|
|
|
CETTE THÈSE VISE À ÉTUDIER LES ASPECTS GÉNÉRAUX LIÉS À L'IDENTIFICATION ET À L'UTILISATION DE LA RÉSISTANCE GÉNETICA NATURELLES OU TRANSGÉNIQUES.Auteur: AGUILAR AGUILAR JUAN MANUEL. Année: 2004. Université: MÁLAGA [ www.uma.es]. Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS. Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS. Résumé: Cette thèse vise à étudier les aspects généraux liés à l'identification et à l'utilisation de la résistance génétique, naturel ou transgéniques, en tant que stratégie de contrôle CYSDV, un virus transmis par la mouche blanche par des cultures protégées cucurbitacées sud-est de la péninsule español.Inicialmente, était nécessaire pour Procéder à la caractérisation moléculaire des CYSDV. Ainsi, dans cette thèse, il a été déterminé la séquence nucléotidique complète du génome d'un isolat espagnol - CYSDV à partir duquel a été déduit organisation éventuelle genómica.Los analyse a montré que les caractéristiques ne sont pas partagées par d'autres membres de la famille et aussi que les Mécanismes impliqués dans l'expression des gènes est la génération de messagers subgenómicos. Le estratgias proximité de contrôle CYSDV fournir des résultats restringidos.Así qui a effectué une recherche génétique pour la résistance à la CYSDV dans 300 entrées pepino.En cette analyse ont été identificadoo deux entrées dans les conditions naturelles ne présentaient aucun symptôme typique de l'infection provoquée par CYSDV, mais dans des conditions contrôlées Si elles montraient les symptômes, mais le développement et la gravité de ces mineures ont été comparés avec ceux d'un adulte susceptible.Además, l'analyse quantitative a montré une accumulation de petits ARN CYSDV cours de la testifo susceptible.Por outre, les résultats obtenus à partir d'une analyse favorisant la Aleurode révélé qu'un entrad semble démontrer une résistance à la volée le type antixenoisis. Compte tenu de l'existence d'un nombre limité de donateurs potentiels résistance naturelle à CYSDV, l'objectif était de susciter la résistance à l'infection grâce à la transformation de plantes avec des gènes capables de confeir ce carácter.La stratégie est basée sur la transformation génétique des plantes avec un de melon Bâtiment qui porte un fragment d'une répétition inversée de l'ARN dépendant de l'ARN polymérase (RdRp) CYSDV.Se ont identifié les lignes de melon avec une résistance partielle à CYSDV.Dicha résistance est caractérisé par une moindre accumulation de l'ARN viral et moins douloureuses Si on les compare à leurs controles.Los analyse effectuée avec une ligne de plantes suggèrent que le mécanisme responsable de la résistance gène silencieux est le niveau de l'ARN desecadenado par le transgène.
DECAIMIENTO ARBRES TOUCHÉS PAR LA TRISTESSE ET LA MORT SUBITE DES AGRUMESAuteur: ROMÁN PERUYERO MARTHA PATRICIA. Année: 2004. Université: POLITÉCNICA DE VALENCIA [ www.upv.es]. Lieu de l'exposition: ESCUELA TÉCNICA SUPERIOR DE INGENIEROS AGRÓNOMOS. Lieu de préparation: UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE VALENCIA. Résumé: Virus de la tristeza des agrumes (CTV) dans le monde a causé la mort de plus d'une centaine de millions de plants greffés sur bigaradier depuis la décennie de 1930. Dans ce travail, nous avons étudié les causes du syndrome de la désintégration par la tristesse en orange douce greffés sur orange amère, et testé des méthodes de serre et in vitro à reproduire la dégradation observée sur le terrain. Il a aussi étudié le mouvement du virus dans des combinaisons différentes variétés ou schéma amer et ont été caractérisées CTV isolés dans la dispersion actuelle naturelles domaine. En parallèle, nous avons étudié le syndrome de la décomposition des arbres touchés par la mort subite de Citrus (MSC), une nouvelle maladie orange douce vers les arbres qui ont utilisé au Brésil, à partir de 199, la mort de plus de deux millions de plants. Tout cela est renforcée par les études anatomiques et les estimations de la charge virale par des méthodes sérologiques. Il a été, pour la première fois, en mesure de reproduire in vitro de serre syndrome de la dégradation et de la mort par la tristesse usine orange douce greffés sur bigaradier. Il y avait trois types de syndromes: A - Décès d'effondrement. B - La mort par la détérioration lente. C - de graves symptômes de la chlorose et nanisme. L'étude anatomique de l'écorce de l'orange douce et d'orange bitter, ainsi que le terrain arbres cultivés en serre et in vitro, infectés par le CTV, il a été observé vieillissement précoce ou de la dégénérescence du phloème. Une telle dégénérescence (hypertrophie des cellules parenquimáticas, oblitérer, de l'effondrement et de la nécrose des tubes cribosos abouti à une réduction sensible du foema fonctionnel. Plantes cultivées en serre a été noté que le temps de survie de l'usine a été en fonction de la capacité de résistance de phloème. Usines qui Vécu plus longtemps (décomposition lente) phloème dégénéré a été renouvelé par la production de nouveaux stable phloème. Usines de symptômes aigus seulement dans la variété, le phloème d'orange amère n'a pas été affectée. Chez les plantes cultivées in vitro, ont également été observées grandes altérations anatomiques dans le système racinaire . Changements observés dans l'écorce des arbres touchés par la tristesse en Espagne étaient similaires à ceux qui sont touchés par MSCS au Brésil. Intensité des symptômes de tristesse et le CSM a été liée à l'augmentation des changements anatomiques, en particulier la réduction du phloème fonctionnel. Arbres touchés par Tristesse existe une relation positive entre la charge virale et des symptômes. Charge virale CTV arbres touchés par le CSM n'est pas associée à des symptômes. Homogénéité et de la distribution de la vitesse de CTV, virales dépend de l'isolement et de la variété greffée sur bigaradier. Combinaisons clementino et mexicains chaux Sur orange amère, a fait un très régulière de distribution et de la mobilisation du virus à la base. Dans orange douce greffés sur orange amère, mais la distribution n'a pas été aussi régulièrement pour tous les isolats étudiés, la distribution rapide du virus était plus élevé que dans d'autres combinaisons . Isolés qui seront distribués plus rapidement est le T - 300, dans n'importe quelle combinaison variété / orange amère, il peut être lié à la rapidité avec laquelle influe sur le phloème, provoquant l'effondrement de l'plantes. Caractérisation biologique et sérologique isolé capturé dans le domaine , A révélé la variabilité entre eux. Tous les isolats contenues epítopos 3DF1 et 3CA5 et certains d'entre eux ont été MCA 13 positif et l'agressivité accrue qui habituellement trouvés jusqu'ici dans la région de L'Horta Nord. L'INCIDENCE ET LA DISPERSION DES VIRUS TRANSMIS PAR LES PUCERONS DE LÉGUMES EN HIVER ET DE SES RELATIONS VECTEUR DU VIRUSAuteur: MORENO LOZANO ARANZAZU. Année: 2004. Université: POLITÉCNICA DE MADRID [ www.upm.es]. Lieu de l'exposition: ETSI AGRONOMOS. Lieu de préparation: CENTRO INVESTIGACIONES AGRARIAS, CCMA, CSIC. Résumé: Au cours de la thèse a été faite d'une part, l'identification, indicencia enquêtes et de la prévalence des principaux virus affectant les cultures de laitue et brásicas et dans le adventitia la flore qui y sont associées. Une analyse plus approfondie a été fait de l'évolution des virus de la mosaïque de la laitue espace dans la laitue cultures dans la région centrale. Les résultats montrent que le virus de la mosaïque de la laitue (LMV) et le virus de la mosaïque du concombre (CMV) dans la région centrale, et le bronzage virus de la tomate (TSWV) et le virus de l'ouest de betteraves jaunes (BWYV) et Murcie, ont été les principaux virus trouvé dans la laitue. En brásicas était cultivé le virus de la mosaïque du chou-fleur (CaMV), qui apparaît plus fréquemment. Major virus trouvés dans les cultures est aussi apparu dans la flore sauvage associés. La présence d'infections multiples était commun sobret notamment dans la flore sauvage associés. Les résultats obtenus par l'analyse de l'espace de LMV montrer comment la dispersion du virus dans les conditions d'essai est généralement policíclica. D'autre part, nous avons étudié la relation entre le principal vecteur du virus dans les cultures de virus trouvé. Nous avons évalué l'efficacité de la transmission LMV par différentes espèces de pucerons, soit M yzus persicae et Macrosiphum euphorbiae espèces correspondant le mieux transmis le virus. Nasonovia ribisnigri ne peut pas transmettre le virus à l'une des plantes testées. Il a été également presque techniques IC-RT-PCR et RT-IC-Nested-PCR comparant sa sensibilité et sa spécificité. La technique IC-RT-PCR-imbriquée a été utilisée pour la détection du virus dans les pucerons, rester possible dans la détection des espèces de vecteurs non viraux comme vecteur. Dans les études du comportement des pucerons associés à l'inoculation du CaMV a été observé que le virus est inoculé par la salivation lors de la première pénétration intracellulaire, les différences dans les pesistencia virus par les deux espèces étudiées, M.persicae et Brevycorine brassicae. D'autres études avec plusieurs variantes mutadas montrent que le virus de l'acide aminé 6 (Gln) de la protéine P2 du CaMV est spécifiquement impliquées dans la reconnaissance entre cette protéine et le récepteur cuticulaires dans vecteur. ANALYSE DES NOUVELLES STRATÉGIES FONDÉES SUR LES GÈNES SILENCIEUX POUR LE CONTRÔLE DES MALADIES VIRALES DANS LES PLANTESAuteur: VARGAS CONCHA YOLANDA MARISOL. Année: 2005. Université: POLITÉCNICA DE MADRID [ www.upm.es]. Lieu de l'exposition: ESCUELA TECNICA SUPERIOR DE INGENIEROS AGRONOMOS. Lieu de préparation: CENTRO DE INVESTIGACIONES BIOLOGICAS CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS (CSIC). Résumé: Le silencieux gène postranscripcional est un mécanisme de dégradation de l'ARN dépendant de l'homologie de séquence, qui agit comme un système de défense naturel des plantes par rapport aux infections virales. Nous savons également que l'ARN bicatenario (dsRNA) est l'inducteur de la réponse adaptative de la défense et très conservés dans l'évolution. Dans ce travail de thèse a été traitée avec deux stratégies différentes que, même si les deux sont basées sur l'utilisation de molécules dsRNAs dérivés séquence pour interférer avec infection virale du virus. La première stratégie est fondée sur l'expression de dsRNA par un transgène stables codage de la transcription virale séquences disposées en répétition inversée (IR). À cet égard, il existe des lignées transgéniques de Nicotiana benthamiana dans lesquelles elle a introduit un transgène contenant une répétition inversée de la région 54k de replicasa de poivron doux le virus de la marbrure (PMMoV). L'expression de cette construction a abouti à l'accumulation stable dans le plancher d'un transcrit en longueur correspondant à la séquence transgénique. Lors d'essais, de la protection contre PMMoV, près de 70% de ces lignes R0 régénérées ont montré une résistance au virus. En revanche, les bâtiments disposés en répétant encodage directe dans la même région du virus mais sans la possibilité de hibridar intramolecularmente montré une résistance au virus en seulement 6-20% des plantes R0 régénéré. Résistance à la PMMoV était associée à l'accumulation de petits ARN de 21 et 25 ts caractéristique de PTGS à un stade antérieur à la vaccination virale. Il a été caractérisé une ligne R2 dans homocigosis, IR4 # 8, qui exprime le NYT bicatenario. Cette ligne a été soumis à des degrés croissants de l'inoculum virale dans la route et une forte pression de l'inoculum et continue par faisceaux vasculaires, à l'aide de greffes. Dans tous les cas, les plantes transgéniques a haute résistance (immunité) contre le virus jusqu'à la fin du cycle de vie. De plus, lors de cette ligne de plantes transgéniques ont été inoculées avec tobamovirus à faible nucléotides similitude avec PMMoV - S comme TMV ou ToMV, ils ont montré une susceptibilité phénotype, cependant, quand ils ont été inoculés avec PMMoV - Ia tobamovirus élevé de nucléotides similitude avec PMMoV, les plantes ont montré Phénotype de résistance complet, indiquant la grande spécificité de ce mécanisme qui favorise la résistance dans ces plantas.La deuxième stratégie est présentée comme une alternative à la transformation génétique des plantes et est basée sur la production dsRNAs dérivés séquences virales dans les bactéries. Auparavant, il a été montré que l'inoculation des virus et des communes virale dsRNA séquences dérivées produites in vitro spécifiquement empêche infection virale chez les plantes. Afin de disposer de grandes quantités de dsRNA qui pourraient être utilisés dans des études de PTGS, ainsi que pour les possibilités d'utilisation dans le contrôle des maladies virales dans les plantes, a développé un système inductible de l'expression de ces molécules dans les bactéries. Le dsRNAs bien exprimé rapportent à diverses séquences génomiques provenant de PMMoV, le virus de la sharka (PPV) et le virus Y de la pomme de terre (PVY). Le dsRNAs purifié à partir de bactéries et de la collaboration inoculados avec le virus homologue de plantes N. Benthamiana et Capsicum annuum déposé une ingérence dans l'infection virale. En outre, lorsque les extraits bruts de dsRNAs obtenus par le lysat de la bactérie par la presse française, sans aucune étape de purification supplémentaire, sont mixtes inoculados avec le virus ou pulvérisé homologue sur la surface des feuilles de plantes, ont été observés à être aussi efficaces les virale De protection, même si la pulvérisation a été faite plusieurs jours avant l'inoculation du virus. On a obtenu la protection de pl 8 portes po 3ea -r cette méthode lorsque le virus de vaccination a été menée par le vecteur Myzus persicae. Toutefois, lorsque les molécules dsRNAs étaient transitoirement exprimées dans les plantes, elle a reçu un total ingérence dans la transmission du virus vecteur, résultant des plantes protégées de l'infection virale.
UTILITAIRE DE PARAS PLANA VITRECTOMY AVEC LA MEMBRANE INTERNE LIMITANT LA DISSECTION, DANS LE TRAITEMENT CHIRURGICAL DU TROU MACULAIRE DIABÉTIQUE ET L'œDÈME MACULAIRE. - CLINIQUE PATHOLOGIQUE CORRÉLATIONAuteur: CASTRO DE SOUSA JOAO PAULO. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA [ www.uab.es]. Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA. Lieu de préparation: ESCUELA DE POSTGRADO. STRUCTURE ET LA DIVERSITÉ GÉNÉTIQUE DES POPULATIONS DE BEGOMOVIRUS CAUSANT LA MALADIE BOUCLÉS JAUNE TOMATEAuteur: GARCIA ANDRES SUSANA. Année: 2005. Université: CÓRDOBA [ www.uco.es]. Lieu de l'exposition: ETSIAM. Lieu de préparation: ETSIAM. Résumé: Le bengomovirus (Famille Geminiviridade) associées à la maladie bouclés jaune tomate (TYLCD) causant des dommages importants dans la tomate (Lycopersicon esculentum Mill.) Dans de nombreuses régions tropicales et subtropicales du monde, sont également impliquées dans de très graves épisodes épidémiques en Espagne et en Italie depuis La fin delos années 80. Toutefois, en dépit de son importance économique, sont très peu d'études sur la diversité génétique et la structure de leurs populations, qui sont essentiels à la compréhension des facteurs qui influent sur leur développement et d'élaborer les stratégies de lutte durables. Par conséquent, les objectifs de ce travail a porté sur l'analyse de la structure et de la diversité génétique des populations bengomovirus causant TYLCD, étudier différentes causes qui peuvent modifier la structure de ces populations et leur évolution, ainsi que les mécanismes générateurs de la diversité est la recombinaison. La structure de la population de ces begomovirus en Espagne et en Italie avérée très complexe, de trouver des différences d'accueil, de zone géographique ou de temps. Il a identifié cinq variantes virales en Espagne et trois en Italie. Il a également souligné l'importance que joue la faune comme Solanumnigrum dans l'évolution de ces virus, car ils servent de réservoirs de la diversité génétique. En fait, on a détecté la présence à cette sorte d'une nouvelle variante de begomovirus de recombinaison de la nature avec un nouveau phénotype pathogène, qui pourrait avoir des conséquences imprévisibles épidémiologiques. Il a été démontré dans le présent document que la recombinaison est un phénomène courant chez les begomovirus qui fournit un large éventail de variantes virales dans la population qui permet à ces virus rapide adaptation à l'évolution de l'environnement. Il a aussi été révélé que la structure génétique des populations begomovirus en Espagne a été perturbé par le mouvement d'une autre espèce virale semble être plus résistant aux nouvelles variétés de tomate introduit dans les cultures avec des gènes de résistance aux TYLCD. Cette étude donne un aperçu sur les développements qui ont suivi la begomovirus présents dans le bassin méditerranéen depuis sa détection. LES INFECTIONS VIRALES EN TANT QUE FACTEUR DE STRESS SUR LA PHOTOSYNTHÈSEAuteur: SAJNANI PÉREZ CARLOTA. Année: 2005. Université: GRANADA [ www.ugr.es]. Lieu de l'exposition: ESTACIÓN EXPERIMENTAL DEL ZAIDÍN (CSIC). Lieu de préparation: ESTACIÓN EXPERIMENTAL DEL ZAIDÍN. Résumé: Dans ses précédents travaux, le groupe a montré que le virus de la marbrure poivron doux (PMMoV) induit une diminution des niveaux de protéines différentes PSII, ainsi que des changements dans l'expression des gènes de différentes protéines cloroplastídicas fois cloroplastídica codage nucléaire. Aussi imagerie de la fluorescence émise par les clorofial (Chl AF) s'est avéré très utile pour garder la trace de l'infection virale et à la défense des mécanismes qui se sont développés au cours de chloroplaste. Les systèmes huésped-patógeno utilisés dans cette étude ont été Nicotiana benthamiana infectés par des souches de l'espagnol et l'italien virus de la marbrure poivron doux (PMMoV-S, PMMoV-I) et de Nicotiana tabacum infectées par le virus de la mosaïque du tabac (TMV). Enfin, la société a eu recours à une ligne de travail transgéniques (CrtZ) sobreexpresa la bêta-carotínhidroxilasa. Pour l'étude du stress chez les plantes par des virus N.benthamiana ont passé deux biophysiques des techniques qui permettent de réaliser (comme l'EF Chl) des mesures Sheet: thermoluminescence (TL) et la fluorescence verte (GDB), également appelée la fluorescence de la Chl induites par les UV. Les TL ont révélé des changements dans la bande C à pas de géant dans la bande AG. La TL a également mesuré une température élevée (HTL) des feuilles infectées par les bandes ont été identifiées (HTL2), signe de stress oxydatif. Mais ces changements ont affecté d'une manière différente de la jeune feuille symptomatique et de la feuille adulte ne présentant pas de symptômes (sujets asymptomatiques fiche) plante infectée. GDB mesures nous ont permis de détecter une augmentation de la fluorescence dans le visage adaxial et surtout dans le abaxial feuille de la jeune et mature après deux semaines de l'inoculation. En outre, ces mesures ont montré que la face ventrale de la route infectées, comparativement à la santé, composés absorbant les UV s'accumulent dans la région. Ce phénomène a été détecté chez les jeunes feuilles avant même que les symptômes de l'infection sont visibles. Le CHl FLj a été utilisé dans ce document pour l'étude d'un deuxième système huésped-patógeno, plante Nicotiana tabacum infectées par le TMV. Dans ce cas, ont été analysés sous différents régimes lumínicos, sain et plantes infectées à l'état sauvage en ligne tabac à priser (WT) et une lignée transgénique (crtZ), qui sobreexpresa enzyme béta-carotínhidroxilasa qui vous permet de produire de plus grandes quantités de zeaxantina (Zea). Images NPQ (non-photochimique trempe), qui mesure l'énergie dissipée sous forme de chaleur et pas utilisé dans la photosynthèse, et de PSII (rendement cuántido de PSII) suggèrent que la ligne de tabac à priser crtZ soumis simultanément à la fois de stress (éclairage et virales Infection) n'a pas d'avantages par rapport aux WT. Cela serait compatible avec les données des profils de ces plantes obtenues par HPLC pigment, qui ne présente pas une grande différence. Enfin, dans cette thèse de doctorat que nous avons soulevées, une première approche de protéome chloroplaste de N.benthamiana, aussi comparer les différences dans les niveaux d'expression de protéines cloroplastídicas entre les échantillons infectés par le tobamovirus et des échantillons de végétaux sains. Nous avons identifié un total de 55 spots de protéines, gels 2D affiche des chloroplastes, dont 26 sont de moins en moins dans l'échantillon infecté. Les protéines affectés par l'infection décrits dans le présent document appartiennent principalement à la CCE et le cycle de Calvin. ANALYSE DE L'INTERACTION DE MELON (CUCUMIS MÉLO G.).
Résumé: Les maladies provoquées par les virus sont un problème croissant dans l'agriculture moderne et intensive. Le cycle d'infection virale est un processus complexe qui requiert une interaction à divers niveaux entre les facteurs de l'hôte et des facteurs du virus. L'étude des processus moléculaires impliqués dans les interactions entre les virus et les facteurs cellulaires peuvent produire de nouvelles connaissances sur les mécanismes de résistance et le développement de la résistance au virus, plus durable et à large spectre. Le virus de taches nécrotiques de melon (melon necrotic spot virus, MNSV) est un virus à ARN de sens positif endémique cucurbitaceas cultures du monde entier. Le gène récessif nsv melon (Cucumis melo L.) résistant à tous isolés MNSV sauf MNSV-264. Ceci a isolé davantage la capacité d'infecter les clients qui n'appartiennent pas à la famille des cucurbitacées (Nicotiana benthamiana et Gomphrena globosa). Une étude utilisant le mutant chimérique construite entre MNSV-264 et MNSV M-5 (un cas isolé avirulento) a montré que le facteur déterminant de avirulencia de MNSV réside dans la région 3'-terminal du génome viral. Des études antérieures ont identifié des facteurs dans l'initiation de la traduction eucaryote melon, Cm-elF4E comme un gène candidat à nsv. Un but principal de cette thèse a été la caractérisation moléculaire de l'interaction entre MNSV-nsv. Pour remédier à cette étude ont été effectuées dans les tests de complémentation melon par transient expression de l'allèle de susceptibilité Cm-el F4E génotypes résistants dans le melon. Ces tests ont conduit à la multiplication des MNSV M-5, confirmant que Cm-el F4E est le produit encodé par nsv. Ceci est donc le premier exemple d'une résistance à médiation récessif elF4E efficaces contre un virus ne poliadenilado sans 5'cap qui n'appartient pas à la famille des Potyviridae. Ce document a fait la caractérisation moléculaire de la région MNSV impliqués dans la détermination avirulencia. Les expériences ont montré que le facteur déterminant de avirulencia ARN est une molécule elle-même. En même temps, nous avons identifié dans les prédictions de la structure secondaire de plusieurs 3'UTRs isolé MNSV possible les éléments structurels qui peuvent être liés à surmonter la résistance. Il s'agit du premier cas décrit dans lequel le facteur déterminant de avirulencia qui interagit avec elF4E, directement ou indirectement, est une molécule d'ARN. Controlling MNSV se fonde principalement sur l'utilisation de variétés qui intègrent le gène nsv. Cette étude a procédé à une recherche de nouvelles sources de résistance naturelle à MNSV par criblage phénotypique de 147 entrées et des espèces C.melo fins mécanique après l'inoculation. Les résultats ont montré l'existence de 2 et 4 entrées C.melo des espèces résistantes MSNV-M 5. Une seule entrée, C.zehyeri n'était pas infecté par l'un des isolats. L'utilité des entrées relatives aux espèces C.melo reposent en grande partie sur le développement de stratégies de transfert de gènes permettant de surmonter les obstacles à la compatibilité avec C.melo reposent en grande partie sur le développement de stratégies pour le transfert de gènes au-delà des barrières compatibilité C.melo. En outre, dans cette étude, nous avons adapté et développé pour EcoTILLING point de la technique de melon avec le même capteur utilisé dans le contrôle phénotypique. Cette technique a été appliquée comme le dépistage génétique et a permis de confirmer la corrélation entre les SNP (single nucleotide change) dans le génotype résistant melon et de la résistance à MNSV. Grâce à la mise en oeuvre de EcoTILLING a analysé la variabilité de la Cm-elF4E d'entrées dans la collection, il ya eu une recherche de nouveaux allèles de résistance et a analysé la corrélation entre les haplotypes retrouvés et la résistance / sensibilité à d'autres virus pour lesquels la collecte a été Précédemment caractérisé. Enfin, un autre objectif a été soulevée caractérisation moléculaire du travail interaction MNSV-N.benthamiana. La complémentation essais cabine 8 ou mostra 4ef rhum que l'allèle de susceptibilité Cm-elF4E pas complétant MNSV-M5 infection dans cette espèce. Cela donne à penser que les mécanismes de contrôle de la résistance dans N.benthamiana et melon sont différents. L'homologie de la prédiction de la structure secondaire 3'UTR de précurseurs isolés avirulentos avec miRNA séquences évoqué la possibilité de l'implication des mécanismes silencieux médiée par de petits ARN. Analyse a été réalisée par le Nord-blot montrent que l'existence de petits ARN codé par homologie avec N.benthamiana avec 3'UTR du génome MNSV-M5. EXPRESSION DIFFÉRENTIELLE DE PROTÉINES ET DE L'ÉTUDE DU MÉTABOLISME DES PRUNUS ANTIOXIDATIVO SP ET LES PLANTES DE POIS (PISUM SATIVUM L.), EN RÉPONSE À LA PRUNE VIRUS DE LA VARIOLE (PPV) SUBCELLULAIRE NIVEAU.Auteur: Díaz Vivancos Pedro. Année: 2006. Université: POLITÉCNICA DE CARTAGENA [ www.upct.es]. Lieu de l'exposition: E.T.S. de Ingeniería Agronómica. Lieu de préparation: Centro de Edafología y Biología Aplicada del Segura (CEBAS-CSIC).
Résumé: La sharka maladie causée par le virus de la variole Plum (PPV), est l'un des facteurs limitants dans la production d'arbres fruitiers du genre Prunus, donnant d'importantes pertes économiques. Il a étudié l'effet de l'infection sur PPV différents paramètres physiologiques et biochimiques de l'espèce Prunus avec différents sensibilité à la carte [de pêche "GF305" et abricot Real Fine, "comme susceptible d'abricot et de" Stark Early Orange "(" SEO ") Comme résistant], subcellulaire niveau. Ces études ont également été entreprises dans une variété de pois ( "Alaska") très sensibles au PPV. Dans les végétaux sensibles, l'infection PPV produire des changements dans certains paramètres photosynthétiques. Les deux Prunus pois comme cela a été décrit en présence de l'activité APX résistant à l'acide p- hidroximercuro benzóico (pHMB) (APX Classe III). En fraction soluble de l'infection par les végétaux sensibles abricot baisse de l'activité APX sensibles pHMB (APX classe I) deshidroascorbato réductase (DHAR) et peroxydase (POX), tandis que dans la variété résistante a été une augmentation des activités de l'APX Classe III, monodeshidroascorbato réductase (MDHAR) , Glutathion réductase (GR) et de superoxyde dismutase (SOD). L'activité de la catalase diminué dans la fraction soluble de ces deux variétés. L'infection conduit à une baisse de la carte des enzymes du cycle ascorbato - glutation (APX, MDHAR, DHAR et GR) seulement en chloroplastes de la variété sensible. En pois études ont été réalisées à 3 et 15 jours après l'inoculation (ppp). Après 3 ppp infection par le PPV entraîné une baisse de la classe I et APX POX augmenté en fraction soluble, alors que dans chloroplastes il a baissé de APX et POX. Après 15 ppp infections ont entraîné une augmentation de l'enzyme secuestradoras de H2O2 (POX et APXs) et une réduction des activités glutation - S - transferasa (TPS) et la fraction soluble dans la catalase. En chloroplastes il y avait une baisse des activités glutathion peroxydase (GPX), la SOD et SW. Il a également étudié les systèmes antioxydant apoplasto en réponse à la carte dans les variétés de Prunus avec différents sensibilité à la carte. Les deux pêches et abricots décrites à la présence d'APX classes I et III, SOD, POX, NADH - POX et polifenoloxidasa (PPO). En apoplasto de l'infection des feuilles de pêchers conduit à un accroissement des APX classe I, POX, NADH et POX - PPO. En apoplasto feuilles abricot sensibles à l'infection conduit à une baisse de POX et de la SOD et une augmentation de la PPO. Toutefois, le apoplasto feuilles abricot PPV résistants à l'infection conduit à un accroissement des APX POX classe I et la SOD. L'infection abouti à un PPV stress oxydatif, comme l'indique l'augmentation des niveaux de la peroxydation des lipides, protéines oxydation, la perte d'électrolytes et de l'accumulation de H2O2 seulement dans les variétés sensibles étudiées. La baisse des paramètres photosynthétiques, indiquant génération d'espèces réactives de l'oxygène (ROS) en chloroplastes, et le déclin des niveaux de antioxydant enzymes dans les chloroplastes des variétés sensibles pourraient être responsables de symptômes de la chlorose. Les résultats obtenus dans les pois, qui a utilisé une souche de PPV avec génétiquement modifiés GFP ont montré que le virus est apparu dans les zones de chlorose et dans les mêmes domaines a été observé par les techniques histochimiques, une accumulation de H2O2 et O2 dans les feuilles infectées. Ultrastructural études ont montré que le virus a été accumulé dans le cytosol des cellules infectées et le chloroplaste a été orgánulo les plus durement touchés par l'infection par le PPV. Par des études de protéomique, nous avons étudié les effets de l'infection par le PPV de l'expression de protéines de pois et de la pêche. L'identification de protéines ont montré une induction taumatina et 8 un inv 712 enso de mandelonitrilo liasa dans apoplasto de feuilles de pêcher infectées par le PPV. Toutefois, la plupart des Polypeptides montré aucune homologie avec des protéines connues. Ce fait montre que la plupart des fonctions apoplasto sont encore inconnus, du moins dans Prunus. En pois d'infection PPV produit principalement une modification de la photosynthèse et le métabolisme des glucides. En conclusion générale que peut décrire l'infection produit une PPV stress oxydatif dans les deux feuilles de variétés de pois en feuilles Prunus sensibles au virus et que le déséquilibre observé dans le métabolisme antioxidativo pourrait être liée à la progression de l'infection et les symptômes. En outre, les résultats donnent à penser qu'une plus grande capacité antioxydante en témoigne le cultivar abricot "SEO" pourrait être le résultat d'une réaction systémique acquise induite PPV pénétration dans les tissus de la tige au point de greffe. Ces faits pourraient être liés, entre autres facteurs, sa résistance au PPV. |
|
|