SCIENCES DE LA VIE, 2

Auteur: RUBIO SOMOZA IGNACIO.
Année: 2004.
Université: POLITÉCNICA DE MADRID.
Lieu de l'exposition: E.T.S. INGENIEROS AGRONOMOS.
Lieu de préparation: E.T.S.I. AGRONOMOS.

Résumé: Dans cet article, nous décrivons le clonage moléculaire et la caractérisation de deux facteurs transcripcionales type MYBR1 la sous-famille SHAQKYF orge, et leur implication dans la régulation transcriptionnelle de l'expression des gènes qui sont exprimés au cours du développement et la germination des graines de cette céréale. Ces deux facteurs sont présents dans les deux phases du cycle de vie à partir de semences, de jouer un inducteur de l'expression des gènes au cours du développement de l'endosperme, la course, cependant HvMCB1 comme répresseur et HvMYBSt1 comme l'activation de l'expression de gènes codant hidrolasas dans aleurona dans la germination du grain. Enfin, une analyse bioinformático la présence de membres de la sous-famille SHAQKYF dans le génome d'Arabidopsis thaliana et Oryza sativa.

Auteur: PARRA FARRÉ GENÍS.
Année: 2004.
Université: POMPEU FABRA.
Lieu de l'exposition: DEPARTAMENTO DE CIENCIAS EXPERIMENTALES Y DE LA SALUD.
Lieu de préparation: DEPARTAMENTO DE CIENCIAS EXPERIMENTALES Y DE LA SALUD.

Résumé: Le travail présenté ici, est l'étude de la reconnaissance des signes qui l'entourent et de définir les gènes codant des protéines, ainsi que leur applicabilité à la prédiction de gène programmes. L'argument présenté ici, est également à explorer l'utilisation de la génomique comparative pour améliorer l'identification de gènes dans différentes espèces simultanément. Cela explique aussi l'élaboration de deux programmes de calcul de prédiction de gènes: geneid et sgp2. Le programme geneid identifie des gènes codés dans une séquence d'ADN anonyme fondée sur leurs propriétés intrinsèques (principalement des signaux épissage différentiel et de l'utilisation des codons). Sgp2 permet l'utilisation de la comparaison entre les deux génomes, qui doit être d'une certaine distance évolutive optimale, dans le but d'améliorer la prédiction des gènes, en vertu de l'hypothèse que la codification des régions qui sont les plus conservées régions qui ne codent pas pour des protéines. Ces deux programmes ont été utilisés pour l'annotation des espèces différentes dans le cadre de consortiums internationaux de séquençage et d'annotation. Parmi les plus importants, les partenariats dans lesquels elle a été utilisée geneid peut être mis en évidence: l'annotation du génome de Dyctiostelium discoideum et génome Tefraodon nigroviridis. Le programme sgp2, vous pouvez mettre en évidence l'annotation du génome de la souris et le poulet. Ce travail comprend également des collaborations avec des groupes expérimentaux et de calcul, chose qui a permis de coordonner les méthodes bioinformatique et validation expérimentale de nombreux jusqu'alors inconnu, les gènes humains.

Auteur: FONTAINE FABIEN.
Année: 2004.
Université: POMPEU FABRA.
Lieu de l'exposition: DEPARTAMENTO DE CIENCIAS EXPERIMENTALES Y DE LA SALUD.
Lieu de préparation: DEPARTAMENTO DE CIENCIAS EXPERIMENTALES Y DE LA SALUD.

Résumé: Dans le but de lier la structure et l'activité d'une série de composés, il est important d'utiliser les descripteurs moléculaires. GRIND descripteurs et VolSurf appartiennent à une nouvelle famille de descripteurs appelés libre alignement. En d'autres termes, qui n'ont pas besoin d'aligner les composés dans le but de comparer leurs domaines d'interactions moléculaires. Cette étude a appliqué ces descripteurs pour la sélection des réactifs chimiques à partir d'une base de données globale. La sélection a été effectuée par le biais d'un protocole qui permet d'optimiser la diversité de l'échantillon et obtenir certains composés très informative. Il a également mis au point de nouveaux moyens de descripteurs qui sont fondées sur les modifications de la courbure de la surface moléculaire. Nos résultats indiquent que les nouveaux descripteurs intégrera très bien dans l'original et GRIND descripteurs qui permettent d'identifier les effets à la fois favorables et défavorables. De plus, il a élaboré de nouveaux descripteurs libre alignement appelé "ancre - GRIND" en utilisant un atome, dans chaque molécule de référence pour la comparaison des domaines d'interactions moléculaires. Les descripteurs "ancre - GRIND permet une analyse plus précise et plus simple que les descripteurs GRIND qui les rend plus pertinentes pour l'analyse de certaines familles de composés.

Auteur: LAO GRUESO ÓSCAR.
Année: 2004.
Université: POMPEU FABRA.
Lieu de l'exposition: DEPARTAMENTO DE CIENCIAS EXPERIMENTALES Y DE LA SALUD.
Lieu de préparation: DEPARTAMENTO DE CIENCIAS EXPERIMENTALES Y DE LA SALUD.

Résumé: Les maladies génétiques sont généralement classés en deux grands groupes: mendelianas maladie et les maladies complexes. Alors que mendelianas maladies se caractérise par une faible fréquence dans la population et d'être causés par des mutations dans un gène particulier, les maladies complexes sont le principal problème de santé dans les pays développés et sont produits par l'interaction de facteurs génétiques et des facteurs environnementaux. Dans ce cas, nous ne pouvons pas parler d'une mutation dans un gène, mais ce polymorphisme dans une petite fraction augmente le risque de la maladie. Dans cette thèse a étudié la répartition spatiale de la variabilité génétique dans mendelianas maladies (notamment la mucoviscidose, phénylcétonurie et b - talasemia) comme une maladie complexe (CHD) dans les populations d'Europe et du monde entier. Ces résultats suggèrent que la répartition géographique de la variabilité génétique de la maladie mendelianas dépend principalement de facteurs démographiques et de l'histoire des populations. Toutefois, cet effet n'est pas indépendant des facteurs sélectifs. En particulier de l'équilibre entre les phénomènes de sélection peut augmenter ou diminuer la variation génétique dans une population en fonction de l'heure à laquelle l'événement a été sélective. Dans le cas de la maladie étudiée complexe, les coronaropathies, nos résultats suggèrent que la répartition spatiale des polymorphismes de risque dans les populations d'Europe dépend, comme pour les autres marqueurs génétiques, principalement dans l'histoire de la population, en particulier dans le règlement du continent européen, Les reexpansión après la dernière période glaciaire et de la grande expansion de la population pendant les agriculteurs néolithique. Étant donné que l'incidence de maladies coronariennes montre un modèle de répartition géographique au nord, ce résultat implique que de nombreux polymorphismes sont corrélés à l'incidence de la maladie, indpendientemente qu'ils soient ou non effectivement être impliqué dans l'étiologie de la maladie coronarienne.

Auteur: MARTÍNEZ AMAT ANTONIO.
Année: 2004.
Université: GRANADA.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS DE LA ACTIVIDAD FÍSICA Y EL DEPORTE.

Résumé: La pratique de l'exercice physique a été associée à l'élaboration de microlesiones musculaire. Sa gravité et l'évolution sont variables, en fonction de l'intensité, la durée et le type d'exercice réalisé. Il est bien établi que le muscle plus de dégâts subis lors de l'exercice implique des contractions excentriques (actif étirement musculaire). Divers marqueurs ont été proposées pour déterminer les dommages musculaires, comme la créatine activité kinase dans le sérum (CK), le lactate deshidrogenadas (LDH), ou la concentration dans le plasma malondialdéhyde (MDA). Cependant, tous les paramètres actuellement disponibles sont limitées, et de la libération des enzymes du muscle reflète pas clairement les dommages structurels musculaire, comme cela a été estimé par l'analyse histólogico. Dans cette étude, notre objectif a été d'identifier les protéines a actina musculaire squelettique, par tache occidentale, dans le sérum de sujets de graves dommages muscle squelettique, les sujets sains ne athlètes, les athlètes d'élite et des sujets soumis les athlètes ayant blessures musculaires, en utilisant Comme un élément prédictif fiable, qui est capable de détecter les problèmes de dysfonctionnement musculaires contractiles. En outre, nous avons procédé à l'identification d'un certain nombre d'autres marqueurs, comme mioglobina, CK totale LDH troponine T et troponine I, dans le but de comparer et d'évaluer, en collaboration avec l'actina, lequel d'entre eux est plus fiable pour détecter Muscle squelettique dommages. Les échantillons ont été obtenus à partir d'un total de 134 sujets, qui ont été distribués dans chaque groupe commenté plus tôt. Ces groupes ont pris quatre études: premièrement comparer les niveaux de marqueurs entre les différents groupes de sujets, la deuxième étude était de comparer l'évolution des différents marqueurs dans les différentes disciplines sportives étudiées: La troisième étude avait pour objet de l'analyse de marqueurs varient comme partie De forte concurrence entre les deux types de modèles de sport (handball et le rugby), et enfin, l'on compare les variations dans le temps des différents marqueurs, après avoir procédé à un test d'efforts. Nos résultats montrent dans les différentes études, l'un actina est la protéine dans le muscle squelettique des dommages plus d'importance, à la fois quantitativement et qualitativement, à l'égard d'autres protéines testées. En outre, nous trouvons que a actina est que la protéine est libérée dans le sang quand il ya un plus précoce du muscle squelettique dommages, et peut donc être considéré comme un candidat pour la détection précoce des lésions dans le muscle squelettique athlètes.

Auteur: GARCÍA CALERO ELENA.
Année: 2004.
Université: MURCIA.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA.

Résumé: Afin de progresser dans la compréhension des questions de développement et de la régionalisation de prosencéfalo vertébrés, cette thèse, nous avons suivi trois approches axées sur la disponibilité de nouveaux marqueurs moléculaires. Les résultats correspondants sont abordés séparément dans des chapitres spécifiques. Nous avons lié ce type d'expression avec la mise en place rapide de traverser les frontières en prosencéfalo. Pour mener à bien cette étude, nous avons soutenu dans le modèle prosomérico révisé (Puelles et Rubenstein, 1993, 2003). Le gène prezonal a été cloné dans notre laboratoire repose sur la séquence d'publiées antérieurement. Les résultats corroborent l'établissement de frontières en prosencéfalo (stades HH16, HH17). Ces résultats sont présentés dans le premier chapitre et une partie du chapitre II de cette thèse. Deuxièmement, nous avons discuté de l'établissement d'un schéma ventrale en prosencéfalo secondaire, en particulier le développement de la région mamilar et leur relation avec l'induction compter de la fin de la précédente notocorda et plaque precordal. Nous avons utilisé comme marqueur précoce dans la région mamilar gène EphA7 décrit précédemment. Nous avons vu un effet inductif de la plaque precordal sur la partie ventrale région de prosencéfalo secondaires résultant d'une spécification qui suit une séquence temporelle caudorrostral, à savoir que les régions les plus rostrales spécifié dans la dernière place. En outre, nous avons observé un lien direct ou indirect entre la région basale de telencéfalo et inductif processus découlant de la plaque precordal. Ces résultats apparaissent dans la deuxième partie du chapitre II de cette thèse. Enfin, nous avons analysé le profil d'expression du gène Enc1 dans prosencéfalo poulet de trois jours d'incubation jusqu'au stades de preeclosión. Cela nous a permis de relier les domaines d'intervention précoce avec la formation de structures de gris dans les stades plus avancés. Également partie de cet examen a porté sur l'étude de l'expression de ce gène dans la région de telencéfalo obtenir des informations d'une importance capitale car ils effectuent des études comparatives de telencéfalo chez les vertébrés. Nous avons commencé, en revanche, l'analyse du profil d'expression de ce gène dans telencéfalo souris. Ces conclusions figurent dans le chapitre III du présent exposé.

Auteur: Jiménez Movilla María.
Année: 2004.
Université: MURCIA.
Lieu de l'exposition: Facultad de Medicina.
Lieu de préparation: Facultad de Medicina Universidad de Murcia.

Résumé: Dans cette thèse ont étudié différents aspects glucídica la composition, la structure, la formation et l'origine de la zone pellucide glycoprotéines, et que la forme, avec un intérêt particulier dans l'espèce humaine. À cette fin, nous avons développé trois axes de recherche, ultrastructural étude de la zone pellucide et corticales granulés ovocytes humains et de la synthèse des glycoprotéines de l'homme et de la souris ZP, biochimiques et biophysiques analyse de la zone pellucide glycoprotéines de hamster et physiologiques et Analyse biochimique de ZP2 et ZP3 humain recombinant exprimé dans les cellules CHO. On trouvera ci-après une synthèse des expériences et de données dans les trois pistes de réflexion. 1. Il ya eu une ultrastructural étude de la zone pellucide et corticales de granulés ovocytes humains glucídica de déterminer leur composition et la structure. Nous avons également enquêté, ultrastructural niveau, la voie de synthèse des glycoprotéines qui forment l'homme ZP et de la structure des organites impliqués dans la synthèse des glycoprotéines dans les différents stades de développement des follicules ovocytes de souris. Pour ce faire, nous avons utilisé à cytochimiques techniques de la microscopie électronique appliquée lectine conjugué peroxydase, digoxigenina et colloïdale d'or, en association avec des traitements enzymatiques. Ils ont également été utilisés les techniques inmunocitoquímicas avec des anticorps dirigés contre les glycoprotéines constitutifs de la ZP et contre la protéine humaine marqueurs organite dans le cytoplasme des ovocytes de souris. Des études comparatives ont été réalisées en utilisant quantitatives de l'analyse d'images. Les principaux résultats obtenus dans cette étude peuvent être regroupées sous les rubriques suivantes: A. Le ZP - MII ovocytes humains dans VG et présente lectine affinité pour les activités suivantes: AAA, AIA, ConA, DSA, LFA, MAA, PHA - E, PHA -L, RCA - Iy WGA. Toutefois, nous n'avons trouvé aucune marques dans la ZP quand incubamos les sections ultrafines d'ovocytes humains avec la lectine suivantes: BSA - I - B4, DBA, GNA, HPA, LTA, NAPA, SBA, SNA, STA ou UEA - je. L'anticorps de lutte contre la ZP3 l'homme a une forte réactivité dans toute l'épaisseur de la ZP en ovocytes humains dans le VG que dans MII ovocytes. ZP de l'homme a aussi été fortement marquée par les anticorps antipersonnel sialil - Lewisa et de la lutte contre sialil - lewisx dans les deux stades analysé dans la présente étude. Il n'a pas été détecté aucune réactivité avec les anticorps de lutte contre le Gal, de lutte contre la Lewisa, la lutte contre la Lewisb, la lutte contre la Lewisx et TEC - 02 dans la ZP. Lorsque les sections ultrafines ont été traités par l'enzyme de la neuraminidase et d'éliminer les déchets acides siálico, lectine LTA, PNA et SBA présentée par la ZP réactivité des ovocytes humains. Ce traitement expose également les sites de liaison des anticorps qui reconnaissent la lutte contre Lewisa et de la lutte contre Lewisx. L'analyse quantitative a été réalisée avec la lectine WGA et AAA, les anticorps antipersonnel sialil - Lewisa et de la lutte contre sialil - lewisx et d'un anticorps de lutte contre la ZP3 humains. Avec ces résultats, nous avons démontré que glicanos de l'homme présenté comme ZP sucres terminaux séquences sialil - lewisa, sialil - lewisx et Neu5Ac 2 - 3Gal 1,4 GlcNAc. Aussi, nous avons démontré la présence de séquences Neu5Ac - Gal 1,3 GalNAc et Neu5Ac - GalNAc. Les données montrent également que la séquence polilactosamina est présent dans la ZP et à l'expression de l'homme chaînes biantenarias et triantenarias du type N - glicanos. Nous avons trouvé fucosa unis 1,6 à GlcNAc (AAA) et fucosas contenues dans la séquence de l'un y louis louis X. Enfin, et contrairement à d'autres épices ont montré la présence humaine dans la ZP antigène Tn (GalNAc - Ser). Grâce à l'analyse quantitative de marquage obtenus suggèrent une distribution hétérogène d'hydrates de carbone dans la ZP humaine. L'analyse quantitative a indiqué que certaines séquences des hydrates de carbone comme sialil - Lewisa et sialil - Lewisx était 8 encuentr 1ff8 une principalement situées dans la région en dehors de la ZP. B - granulés corticales ont été fortement marqués par la lectine: AAA, AIA, DSA, LFA, MPA PHA - Ey WGA. Le MAA lectina et anticorps antipersonnel sialil - Lewisx montré une faible réactivité. Le marquage observée dans le cortex granulés n'était pas uniforme. Les granulés corticales ne sont pas réactives à la lectine: BSAI - B4, ConA, DBA, GNA, HPA, LTA, PHA - L, NAPA, RCA - I, SBA, SNA, STA UEA - Iy autres anticorps utilisés dans la présente étude. Après le traitement par la neuraminidase, le corticale granulés affichent une forte réactivité à lectina PAN. Dans cette étude, nous avons démontré la présence de déchets suivantes glucides grâce citoquímica lectine couplée à des particules d'or colloïdales: GlcNAc, Fuc, Gal 1,4 GlcNAc, GalNAc, Neu5Ac 2,3 Gal 1,4 GlcNAc, Neu5Ac 2,3 Ga 1, 3 GalNAc et N - glicanos Type complexe avec des chaînes biantenarias et / ou triantenarias. Nous avons également remarqué que lectine qui lient spécifiquement à l'homme ZP n'ont aucune affinité pour les granules corticaux, confirmant que la composition de la ZP différente de la composition des granulés corticales. En outre suggèrent également qu'il existe des ovocytes humains dans différentes populations de granulés corticales. C. - Les ovocytes humains dans la vésicule germinale (la prophase I) et métaphase II ont été incubées avec les anticorps de lutte contre la ZP3 humaines de lutte contre la ZP total de la viande de porc et de la lutte contre la ZPC porc montrant une forte affinité pour les humains ZP. En oolema d'ovocytes dans la prophase I peut observer un marquage modérément anticorps antipersonnel ZP3 humaines de lutte contre la ZP de porc et de la lutte contre la ZPC porc. Toutefois, en ovocytes à la métaphase II, on ne voit pas ce marquage. Ces données démontrent que les anticorps contre la glycoprotéines de la ZP et de porcs ZP reconnaître épitopes présents dans la ZP et humaines de ces glycoprotéines sont à la membrane plasmique de l'ovocyte suggérant que les poursuites engagées contre cette glycoprotéine se produire au niveau de oolema en ovocytes dans la prophase je mets Que, dans ovocytes à la métaphase II, nous n'avons trouvé aucun marquage. En ooplasma d'ovocytes dans la prophase I observé un marquage des anticorps spécifiques dans ces trois organes multivesiculares et citernes de l'appareil de Golgi. Dans les ovocytes qui ont été à la métaphase II, ces structures ne sont pas expressément indiqués. Cela donne à penser que les glycoprotéines de la ZP sont synthétisées et endocitadas ou dégradés par l'ovocyte. D. - Sections ultrafines de souris ovaires étaient inmunomarcadas avec des anticorps spécifiques contre organite citoplasmáticas comme la lutte contre le PDI anticorps, qui reconnaît le réticule endoplasmatico, et les anticorps antipersonnel GM130 reconnaissant l'appareil de Golgi. L'étude a été réalisée en follicules unilaminares, bilaminares et multilaminares. Nous avons vu que dans les follicules unilaminares le réticule endoplasmatico introduit une disposition dans des réservoirs empilés pour former une structure linéaire. En ovocytes de follicules bilaminares dans ooplasma trouvé une grande quantité de structures circulaires marqués spécifiquement de la lutte contre le PDI anticorps qui n'étaient pas marqués par l'anticorps antipersonnel GM130. En ovocytes qui étaient en follicules multilamelares pas permis de déceler la présence de structures circulaires. Cependant, nous avons constaté, avec les anticorps qui reconnaît la protéine réticulum endoplasmatico, la présence de petites vésicules electrodensas marqués spécifiquement. Les résultats, nous suggérons que l'ovocyte follicules être trouvé dans l'enseignement primaire bilaminares soutient une importante protéine qui affecte la circulation sur la forte présence de l'organite impliqué dans la synthèse des protéines, comme c'est le réticule endoplasmatico et cela représente une forme circulaire avec un diamètre Moyenne de 1,5 m. Toutefois, l'ovocyte multilaminar une fois qu'ils ont achevé leurs besoins proteícas pour faire face à la fertilisation, réorganise le RE à servir de réservoir de Ca2 + et de réguler les différents transits de Ca2 + qui se produisent au cours de la fécondation pourra noter la présence dans la ooplasma l'ovocyte, Dans certaines vésicules diamètre moyen de 100 milles marins. 2. Pour rendre l'étude biochimique de glycoprotéines de la ZP nous servir de modèle pour l'examen de la ZP de hamster. Dans cette étude, nous l'avons fait, d'abord, une étude immunocytochimiques ultrastructural niveau de la ZP de hamster avec un anticorps antipersonnel ZP porc épitopes reconnu que la région de l'extérieur de la ZP et comparer la répartition de différentes espèces. Pour cela, nous utilisons des techniques immunohistochimie au niveau de la microscopie électronique et quantitative des études comparatives ont été menées à bien grâce à l'analyse d'images. Ultérieurement, nous avons effectué la purification et la caractérisation des glycoprotéines de la ZP de hamster par SDS-PAGE techniques d'électrophorèse et de l'ouest - épongez avec anticorps antipersonnel ZP porc. Pour déterminer quels sont les épitopes reconnus par cet anticorps effectuer inmunoprecipitación et de la digestion avec l'enzyme N - glicosidasa F. Enfin secuenciamos bande anticorps qui reconnaît la lutte contre la ZP porc par spectrométrie de masse. Les résultats sont présentés ci-après. A. La ZP d'ovocytes provenant de différents follicules ovariens de hamster, cochon, le rat et la souris a été spécialement marqués avec l'anticorps antipersonnel ZP porc. Notez que le inmunomarcaje été distribués dans toute l'épaisseur de la ZP de follicules ovariens porc, le rat et la souris, cependant, nous voyons un modèle différent dans la distribution de marquage obtenus dans la ZP ovariennes de hamsters. Les follicules ovariens preantrales montré une numérotation uniforme dans l'ensemble de la ZP tandis que le inmunomarcaje observé dans les grands follicules (follicules multilaminares et antre) a été distribué avec plus d'intensité heterogéneamente marquage dans le secteur extérieur. L'hétérogénéité dans le schéma observé antre de follicules ovariennes de hamsters a aussi été examiné en ovocytes ovulados. Toutefois, chez le rat et la souris ovocytes observer un marquage distribué tout au long de l'épaisseur de la ZP. Ces données démontrent qu'un épitope présents à la ZP porc et se retrouve aussi dans la souris et le rat ZP hamsters, est principalement distribué dans la région en dehors de la ZP de hamster. B. Par électrophorèse et de l'ouest - tache de glycoprotéines de la ZP de hamster noter que les anticorps antipersonnel ZP porc reconnaît spécifiquement la bande de 56 kDa qui a été décrit qui est la ZP3 de hamster. Le lectina WGA reconnaît deux bandes moins 56 kDa et une assez large entre 90 et 200 kDa. Nous inmunoprecipitación des glycoprotéines avec les anticorps de lutte contre la ZP porc en notant que la bande de 56 kDa a été totalement précipité et le groupe restant dans le surnageant. Ce résultat feront preuve de la structure différente de la ZP long de son épaisseur, car en utilisant la microscopie électronique à noter marquage exclusivement à l'extérieur de la ZP, cependant, en testant inmunoprecipitación noter que l'anticorps a affinité pour tous les groupes où la ZP3 hamster et c'est à travers L'épaisseur de la ZP. La présence d'un ouvrage long de la supramoléculaire ZP composé des différentes glycoprotéines interne peut faire la région est inaccessible aux anticorps tandis que dans la région sont exposés externe épitopes reconnu que l'anticorps. C. - Aislamos bande de 56 kDa et mené la digestion avec l'enzyme N - glicosidasa F de cette bande et de la ZP totale de hamster. Nous analysons l'échantillon obtenu par électrophorèse et de l'ouest - épongez incubant la membrane avec les anticorps de lutte contre la ZP porc. Avec ces expériences, nous avons observé que la deglicosilación de ZP totale de hamster ont montré la présence de quatre bandes de rapprocher masse 67 kDa moléculaire, 58 kDa, 48 kDa et 38 kDa et de la bande de 56 kDa digéré noter la présence de deux bandes de poids moléculaire 8 proximad 1df5 ou 48 et 38 kDa. Ces données donnent à penser pour nous deux choses: 1) que l'anticorps reconnaît la part de toutes les protéines, mais ces glycoprotéines sont inaccessibles en raison de la présence de la structure moléculaire formé par les protéines et les chaînes glicosídicas. 2) La bande de 56 kDa dans la ZP hamsters sont présentera deux glycoprotéines qui peuvent être détectées après traitement avec N - glicosidasa F. La bande de 38 kDa appartiennent à ZP3 sans chaînes N - unidas et de la bande supérieure de 48 kDa pourrait correspondre à Une nouvelle glycoprotéine qui n'avaient pas été décrites à ce jour, de ce fait, la ZP de hamster, à l'instar de la ZP homme et le rat peut comporter quatre glycoprotéines D. La bande de 56 kDa a été détectée avec l'anticorps purifié et séquencé par spectrométrie de masse permet de déterminer la présence de Deux des peptides correspondant aux acides aminés 334-344 (YQAHGVSQWPT) et 285-297 (VTPANQTPDELNK) appartenant à la séquence ci-dessus pour ZP3 de hamster. Avec ces données, nous avons été en mesure de démontrer la présence de ZP3 de hamster dans la bande de 56 kDa. 3. Basée sur trois lignées de cellules CHO, y compris les deux autres transfectées ligne et le contrôle parental, nous avons obtenu trois échantillons. 1) Un échantillon contenant ZP3 recombinantes sécrétées par les cellules CHO qui ont été transfectées avec un plasmide ZP3 humains. 2) Une autre montre ZP2 recombinantes sécrétées par les cellules CHO transfectées avec le plasmide de ZP2 humains. 3) Une troisième montre le surnageant sans autorisation parentale cellulaire CHO transfectar. Ces échantillons ont été caractérisés biochimiquement par électrophorèse et de l'ouest - tache. Caracterizamos la proportion de chaînes N - oligosacarídicas grâce à l'enzyme de traitement. Une fois la ZP2 et ZP3 sont caractérisées effectuer des essais d'induction de acrosomal réaction avec les deux glycoprotéines recombinantes. Le ZP3 recombinants sans chaînes N - glicosídicas a également été testé comme des inducteurs de la acrosomal réaction humaine dans le sperme. Données extraites le développement ci-après: A. - CHO cellules transfectées avec le plasmide de ZP3 humains ont été cultivées puis le surnageant collecté, diluimos et se concentrer. Cet échantillon contenant ZP3 humaine recombinante sécrétée a été marquée par des anticorps de lutte contre la ZPC de singe et de lutte contre l'anticorps ZP porc. Les anticorps spécifiquement reconnu une bande de 60 kDa dans la collecte d'échantillons de surnageant des cellules CHO transfectées avec le plasmide de ZP3 humains. Ce groupe a un poids moléculaire semblable à l'être humain lorsque la ZP ZP et ZP3 humaine recombinante ont été détectées avec des anticorps de lutte contre la ZP porc. Ne regardez pas réactivité dans le surnageant recueillies auprès des cellules CHO sans transfectar que nous avons utilisé comme contrôle. Avec ces données, nous concluons que la ZP3 recombinants exprimant cellules CHO a présenté un poids moléculaire d'environ 60 kDa suggérant que la protéine était fortement glycosylée depuis le poids moléculaire de la protéine ZP3 humaine sécrétée sans glicosilar est 36,39 kDa. Avec ces données, nous concluons que la ZP3 recombinaison de l'étude a un poids moléculaire semblable à ZP3 natif déjà exprimées par les autres groupes. Le ZP3 recombinants a été digéré avec l'enzyme N - glicosidasa F. La glycoprotéine sans chaînes N - oligosacarídica présenté une forte diminution de son poids moléculaire de 60 kDa à 38 kDa. Avec ce résultat, on peut conclure que la libération du joug N - unidas est l'élimination de la plupart des hydrates de carbone qui composent la molécule, et donc suggérer que la ZP3 être humain plus lourdement N - glicosilada que O - glicosilada. B. - CHO cellules transfectées avec le plasmide de ZP2 humains ont été cultivées puis le surnageant collecté, diluimos et se concentrer. Cet échantillon contenant ZP2 humaine recombinante sécrétée a été marquée par des anticorps antipersonnel ZP2 humain anticorps antipersonnel ZP porc. L'anticorps antipersonnel ZP2 humain reconnu spécifiquement deux bandes dont les poids moléculaire approximatif de 110 kDa ont été plus élevées et 90 kDa bas. L'anticorps ne reconnaît pas tout de protéines dans le surnageant de culture de cellules CHO transfectées sont pas. L'anticorps antipersonnel ZP porc affinité déposées par deux bandes de masse moléculaire d'environ 110 kDa et 90 kDa dans la fraction de cellules transfectées. On voit comment cette affinité anticorps présenté par un groupe d'environ 110 kDa poids dans la ZP humaine. Ces données suggèrent que les cellules CHO exprimant le ZP2 humaine recombinante à deux niveaux d'de glycosylation, un moins glycosylée de 90 kDa et l'autre de 110 kDa rapprocher de ZP2 humain natif. Les deux classes ZP2 exprimées sont glicosiladas depuis le poids moléculaire de protéines sécrétées sans glicosilaciones est 67,44 kDa. C. - Pour déterminer l'activité des glycoprotéines recombinantes obtenues effectuer des essais d'induction de acrosomal réaction avec du sperme humain. Les essais ont été effectués dans sept patients. Le ZP3 recombinante a montré la capacité à induire acrosomal réaction à 72,6% du sperme humain, soit légèrement inférieur au niveau affiché par l'induction ionóforo de calcium. Le ZP2 recombinantes et le surnageant recueillies auprès des cellules sans transfectar montraient des niveaux similaires à induction spontanée observés dans le sperme humain. Avec ces données, nous concluons que nous avons obtenu un ZP3 recombinantes biologiquement actives et donnent à penser que l'expression de la ZP3 humaine recombinante biologiquement actives dans les cellules CHO est un système très efficace d'obtenir une glycoprotéine recombínate avec les niveaux d'activité semblables à natif de l'. Bien que les mécanismes de glycosylation des cellules CHO est différent du système humain, nous suggérons que les cellules CHO ont la capacité de synthétiser la glycoprotéine ZP3 humaine recombinante séquence sucres nécessaires pour produire une glycoprotéine capables d'induire la acrosomal réaction humaine dans le sperme. Le ZP2 ne pas induire le acrosomal réaction dans le sperme humain probablement dû à son rôle de récepteur secondaire décrit ci-dessus. Avec la glycoprotéine recombinante ZP3 digéré avec l'enzyme N - glicosidasa F effectuer des essais acrosómica l'induction. Avec cette expérience, nous constatons que la proportion de spermatozoïdes reaccionados avec glycoprotéine et traités avec la glycoprotéine de contrôle non traitées étaient les mêmes. Ces données suggèrent que les chaînes de N - oligosacarídicas de la glycoprotéine recombinante ZP3 ne sont pas impliqués dans l'induction de acrosomal réaction humaine dans le sperme. Ces données montrent que chez l'homme, ZP3 et probablement sucres O - unidos être impliqués dans l'induction de acrosomal réaction comme cela a été décrit chez la souris.

Auteur: Peñalver Mellado Marcos.
Année: 2004.
Université: MURCIA.
Lieu de l'exposition: Facultad de Biología.
Lieu de préparation: Facultad de Biología.

Résumé: La protéine CarD de Myxococcus xanthus est un régulateur de la transcription. CarD participe à la régulation de carotenogénesis et le développement dans pluricellulaires M. Xanthus. En outre, CarD est nécessaire pour l'expression des gènes actifs durant la croissance végétative. La protéine CarD a deux domaines: le N-terminal est nécessaire à la fonction de la protéine, et le domaine C-terminal, qui contient une source de liant à l'ADN précédemment décrites seulement dans les organismes eucaryotes. Protéines HMGA sont nécessaires à la formation de différents complexes de multiproteicos impliqués dans différentes opérations sur l'ADN. L'action HMGA est médiatisée par les liant à l'ADN, entraînant des changements dans leur courbure endogène, et de son interaction avec diverses protéines. Le rôle de CarD dans la régulation de différents groupes de gènes dans M. Xanthus, et leur similarité structurelle et fonctionnelle avec HMGA, conduisant à la prédiction que CarD interagit avec différentes protéines M. Xanthus impliqués dans la régulation de gènes ou d'autres opérations sur l'ADN. Dans l'une des stratégies de recherche de protéines de M. Xanthus interaction avec CarD a utilisé deux fois le système hybride de la levure, pour analyser la possibilité d'interaction physique entre CarD et deux protéines régulatrices de la carotenogénesis, IfhA et CarQ, et d'effectuer le suivi d'un genoteca fusions traduccionales de Protéine proie à des sections de lecture ouverts obtenus au hasard. Plasmides pGMx1 et pGMx2 identifiés dans cette recherche sont porteurs d'un fragment d'ADN dont le produit interagit spécifiquement avec CarD. Le orf incomplète contenu pGMx1 ne semble pas vraiment identifier une protéine M. Xanthus. Le orf tronqué dans pGMx2 montre une grande similitude avec le domaine protéique citoplasmático en histidine kinases assurant la fonction de capteur de protéines dans les deux composants des systèmes de réglementation. L'interaction entre la protéine capteur et CarD se fait par voie N-terminal de ce dernier. Immédiatement en aval de la protéine senseur gène est un gène qui déterminerait une protéine régulation de la réponse. Il est à espérer que les deux gènes constituent une des deux composantes du système de réglementation, ce qui ne semble pas être liée à la réponse à la lumière ou jeûne. Il a été détecté interaction physique entre CarD et protéines régulatrices de la carotenogénesis IhfA et CarQ. Une autre stratégie pour trouver des protéines de M. Xanthus interaction avec CarD a été la suppression du gène lieu carD et le phénotype résultant de l'analyse des processus contrôlés par CarD. Les protéines codées dans orf4 participe, comme CarD, dans la régulation de carotenogénesis et développement multicellulaires, et non des protéines cryptée en orf2 et orf5. Pour son implication dans les carotenogénesis, orf4 rebaptisé carG. Gènes carD et carG partie de la même opéron. Le gène correspondant produits, CarD et CarG agi dans un esprit de coopération dans l'activation de plusieurs promoteurs analysés. La protéine CarG présenté dans son C-terminal fin deux sites de liaison potentiels pour le zinc. La première est une cause très conservées dans certains tributaires de la protéase du zinc, et l'autre est une section qui contient quatre cisteínas, situé juste en dessous de la première. La protéine CarG purifié de zinc se lie à un estequiometría CarG: Zn de 1:2. Cette union est susceptible d'impliquer les quatre cisteínas une part, et histidinas du moyen préservés de l'autre. CarG interagir physiquement avec CarD, par l'intermédiaire du N-terminal de CarD et peut-être le N-terminal de CarG. Cette interaction semble se produire avec un estequometría CarD: CarG de 2:1. La protéine CarG ne lie pas à l'ADN in vitro ou modifie considérablement l'affinité de CarD par l'ADN, mais qui conduit à un supercomplejo CarD - CarG ADN. In vivo, l'tant CarD comme CarG sont situés principalement dans le nucleoide les cellules de M. Xanthus. En l'absence de CarD, CarG s'est dissociée de la nucleoid 8, et qu'on 3d0 et confirme son incapacité à se réunir à l'ADN. Les données provenant de ces travaux et d'autres préalables permettent de proposer un modèle d'action pour le duo CarD - CarG où la fonction fourni par le module CarG serait d'interagir avec d'autres protéines, et de la réglementation facteurs sont des éléments spécifiques ou de la machinerie basale de transcription.

Auteur: Hussein Ahmed Khedr Samiha.
Année: 2004.
Université: MURCIA.
Lieu de l'exposition: Facultad de Biología.
Lieu de préparation: CEBAS (CSIC).

Résumé: Le transfert de cultures tiges micropropagadas Rosa multiflora var. Kordana la phase finale de la propagation d'une culture avec système de refroidissement de référence et double couche. Stimulée par son allongement et inhibé bourgeonnement axillaire Secundaria a. L' Tiges micropropagés formé plus tôt dans des conditions viables au milieu des racines croissant MS sans régulateurs de croissance. Le processus d'acclimatation des conditions ancien vittro de plantules mcropropagadas a une durée de 30 jours, à l'issue de laquelle les mêmes sont adaptées pour survivre aux conditions de la serre avec une survie de 90%. Au cours de l'acclimatation de plants ont été échantillonnés à 0. 2, 7, 15 et 30 jours. Au cours de la phase finale de l'acclimatation teneur en amidon dans les racines de jeunes plants a dépassé celui de saccharose comme le principal glucide, miestras que pendant la première partie de ce processus était la situation inverse, ce résultat avec l'évolution dans le temps de l'activité enzymatique sacarolíticas clairement Traduit le passage d'un métabolisme initialement mixotrófico jusqu'à une dernière autotrófico. Au cours de l'acclimatation, la structure de l'apex racine évolué d'une simple différenciation des espaces intercellulaires riche à la pointe d'une pleinement développé cofia (consistant ade, estatocitos différenciés), zone meristématica, épiderme, et endodermis le cortex que pudede adapter fonctionnellement du ecofisilogía substrat ancien Vitro,. Le acilmatación aux anciens vitro conduit à une réduction preogersiva les niveaux d'éthylène et pliaminas totale dans les racines de jeunes plants micropropagadas. L'évolution dans le temps des niveaux de nutriments dans les racines au cours de l'acclimatation reflète la pregresiva adaptation à la situation nutritionnelle de la nouvelle substrat. Les activités enzymatiques impliquées dans l'absorption des nutriments, des minéraux aussi presenteron un profil caractéristique liée à la nécessaire movilizacióny absorption de nutriments nécessaires à l'adaptation des techniques aux racines de condicones ecofisiológicas substrat vitro de l'ancien. Le début de l'acclimatation porte augmentation des niveaux de malondialdéhyde (indicateur de stress oxydatif), qui démontrent l'existence de ce type de stress qui se rétrécit à mesure qu'il progresse le processus d'acclimatation. C'est pourquoi les racines se déroule dans l'activation de l'enzyme antioxydant systèmes qui permettent le rétablissement de l'équilibre d'oxydoréduction nécessaires au bon développement et le fonctionnement du système racinaire des plantes acclimatés.

Auteur: LUCAS ALCARAZ DANIEL.
Année: 2004.
Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
Lieu de l'exposition: CIENTÍFICAS.
Lieu de préparation: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGÍA.

Résumé: 1. Génération de souris déficientes dans l'ADN polymérase m ADN polymérase mu- (Polm) est une ADN polymérase X appartenant à la famille des ADN polymérases. En raison de son expression dans les organes lymphoïdes secondaires, une identité avec transférase terminale (42%) et mutagènes, a été proposé comme l'un des agents de mutadores dans le processus de hipermutación somatique des gènes des immunoglobulines. Pour déterminer le rôle spécifique de Polm dans ce processus a été obtenu et secuenció ellocus génomiques polymérase ce modèle murin et générer KO. Souris déficientes en Polm sont viables et fertiles, sans apparente anomalie. 2. Polm est l'un des éléments du mécanisme hipermutación somatiques. Le processus d'analyse hipermutación somatiques chez les animaux déficients en Poim révélé que les cellules B sont capables de hipermutar et générer une réponse identique à celui des contrôles. Cependant, les cellules sont hipermutando (centroblastos) s'accumulent dans les organes lymphoïdes secondaires de la souris knock-out. Le processus d'analyse hipermutación montré une réduction du nombre de clones hautement muté (avec plus de 10 des mutations). Le hipermutación se produit pendant la réaction du centre germinatif, au cours de laquelle centroblasto souffre de multiples séries hipermutación jusqu'à ce qu'il acquiert suffisamment de mutations à accroître son affinité pour l'antigène et évasion gracieuse réaction. Nous proposons que la carence en Polm réduit le taux de hipermutación et centroblasto nécessite plus de tours de hipermutación d'échapper à la réaction du centre germinatif, ce qui explique l'accumulation de centroblastos. 3. Polm impliqués dans le système de réparation de l'ADN appelé NonHomologous Fin Participer Il a également proposé la participation de Polm dans le système de réparation des pauses doubles échoués denomínado Non Homologous End Joining. Le processus d'analyse hipermutación cellule somatique en ligne Ramos quand sobreexpresa dominante négative Polm, a révélé la présence de suppressions associés à ce processus, ainsi que l'instabilité chromosomique, preuve de l'implication de Polm dans mutagènes réparation des ruptures double brin dans l'ADN. 4. Mauvais Polm modifie hématopoïèse. L'analyse de la carence en Poi mu- dans la souris knock-out révélé un défaut tant dans le nombre et la capacité de prolifération des progéniteurs hématopoïétiques. Outre les parents déficients dans Polm sont très sensibles aux agents qui induisent double échoués pauses. Ces données suggèrent que Polm impliqués dans les mécanismes Non Homologous End Joining qui sont indispensables au maintien de progéniteurs hématopoïétiques. 5. Mauvais Polm augmentations de la longévité. Souris déficientes dans l'ADN polymérase mètres vivent plus longtemps que les animaux de contrôle, cette longévité est associée à un moindre apport calorique et d'une résistance aux dommages oxydatifs, suggérant que la carence en Polm confère une capacité à détoxifier ce type de blessure par des mécanismes pas encore définis.

Auteur: IBORRA MARTÍN SALVADOR.
Année: 2004.
Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
Lieu de l'exposition: DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA MOLECULAR.
Lieu de préparation: CENTRO DE BIOLOGÍA MOLECULAR SEVERO OCHOA. FACULTAD DE CIENCIAS..

Résumé: La leishmaniose est un ensemble de patologias touchant 12 millions de personnes et qui sont causés par le parasite protozoaire intracellulaire de genéro leishmanias. Il est prouvé que loshospedadores ce protozoaire peut développer une résistance et l'immunité acquise à la réinfection, bien qu'il n'existe pas encore de vaccin efficace contre cette maladie. Il a été demostardo que la résistance à l'infection par le leishmanias est fondée sur la génération d'une réponse immunitaire médiée par les lymphocytes T de type Th1 produisant essentiellement de gamma interféron cytokines qui induit l'activation de l'oxyde nitrique sinUisá Tnducible dans macrófago, qui provoque la génération de l'oxyde nitrique Et la destruction des parasites. Récemment, le développement des vaccins, a été fondé sur les techniques de l'ADN recombinant, qui permet d'exprimer les antigènes du parasite dans une forme définie qUe même formulaire peut être obtenu auprès de l'industrie. Les produits recombinants ainsi obtenus met en relief l'ADN des vaccins qui sont particulièrement efficace pour inciter les réponses Qe médiée par les cellules T de type Th1 et de la réponse immunitaire à médiation cellulaire CD8 +. L'objectif de cette thèse était la production de vaccins basés sur défini histones (H2A, H2B, H3 et H4) Et, dans la protéine ribosomique acide (RB, P2a et P2b) de leishmanias, deux familles de protéines antigéniques au cours de l'infection chez l'homme et Chiens. Une fois généré les vaccins, a parlé de sa inmunogenícidad sous la forme de souris. Génération réponses Th1 aborder ces antigènes a été réalisée grâce à la vaccination génétique ou de l'utilisation de oligodeoxinucleótidos contenant raison inmunoestimulador "CpG". Les résultats montrent que les réponses de type Th1 généré aborder ces antigènes peut être associée à des degrés divers de proteccíón chez la souris contre une infection par le g. Majar, les principaux agents étiologiques de la leishmaniose cutanée, dans l'ancien monde. Cette protection consiste en une baisse de la pathologie associée à l'infection ainsi que la charge parasitaire.

Auteur: JIMÉNEZ GÓMEZ JOSÉ MARÍA.
Année: 2004.
Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
Lieu de l'exposition: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGÍA.
Lieu de préparation: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGÍA.

Résumé: La transition fleur est une des plus importantes dans le processus de développement des plantes. Le calendrier de la transition vers la floraison est réglementée de se produire lorsque les conditions environnementales sont plus favorables pour la production de graines et fruits, et de coordonner le moment de la floraison des espèces à pollinisation croisée. En ce qui concerne les exigences de la durée du jour (photopériode) pour s'épanouir, les plantes peuvent être classées dans les plantes longue journée, journée des plantes à court et le jour neutre plantes. Long Day plantes sont celles qui fleurissent lors de la journée longueur est plus grande; courte plantes fleurissent lorsque la durée du jour l'est moins, et le jour neutre s'épanouir indépendamment de la photopériode. Les mécanismes moléculaires qui contrôlent le moment de la floraison a été étudiée dans la journée courte que le riz et les plantes Long Day comme Arabidopsis, nous avons constaté que bon nombre des gènes responsables du contrôle de la floraison temps sont communs aux deux modèles. D'autre part, elles n'ont pas été abondamment étudié les mécanismes moléculaires qui contrôlent le moment de la floraison des plantes dans la journée neutre, nous avons donc décidé d'utiliser la tomate dans ce but. Cette analysé 21 variétés appartenant à 8 des 9 espèces qui composent le genre Lycopersicon et analyser le nombre de feuilles jusqu'à la floraison (LN feuilles en nombre), le reflet de l'époque de la floraison. Cette étude a démontré qu'il existe des variantes entre LN espèces du genre Lycopersicon analysés, et aussi cette variation est également parmi les différentes variétés de chaque espèce. Pour analyser les déterminants génétiques de l'époque de la floraison dans les tomates ont été sélectionnés 2 variétés. Parmi les personnes présentant suffisamment analysé la variation de ce caractère. Ces variétés étaient Lycopersicon esculentum L777 (tomate cultivée, elle est aussi le genre de référence pour les études génétiques) et Lycopersícon chmielewskii CH6047 (espèce sauvage qui fleurit plus tard que L. esculentum). De ces deux variétés ont généré une population F2 séparant pour le moment de la floraison à laquelle mesuré à la fois la variable LN, comme le nombre de jours de la graine à la floraison (DTF pour les jours à la floraison). D'autre part, nous avons utilisé des marqueurs moléculaires de type CAPS, le SCAR, microsatellites et AFLP obtenus auprès d'autres laboratoires ou conçus par nous pour ces travaux pour construire une carte génétique des croisements de L. X L. esculentum ChmielewskiL. Utilisation de la mesure du temps de floraison de la population F2 et le lien plan, nous avons effectué une analyse de QTL permettant de localiser 6 QTLs affectant LN et variables expliquant conjointement 66,7% de l'écart constaté dans la population F2. Ces QTLs sont trouvés sur les chromosomes 1, 3, 4, 5, 7 et 8, avec les chromosomes 5 et 7 qui ont plus d'effet en LN. Plantes transportant des allèles L. Esculentum pour QTL des chromosomes 4, 5, 7, et 8 ont moins souvent nombre de feuilles jusqu'à la floraison par rapport à la mise en bière L. ChmielewskiL Toutefois, contrairement aux attentes des plantes portant des allèles L. Esculentum pour QTL des chromosomes 1 et 3 ont montré un plus grand nombre de feuilles, donc prospéré plus tard, les plantes avec des allèles L. ChmielewskiL Les QTLs sur le chromosome 1 et 8 de la bière de L. Esculentum étaient dominante sur le L. ChmielewskiL Comme pour la variable DTF, de l'analyse Détecté deux lieux QTL sur les chromosomes 5 et 12 derrière un 56,3% de l'écart constaté dans la population F2 pour ce caractère. Les plantes transportant de la bière L. Esculentum pour les deux lieux accéléré sa floraison à l'égard de la allèles de L. ChmielewskiL outre, dans les deux cas, la bière de L. Esculentum présenté domination de la part de L. ChmielewskiL Dans les régions où étaient Détectée QTLs affectant le temps de floraison est mapearon gènes qui pourraient être responsables des effets detetctados par ces QTLs. Comme un gène candidat pour QTL des chromosomes 3 et 5 sont proposés des lieux PHYB2, FA ET LeFLC appartenant à des familles qui ont présenté des variations naturelles de gènes dans Arabidopsis et de contrôle et de 8 l temps 1b8 floraison chez Arabidopsis et la tomate.

Auteur: PRIETO ALCEDO MANUEL.
Année: 2004.
Université: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE FARMACIA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE FARMACIA.

Résumé: La paroi cellulaire végétale est responsable delà de la cohérence du tissu génétique des plantes. La paroi de la cellule est composée de différentes molécules. Cela comprenait une série de microfibrilles de cellulose noyées dans une matrice de différents polysaccharides de formé (hemicelulosas et pectines) et glycoprotéines. Les pectines sont un groupe de complexes de polysaccharides, ont été retrouvés dans l'espace intercellulaire, dans le cadre du film, les médias, et, par conséquent, sont principalement responsables de la cohérence du tissu des plantes. L'une des enzymes de la loi sur les pectines sont poligalacturonasas, hidrolizanla molécules homogalacturonano, une composante de pectines. Le poligalacturonasas ont d'importantes applications industrielles, et qui sont utilisés pour la transformation des fruits pour la macération et la liquéfaction avant utilisation dans les procédés industriels. Ils sont également utilisés pour l'obtention des huiles essentielles et des caroténoïdes de la peau de l'agrume. Bien que son ou des éclaircissements est la plus répandue, l'addition de ces enzymes permet de réduire la viscosité et s'enivrent jus beaucoup moins de remplissage des filtres. L'industrie du vin emploient aussi, en ajoutant au début de la fermentation. Cette thèse a étudié un poligalacturonasa luzerne impliquées dans le processus de symbiose entre l'usine et Rhizobium, le gène MsPG3. Il clonó ce gène de l'expression dans les bactéries et levure Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe et Pichia pastoris. Dans tous les employés des agences détecté la production de certaines quantité d'enzyme, mais le montant est si petite que l'utilisation de ces lignées cellulaires transformées pour obtenir l'enzyme en grandes quantités n'est pas viable. Un autre des buts inscrits dans la thèse a été l'effet de l'étude delà surexpression du gène dans les plantes. Arabidopsis thaliana, a été utilisée parce qu'elle est la plante modèle pour l'étude génétique des plantes. À la suite de l'expression des gènes ont été observées dans les premières étapes de l'élaboration des feuilles de la plante gravement endommagés, ce qui confirme l'expression correcte du gène. Toutefois, dans les dernières étapes du développement des plantes transgéniques a un normale, en raison d'un mécanisme de l'usine de faire face à la surexpression du gène. Pour effectuer des coupes histologiques de la plante transgénique dégâts sur les feuilles a été observé une nette rupture avec d tissus de la feuille, qui soutient l'expression de lapoligalacturonasa est correct, et que, en agissant sur la paroi cellulaire causerait des dommages aux tissus végétaux. Grâce à PCR quantitative en temps réel a été déterminée au niveau de l'expression des gènes dans les plantes transgéniques, confirmant que le gène est exprimé correctement, avec un haut niveau d'expression. Mesures d'activité détecté des niveaux plus bas dans les plantes transgéniques en comparaison avec les plants de contrôle, ce contrairement aux attentes. La raison en était probablement due à l'action de petites molécules d'ARN interférant (siRNAs). En fin de compte les résultats dans les plantes confirmé la correxta expression des gènes MsPG3 et montré qu'il est un poligalacturonasa.

Auteur: MARTIN CASTRO FRANCISCO ANTONIO.
Année: 2004.
Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
Lieu de l'exposition: DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA MOLECULAR.
Lieu de préparation: CENTRO DE BIOLOGÍA MOLECULAR SO.

Résumé: Disques imaginales de Drosophila provenir que des groupes de 20-40 cellules de l'ectoderme embryonnaire (primordios imaginales). Pendant le développement larvaire et la croissance rapide du nombre de cellules est augmenté d'un millier de fois. Au cours de la métamorphose donner lieu à des structures cuticulares adultes (ailes, les pattes, les yeux.). Il est évident que l'activité de la via Dpp est nécessaire pour la croissance de l'aile disque. Cette thèse a analysé le rôle de la voie de signalisation Dpp dans la croissance de l'aile générant disque génotypes différents avec des niveaux différents de signalisation Dpp et d'examiner leurs effets sur la taille de l'aile. Le niveau de l'activation par corrélation avec la taille finale. Alors Dpp favorise la croissance dépendant de la concentration. En revanche, le gène brinker (brk) se comporte comme un répresseur de la croissance, et aussi un effet inhibiteur Non "dépend de la concentration. Étant donné que l'activité des Dp p supprime l'expression de brk, l'effet de Dpp croissante de la répression est médiatisée brk. Nous avons étudié certains aspects du mode d'action des brk apoptose et il existe un endroit où il ya une discontinuité dans son expression, mais son rôle principal en matière de croissance est de réduire le taux de division. Brk probablement supprime l'expression des gènes qui contrôlent la prolifération des cellules, comme bantam. En outre, il est l'expression ectopique de miRNA bantam qui est corrélée avec la perte d'expression de brk et taux plus élevé de la division.

Auteur: ARJONA MAYOR M. DOLORES.
Année: 2004.
Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE BIOLÓGICAS.
Lieu de préparation: FACULTAD CIENCIAS UAM..

Résumé: Tumeurs astrociticos forme, en dépit de progrès dans las1écnicas chirurgie, un problème non résolu. Les formes de plus haut degré de malignité ne dispose pas encore d'une meilleure survie de 9-12 mois. La compréhension moléculaire de 21teraciones que ces tumeurs apparaissent de manière séquentielle est indispensable de commencer un traitement de chimiothérapie ou radiothérapie, car ils ont trouvé des degrés divers de la réponse que ces changements. Dans notre série, nous avons inclus 86 tumeurs astrocíticos de distint0s classe malignité, de procéder à leur recherche perdu heterocigosidad, hypermethylation et mutations, ainsi que l'amplification et la surexpression géníca, les régions et les gènes impliqués dans la transformation maligne de ce type de tumeur. Les résultats de notre étude sont les suivantes: 1. Les pertes heterocigosidad d'armes chromosomiques 9p, 1Op et 10q sur l'é correspondent sensiblement avec un degré élevé de malignité de la tumeur astrocíticos, surtout dans la voie du développement glioblastomes "de nouveau". Pertes en 19q, cependant, seraient liées à la voie de l'évolution progressive tumora!. Moins importantes pertes semblent en 1p dans le développement des tumeurs astrociticos. 2. Des mutations dans le PTEN, et le gène EGFR l'amplification des événements sont liés LOH du chromosome 10, apparaissant plus tard, ces suppressions associés à une augmentation du degré de tumeur maligne. 3. Les mutations de TP53, l'amplification PDGFR - y des gènes situés dans la région 12q 13 sont impliqués dans l'apparition de formes de tumeur astrocíticas classe 11. 4. Le gène MDM2 semble être la cible d'amplification processus, dès le départ, la région 12q13 dans un sous-groupe de tumeurs qu'aucune amplification de MDM4 ou mutations dans TP53. Toutefois, l'amplification de CDK4, également situé dans cette région, serait associée à une augmentation du degré de malignidap de tumeurs via l'AII progressif à l'AA. 5. Les résultats de l'analyse du gène EGFR confirmer un rôle décisif dans le développement de gliomes astrocíticos. L'amplification de l'EGFR semble LOH connexes dans la région du chromosome 7p11, où est situé le gène, ainsi que la surexpression de mutants transcriptions. Ont été trouvés, en outre, six altérations de la séquence de pas précédemment décrits. 6. Le hypermethylation de CpG îles de la région promoteur de gènes p16ink4a, p14arf, MGMT et RB1 joue un rôle important dans le développement et la progression des tumeurs astrocíticos. 7. Le hypermethylation de la MGMT gène p16ink4a et sont associées à une augmentation du degré de malignité des tumeurs par progressif. 8. Le promoteur hypermethylation du gène RB1 est sensiblement plus élevé dans GBM2arios que GBM1 Aryens. 9. L'itinéraire RB1 est déréglementé principalement devant le chemin de TP53 dans notre série. En outre, les deux troubles semblent se produire à différents moments de la progression des tumeurs astrocíticos qu'il jouerait un rôle différent dans le processus, TP53 dans la genèse des formes de bas grade et RB1 dans la progression vers la forme agressive de haute malignité.

Auteur: CUESTA ROJO ISABEL.
Année: 2004.
Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
Lieu de l'exposition: INSTITUTO DE INVESTIGACIÓN BIOMEDICAS.
Lieu de préparation: INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOMEDICAS CSIC-UAM.

Résumé: L'organisation du matériel génétique dans le noyau est appelée chromatine et est une structure dynamique qui régit la création et le maintien de l'expression des gènes. Les membres de la famille des facteurs de transcription Forkhead régulent l'expression de gènes spécifiques aux tissus, qui sont essentiels à la différenciation et le développement. Le facteur Forkhead FoxA1 partie de la famille des facteurs techniques pionniers, qui sont en mesure de se joindre compacte structure de la chromatine au cours du développement et remodelarlas. Nous avons utilisé le modèle du gène de Tiroperoxidasa (TPO) pour l'étude du rôle des facteurs Forkhead au cours des processus de différenciation. FoxE1 est essentiel pour l'activation de l'expression des territoires palestiniens occupés en réponse aux hormones et c'est en raison de sa capacité à rejoindre le promoteur inactif et générer une structure ouverte stimuler les suivantes événements qui ont conduit à son discours. En utilisant le modèle pour la réglementation du gène albumine par FoxA1 nous avons étudié les mécanismes moléculaires de régulation de la chromatine, identification des régions de l'interaction du gène albumine par FoxA1 nous avons étudié les mécanismes moléculaires de régulation de la chromatine, identidicando régions interaction avec le nucleosoma. Cette fonctionnalité est conféré par un domaine liant à l'ADN forkhead et d'un domaine capable d'interagir avec la surface de nucleosoma inhibant la compaction de la chromatine fibres. Ces résultats établissent un nouveau mécanisme d'activation de gènes de facteurs de transcription, qui a lieu grâce à un domaine fonctionnel de la protéine identifiés dans la présente étude, nous appelons "Hélice d'ouverture." Ainsi, nous avons identifié et caractérisé le mécanisme moléculaire de l'ensemble Rôle des facteurs Forkhead comme facteurs Pionniers, qui sont en mesure de lancer l'ouverture de la chromatine phénomènes taire, nécessaires à l'activation des gènes au cours du développement et de différenciation.

Auteur: OCHANDO SÁNCHEZ ISABEL.
Année: 2004.
Université: MIGUEL HERNÁNDEZ DE ELCHE.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA.
Lieu de préparation: INSTITUTO DE BIOINGENIERIA UNIVERSIDAD MIGUEL HERÁNDEZ.

Résumé: Les organes côté de la polarité et plantes montrent asymétrie axe próximo - distale et abaxial - adaxial. Surgical expériences ont suggéré que l'apicale meristemo produit un signal nécessaire pour les cellules d'adopter la bonne destination de l'arbre abaxial adaxial -, et de récentes études génétiques ont conduit à la identificaicón plusieurs gènes qui sont exprimés dans le corps côté, et sont probablement impliqués dans L'interprétation des signaux émis par les meristemo apicale. Deux gène INCURVATA4 (ICU4) a présenté le phénotype incurvata caractéristique (feuilles végétatif courbés vers le faisceau). Ces caractéristiques peuvent être interprétées comme une transformation paracial des structures abaxiales dans adaxiales. L'effet de synergie entre les mutations icu4 - 1 et TVH - 1 (une mutation adaxializante) comprend, entre autres caractéristiques phénotypiques, une forte adaxialización de feuilles et de la transformation de la replum abaxial adaxial dans le placenta. Ces obervaciones appui de l'hypothèse que le produit ICU4 s'est rôle adaxializante. Nous trouve une mutation identique dans les deux allèles (icu4 - 1 et icu4 - 2) dans le gène Athb - 15 qui encode un facteur de transcription qui appartient à la famille des gènes HD - ZIP II. Dans cette famille appartiennent les autres gènes impliqués dans la création des axes adaxial - abaxial des organes latéral et central - periférico tige.

Auteur: VÁZQUEZ LÓPEZ M. ARACELI.
Année: 2004.
Université: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA.

Auteur: RUIBAL VILLASEÑOR CONTASTINO.
Année: 2004.
Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA MOLECULAR.
Lieu de préparation: MERCK, SHARP Y DOHME DE ESPAÑA S.A..

Auteur: DIAZ VALDEZ FARRAY NANCY.
Année: 2004.
Université: OVIEDO.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA.