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SCIENCES DE LA VIE, 6

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303 tesis en 16 páginas: 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16
  • CARACTÉRISATION DE NOUVELLES FONCTIONS DES GÈNES IMPLIQUÉS DANS LE DÉVELOPPEMENT DES FRUITS ET FRUITS D'ARABIDOPSIS THALIANA,
    Auteur: ALONSO CANTABRANA HUGO.
    Année: 2005.
    Université: MIGUEL HERNÁNDEZ DE ELCHE.
    Lieu de l'exposition: UNIVERSIDAD MIGUEL HERNANDEZ CAMPUS DE SAN JUAN.
    Lieu de préparation: UNIVERSIDAD MIGUEL HERNANDEZ.
    Résumé: Afin d'identifier de nouvelles fonctions des gènes impliqués dans le développement de gineceo chez Arabidopsis thaliana, sont deux des emplois indépendants. D'une part, un produit chimique sur la mutagenèse lignée cer6, permettant l'identification des mutants zeppelins (zpl). Les fruits de ces plantes sont plus courts et plus épais que ceux de la souche sauvage, apparemment due à un changement dans l'orientation de la croissance cellulaire. Il a caractérisé le phénotype de ces plantes, et en même temps a commencé l'étude de la génétique des interactions avec d'autres allèles mutants, comme fructueuse (regorgeant) et griffe crabes (crc). Elle a également lancé une étude transcriptómico cette mutante. La mutation zpl affectent la région 3 'non traduites gène At5g16220, fonction inconnue. En outre, nous avons étudié le rôle du gène ASYMMETRIC LEAVES1 (AS1) dans le développement de gineceo. Ce gène est impliqué dans la répression des gènes KNOX classe I latérale organes, mais, jusqu'à présent, n'avaient pas été décrit son rôle dans la formation des fruits. Il a caractérisé le phénotype des mutants fruits à l'aide de simples as1, ainsi que dans diverses combinaisons et d'une ligne mutante surexpression de KNAT1. Aussi, nous avons étudié l'expression de AS1, KNAT1, REPLUMLESS (RPL) et la FUL en gineceos sauvage et as1. Nos résultats indiquent que KNAT1 et AS1 impliqués dans la régionalisation de l'ovaire. KNAT1 confère identité replum et active l'expression de RPL, tandis que AS1 et d'autres produits qui sont exprimées dans le valva s'opposer à son rôle.
  • - RÈGLEMENT DE ESTRUCTURA DE LA FONCTION BÊTA CATENIN ET P120 - CATENINA: DEUX PROTÉINES ASSOCIÉES À L'MEMBRES DU SYNDICAT.
    Auteur: CASTAÑO CARDOSO JULIO.
    Année: 2005.
    Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
    Lieu de l'exposition: UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE BARCELONA.
    Lieu de préparation: UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE BARCELONA.
  • "LES EFFETS DU PÉTROLE SUR LA RÉPARTITION ET LA BIOMASSE DES CYANOBACTÉRIES DANS LES ÉCOSYSTÈMES NATURELS ET MAN-MADE
    Auteur: DIESTRA VILLANUEVA ELIA.
    Année: 2005.
    Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
    Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS 103.
    Lieu de préparation: UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE BARCELONA.
  • ÉTUDE DE LA NEUROTRANSMISSION DANS LE SPHINCTER œSOPHAGIEN INFÉRIEUR
    Auteur: Farré Martí Ricard.
    Année: 2005.
    Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
    Lieu de l'exposition: Facultad de Veterinaria.
    Lieu de préparation: Facultad de Veterinaria.
  • ETUDE MOLÉCULAIRE DU SYNDROME D'ALPORT
    Auteur: TAZÓN VEGA BÁRBARA YMAINE.
    Année: 2005.
    Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
    Lieu de l'exposition: FUNDACIÓ PUIGVERT.
    Lieu de préparation: UNIVERSITAT AUTÒNOMA DE BARCELONA.
    Résumé: Cette thèse est une contribution essentielle pour comprendre les bases moléculaires du syndrome d'Alport (SA), néphropathie héréditaire responsable de 1-2% des cas d'insuffisance rénale chronique terminale (IRCT), dans les pays occidentaux. La promesse inhérente à la génétique moléculaire, c'est que la révélation de ces mutations pourraient permettre d'établir des corrélations genotipo - fenotipo et expliquer la variabilité clinique de la maladie, ainsi qu'à fournir une base plus solide pour le conseil génétique et le pronostic de ces patients. Étant HS génétiquement hétérogène de maladies et avec différents schémas de succession, ont été traitées séparément ses diverses formes et avec des objectifs spécifiques et de nouvelles énoncées ci-après: Â enquêter sur les liens éventuels entre moléculaires du syndrome d'Alport autosomique récessive (SAAR) et de la famille Hématurie bénignes ( HFB). Â Organiser un dépistage mutacional en gène COL4A3 et COL4A4 chez les patients atteints de syndrome d'Alport lié au chromosome X (SALX) * Analyse du lien, dans la région Xq22 - q23. * Projection mutacional gène COL4A5. . Étudier la faisabilité de diagnostic génétique preimplantacional spécifiques du syndrome d'Alport lié au chromosome X (SALX). . Pour caractériser une famille syndrome d'Alport lié au chromosome X (SALX) présentant une transmission varión - varón delà maladie. Le premier chapitre, les résultats de cette étude apporte des précisions sur la controverse qui existait avant le début de cette étude sur la relation possible entre SH et HFB moléculaire, les maladies rénales, qui présente certains traits cliniquement identiques à celles de la phase initiale du SH ou titulaires de la SAAR. Ces deux maladie rénale qui présente certains traits cliniquement identiques à ceux de la génétique stade début au début de cette thèse, on croit intéressant identifier les défauts moléculaires chez les patients qui souffrent et tenter de comprendre les parallèles entre ces deux entités cliniques. Nous mutacionales deux études de gènes COL4A3 et COL4A4. Premièrement, dans 54 malades appartenant à 11 familles n'ont rien à HFB (Badenas et coll. J Am Soc Nephrol 2002) et par la suite, 71 patients de 14 familles avec SAAR et 2 avec HFB (Tazón - Vega B, et al. Am J Kidney Dis 2003). Le deuxième chapitre est consacré à la forme de SA liée à la chromosome X: SALX. Cette teipo SA est la plus courante et, par conséquent, le meilleur caractérisée. Toutefois, son diagnostic moléculaire n'a pas été bien établie au début de cette étude. Ce chapitre présente deux ouvrages ont été publiés et un troisième déjà publiés. Le premier est axé sur l'amélioration du diagnostic moléculaire SALX grâce à l'affinement de l'analyse deligamiento dans la région chromosomique Zq22 - q23 et le développement d'une méthodologie de recherche de mutations dans le gène COL4A5 cause de la maladie. Cela permet à l'avance dans le diagnostic moléculaire de la SALX auparavant basée uniquement sur l'analyse des liens, exteniéndolo les cas dans lesquels cette technique n'est pas applicable: des cas sporadiques de la maladie et les cas où les familles sont disponibles sur un petit nombre d'individus. Cette technique est la première méthode à la fois simple, rapide et efficace pour l'étude directe moléculaire de ce syndrome de l'ARN. Cela permet de déterminer l'effet que casuan mutations dans le traitement des ARNm COL4A5. La technique utilisée repose sur une analyse de l'ensemble de la région codante du gène COL4A5, qui à son tour permet de déterminer l'effet que casua mutation dans le traitement des ARNm de ce gène. Le deuxième chapitre de ce travail est l'élaboration de diagnostic génétique preimplantacional spécifiques SALX et indpendiente sexe de l'embryon. Enfin, au cours de ce travail a été marqué le premier cas de simultanéité SH et le syndrome de Klinefelter dans une famille qui avait une transmission varón - varó 8 Pas HS 1275 liée à la chromosome X (Ars et coll. Eur J Hum Genet 2005) . Les conclusions de cette étude sont les suivants: 1 .- Les HFB est casuada par des mutations dans les gènes CIL4A3 et COL4A4, qui sont également responsables de la DTA. Nous avons identifié 8 des mutations qui n'était pas connu auparavant dans ces gènes de collagène de type IV dans les familles avec HFB, avec le gène COL4A3 la première des mutations décrites dans cette maladie. 2 .- Il a mené à bien la troisième pleine de dépistage, tel qu'il est décrit jusqu'ici, le gène COL4A3 et COL4A3 dans les familles avec DDA, qui a identifié 9 nouvelles mutations responsables de la pathogenèse de cette maladie. Cette étude confirme que le type de missense des mutations qui affectent la glycine résidus sont le plus souvent considérée dans ces gènes. 3 .- Il a été démontré dans 5 des familles étudiées, le HFB et état deportador la DTA pourrait être considéré comme une seule maladie, parce que ces malades partagent le même défaut moléculaire du gène COL4A3 et COL4A4 et de son évolution clinique revient. 4 .- Le HFB, le transporteur et le statut SAAR SAAD, considéré jusqu'alors distinctes entités cliniques sont tous provoqués par une seule mutation du gène COL4A3 ou CIL4A4. Par conséquent, ils peuvent aller dans le terme "Nefropatía collagène de type IV (chaînes a3/a4)" entraînant un spectre allant de phénotypiques microhematuria isolés jusqu'à ce que le CIRT. 5 .- La technique SSCP / A appliqués à l'analyse génétique des gènes cIL4A3 et COL4A4 a démontré une sensibilité de 62%, de sorte qu'il peut être considéré comme approprié pour l'étude de ces gènes. 6 .- Il a permis d'améliorer le diagnostic indirecte SALX avec l'utilisation de marqueurs microsatellites qui définissent une région de 1.13-1.23 Mb environ gène COL4A5. Cela a diminué la possibilité d'une recombinaison entre des marqueurs génétiques et extrémités d'un 6% à 1,2%, ce qui réduit grandement la possibilité d'erreurs de diagnostic. 7 .- Il a mis au point une méthode simple et rapide de trouver des mutations du gène COL4A5, qui provoque SALX basé sur la projection de sa région de codage. Cette technique a une haute efficacité de la détection de mutations (76%). En conséquence, il est une méthodologie qui permet d'diagnostic de ce syndrome et elle est applicable à l'étude de cas sporadiques ou des petites familles. 8 .- 41% des patients avec SALX à laquelle il a identifié la mutation montrer modifications dans le cadre normal épissage de l'ARNm COL4A5. Sur un total de 22 des mutations identifiées dans le gène COL4A5, 5 d'entre eux (23%) n'étaient pas aussi l'annonce des mutations desplicing avoir fait une projection d'fondées sur la génétique gDNA. 9 .- Le diagnostic génétique preimplantado spécifiques SALX est faisable analyse de liaison en utilisant une seule cellule marqueurs DXS1120, COL4A5 - 2B6 et DXS456 flanqueantes gène COL4A5. 10 .- Il a décrit le premier cas de simultanéité SH et le syndrome de Klinefelter, démontrant que, dans une famille avec SA transmission de varón - varón de la maladie n'est pas toujours en raison d'un mode de transmission autosóico mais peut aussi être causée par Mutations dans le gène CIL4A5. 11 .- Il a été exclu du schéma de l'inactivation du chromosome X, de détection qui est aléatoire, comme la cause de graves phénotype SA mâle qui présente l'apparition de cette maladie et le syndrome de Klinefelter. Il a identifié un préférentiel expression d'un transcrit aberrante épissage chez ce type de patients (50%) par rapport à celle de sa grand-mère transporteur (8%). Ce résultat pourrait expliquer pourquoi les manifestations de la SA dans le patient avec un caryotype 47. XXY sont plus semblables à ceux d'un homme avec SALX côtés d'une femme portant. Enfin, dans l'annexe à la thèse présente trois nouveaux emplois également publiés au cours de ces travaux: Bol et al. Néphrologie 2003; Prague et al. Néphrologie 2003, et Torra ycols. Nephrol Dial Translant 2004.
  • L'OBTENTION ET LA CARACTÉRISATION FONCTIONNELLE DU GÈNE FRATAXINE HOMOLOGUES (FH) DANS DROSOPHILE
    Auteur: Navarro Langa Juan Antonio.
    Année: 2005.
    Université: VALENCIA.
    Lieu de l'exposition: Facultat de Química.
    Lieu de préparation: Departamento de Genética.
    Résumé: L'ataxie de Friedreich est une maladie humaine neurodégénérative autosomique récessive et de l'héritage. Elle est la plus courante ataxie héréditaire dans la population caucasienne. La maladie est causée par une carence de la protéine frataxina. Les clefs sur le rôle de frataxina proviennent de différentes études réalisées dans plusieurs organismes modèles. Nous avons isolé les gènes ortólogos dans un grand nombre d'organismes de bactéries à des souris et aussi chez les plantes. Drosophila s'est avéré être un excellent modèle pour étudier les maladies humaines parce que de nombreux processus biologiques sont conservés entre les mouches et les humains, telles que la formation et la dégénérescence du système nerveux, la génération et la fonction du cœur, le métabolisme mitochondriale, etcâ | Cet article a Approché l'étude de la fonction génique en D. fh Melanogaster utilisant trois des nombreuses stratégies à cet organisme orienté phénotypes mutants: mobilisation éléments transponibles P, le système ARNi et surexpression. Avec des expériences de mutagenèse insercional n'a pas obtenu les résultats escomptés parce que le gène est un gène fh petits situés dans une région riche en gènes et flanqué de deux, voire trois points chauds d'insertion. Il a ensuite pris un second rapprochement consistant en l'utilisation du système UAS - GAL4 pour le développement d'expériences et d'ingérence excessive. Immixtions ou de la surexpression du gène dans les tissus cibles fh chez les patients et dans le développement embryonnaire de la drosophile, de provoquer l'apparition de morts, de toute altération ou phénotypiques modifier certains comportements. Les défauts étaient concentrés par une partie dans le SNP, à la fois dans les neurones et les axones du volet sensoriel, comme dans axones composant du moteur (dans ce cas, les neurones moteurs ne semblent pas concernés). D'autre part, il ya eu des changements majeurs dans plusieurs de ces instruments dérivés mesodermo embryonnaire, comme somatiques et les cellules musculaires cardiaques et pericardiacas. Tous ces défauts conduisent à l'apparition de 100% de létalité avant l'avènement de l'adulte ou d'une diminution de la survie et de l'escalade dans les cas vous obtenez progéniture. L'ingérence et surexpression dans le muscle sont révélés efficaces que si le changement se produit dans les premières phases de développement des structures concernées. Pour sa part, le SNP ne se sont produits lorsque des changements ont touché conjointe précurseurs sensoriel ou simplement différenciées neurones sensoriels impliqués dans la formation des organes sensoriels dans l'embryon et l'adulte. Mais apparemment, le rôle de fh n'est pas aussi important dans tous les organes sensoriels, et que le fait de changer son expression dans les organes cordotonales pas produit de changement significatif. Tous les résultats décrits permis d'établir un modèle, dans D. Melanogaster, pour l'étude de l'ataxie de Friedreich.
  • ÉVALUATION DE RISQUE GÉNÉTIQUE CHEZ LES PATIENTS ATTEINTS D'OLIGOASTENOZOOSPERMIA DANS UN PROGRAMME MICROINYECCION INTRACITOPLASMATICA
    Auteur: ARAN CORBELLA BEGOÑA.
    Année: 2005.
    Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
    Lieu de l'exposition: INSTITUT UNIVERSITARI DEXEUS.
    Lieu de préparation: SERVICIO MEDICINA DE LA REPRODUCCION. INSTITUT UNIVERSITARI DEXEUS.
  • CONTRÔLE DE L'APPLICATION ET L'IMPACT DES ÉLÉMENTS DE GÉNOMES TRANSPONIBLES USINE ANALYSE RETROTRANSPOSÓN TNT1 DE TABAC ET D'ACARIENS ÉMIGRANT DU ARABIDOPSIS
    Auteur: SANTIAGO GONZALVO NÉSTOR.
    Année: 2005.
    Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
    Lieu de l'exposition: INST.DE BIOL. MOL. DE BARCELONA (CSIC).
    Lieu de préparation: INST. DE BIOL. MOL. DE BARCELONA (CSIC).
    Résumé: Le travail présenté dans cette thèse porte sur l'étude de l'impact des éléments transponibles sur les gènes et les génomes des plantes et les mécanismes de contrôle de la transposition de ces génomes. Cette question a été abordée d'une part, la dynamique qui a suivi la famille émigrant de MITEs dans le génome d'Arabidopsis. Et, d'autre part, il se penche sur le contrôle de la transcription retrotransposón Tnt1 du tabac. 1. ÉTUDE D'IMPACT DES ELEMENTS TRANSPONIBLES SUR GENOMAS PLANTES: Analyse de la famille émigrant de MITEs Arabidopsis thaliana,. Le MITEs sont de petits ADN les transposons sans codage capacité, présent dans un grand nombre de copies de la plupart des génomes. Elle postule que sont mobilisées par les autonomes liés éléments présents dans le même génome. Le premier groupe de MITEs décrites dans la famille a été Arabidopsis Emigrant (Casacuberta et coll., 1998). L'objectif de notre étude est de comprendre la dynamique de ces éléments et leurs effets sur l'évolution des gènes et le génome d'Arabidopsis. A conçu un programme informatique pour identifier les copies de tous les émigrants éléments contenus dans le génome d'Arabidopsis. Afin de trouver le nombre maximum d'éléments d'immigration, la recherche était basée sur le terminal répète (TIRs) conserves qui définissent cette famille de MITEs. De cette manière, peuvent être trouvés sous-familles représentées par un petit nombre d'exemplaires ou des copies de ces anciens, et donc plus divergentes. Ont également mis au point d'autres outils logiciels qui ont permis l'évolution et l'analyse phylogénétique de ces éléments. À leur tour, en utilisant les techniques moléculaires a été étudié le polymorphisme de ces MITEs entre les différents écotypes d'Arabidopsis. Grâce à ces tests ont identifié 151 exemplaires Emigrant répartis dans le génome d'Arabidopsis. La plupart d'entre eux peuvent être regroupés en trois familles, dont chacune peut être subdivisé à son tour sous-familles variabilité différente. L'analyse de ces sous-familles a révélé que, bien que les exemplaires les plus récents sont situés loin de séquences de gènes, ceux âgés apparaissent fréquemment associés à des gènes. Cela donne à penser que les éléments émigrants ont été en mesure de jouer un rôle important dans l'évolution des gènes d'Arabidopsis. Par ailleurs l'existence de ces polymorphismes de l'intégration entre les transposons différents écotypes d'Arabidopsis indique l'existence d'une récente mobilisation de ces éléments. 2. ETUDE DE CONTRÔLE TRANSPOSITION: Analyse du contrôle de l'expression de retrotransposón Tnt1 du tabac. Tnt1 a été le premier retrotransposón plantes actifs décrits (Grandbastien et coll., 1989). Elle est présente dans des centaines d'exemplaires dans le génome de tabac et elle est exprimée dans certaines conditions de stress (Casacuberta et Grandbastien, 1993; Mhiri et coll., 1997). En outre, gène silencieux semble être le principal mécanisme par lequel les différentes agences de contrôle de la prolifération des étranges éléments transponibles et les séquences de leurs génomes (Hammond et coll., 2001; Rudenko et coll., 2003). Le travail présenté dans ce rapport examine le contrôle de l'expression de retrotransposón Tnt1 à la fin de la transcription et la polyadénylation des ARNm niveau et la formation de la chromatine, en étudiant les changements dans le silencieux de Tnt1 des conditions de stress. Nous analysons l'existence et de la variation des intermédiaires silencieux, comme siRNAs et de la modification de la chromatine. Dans ce travail, nous avons conçu des stratégies diverses pour induire transcriptionnelle silencieux d'expression du transgène, qui est promu promoteur 35S du CaMV. Nos résultats indiquent que, en termes de stress assouplit les silencieux d'retrotransposón Tnt1 sans être commises dans d'autres transgène silencieux étudiés. Pour cette raison, il a été décidé moléculaire caractérisé le musellement des Tnt1. Nous avons identifié des siRNAs que l'on peut médiation répression de Tnt1 feuilles de tabac, cu 8 ando est 4d7 et la preuve n'a pas été transcrite séquences et leurs promoteurs sont associés à la chromatine inactifs. En outre, aussi longtemps que de savoir Tnt1 dépasse son silence et exprimé dans des situations stressantes, il a analysé l'influence de la région U3 de la LTRs de cette retrotransposón (où sont situés les promoteurs de leur transcription) ce processus. Ces résultats suggèrent que la région U3 n'est pas suffisante pour surmonter les silencieux de Tnt1 et peut-être d'autres séquences de la lettre ou des facteurs structurels sont ceux qui autorisent l'expression de retrotransposón.
  • CARACTÉRISATION PAR TELEDETACCIÓN DE FUNCIONALMIENTO DES ÉCOSYSTÈMES IBÉRIQUE. BASE POUR LA CONSERVATION DE LA BIODIVERSITÉ DANS UN SCÉNARIO DE CHANGEMENT GLOBAL.
    Auteur: ALCARAZ SEGURA DOMINGO.
    Année: 2005.
    Université: ALMERÍA.
    Lieu de l'exposition: DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA VEGETAL Y ECOLOGÍA, UNIVERSIDAD DE ALMERÍA.
    Lieu de préparation: UNIVERSIDAD DE ALMERÍA.
    Résumé: Le changement global affectera un rôle important pour la biodiversité et les services écosystémiques. L'utilisation des attributs fonctionnels de l'écosystème à l'échelle régionale dans l'évaluation de l'impact de ces changements est avantageuse en termes de la connexion locale et globale études et coûteux de mettre en place des programmes de surveillance. Toutefois, il existe de nombreux emplois à l'échelon régional l'évaluation des effets du changement planétaire sur le fonctionnement de l'écosystème de la péninsule ibérique ou fournir une situation de référence par rapport à comparer les effets de l'utilisation des terres et les changements climatiques et atmosphériques sur les écosystèmes. Dans cette thèse documenté les modes spatiale et temporelle de la fraction du rayonnement photosynthétiquement actif (fPAR) interceptée par la végétation présente dans la péninsule ibérique, ainsi que l'évolution dans le même pour les écosystèmes protégés en vertu de la National Parks réseau espagnol. Il aborde également la climatisation et l'utilisation du sol sous-jacent derrière les modes trouvé. A cet effet, a été utilisé comme une mesure de l'exploitation intégrée des écosystèmes une estimation de fPAR et, par conséquent, la productivité primaire nette: Vert Standard (NDVI) obtenus à partir des images NOAA / A VHRR entre 1982 et 1999. Nous avons utilisé les attributs fonctionnels suivant des courbes saisonnières de cet indice: l'variabilité intraanual ou un parent gamme, valeurs maximum et minimum de NDVI, l'ère dans laquelle ces valeurs sont atteints, et de la variabilité interannuelle de tous. Nous avons identifié les types fonctionnelle des écosystèmes en début recueillies auprès de qui résume l'hétérogénéité spatiale de fPAR sur la péninsule et dont les modèles indiquent que le changement d'utilisation des terres à l'échelle régionale les cycles du carbone. Les précipitations, la température, la végétation potentiel et le type d'emploi pour lequel elle remplace, contrôlée par l'ampleur et la direction des différences dans la dynamique du NDVI. La caractérisation des attributs fonctionnels dans les espaces naturels, protégés et semi-arides Espagne a révélé que les différents contrôles déterminer la dynamique de l'environnement le long des gradients de NDVI entre la région méditerranéenne et Eurosiberiana. L'analyse sur les parcs nationaux a montré quelques trous dans le réseau et a permis de différencier les types de parcs qui représentent le fonctionnement des écosystèmes uniques dans le contexte ibérique tros ces paysages, qui sont représentatives du fonctionnement d'une grande partie de la végétation ibérique. En outre, nos résultats ont révélé comment l'espagnol parcs nationaux, zones avec des niveaux de protection élevés, ont tendance à accroître la productivité et réduire l'écart entre les saisons de croissance et de repos à court terme. Globalement, cette thèse propose une caractérisation de base par rapport à évaluer les effets du changement planétaire sur le fonctionnement des écosystèmes et de l'ibérique qui incorporent des aspects fonctionnels des écosystèmes de la politique de conservation de la nature et de l'entretien des Services de l'écosystème, en particulier ceux liés à la fixation du carbone.
  • GLUTARREDOXINA 2 MITOCHONDRIALE I CYTOSOLIQUE DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE,: IMPORTANCE BIOLOGIQUE ET LE MÉCANISME DE RÉPARTITION SUBCELLULAIRE.
    Auteur: PORRAS MILLAN PABLO.
    Année: 2005.
    Université: CÓRDOBA.
    Lieu de l'exposition: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Lieu de préparation: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Résumé: Le glutarredoxinas (Grxs) sont des petites protéines (10-12 kDa) qui catalysent les réactions oxidorredución des groupes thiols des protéines et d'autres biomolécules, de s'acquitter de diverses fonctions (entretien des homeostaiss oxydoréduction cellule catalyse de réactions glutationilación - desglutationilación protéines). Ces processus sont particulièrement importants dans le comportement de la cellule mitochondriale eucariota, qui produit la majorité des espèces réactives de l'oxygène (EROs). Dans cette thèse a été étudié glutarredoxina 2 (Grx2p) de la levure Saccharomyces cerevisiae. Nous avons trouvé une nouvelle activité pour Grx dont il peut catalyser la réduction de la glutathion par lipoamida réduit composé est situé juste à l'intérieur des mitochondries. Le Grx2p S. cerevisiae avérée particulièrement efficace dans ce processus, par rapport aux autres glutarredoxinas, signalant une éventuelle signification physiologique reste à déterminer. Il a également été trouvé plusieurs isoformes de Grx2p, qui sont répartis entre le cytosol, le réticulum endoplasmique et la membrane externe et la matrice mitochondriale, tous de la gène grx2, entraînant deux produits fde traduction différenciées par la présence ou non d'un presecuencia du signal À mitocondría et réticule endoplásmatico. Par des techniques de mutagenèse dirigée et d'importantes études in vivo et in vitro de Grx2p et de ses formes mutantes, il a été déterminé qu'un phénomène de la double nature (balayage imperfecto - traslocación inefficace), n'a pas été décrite à ce jour, est responsable de la situation exceptionnelle subcellulaire Distribution des produits du gène grx2 dans S. cerevisiae. Il ouvre donc un intéressant champ de recherche pour l'avenir dans lequel il est déterminé quel rôle les fonctions physiologiques ou justifier le choix de l'évolution de ce mécanisme complexe, qui étend le champ d'action de la Grx2p plusieurs subcellulaire localisations.
  • EFFETS HOMONAES SUR LA VIABILITÉ ET LE MÉTABOLISME DE L'CARDIOMIOCITOS: HOSMONA CROISSANCE ET ADIPONECTINA.
    Auteur: PIÑEIRO CID ROBERTO.
    Année: 2005.
    Université: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA, UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE COMPMOSTELA.
    Lieu de préparation: HOSPITAL CLÍNICO UNIVERSITARIO DE SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Résumé: L'hormone de croissance (GH) et adiponectina hormones sont intimement liées à la fonction cardiovasculaire. Cette relation est démontrée par le fait que les modifications dans la sécrétion de deux à la fois, sont associés au développement des complications cardiovasculaires. Pour cette raison, cette thèse a porté sur l'étude des effets des hormones sur les deux aspects de la biologie des cardiomiocitos tels que la viabilité et le métabolisme. GH exerce des effets bénéfiques sur le coeur, et c'est aussi un régulateur de la mort par apoptose dans différents modèles cellulaires. Pour ces raisons, le travail a essayé d'explorer un éventuel rôle de réglementation de GH sur l'apoptose dans cardiomiocitos. Deux modèles ont été utilisés cellule cardiomiocitos, la principale culture de la cardiomiocitos néonatal de rat (COP), et la ligne de la souris HL - 1. Les résultats ont montré l'expression de l'ARNm du récepteur GH dans cardiomiocitos et que l'hormone a été en mesure de l'activer grâce à la phosphorylation ainsi que des protéines JAK2 et STAT5. Le traitement par GH exercé un effet protecteur sur cardiomiocitos rapport à l'apoptose induite par la privation de sérum (COP), soit par un traitement par cytostatiques AraC (HL - 1). Cet effet antipersonnel apoptótico de l'hormone est directe, et non grâce à la médiation de l'action de l'IGF - 1, parce qu'il n'a pas modifié le niveau des ARNm et de protéine IGF - 1 après un traitement à l'hormone de croissance, ou de la présence d'un anticorps antipersonnel IGF -1 Inversée action protectrice de GH. L'analyse de cet effet a montré que les protéines phosphatases calcineurine joue un rôle de médiateur des actions de lutte contre la apoptóticas de GH en cardiomiocitos, car la combinaison de deux inhibiteurs spécifiques de la présente inversée pour effet de GH. On a également trouvé que le traitement avec AraC inducia l'activation de la p38 MAPK, de faits qui a été partiellement empêché par l'hormone de croissance. Ces résultats suggèrent que la GH exerce un effet protecteur contre l'apoptose des cardiomiocitos un lien direct et non médié par IGF - 1, et que cet effet est médié par l'action de la calcineurine. Le adiponectina est un adipocitoquina produite en abondance par adipocitos et l'on pense qu'il joue un rôle décisif dans la relation entre l'obésité, la résistance à l'insuline et le risque cardiovasculaire. Ce travail a enquêté sur la synthèse et la sécrétion de adiponectina par cardiomiocitos, ainsi que des possibilités fonctionnelles effets sur le métabolisme de la même chose. Les téléphones mobiles ont été utilisés comme les deux modèles mentionnés ci-dessus, et la principale culture de la cardiomiocitos adultes humains. L'analyse de l'expression des gènes a montré l'expression d'ARNm adiponectina par cardiomiocitos. De même, nous avons établi que l'expression des ARNm des deux récepteurs adiponectina, AdipoR1 et AdipoR2. L'utilisation d'anticorps spécifiques révélé adiponectina de la synthèse protéique et de deux récepteurs, et également de déterminer la sécrétion adiponectina le milieu de culture par le cardiomiocitos. S'adressant cardiomiocitos rat et HL - 1 avec adiponectina stimuler l'absorption du glucose basale et induite par l'insuline déjà. L'hormone a également été en mesure d'activer la phosphorylation de la kinase par l'AMP ou AMPK, qui pourrait être l'effet de médiation de adiponectina sur l'absorption de glucose, tel que déterminé au moyen d'un inhibiteur spécifique de ce (araA). Le traitement par adiponectina également stimulé l'absorption des acides gras libres dans cardiomiocitos HL - 1, mais n'a pas eu d'effet sur l'apoptose induite serodeprivación ou sur la prolifération des basale cardiomiocitos rat et HL - 1, respectivement. En outre, il a été montré que adiponectina a réussi à encourager l'accumulation de nitrites dans le milieu de culture par cardiomiocitos rat -ef 8 ecto-enzyme montré que 505 ont été grâce à la médiation de l'oxyde nitrique synthétase inductible (iNOS) ou NOStipo 11. La présence de l'inhibiteur de iNOS aminoguanidina, entravent l'action des adiponectina sur l'accumulation de nitrites. L'action de stimulation de iNOS sur adiponectina également constaté au niveau de la protéine, avec une induction de l'expression de la synthétase. Ces résultats montrent que cardiomiocitos exprimé, de synthétiser et de sécréter adiponectina, et que cette hormone présente fonctionnelle effets sur le métabolisme des cardiomiocitos.
  • INTERFÉRENCES ENTRE LES VOIES DE SIGNALISATION QUE LA MÉDIATION DANS LA SURVIE ET LA PROLIFÉRATION DES KÉRATINOCYTES: INCIDENCES ÉPIDERMIQUE CANCÉROGÉNÈSE.
    Auteur: LEIS MARTINEZ HUGO.
    Année: 2005.
    Université: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Lieu de l'exposition: FACULTAD DE VETERINARIA LUGO.
    Lieu de préparation: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Résumé: NF - kappaB, P13K1Akt ET MO essentiel molécules sont impliquées dans une commune et coordonnée, dans le contrôle des divers aspects de l'homéostasie des kératinocytes, notamment la résistance à l'apoptose, la prolifération et la différenciation épidermique ainsi que les processus inflammatoires cutanés. Le complexe IKK est un point central dans la régulation de l'activité NF-kB et de nombreux signaux convergent sur lui. La sous-unité réglementaire IKKgamma est essentiel de la fonction de IKK complexe et son absence totale ou partielle de la fonction corrélation avec divers humaines patologias qui sont caractérisés par des défauts dans un ou plusieurs épithéliums primaires. Dans cet article, nous avons abordé l'étude fonctionnelle de IKKg dans les kératinocytes dans la culture et dans la peau in vivo de la souris, en utilisant les mutants delección IKKg - DN97, qui agit comme un dominant négatif rôle de NF-kB. IKKg - DN97 entraîne la dissociation du complexe, résultant en une inhibition et partiellement tributaire des doses de inductible NF-kB activité. En outre produire des altérations morphologiques et l'accroissement de l'apoptose des kératinocytes sans stimulant, le blocage de la dégradation IkappaBalpha et le traçage nucléaire p65 niveaux croissants de PTEN et de la réduction de la phosphorylation de Akt. Nous avons généré des souris transgéniques exprimant IKKg - DN97 dans les kératinocytes de l'épiderme et renforce les autres épithéliums stratifiés (K5 - IKKg - DN97), qui montrent les changements dans le follicule morphogenèse et cutanées réponse inflammatoire. Par approximations de la tumorigenèse, in vivo, nous avons montré que Akt contribue à la progression tumorale des kératinocytes grâce à l'inhibition partielle de GSK3beta, permettant le traçage nucléaire CycD1 par le biais de divers mécanismes qui augmentent l'expression et la stabilité de la ciclina. Nous avons également montré que certaines des anti-tumorale effets de GCs au cours de la carcinogenèse épidermique sont médiatisées par l'interaction du GR avec PI3K/Akl. Cette interaction conduit à une diminution de l'activité PI3K/Akt, IKK activité et l'activité de NF-kB liant à l'ADN dus au moins en partie à une diminution des niveaux de IKKg.
  • RÔLE DU GÈNE ATFXG1 DANS LE MÉTABOLISME XILOGLUCANO
    Auteur: ABELENDA VILA JOSÉ ANTONIO.
    Année: 2005.
    Université: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Lieu de l'exposition: FACULTAD DE BIOLOXÍA.
    Lieu de préparation: FACULTADE DE BIOLOXÍA.
  • INTERACTIONS NEURO-ENDOCRINES DANS LE PROCESSUS INFLAMMATOIRES ARTICULAIRES. EFFET DE LA LEPTINE S'ÉLÈVE NOUS LE TYPE II DANS LES CHONDROCYTES.
    Auteur: OTERO ADRÁN MIGUEL.
    Année: 2005.
    Université: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA. UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Lieu de préparation: HOSPITAL CLÍNICO UNIVERSITARIO DE SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Résumé: La leptine, une hormone 16KDa découvert en l'an 1994, est capable d'unir le homéostasie énergétique et le système immunitaire par l'intégration de divers facteurs orexigénicos et anorexigénicos bien que par son action directe sur le thymus et la sécrétion des cytokines. La leptine est synthétisée principalement par le tissu adipeux, ce qui appartiennent au grand groupe de adipocitoquinas. Structurellement, la leptine appartient à la famille des cytokines interleukine (IL) -6. Les niveaux de leptine circulants maintenir une relation directe avec la masse de graisse corporelle. La première fonction de laleptina a été décrit leur action comme adipostatina: agissant à l'échelon central, la leptine augmente les dépenses d'énergie et à minimiser l'apport énergétique optimal afin de maintenir l'équilibre et une bonne quantité de corps gras. En plus de ce rôle central, la leptine exerce un grand nombre de fonctions périphériques, qui sont tous médiatisée par un récepteur spécifique (Ob - R), tel que codifié dans le gène DB, avec six différents isoformes dont seule la longue isoforme, Ob - Rb, est entièrement fonctionnelle. Dans le périphérique fonctions de leptine souligne son rôle de régulateur du système immunitaire: les changements dans les niveaux de leptine circulants implique des modifications dans la réponse immunitaire en raison de changements dans la fonction des cellules T et des changements dans la sécrétion de cytokines, entre autres. En outre, il a été montré que les niveaux de leptine sont élevées dans l'arthrite rhumatoïde, une maladie auto-immune systémique participation impliquant des modifications dans l'homéostasie du cartilage articulaire. Il a été récemment découvert que les chondrocytes, les cellules qui forment le cartílago et maintenir l'homéostasie, de synthétiser et de sécréter la leptine. Cette sécrétion est augmenté au cours de l'arthrose, l'une des principales pathologie de la dégradation du cartilage, et après l'administration de leptine exogène, qui a suggéré un rôle dírecto et pro inflamatorio de leptine dans le cartilage articulaire. Étant donné la importancía de nitrico oxyde (NO) dans la médiation de la réponse de cytokines dans les chondrocytes, considérant le rôle de Nitróxido Sintasa (NSA) de type 11en production de NO dans le processus inflammatoire et immunitaire, et de régler la capacité de la leptine d'induire la formation de NO Dans les macrophages, l'action pourrait pro- inflamatoria directe cette adipocitoquina dans le cartilage articulaire grâce à la NSA de type 11. Les objectifs de ce travail étaient:, 1. Étudier l'effet de la leptine, en association avec l'interféron gamma et interleukine - 1 sur l'induction de Nitróxido Sintasa type de 11en en culture in vitro, les chondrocytes. 2. Pour étudier les mécanismes moléculaires impliqués dans la transduction du chemin qui conduit à l'activation de l'Nitróxído Sintasa de type I1inducida synergie par la leptine et l'interféron gamma et interleukine - 1 dans les chondrocytes en culture. Pour réaliser cette étude a utilisé la ligne condrogénica murins ATDC5, ce qui nous a permis de travailler avec les chondrocytes dans différents états de maturation. Ils ont également été utilisés cultures primaires de l'homme les chondrocytes. L'activité du type 11se nous a donné par l'accumulation des nitrites dans le surnageant de culture. Pour l'étude des molécules impliquées dans la signalisation par l'intermédiaire de différents inhibiteurs ont été utilisés pour JAK - 2 (Tyrphostin AG490 et Tkip) IR - 3K (Wortmannina et LY294002), MEK - 1 (PD098059) et p38K (SB203580). Nous étudions aussi l'expression d'ARNm et de protéines NSA type de 11mediante RT-PCR en temps réel et Western Blot respectivement. Nos résultats ont montré que la leptine elle-même n'est pas capable de inducír la NSA de type 11en les chondrocytes, mais en synergie avec IL - 1 ou de l'interféron gamma, agit comme une cytokine pro en 8 flamator 4b6, entre autres, qui implique l'induction de l'enzyme par une voie Qui implique la signalisation de la kinase JAK - 2, IP - 3K, MEK - 1 et p38 MAPK. En conclusion: 1. La leptine induit, de façon synergique avec l'interféron gamma et interleukine - 1, l'expression de la NSA de type 11en les chondrocytes. 2. La synergie induction de Nitróxido Sintasa type de 11en les chondrocytes stimulés par la leptine, en combinaison avec d'interleukine - 1 jaune interféron gamma, implique un canal commun de signalisation, à laquelle ont participé les kinases PI 3K, MEK - 1 et p38 MAPK.
  • ETUDE DES PROPRIÉTÉS ÉLECTROPHYSIOLOGIQUES DE NEURONES DANS LE SUBNÚCLEO TREILLIS RETOUR DANS LE CHAT ANESTHÉSIÉ
    Auteur: SOTO SÁNCHEZ CRISTINA.
    Année: 2005.
    Université: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA.
    Lieu de préparation: VIGO.
    Résumé: Le subnúcleo treillis dorsale (SRD) est situé dans la formation réticulée médiane flux de óbex. Des études montrent que chez les rongeurs reçoit des informations nociceptiva et augmente sa transmission à deux niveaux supraespinales quant à la moelle épinière. Chez les rongeurs, la transmission se déplace vers le haut par lemnisco médiane à la base ventrale - médiale talámico, de la transmission et de la spécification dorsolateral. Puisque les données à partir de ce noyau ont été obtenus dans des études comportementales et histologiques réalisées chez les rongeurs, nous avons décidé de déterminer l'emplacement du SRD neurones dans le chat et à examiner leurs propriétés électrophysiologiques. Les résultats montrent que: * Dans le chat, le DRP est situé dans la formation réticulée de la moelle osseuse oblongues flux de óbez, mais à la différence de ce qui se passe chez les rongeurs, il existe une certaine répartition somatotópica de neurones dans le noyau, afin qu'ils reçoivent L'information à travers de la partie dorsale colonnes sont dans la région de la formation réticulée médiane. * Comme chez les rongeurs et les primates, les neurones de la SRD sont activés uniquement par des stimuli nociceptivos. * 62% (N = 102/165) des cellules enregistrées envoyer un axone à la moelle épinière. * 44% (N = 24/55) des neurones examinés étaient activés antidrómicamente par stimulation de la formation réticulée bulbaire médiane. * Le 9% (9 / 103) des neurones examinés étaient antidrómicas à la stimulation lemnisco médiane, à la différence de ce qui se passe dans le cas des rongeurs rostrale la projection de ces neurones se fait par lemnisco médiane. * 82% (N = 27/33) des cellules activées antidrómicamente par la stimulation rostrale ont également été antidrómicas la stimulation de la colonne vertébrale, de sorte que l'information est envoyée en tant que commentaires à la moelle est la même que celle envoyée rostralmente. Les résultats montrent que, dans le chat, comme chez le rat cellules dans le processus SRD informations dolorsa. Toutefois, le chat, ces cellules niveaux projetés supraespinales plus rostrales fundametnalmente grâce à la formation de treillis médiane et, dans une moindre mesure, par le biais lemnisco médiane. Bien que nous ne connaissons pas le lieu de la résiliation de ces projections à travers la formation réticulée, les données histologiques indiquent que, à la fin réticulaire plus rostrales d'où ils peuvent également être transmises au noyau intralaminares talámicos pour atteindre le cortex cérébral. Depuis la formation réticulée bulbaire maisons circuits de promoteurs associés à moteur à l'intention des actions involontaire directement à motoneuronas de astra ventrale de la moelle épinière, les SRD peuvent participer à des réactions associées à moteur processus nociceptivos et à prévenir ou réduire les douleurs générées par des stimuli nociceptivos externe et interne. Cela peut être important pour les réactions posturales défense prises en réaction à la présence d'une poussée douloureuse et impliquant la modification de la tonalité des groupes musculaires conçu pour immobiliser la région et loin des stimuli douloureux qui peut améliorer cette situation. En outre, si l'information est transmise rostralmente atteint le cortex à travers les noyaux intralaminares, la croûte pourrait contrôler les réactions posturales agissant au niveau des cellules de formation à l'intention de SRD treillis et de la moelle épinière.
  • MARQUEURS MOLÉCULAIRES ET DIMORPHISME SEXUEL DANS DES GENRES MYTILUS ET ENSIS (MOLLUSQUES, BIVALVIA)
    Auteur: Mariñas Pardo Luis Antonio.
    Année: 2005.
    Université: A CORUÑA.
    Lieu de l'exposition: Facultad de Ciencias.
    Lieu de préparation: Facultad de Ciencias.
    Résumé: Le système reproducteur des hommes et des femmes de l'espèce que sont le sexe et Mytilus Ensis ne présente aucun signe de la différenciation sexuelle au niveau structurel. Ce document traite de l'étude du dimorphisme sexuel dans ces genres, en utilisant différents marqueurs moléculaires. Les moules couvrent espèces dioicas de cette nature avec laquelle la plupart des études de toutes sortes ont été faites à ce jour. En outre, les couteaux sont des organismes dont l'intérêt scientifique est de plus en plus grandissante en raison de son potentiel économique. Les mécanismes qui favorisent la différenciation sexuelle dans les deux cas encore commencent à être clarifiée, ils Mytilus Ensis et sont utilisés dans le présent document comme un point de départ pour faire face à la peu documentées dimorphisme sexuel des bivalves au niveau moléculaire. L'analyse du comportement des cinq paternelle mitochondries dans le sperme de M. Galloprovincialis montre que ces pénétrer à l'intérieur de l'oeuf lors de la fécondation. En suivant la même, rester viable à l'intérieur de l'56,4% des zigotos analysées, regroupées et réparti sans au moins la troisième division mitotique, qui peut être vu dans le micrómero 1d. Ce dernier se traduira par la formation de la gonade des adultes individus, ainsi paternelle mitochondries sont confinés dans des cellules individuelles gonadales mâle. Les polymorphismes généré RAPD a montré une forte sensibilité à l'identification moléculaire des différences entre les sexes dans M. Galloprovincialis, où les lieux appelés MG - ABA5 - 750 présenté efficacité des taux proches de 80%. Dans E. Arcuatus quatre des lieux étudiés (EA - ABA2 - 500, EA - ABA3 - 700, EA - ABA7 - 750 et EA - ABA11 - 750) ont des taux proches de 70% d'efficacité dans la présence et l'absence dans les hommes et les femmes . L'ISSR marqueurs généré confirmé le potentiel de la technique pour constituer une alternative à l'isolement et la caractérisation des micro et générer des marqueurs especie - específicos. Les microsatellites appelé MG - ISSR20 - 250, isolé de l'une des séquences permet de différencier les individus de l'espèce M. Galloprovincialis de M. Edulis. Une autre d'entre eux identifie les individus de E. Arcuatus et ne jamais amplifié copies de E. Siliqua. Ces deux marqueurs pourrait constituer une bonne méthode pour la différenciation de ces espèces moléculaires. L'abondance des répétitions en tandem de la séquence (GT) n est plus importante que celle de n (CT) dans toutes les espèces étudiées. Dans M. Galloprovincialis et E. Arcuatus existe une base moléculaire de dimorphisme sexuel, dans le cadre duquel les hommes ont une plus grande abondance de répétitions (WP) Non que les femmes. Conduite d'une genoteca soustractive sexe M. Galloprovincialis caractériser un crédit de cinq pièces d'ARNm présent dans gonades des hommes adultes et absent dans la hermbras, montrant l'existence de gènes d'expression différentielle entre les sexes. L'amplification avec amorces conçues pour amplifier les séquences d'ADN appartenant à l'activité enzymatique carboxileesterasa donné un marqueur qui différencie les hommes et les femmes de M. Galloprovincialis quel que soit le stade du joueur ils sont, tel que précisé dans 100% des garçons interrogés et le rend à jamais Femelles. Elle a également permis de caractériser certaines séquences similaires homme dans E. Arcuatus et E. Siliqua, corroborándose sa présence dans d'autres espèces comme Donax trunculus et Venerupis rhomboides.
  • BASES DE LA POPULATION ET DE L'EMBARQUEMENT DE VARIATION MOLÉCULAIRE VIRALE
    Auteur: ARIAS ESTEBAN ARMANDO.
    Année: 2005.
    Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
    Lieu de l'exposition: SALA RAMON ARECES.
    Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS.
    Résumé: Les populations des virus à ARN sont complexes distributions de génomes très liés mais non identiques sont appelés cuasiespecies. La distribution d'un cuasiespecie virales dépend de l'apparition régulière de nouveaux mutants et la concurrence et les processus de sélection qui agissent sur eux. La forte hétérogénéité génétique observée dans le cuasiespecie est due à la faible fidélité de copie par l'ARN - polimerasas virale activités et de l'absence de correcteur d'erreur pendant le processus replicativo. Ces distributions des mutants donner à l'cuasiespecie une grande capacité d'adaptation face de pressions sélectives. C'est pourquoi les populations d'ARN du virus se comportent comme un système adaptatif, car elles sont en mesure de répondre aux changements dans l'environnement. Il a été indiqué que certains systèmes adaptatifs, tel le système immunitaire, ont une "mémoire" des événements passés pour ceux qui ont été exposés. L'objectif principal de cette démarche consiste à approfondir les thèses sur les mécanismes moléculaires impliqués dans la réplication des virus à ARN et les conséquences de ce processus d'évolution dans la dynamique de cuasiespecies virale. Nous avons caractérisé la présence des génomes "mémoire" dans la ligne C9.22 du virus de la fièvre aphteuse (VFA). Ces génomes présenté comme un marqueur génétique d'insertion oligo-ovulatoires Un interne qui précèdent la deuxième AUG codon d'début de la traduction de la polypeptides virale. Quand C9.22 subi passe à haute multiplicité d'infection génomes révertants qui n'ont pas réagi rapidement cette intégration avec les génomes d'insertion. Cette insertion de congé si detactable dans la séquence consensus de la population de la transmettre 20 (C9.22p20). Toutefois, l'insertion a été organisée à la mémoire des génomes de ce scénario, comme l'atteste l'analyse des peuples de la passe à 50 et 150 (C9.22p50 et C9.22p150). Le génome mémoire accru leur efficacité biologique au cours de la passe, bien qu'elle ait été déplacées par les révertants, selon l'hypothèse de la Reine Croix. Nous avons analysé le spectre de mutants de cuasiespecie C9.22p50 par clonage biologique et moléculaire, le clonage des trois différentes régions génomiques. Les résultats ont fourni des informations détaillées sur les types et la fréquence de la mutation, ainsi que la présence de "points chauds" ou "points chauds" pour les altérations du génome virale dans la population active. Cette analyse a montré une caractérisation indifférenciable de le spectre de mutants d'une cuasispecie par clonage biologique et moléculaire clonage. Nous avons exprimé et purifié polymérase VFA (3D), et nous avons étudié les conditions de base pour son activité enzymatique in vitro, dans des tests. La caractérisation de cette enzyme est essentiel pour l'étude et la compréhension de la nature erronée de réplication AGV. Polymérase 3D purifié a permis au groupe Dr Nuria Verdaguer obtenir diffraction de rayons X des structures de 3D unique en trois dimensions et 3D complexe avec une molécule qui agit comme molde - cebador (1,9 - Ay 3,0 - Une résolution, respectivement) . Ces structures ont identifié les résidus impliqués dans l'interaction avec l'ARN molécule qui agit comme molde - cebador. Ont été identifiés dans l'ARN du virus populations soumises à la mutagenèse de nombreuses meurtrières mutations dans la polymérase 3D génomes présents dans cette population. Certains d'entre eux, en particulier les résidus des mutants Gly 118, causant le manque d'activité enzymatique a été détectée, suggérant un rôle crucial pour ce résidu dans l'activité de l'ARN - polimerasa.
  • ETUDE MORFOGENESIS ET L'EMBALLAGE DES ADN DANS BACTERIOFAGO T7 TRAVERS CRIOMICROSCOPIA ÉLECTRONIQUE ET DE TRAITEMENT DE L'IMAGE
    Auteur: AGIRREZABALA COLMENERO XABIER.
    Année: 2005.
    Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
    Lieu de l'exposition: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGIA.
    Lieu de préparation: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGIA.
    Résumé: Les bactériophages ADN double brin systèmes modèles sont adaptés à l'étude des processus biologiques de base tels que les interactions moléculaires qui se produisent au cours de la réunion et de la maturation virale, ou le comportement de moteurs moléculaires agissant pour le conditionnement de l'ADN viral. Grâce à l'utilisation de la cryomicroscopie électronique et le traitement de différentes particules ont été déterminées à partir de la bacteriófago T7 produites au cours de son itinéraire morfogenéteca. La structure de la precabeza révèle la présence de la protéine échafaudage, le noyau et le connecteur, ces derniers participent à l'emballage de l'ADN, qui sont situés dans l'un des sommets pentaméricos. La reconstruction de virión matures montre une évolution profonde de cápsida, desaparación de protéines d'échafaudage, et drastiques changements structurels dans le noyau, qui, dans ce cas, correspond au cápsida d'interagir avec la queue. Certains de ces changements pourraient être causées par la pression exercée par l'ADN emballage. En outre, la structure du connecteur à 8 Une résolution obtenue de recombinaison de particules, a montré la présence d'un moyen alpha bêta conservé leur position dominante dans la partie distale de la zone de la structure impliqués dans le conditionnement de l'ADN.
  • VECTEURS BASÉE SUR LE GÉNOME DU CORONAVIRUS DU TGEV
    Auteur: RIQUELME GABRIEL CRISTINA.
    Année: 2005.
    Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
    Lieu de l'exposition: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGIA.
    Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS.
    Résumé: Tout au long de ce rapport décrit la génération de vecteurs viraux basée sur le génome du coronavirus du TGEV afin de répondre à des questions fondamentales au sujet de la réplication du virus ainsi que leur utilisation en tant que système de l'expression des gènes hétérologues. Nous avons construit génomes TGEV avec tous les sites de gènes séparés les restrictions endonucleasa. La séparation des gènes TGEV signifiait la duplication des séquences d'extrême 5 'de chaque gène, ce qui est une séquence de domaine associé à la régulation de la transcription, qui affecte la croissance du virus in vivo et son la virulence. Dans cette thèse, il fournit la première démonstration qu'un gène 7 de TGEV est un gène n'est pas indispensable à la viabilité du TGEV. En outre, il démontre que la suppression du gène 7 affecte la réplication TGEV et dilue la virulence dans ses porcelets, ses hôtes naturels. De même, il a été montré que l'introduction d'un ou plusieurs changements dans le génome de TGEV conduit à la création d'une collection de recombiantes de TGEV avec un degré variable de la virulence. En outre, il a été déterminé que la E gène est essentiel de mettre au point un génome TGEV déficients dans le gène E dans les gènes non essentiels 3a et 3b. Pour la production de virions dans le gène défectueux E, il a été complété par d'emballage transeuropéens dans les cellules exprimant la protéine E. En l'absence de la protéine E bloqué la formation de maturité au cours de la morphogenèse des virions du virus obtenu des virions immatures non infectieux qui s'accumulent dans la ERGIC. Aussi, les vecteurs ont été générés tropique adressée à l'unité canine espèces en remplaçant le domaine globulaire de la protéine S du TGEV par l'unité canine coronavirus du surpassant le premier obstacle empêchant l'infection, l'entrée du virus. Nous avons développé des vecteurs tropique canins compétents de réplication et de propagation. Ces compétences permettrait à la génération de vecteurs et de la virulence tropique défaut, quelques caracterísitcas qui sont essentiels pour le développement des systèmes qui permettent d'expression en utilisant ces vecteurs recombinants sûrs d'obtenir des vaccins et de la thérapie génique. Ils sont écrits pour les systèmes d'expression spécifiques des espèces porcine et des chiens avec lesquels ils ont manifesté de l'intérêt pour vacciner les antigènes hétérologues ces espèces afin de déterminer le degré de protection contre des infections fréquentes de la même chose.
  • L'IDENTIFICATION DE NOUVEAUX GÈNES IMPLIQUÉS DANS LA FORMATION DES VEINES DROSOPHILE MELANOGASTER ET LA CARACTÉRISATION FONCTIONNELLE DE MOESINA, LAMININAB1 ET CG9056
    Auteur: MOLNAR MURO CRISTINA.
    Année: 2005.
    Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
    Lieu de l'exposition: CENTRO DE BIOLOGIA MOLECULAR SEVERO OCHOA.
    Lieu de préparation: CENTRO DE BIOLOGIA MOLECULAR SEVERO OCHOA.
    Résumé: La formation des veines de l'aile drosophile nécessite l'activité des voies de signalisation Notch, EGFR et Dpp. Pour identifier de nouveaux membres de ces routes ont fait un mutagenèse gagner fonction et nous avons sélectionné quelque 13000 nouveaux encarts P - UAS. En combinaison avec une ligne Gal4 spécifiques veines ont choisi et cartographié 500 insertions de P - UAS identifié environ 300 gènes que lorsque sobre dans les veines pupales affectent la formation de veines, de la différenciation cellulaire ou de morphologie aile. Nous avons identifié dans cette mutagenèse pour 70% des membres connus des itinéraires Notch, EGFR et Dpp. Dans ce travail, je présente les résultats de mutagenèse et de l'analyse de trois des lignes choisies, affectant les gènes Moesina, LanB1 et CG9056. Moesina appartient à la famille ARM, un groupe de protéines qui lient citoplasmáticas le cytosquelette d'actine protéines transmembranaires sous- corticales spécifiques. Nous avons créé un nouvel allèle de l'absence de rôle moe (moeC858), et nous avons étudié leurs phénotypes dans l'aile des adultes, la recherche de deux grands défauts: 1) la queue aile, les défauts dans l'aisselle et de la présence de vésicules comme des tissus différenciés entre les deux ailes Superdicies dorsale et ventrale aile, et 2) modification de la structure de la veine L3. L'analyse des disques imaginales révéler pertinentes profondes modifications dans la morphologie de l'aile imaginale disque, ainsi que les changements dans l'expression de plusieurs gènes cibles dans la voie de signalisation Hedgehog. L'activité d'autres voies de signalisation telles que Notch, Dpp, Wg et EGFR est inchangée avec disque aile moeC858. Nous suggérons que Moe a une nouvelle exigence en matière de signalisation HH qui est indépendant de son rôle dans la morphogenèse épithéliale. Le second a analysé gène encode une des trois sous-unités de Laminina: LanB1. Laminina est un composant de la membrane de sous-sol. La surexpression de lanB1 causer des défauts de la configuration des veines semblables à ceux observés lors de la actividaad de Notch route est réduite. Nous avons caractérisé les phénotypes gagner fonction LanB1 et ont incité deux allèles d'un manque de funciín de ce gène. Le manque de LanB1 affecte l'adhérence entre la surface de l'aile dorsale et ventrale. Enfin, nous avons analysé le gène CG9056, dont la surexpression provoque l'absence de différenciation des veines. Nous avons analysé la fonction de l'absence de CG9056, constatant que ce gène est nécessaire pour empêcher formción veine antagonizando itinéraires de signalisation de l'EGFR et / ou Dpp.
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