileon.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE VETERINARIA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE VETERINARIA.

Résumé: L'objectif principal de cette thèse était de déterminer la fréquence d'isolement de Salmonella dans le porc, d'évaluer les outils disponibles pour le diagnostic, l'identification et la détermination, ainsi que de clarifier les aspects de son épidémiologie, nécessaire d'établir des stratégies efficaces de surveillance et de contrôle de Salmonella dans le porc Systèmes de production. Une première partie de l'étude a été réalisée en porcs à l'abattoir. Il a suivi de près les différents lots de porcs dans la phase finale d'appâts à deux moments différents, à la ferme, avant son départ à l'abattoir et après l'abattage. L'étude a consisté en une analyse bactériologique des différents types d'échantillons, ainsi que d'une analyse sérologique. Nous avons évalué l'utilité d'un Mix - ELISA pour la détection des anticorps de Salmonella et a déterminé dans quelle mesure les résultats sérologiques refléter la présence de Salmonella dans les groupes étudiés. Enfin, nous avons identifié les facteurs et les étapes de la production associée à la présence de salmonelles dans les porcs après l'abattage. La deuxième partie de cette thèse a été réalisée sur des porcs malades afin de déterminer la fréquence de détection, ainsi que des sérotypes et fagotipos impliqués. Une troisième partie du travail a été déterminé la variabilité génétique des isolats de différents fagotipos S. Typhimurkium et S. 4, 5, 12 i: - pour lesquels deux techniques moléculaires ont été utilisés: la détermination du profil des plasmides et électrophorèse en champ pulsé (PFGE ) Précédemment ADN digéré avec les enzymes XbaI et BlnI. Enfin, dans la quatrième et dernière partie de la thèse de doctorat, nous avons étudié la résistance aux antimicrobiens dans différents isolats de sérotypes différents et fagotipos salmonelles de porcs sains et les malades. Les résultats obtenus dans cette thèse illustre l'importance de l'élevage porcin comme un réservoir d'sérotypes de salmonelles fréquemment résistantes aux antimicrobiens. Ces isolats résistants ont pu causer la salmonellose chez les humains. Pour cette raison et d'autres, il serait important de procéder à un contrôle efficace des mesures qui pourraient réduire la prévalence de l'infection par les salmonelles et le développement de la résistance bactérienne dans les élevages. Ces mesures contribuent à une baisse de l'entrée des produits du porc contaminé par des salmonelles dans la chaîne alimentaire

Auteur: MENENDEZ GONZALEZ AURORA.
Année: 2006.
Université: OVIEDO [www.uniovi.es].
Lieu de l'exposition: UNIVERSIDAD DE OVIEDO.
Lieu de préparation: UNIVERSIDAD DE OVIEDO.

Résumé: Les mécanismes de la pathogénicité de Lactococcus garvieae, agent causal de la lactococosis dans diverses espèces de poissons d'eau douce, saumâtre ou salée, sont encore mal connus. À l'adresse de leur étude, le présent ouvrage a été utilisé technique appelée mutagenèse marquage (Signature tagged mutageneiss, STM). À cette fin, il est nécessaire de développer un ensemble de l'ingénierie génétique dans ce micro-organisme comme transformaicón, interrompant la transposition par le biais de la mutagenèse gène, ect. Ensuite, et grâce à l'application de la STM a été en mesure d'identifier un ensemble de mutants dont atténué dans ses gènes de virulence ont été identifiés et perturbé y compris les gènes associés au métabolisme, les gènes impliqués dans le transport et la régulation des gènes. Certains de ces mutants hans été étudiée de manière plus approfondie la fois in vitro et dans le pays d'accueil et les résultats obtenidios ont permis à certains des mécanismes de la pathogénicité de L.garvieae.