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RELATION ESTRUCTURA - UNE FONCTION DE RELAXASA DE PLASMIDE R388 TRWC.Auteur: LUCAS GAY MARIA JESUS. Année: 2005. Université: CANTABRIA. Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA. Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA. Résumé: Le relaxasa est la protéine responsable de l'ouverture des réactions dans le traitement conjugativo ADN. Le relaxasa reconnaît et découpes un lien fosfodiéster spécifique située à l'origine du transfert par l'attaque nucleofílico un tyrosines. Ce document a étudié les recnocimiento ADN et de la biochimie de la réaction catalysée par l'ADN coupant le relaxasa de plasmide R388, TrwC. Le fragment TrwC - N293, qui contient le premier 293 acides aminés de la protéine, lie oligonucléotides dans la région de coupe, nique, qui comprennent la répétition inversée IR2 avec une affinité nanomolaires. Cette union implique une molécule protéique et de l'ADN. La structure tridimensionnelle de ce complexe est construit sur deux couches Alpha / bêta et a une fissure, où le centre est actif. Les structures disponibles montrent que l'union de TrwC - N293 l'ADN est associée à un repliement de la protéine. L'affinité de l'union de TrwC - N293 par nique région est déterminée par ses interactions avec les 22 premiers nucléotides dans le sens de la 5 'à la place nique. Contacts avec la chaîne de la double inversé répéter manifestent une plus grande contribution à l'affinité de l'union. Le syndicat de la rivière près de la nique sous la forme d'une simple chaîne montre affinité moindre, mais sa reconnaissance est essentielle pour le bon positionnement de l'ADN dans le centre avoirs, afin qu'il puisse mener à bien l'attaque nucleofílico sur le phosphate tribunal. Cet autre affinité que TrwC va vous suggérons de contacter la première séquence IR2 et cette union facilitera la reconnaissance de la séquence adjacente (bases IR2 et nique site et deux bases 3 'nique). Ces deux régions de l'ADN sont expressément reconnues par TrwC, afin que les interactions entre aidera le relaxasa discerner entre autres séquences, et son objectif, le site nique de oriT de R388. Une étude des mutants déchets deTrwC Arg81, Ser89 et Lys92 a montré que sa fonction est liée à leur interaction avec l'ADN. Les résultats suggèrent que R81 facilite desapareamiento de la double chaîne autour nique, S89 interagit avec l'extrémité 3 'ADN et K92 aide coupés à la bonne position de l'ADN dans le centre actif. Il a aussi étudié le rôle des ions métalliques dans l'activité TrwC. D'une part, les ions métalliques ont un rôle de catalyseur dans la réaction du tribunal, et que de la position de l'ion métallique dans le centre de l'activité des structures résolues TrwC révèlent que les ions métalliques pocionan et de polariser les phosphates tribunal. En outre, il a été prouvé qu'ils ont aussi un rôle structurel, comme l'union d'ions métalliques Ni Mn et rend le pliage de la protéine est plus compact. Enfin, on a analysé les résidus TrwC Outre les tirosinas Tyr18 et Tyr26 impliqués dans le mécanisme de la réaction de couper l'ADN. Une étude de mutagenèse à l'alanine a révélé que les déchets Asp85, Son 150, His 161 et His 163 contribuer à l'attaque nucleofílico par Tyr18 et Tyr26. La triade de histidinas coordonner l'ion métallique, qui est essentiel pour la réaction, et il a été proposé que Asp85 active le groupe hydroxyle de Tyr18 par captage d'un proton. PLASTICITÉ DES CELLULES HÉMATOPOÏÉTIQUES CHEZ LA SOURIS AVEC DES LÉSIONS HÉPATIQUESAuteur: QUINTANA BUSTAMANTE OSCAR. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS. Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS.
Résumé: La présence d'hépatocytes provenant de la moelle osseuse (HDMO) dans le foie a été décrit dans les différents modèles. Le mécanisme impliqué dans son origine n'est pas parfaitement claire. Il a été suggéré que possible des mécanismes de différenciation directe de cellules souches hématopoïétiques (CMHs) et / ou la fusion cellulaire entre les cellules provenant de CMHs et endogène hépatocytes. La fréquence des HDMO est liée au modèle étudié, et varie selon la source à partir de la 30% des hépatocytes d'être un phénomène très faible. À l'étude du processus de génération HDMO, a mis au point un modèle de souris, dans lequel les souris femelles letalmente cellules irradiées ont été transplantés avec MO mâle souris transgéniques, exprimant la protéine fluorescente verte (EGFP) contrôlée par l'omniprésence du promoteur b- actina. Après la mise en place de l'hématopoïèse chimériques, les animaux ont été injectés avec une solution saline ou de tétrachlorure de carbone (CCl4) pour provoquer des dommages graves semblables à un cirrósis chronique. Chez les animaux traités par CCl4 il y avait une grande différence dans les paramètres du plasma et de la structure complètement changé foie. Le HDMO ont été identifiés par l'immunofluorescence comme EGFP + avec la morphologie des cellules du foie, le foie exprimant des protéines spécifiques et non pas l'expression des marqueurs hématopoïétiques; fréquence HDMO dans le foie endommagé a 1 pour 250000 hépatocytes totaux. Ultérieurement, ont été mobilisés pendant trois semaines, avec le facteur de croissance (G-CSF) ou granulocytes avec G-CSF/Trombopoyétina (TPO) à la moitié des animaux de chaque groupe. Une semaine plus tard, les animaux ont été sacrifiés et ont examiné la présence de HDMO. La mobilisation avec G-CSF sensiblement accru le pourcentage des HDMO (plus de 17 fois) dans le foie des animaux traités avec CCl4. Une égalité de fréquence a été conclu avec la mobilisation avec G-CSF/TPO. L'analyse des mécanismes responsables de l'HDMO, a été menée par colocalización marqueurs du donneur féminin MO (EGFP) et le destinataire souris mâle (le chromosome Y). Elle a constaté que la majorité des hépatocytes exprimant EGFP également eu le chromosome Y, ce qui indique que son origine est le résultat d'une fusion entre les hépatocytes in vivo et endogène des cellules du sang de la femme. Ce processus a été augmentée au moyen de chlorure d'ammonium (NH4Cl), un inhibiteur de la phagocytose, ce qui suggère que les processus endocíticos caractéristique de monocítos - macrófagos, étaient impliqués dans la formation de HDMO. Enfin, pour déterminer la façon dont le noyau hématopoïétiques est reprogramaba ont été analysés qualitativement et quantitativement la morphologie et l'expression de l'antigène nucléaire spécifiques lignée. Nous avons identifié un processus séquentiel, à travers lequel le noyau hématopoïétiques changé sa morphologie, perdu hématopoïétique facteurs nucléaires, et enfin acquis nucléaires facteurs foie, égalisant les noyaux des hépatocytes. En résumé, nous avons montré que: i) la présence de HDMO dans le foie se produit lorsqu'il ya un foie. Ii) La présence de ces cellules peut être augmentée de façon significative avec l'utilisation de facteurs de croissance hématopoïétiques. Iii) L'origine de HDMO est hématopoïétique et est produite par la fusion entre in vivo de cellules hématopoïétiques et hépatocytes. Iv) La base hématopoïétiques de HDMO inchangé lors de sa morphologie, de gènes marqueurs silencieux hématopoïétiques et présente nucléaire foie. L'EFFET DES CHANGEMENTS CLIMATIQUES SUR LA RÉPARTITION DES FORÊTS IBÉRIQUE: PASSÉ, PRÉSENT ET AVENIRAuteur: BENITO GARZÓN MARTA. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS, DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA. Lieu de préparation: UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE MADRID, DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA. Résumé: Différentes distributions de 19 espèces d'arbres dans la péninsule ibérique dans relacción climat. Elle crée un cadre pour la modélisation de l'environnement source ouverte oara prédire l'habitat de l'espèce. Ce cadre englobe trois techniques d'apprentissage automatique des données: classification et de régression des arbres, les réseaux de neurones et l'algorithme aléatoire de la forêt. Il a prédit des distributions de ces espèces à différents scénarios climatiques: le dernier maximum glaciaire (LGM, 21000BP), le climat Optimum (6000BP), le présent, 2020, 2050 et 2080. Climat scénarios ont été adaptés pour la péninsule ibérique à partir de modèles de circulation générale atmosphérique (JAG). Les résultats de la dernière montrent que les zones de répartition des espèces de la flore LGM tracé des abris mis en évidence par le biais palinología et filogeografía. Les résultats montrent aussi une augmentation de la variété des espèces qui ont souffert au cours de l'Optimum climatique. À l'avenir, la tendance générale dans la distribution des espèces de l'un quelconque des scénarios climatiques et des scénarios du GIEC (A1, A2, B1 et B2) est un grave recul dans les domaines de la profession comme une réponse au changement climatique. Le groupe d'espèces qui est la plus touchée de façon spectaculaire en termes de réduction de la région est composée d'espèces submediterráneas, qui avocadas dans certains cas presque à l'extinction. La forêt de conifères de montagne brevet souffrent également une baisse de leurs zones de distribution. Ce ne serait pas si forte dans le cas des forêts planocaducifolios. Les forêts méditerranéennes montrent une mayuor capacité de se déplacer comme une réponse aux changements climatiques que d'autres types de forêts. Les espèces qui vivent dans les zones les plus continentale souffrent d'une très forte baisse due à la hausse des températures qui se produiront dans la plupart des zones continentales. RÉGULATION DE L'RÉACTION À LA DOULEUR PAR LE RÉPRESSEUR TRANSCRIPTIONNEL RÊVEAuteur: Barrio Burgos Jorge. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: Centro Nacional Biotecnología. Lieu de préparation: Centro Nacional de Biotecnología. Résumé: La protéine DREAM (Aval antagoniste réglementaire élément modulateur) réglemente l'expression des gènes de protéines direct liant à l'ADN dans une Ca2 + dépendantes. D'enquêter sur les in vivo de la fonction de DREAM, nous avons préparé et caractérisé plusieurs lignées de souris transgéniques qui overespress calcium insensible EF main mutante DREAM (EFmDREAM). Both in vitro et vivo de EFmDREAM fonctions activer une dominante mutante (daDREAM) blocage de calcium médiation de la répression de gènes cibles. La surexpression de daDREAM dans le SNC conduit à un accroissement de la douleur nociceptive réponse à plusieurs modèles. Cette findig est corrélée avec l'importance de la réduction de la tonalité d'opioïdes dans daDREAM souris avec une diminution sensible de l'expression de ces trois récepteurs opioïdes ainsi que dynorphines. Comparative gène profilage des daDREAM révélé l'analyse d'importantes différences génétiques dans la réponse par rapport à des souris de type sauvage. Le motif de l'expression des gènes dans daDREAM est semblable à la douleur chronique modèle de l'expression des gènes motif. INMUNODOMINANCIA ET À LA TRANSFORMATION DE LA GLYCOPROTÉINE EPÍTOPOS F VIRUS RESPIRATOIRE SYNCYTIAL HUMAIN -T RECONNU PAR LES LYMPHOCYTES CYTOTOXIQUES CD8 + MURINSAuteur: JOHNSTONE ESPAÑA CAROLINA. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS. Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS.
Résumé: Le virus respiratoire syncytial (VRS) l'homme est l'une des principales causes des infections respiratoires chez les nourrissons et les personnes âgées. La fusion glycoprotéine VRS (R) est un antigène cible dans le développement de vaccins et de déclencher une réponse immunitaire médiée par les anticorps et cytotoxiques CD8 et les lymphocytes T (CTL). La protéine F de la souche A2 VRS ont décrit deux des CTL epítopos murins limité par H - 2Kd, epítopos F85 - 93 et F92 - 106. Afin d'étudier la réponse immunitaire par rapport à la RSV F protéines grâce à la médiation de CTL, dans le modèle de souris BALB / c et sont générées in vitro de lignées CTL F polyclonaux protéine spécifique par le biais de procédures qui ont monoespecíficas ou multiples. Dans le second cas a été utilisé dans un roman de stimulation avec des cellules BCH4 persistante infectés par la souche Long VRS. CTL lignes ont été utilisés dans des tests fonctionnels de l'antigène présentation par citotóxicidad ou coloration intracellulaire de cytokines (ICS). En outre, d'évaluer la réponse in vivo de CD8 + T cellules ont été effectués les essais ICS splenocytes ex vivo. Les résultats les plus pertinents sont les suivants: - la protéine F de la souche de longue VRS, est conservé epítopo F85 - 93 présenté par Kd et décrits à la souche A2. Toutefois, il n'existe aucune preuve de la présence de epítopo F92 - 106 dans la souche Long. - La séquence F249 - 258 de la protéine F de la souche Long VRS est une nouvelle epítopo présenté par Kd à CTL comme nonámero (TYMLTNSEL) ou decámero (TYMLTNSELL). L'infection in vivo de la souris BALB / c en RSV ou avec un virus de la vaccine recombinants qui encode une protéine F VRS (vvF) induit CTL répondre à cette epítopo. Dans la réponse immunitaire in vivo de la médiation de CD8 + T cellules chez les souris BALB / C infectées par vvF, est l'établissement d'un inmunodominancia de F85 - 93 sur F249 - 258, avec la ligne polyclonaux multiples CTL F/BCH4 représentant de cette tendance inmunodominancia. - Epítopos de la protéine F VRS F85 - 93 et F249 - 258 présenté par Kd sont traitées par différentes manières en fonction de la epítopo, sous la forme de la protéine F, et le contexte du virus. Les deux epítopos peuvent être présentées par différentes voies indépendantes de TAP. Les résultats présentés dans cette thèse contribuer à l'étude de modèles murins du rôle des CTL dans la réponse immunitaire à la protéine F du VRS, et de mettre l'accent sur la diversité des voies de traitement disponibles pour le dépôt epítopos par MHC de classe I CTL. GÉNÉTIQUE MOLÉCULAIRE ET L'ÉTUDE DES GÈNES IMPLIQUÉS DANS LA CANCÉROGENÈSE DES POUMONS.Auteur: Medina Vico Pedro Pablo. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: Cen. Nac. de Inv. Oncol.(U.A.M). Lieu de préparation: Cen. Nac. de Inv. Oncol.(U.A.M). Résumé: Le cancer du poumon est devenu un grave problème de santé en Espagne est le premier cancer en terme de mortalité et le deuxième en termes d'incidence. Cette thèse sous des angles différents contribue à l'avancement de la biologie moléculaire des cancers du poumon, un outil qui peut aider à la baisse de ces statistiques: d'une part a étudié la relation entre les polymorphismes dans les gènes de réparation des dommages à l'ADN (liées au carcinógenes Du tabac à priser), et les caractéristiques génétiques et pathologiques des tumeurs primaires du poumon. Enfin, il a mené une perquisition dans des oncogènes activés par une amplification génique dans le cancer du poumon, qui peut être une cible potentielle d'un traitement thérapeutique. RÉGULATION DE L'EXPRESSION DES SDF1 ALPHA / CXCL12. EFFET DE EBNA 1, TAT ET FISCALES.Auteur: ALONSO LOBO JUAN MANUEL. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA MOLECULAR. Lieu de préparation: INSTITUTO DE SALUD CARLOS III (MADRID). Résumé: L'objectif de ce travail dans un PRICIPIO a été l'examen de la réglementation de promoteur de CXCL12 dans les cellules de production constitutifs: LC5, MS5 et U373, et de déterminer si la stimulation de la inducción, règlements que les régions impliquées dans ce genre de règlement du promoteur. Dans une partie, l'objectif était d'analyser l'effet de l'impôt proteína HTLV - 1 sur l'expression de CXCL12 dans LINFOCITOS, ainsi que dans les cellules T de LEUCEMIAS / LINFOMAS associée à une infection HTLV - 1. SE OBSERVÓ à une expression de la transition proteína impôt dans les cellules JURKATT PRODUJO un important TRANSACTIVACIÓN de promoteur de CXCL12. D'accord avec ces résultats, SE OBSERVÓ la présence d'ARNm proteína si comme dans les cellules MT2 (lignée cellulaire INFECTADA forme chronique par le HTLV - 1); que tous vus par RT-PCR, CITOMETRÍA débit et MARCAJE par INMUNOFLUORESCENCIA. CXCL12 était DETECTADO aussi dans le SOBRENADANTE cellule MT2 par ELISA techniques et CHEQUEADA son activité pour les essais de fonctionnement du QUIMIOTAXIS. BIOPSIAS des patients infectados avec HTLV - 1 mostraron LINFOCITOS CD3 + positif pour l'expression de CXCL12, tout en n'étant pas APARECÍA cette ganglions LINFÁTICOS d'expression chez les patients non infectados le HTLV - 1. Sur la base de ces résultats qui peuvent être concluir proteína de la taxe HTLV - 1 induire l'expression de QUIMIOCINA CXCL12 niveau TRANSCRIPCIONAL montrent bien une expression ABERRANTE de proteína CXCL12 les deux lignes cellulaires INFECTADAS avec HTLV - 1 que dans LINFOCITOS de BIOPSIAS de LINFOMAS associés à CE VIRUS. L'augmentation de l'expression de CXCL12 par l'infection par le HTLV - 1 peut contribuer au recrutement de LINFOCITOS sain jusqu'à ganglions infectados le HTLV - 1, INDUCIENDO bien la propagation de l'infection. MÉCANISMES INTRAMOLECULARES POUR INITIER LA TRANSMISSION DE SIGNAUX PAR LE TCRAuteur: Muñoz Risueño Ruth. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: Fa. de Cien. Secc. Biol.Biol. Molec.. Lieu de préparation: Facultad de Ciencias.
Résumé: L'activation du récepteur pour l'antigène (TCR) T cellules peuvent produire des réponses différentes selon la nature du peptide antigénique encadrées dans le complexe majeur d'histocompatibilité (MHCp). Cela implique la possibilité combinaison du ligand spécificité de la TCR et l'activation de différentes cascades de signalisation intracellulaire. Le mécanisme moléculaire qui permet à la discrimination est connue en partie. L'anticorps monoclonal APA1 / 1 reconnaît un epítopo dans cytosolique découlent de CD3e énoncés lors de la TCR est pleinement activé. L'exposition des epítopo de APA1 / 1 survient promptement et de manière indépendante de l'activité tirosín - quinasa - en fait, cette exposition est produite lorsque les cellules sont stimulées à 0Â ° C. Seuls la stimulation de la TCR avec l'agoniste induit ligand de forte exposition epítopo de APA1 / 1. Dans la plupart des cellules T au repos dans les ganglions lymphatiques, epítopo de APA1 / 1 n'est pas exposée, mais après l'injection de l'antigène in vivo, le epítopo décrite dans la majorité des cellules T spécifiques de l'antigène. Ces résultats montrent que la TCR objet d'un changement conformacional après l'union de MHCp in vitro et in vivo, et d'une stabilité moléculaire corrélation avec la production de TCR d'activation. Une caractéristique unique de TCR est sa capacité à explorer les ligands MHCp structurellement similaires et de transmettre des signaux biochimiques différemment en fonction de la force du ligand reconnaissance. Lors de l'élaboration de thymocytes, la faiblesse de ligands induisent positif de sélection et les ligands inciter fortement négative sélection. Une minorité non transgéniques souris thymocytes exposés les epítopo reconnu par APA1 / 1. Les cellules APA1 / 1 positifs sont DP sont dans la croûte terrestre et les syndicats cortico - medulares et sont en contact avec les cellules épithéliales et dendritiques. La population APA1 / 1 positifs augmente en termes de sélection négative à la fois dans les souris transgéniques TCR limité aux MHC classe I ou de classe II. La majorité des thymocytes APA1 / 1 positifs sont TUNEL positif, ce qui indique l'existence d'une corrélation directe entre l'exposition epítopo de APA1 / 1 et de l'induction de l'apoptose médiée par les ligands MHCp qui induisent sélection négative. Bien qu'il existe des preuves expérimentales changement conformacional dans CD3e après stimulation du TCR, on ne sait pas comment la transmission de la reconnaissance antigénique de sous-unités reconocedoras de ligands TCRab la signalisation des sous-unités de CD3. La TCR la stimulation induit une protection contre la digestion par les protéases dans les tiges CD3e et CD3z. Utilisation d'une approche thermodynamique, décrit les propriétés des actifs et non actifs conformation de dimères de CD3. Enfin, nous proposons un modèle dans lequel la stimulation du TCR déclenchement rigidificación la structure et le compactage des tiges de CD3. ÉTUDE DE LA HCV POLYPEPTIDES L'EXPRESSION D'UN VIRUS DE LA VACCINE RECOMBINANTS INDUCTIBLE ET L'IMPLICATION DANS LA CELLULE HÔTE - RÉPONSESAuteur: VANDERMEEREN Andrée Marie. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: Departamento de Biología Molecular. Lieu de préparation: Centro Nacional de Biotecnología (CSIC). Résumé: Le virus de l'hépatite C (VHC) est l'agent étiologique de non A non B et l'hépatite OMS estime que 3% de la population mondiale est cliniquement affectés par ce virus. Plus de la moitié des cas d'infections chroniques progrès qui, souvent, développer une cirrhose du foie qui peut évoluer à l'hépatocarcinome. Toutefois, le mécanisme de la pathogenèse est encore peu connue en raison de l'absence d'un système de culture de cellules et d'un modèle adapté à l'infection virale et la réplication du virus. Le virus de la vaccine (VV) a été largement utilisée comme vecteur de l'expression de protéines hétérologues, nous avons mis au point un nouveau système d'expression basé sur un virus de la vaccine recombinants virus, et nous appelons VT7 - HCV7.9. Ce virus recombiné exprimant inductible forme de protéines structurales (Core, E1 et E2) et non structurelles (NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A et d'une partie de NS5B) ORF sous-type 1b du VHC. L'analyse par microscopie confocale et Western Blot a montré que les polypeptides virale est traitée efficacement dans différentes lignées cellulaires (Hela, BSC40 et HepG2) infectés par le virus recombiné VT7 - HCV7.9, parlant différentes protéines structurelles et non structurelles du VHC. En outre, nous avons vu que le VHC protéines exprimées de VT7 - HCV7.9 sont situés exclusivement dans le cytoplasme avec une distribution puntuada, colocalizan avec le réticulum endoplasmique (RE) et les mitochondries et produit briser appareil de Golgi. Dans les études miscroscopía électronique des cellules humaines infectées par le virus recombinants, il a été noté que des protéines du VHC induire des modifications dans l'architecture des cellules infectées caractérisée par la perte de l'organisation IR, le gonflement des mitochondries, les membranes et le réseau de formation d'électrons denses structures dans le réseau membranaire , Dispersés dans plusieurs domaines. Les changements sont semblables à ceux observés dans les cellules du foie des chimpanzés infectés par le VHC. En outre, l'expression du VHC induit de VV, provoque une inhibition de la synthèse protéique totale dans le carcinome de cellules humaines, Hela, et le foie, HepG2, la phosphorylation facteur d'initiation eIF2alfa. Cette expression affecte également le virus de la vaccine réplication. Nous avons montré que la protéine quinaza induite IFN, PKR, la kinase est le principal responsable de la phosphorylation du eIF2alfa et inhibition de la traduction dans les cellules infectées par le VT7 - HCV7.9. Nous notons également que l'expression de protéines dans des cellules infectées par le VHC avec VT7 - HCV7.9 induire l'apoptose dépendante de la caspase (caspases - 3, -8 et -9), et grâce à la médiation de la mitochondrie. En outre, l'apoptose est médiatisée par le système 2 - 5A synthétase / RNasa L PKR indépendante. Enfin, nous notons que la mort cellulaire par apoptose peut être associée à l'expression de protéines E1, E2 et NS5A du virus VHC. Ces résultats indiquent que le système d'expression du génome par le VHC recombinantes VV peut faciliter la connaissance de la morphogenèse virale, et de leurs relations avec les huésed. VERS LA CONSERVATION DES DAUPHINS DANS LA MER DE ALBORÁNAuteur: CAÑADAS CARBÓ ANA MARÍA. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS. Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS. Résumé: L'objectif global de la thèse était de contribuer à la conservation des baleines dans la mer d'Alboran, à travers l'étude de leur écologie et de la gestion de projet et des mesures de conservation. La zone d'étude comprend la partie nord de la mer d'Alboran et dans le golfe de Vera. La plate-forme d'observation a été le navire de recherche Toftevaag. Les données ont été recueillies transects linéaires comportement, de la taille du groupe et pour chacune des autres observations de baleines, ainsi que des données sur l'environnement et les activités humaines. La première phase de cette étude, qui a porté sur l'étude de la distribution des sept espèces de cétacés dans le sud de Almeria, a indiqué que la topographie locale peut jouer un rôle important dans sa distribution. Nous avons identifié deux groupes d'espèces en fonction de leur distribution en fonction de la profondeur. Inscriptions dauphins, des orques gris, le noir des orques, les baleines picudas et cachalots, de préférence pour montrer eau profonde. Le dauphin commun et mulassière ont été trouvés le plus souvent en eau moins profonde. La caractéristique commune à toutes les espèces dans le groupe d'eau profonde plus évidente est de leurs habitudes alimentaires (principalement teutofágicas). Toutefois, les dauphins communs et mulassière (groupe des eaux), ont montré une préférence pour les poissons dans de nombreuses études de l'alimentation. Dans une seconde phase serait de détails sur l'analyse de l'habitat de préférences des différentes espèces de cétacés utulizando outil d'analyse spatiale. Les résultats de ces nouvelles analyses correspondent essentiellement pour la première phase, mais leur offrant une plus grande robustesse. Les grands dauphins communs et continuer à faire preuve de la plus grande présence dans les eaux du plateau continental et de l'effondrement de la plate-forme dans la région (et en particulier autour des Oliviers à sec pour delfin mulassière). Les cinq autres espèces sont distribuées principalement par la haute mer, en évitant le plateau continental. Grâce à ce travail ont été en mesure d'identifier la tendance générale de la répartition de ces espèces dans la région, à partir de laquelle il n'ya pas eu d'information préalable. A plus spécifiques et des études approfondies ont été menées sur des communes et de grands dauphins, également évalué leur abondance. Pour le dauphin mulassière, l'abondance des estimations pour la période 2000 à 2003 dans le domaine de Alboran est 584 dauphins (95% IC = 278-744), principalement concentrées dans le sud de Almeria, les zones côtières de la Grenade et le sud de Punta CDAlaburras à Malaga. Dans le domaine de Almwería, l'abondance estimée entre 1992 et 1997 fuew de 111 dauphins (95% IC = 54-234). Entre 1998 et 200, après l'arrivée des animaux "immigrés", les prévisions de l'abondance a augmenté par un facteur de quatre. En 2001-2003, les prévisions de l'abondance a diminué de moitié. La zone centrale de densité plus élevée a été le même dans les trois périodes: à propos de "Dry Oliviers." L'abondance totale des dauphins communs dans l'ensemble de la zone d'étude, de Gibraltar à l'Golfe de Vera entre 2000 et 2004 a été estimée à 19428 animaux (95 % CI = 15277 - 22804): Il existe une variation saisonnière de la desidad dans le sud de Almeria avec une densité moyenne plus élevée en été qu'en hiver. Il existe également des différences géographiques lors de l'examen de l'ensemble de la zone d'étude au cours de l'été, avec une densité beaucoup plus élevées dans l'ouest que dans l'est et au sud de densité intermédiaire Almeria dans le centre-ville. La population a été stable de 1992 à 2004 dans la mer d'Alboran, si elle a trouvé une diminution significative dans le Golfe de Vera depuis 1996. En outre, les groupes ayant crís tendance à préférer les eaux côtières et les groupes sans descendance en eaux profondes. Les groupes monoespecíficos suivi le modèle général des densités de courant plus élevées autour de la chute de la plate-forme, tandis que les plus fortes densités d'animaux dans des groupes mixtes (mélangées avec des dauphins liste) se produisent dans les eaux profondes. La plus forte densité de l'alimentation des animaux dans les eaux côtières. Le densid 8 annonces quelles 4f9 l animaux en mouvement suit le schéma général décrit ci-dessus. Il ya une très forte tendance bimodaux socialisation dans les groupes de plus en plus de petits groupes dans des eaux profondes, et moins nombreux, mais des groupes plus importants en eau moins profonde. Les travaux effectués dans cette étude ont contribué de façon significative à la conservation des baleines dans la mer d'Alboran. Nous avons proposé plusieurs projets de taille moyenne: quatre SCI et SPAMI. Nous avons jeté les bases pour l'élaboration du Plan de conservation de Grand dauphin en Andalousie et Murcie, et a collaboré activement à l'élaboration du plan de la conservation des dauphins communs dans la mer Méditerranée de l'ACCOBAMS. CARACTÉRISATION DES ÉLÉMENTS RÉGULATEURS CIS DANS LE COMPLEXE IROQUOIS DROSOPHILE MELANOGASTER: CONTRÔLE DE LA TRANSCRIPTION DES VOIES DE COMMUNICATION DE INTERCELLULAIRE DPP ET EGFRAuteur: Letizia Annalisa. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: Centro de Biología Molecular S. Ochoa. Lieu de préparation: Centro de Biología Molecular S. Ochoa. Résumé: Les Iroquois Complex (C - Iro) de Drosophila melanogaster est composé de trois gènes, araucan (chasse-neige), caupolican (caup) et le miroir (mirr), qui codifícan autour avec homeodomain protéines. Ces gènes sont exprimés dans différents domaines disques imaginales de Drosophila, les structures épithéliales de la larve dont sont originaires la plupart des structures cuticulares la mouche adulte. L'expression de ces gènes dans les différents domaines et sur le développement caractéristique est très importante, car ils contribuent à la spécification des territoires qui sont exprimées et la formation des habitudes qui caractérisent ces structures. Les gènes de C - Iro exprimées dans les domaines sont très similaires, il a été suggéré que cette fonctionnalité était due à la présence de certaines séquences cis réglementaire (ou rehausseurs), qui agirait simultanément sur les trois gènes regulándone la transcripición et entraînant Final spatiale et temporelle des modes d'expression identique (dans le cas de charrues et caup) ou similaire (dans le cas de mirr concernant charrues et caup). Dans ce travail, nous avons identifié cinq séquences régulatrices, situé dans le C - Iro entre les unités de transcription caup et mirr. Aucune des 5 de fragments isolés relaye l'expression d'un gène marqueur (lacZ), le motif de gènes C - Iro dans l'aile imaginale disque (le modèle de système utilisé dans cette étude), qui confirment l'hypothèse originelle le motif est le résultat De l'effort conjoint des différents améliorateurs des territoires spécifiques qui représentent le masque entier sous-domaines. Un des éléments réglementaires analysées dans le présent travail (courrier Iro1) dirige l'expression de lacZ gene dans un domaine du disque correspondant à l'avenir mesotórax dorsale (notum) de l'adulte voler, d'une manière très semblable à l'original de gènes C - Iro dans ce territoire. Différentes études ont montré que l'expression des gènes génétiques C - Iro dépend essentiellement de l'activité de deux voies de signalisation: la voie de la Dpp (Decapentaplegic) et le chemin de l'EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor). Le chemin de l'EGFR activation de l'aile disque remercier ligands Vn (veine): Ce qui déclenche une cascade d'événements qui conduit à l'activation de facteurs de transcription cellulaire, qui à son tour a déclenché une série de gènes cibles. On a vu que ces gènes sont ceux de C - Iro. D'un autre côté vers Dpp réprime la transcription des gènes C - Iro limiter son mode d'expression dans la région de notum côté. Le rehaussement électronique Iro1 contenant de l'ADN différents sites de liaison pour les facteurs de transcription spécifique effecteurs des deux pistes mentionnées, en particulier facteur Pointes STD (Pnt) activés par le biais de la protéine EGFR et GATA Pannier (Pnr) activées par la voie Dpp. Certains de ces sites sont conservées évolutif. Les fonctionnalités de ces sites ont été analysés in vivo par générant des mouches transgéniques transportant des formes mutadas ou tronqués élément électronique Iro1 originale. Nos résultats indiquent que Pnt menée par l'activation de gènes C - Iro dépendante de la voie de l'EGFR, du moins en partie, par l'intermédiaire de l'élément électronique Iro1, tandis que la répression de ces gènes dans le notum médiane, selon le tracé de Dpp Est due à l'activité de répression dímero Pnr - Ush également par le biais d'un régulateur électronique Iro1. En résumé, grâce à une analyse moléculaire du génome de la région de C - Iro, nous avons identifié une séquence cis réglementaire responsable de l'exécution de la régulation de la transcription des gènes C - Iro, qui dépend à son tour deux voies de signalisation: le Dpp et L'EGFR. LES ÉTUDES IN VIVO ET IN VITRO RIBOSOMIQUE SOUCHES DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE, PAR DES TECHNIQUES BIOCHIMIQUES ET BIOPHYSIQUES.Auteur: García Marcos Alberto. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: Centro de Biología Molecular Severo Ochoa. Lieu de préparation: Centro de Biología Molecular Severo Ochoa. Résumé: La tige ribosomique Protuberans côté est une structure très souple dans la plus grande sous-unité des ribosomes. Dans procaryotes, se compose d'un noyau protéine appelée L10, et quatre autres protéines qui lient appelé acide sous forme de dimères L7/L12. Il S. cerevisiae complexité est plus élevé, car en plus de la base de protéines appelé, dans ce cas P0, il ya 4 protéines ácias différentes: P1a, P1b, P2a et P2b. Bien que la majorité des données expérimentales suggèrent que ces protéines lient l'acide sous forme de monomères pour les ribosomes, et donc ces suivre une répartition homogène dans la cellule, avec des tiges composé d'une protéine acide chaque type. Toutefois, certaines données intersection chimiques, contre procaryotes, et la capacité de P2b en solution pour former homodímeros, également suggérer qu'il pourrait y avoir un modèle de composition hétérogène de ribosomes avec différentes combinaisons homodímeros des acides protéines. Tout cela est d'une grande importance, non seulement structurelles, mais aussi fonctionnelle, car selon l'acide couplé à la protéine ribosomes, il a été démontré que varie la structure des protéines que la cellule exprime. Avec l'objectif général d'expliciter la présence ou l'absence de homodímeros protéine acide dans le ribosome, et la discrimination entre l'existence du modèle homogène ou hétérogène de la composition des souches ribosomique, soulève une série d'objectifs spécifiques et techniques. Premièrement, ils remplacé certains résidus acides protéines de protéines par cisteínas et mené des expériences chimiques intersection. Les résultats sont compatibles avec un modèle de composition homogène des ribosomique souches, et aussi montrer une interaction directe entre P2a et P1b. Il ya aussi l'émergence de homodímeros de P2a (avec un résidu cystéine muté pour) dans les souches qui ont été éliminés P2a endogène est simplement artefact sans importance biologique, comme la réaction de l'intersection se produit dans le cytoplasme de l'union avant le ribosome, et cette paire , Un seul des deux protéines se lie directement à des ribosomes, tandis que l'autre le fait à travers son partenariat avec le priemra, mais ne fait pas partie intégrante de la tige. Le deuxième objectif est l'analyse des estructra souches in vivo, l'aide d'une technique moderne biophysique, two-photon microscopie par fluorescence associée à la spectroscopie de corrélation. Il a remporté une série de souches mutantes de levure, qui delecionaron bien chacun des acides protéines individuellement ou toutes les combinaisons possibles de deux acides protéines. Il a par la suite été fusionnées l'protéine fluorescente verte (GFP) carboxyle à la fin de toutes les protéines et les acides entrés séparément ou par paires, dans les souches de levure. Nous actions sur les cellules in vivo, le pouvoir de discriminer la présence d'un ou deux acides protéines couplé simultanément avec le ribosome. Cela pourrait définir la capacité de liaison des différentes paires de protéines le ribosome, et a constaté que dans la cellule, une large majorité des ribosomes sont modélisés homogène, avec une acidité en protéines de chaque type unis, mais aussi en évidence la présence de petites sous-populations de ribosomes Qui suivent le modèle hétérogènes avec diverses combinaisons de homodímeros. En outre, il y avait un grand dynamisme dans les ribosomes lient à la protéine liant les acides et les sites de chaque acide protéines dans le ribosome ne sont pas absolument certaines conditions spécifiques et une protéine peut occuper un site qui n'est pas votre site syndicat spécifique. Ces données, ainsi que d'autres résultats de laboratoire et les données de la littérature, a permis de proposer un modèle de la tige où la protéine ribosomique de type P2 et P0 sont avec leurs voisins et l'extrême carboxyle étendu dans le cytoplasme, probablement chargés de stabiliser le syndicat des facteurs Soluble dans la traduction, tandis que les protéines de type T1 verront leur extrême proximité carboxyle et replegad 8 os sur 4ee le corps des ribosomes peut être responsable de l'activation de l'hydrolyse du GTP GTP sur les facteurs dépendant de traduction. Enfin, une comparaison entre les résultats in vivo et in vitro, les résultats obtenus après purification les ribosomes, montrent que la purification peut modifier la composition de la tige ribosomique et sous-populations sont modélisés pour être très hétérogène minorité, indétectable. Donc, toutes les techniques in vitro, qui impliquent les ribosomes épuration, serait un important artefact entrant dans les études de la composition des souches ribosomique. ESTUIDO FONCTIONNELLE DE PROTÉINES ASSOCIÉES AUX MICROSCOPIQUE MAP1BAuteur: Jimenez Mateos Eva María. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: Facultad de Biología. Lieu de préparation: Centro de Biología Celular "Severo Ochoa". Résumé: Plusieurs axes de evidenes ont indique que les changements dans la structure du cytosquelette neuronale vous pourriez être à l'origine de la dramatique morphologiques qui surviennent pendant neuronaux diferentiation. Il a été proposé que microtubule-depolymerizing protéines associées peuvent contribuer au développement de ce phénomène en contrôlant les propriétés dynamiques des microtubules. MAP1B est un neurone spécifique microtubules associés protéines impliquées dans le contrôle de la stabilité dynamique des microtubules et de la diaphonie entre microscopique et des filaments d'actine. Différents PCP peut cotnribute à cette maturation. MAP1B et MAP2 sont impliqués dans les premières étapes de la maturation et MAP1B et Tau sont impliqués dans la maturation des neurones. Les cascades de signalisation régissant la migration neuronale sont soupçonnés de lien signaux extracellulaires de cytosquelette composants. Nous avons constaté que MAP1B pourrait participer à la signalisation de molécules, telles que Netrin et Reelin, à la fois impliqués dans la migration des neurones. Pour la migration neuronale de se produire, la cellule doit subir morphlogical changements qui exigent des modifications à la cytosquelette. Plusieurs microtubule-depolymerizing protéines associées (PCP) ou actin-binding proteins (SPA) on pense qu'ils sont impliqués dans la migration des neurones. Par conséquent, nous avons plus précisément analysé la interacion de deux des membres de la famille MAP, MAP1B et LIS1, et l'implication dans la migration neuronale. Cette interaction réglemente les cellulaires moteur dynein fonction. D'autre part, nous avons étudié, pourquoi différentes souches de map1b - / - (NMR1 et C57/BL6) mice développer différents phénotypes. Les responsables de ces différents phénotypes pourrait être l'existence de différents horizons génétiques. Ainsi, nous avons testé deux de ces souches dans les concentrations de protéines qui pourraient compléter les microtubules associés proein MAP1B fonction. Dans cette étude, nous avons trouvé une différence dans la quantité de microtubules associés EB1 proteín entre towo de ces souches. CARACTÉRISATION CLINIQUES, MOLÉCULAIRES ET INMUNOFENITÍPICA DES PATIENTS AVEC UNE SUSPICION DE SYNDROME DE LYNCHER. RÉVISION DES CRITÈRES DE SÉLECTION DES FAMILLES POUR LES TESTS GÉNÉTIQUES.Auteur: Valle Velasco Laura. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: Centro Nacional de Investigaciones Oncológicas. Lieu de préparation: CENTRO NACIONAL DE INVESTIGACIONES ONCOLÓGICAS. Résumé: Le Cancer Colorrectal héréditaire Non Polipósico (CCHNP) est le syndrome de prédisposition aux cancers colorectaux héréditaires plus fréquente et se caractérise par le développement du cancer colorectal, l'endomètre et d'autres tumeurs à un âge précoce. Ce syndrome est causé par des mutations dans la lignée germinale d'un gène de réparation des erreurs dans l'ADN correspondant, et plus de 90% des cas avec CCHNP génétiquement définies est causée par des mutations dans les gènes MLH1 et MSH2. Le dysfonctionnement du système réparateur produit un phénotype mutador et de l'accumulation des erreurs dans les microsatellites, appelé instabilité des microsatellites (SGI). En raison de la grande taille des gènes et de l'absence de points chauds de mutation, l'étude de la génétique moléculaire, la réparation est coûteuse tant sur le plan économique et dans le temps. Pour cette raison et pour la forte occurrence de l'agrégation familiale du cancer colorectal, il est indispensable précis de sélection des candidats pour les familles moléculaires étude. Actuellement, cette sélection sont utilisés: des critères cliniques, Amsterdam, Bethesda, et les modifications y afférentes, la présence d'IMS dans le tissus tumoraux, et le immunohistochimique expression de protéines codées par les gènes de réparation. Les résultats des études qui évaluent les critères de sélection sont contradictoires, divers travaux aux autres, et ne sont pas concluants. Ce fait rend nécessaire la recherche de nouvelles approches ou des marqueurs, combinés avec les précédents, d'améliorer le processus de sélection. Dans le présent document ont été évalués et discutés les résultats des études génétiques menées dans 399 familles avec suspicion CCHNP et conseillé sur le cancer de la famille du Conseil de consultation et le National Center for Genetic Research Oncológicas. Les 28% des plaintes déposées dans le SGI tumeur, en considérant seulement microsatellites BAT26, une plus grande sensibilité inaperçue lors de l'utilisation de la "table ronde Bethesda." Après l'étude des gènes MLH1 et MSH2 dans le SGI cas, les 48% transportait une Les perturbations à germe dans l'un de ces gènes. Il confirme que les hypermethylation monoalélica promoteur MLH1 lignée germinale est un mécanisme de la sensibilité à un cancer du colon et a noté que des mutations dans le gène MSH6 semblent être rares dans la population espagnole. Utilisation de la technique immunohistochimique dans les tissus microdamiers ont été étudié 271 tumeurs appartenant à différentes familles avec suspicion CCHNP. Les tumeurs sont classées en fonction de la présence ou l'absence d'IMS; mutation dans le gène de la réparation, ainsi que la présence d'anormal MLH1 ou MSH2. Nous avons comparé les caractéristiques des parents, les cliniques et les inmunofenotípicas entre groupes définis tumeurs. En comparant les tumeurs avec et sans IMS il a été observé que le premier groupe a un âge médian de survenue plus tôt, un plus grand nombre de parents de cancer colorectal et d'autres cáncers associés au syndrome de Lynch; plus souvent proximale emplacement de la tumeur; meilleur pronostic Et la perte d'expression de protéines de réparation; surexpression de protéines liées au cycle cellulaire: Ciclina A, D1, E et p16 et Skp2; plus fort taux de prolifération ki - 67; surexpression de SMAD4, et le manque d'expression de la CK - 20. En outre, les tumeurs sans IMS présente plus fréquemment surexpression de RAD50 et de la p53 et nucléaires bêta catenin d'expression. Au sein du groupe IMS de tumeurs, chez les patients atteints de la lignée germinale de mutation dans un des gènes de réparation diffèrent de ceux des patients chez lesquels aucune mutation n'a été relevée, qui ont une moyenne d'âge inférieure à l'apparition des symptômes; répondre à la plupart des critères rigoureux de CCHNP et Montrer les plus fréquents de perte de l'expression de protéines de réparation et RAD50, et la présence de l'expression de Cdk2. Les différences observées entre les tumeurs avec mutation germinale dans MLH1 et mutation MSH2 sont fondées principalmen 8 vous dans la 516 expression différentielle des protéines de réparation; à un taux plus élevé de prolifération Ki - 67 dans les tumeurs avec mutation MLH1; l'augmentation de la fréquence des tumeurs subi Changements dans MLH1 avec aberrante expression de la beta catenin, indiquant que la voie de Wnt est active dans une grande proportion de ces tumeurs. En outre, nous avons identifié trois groupes de tumeurs sans IMS, ou familier avec tout débuts, sur la base des profils d'expression immunohistochimique des marqueurs. S'appuyant sur les résultats obtenus dans le présent document, nous proposons une procédure d'action pour la sélection des candidats à l'étude de familles de gènes de réparation. ANALYSE DE SÉQUENCES DE PROTÉINES VISANT À LA LOCALISATION DE DOMAINEAuteur: Sanchez Pulido Luis Fracisco. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: Facultad de Ciencias Biologicas. Lieu de préparation: Centro Nacional de Biotecnologia. Résumé: Les travaux menés dans ce mémoire traite de la discipline de l'analyse de séquences de protéines, dans l'intention de montrer l'homologie des relations entre eux et la définition suivante de domaines ou de régions conservées dans des alignements multiples de protéines. Permettant de cette façon dans la mise en place fonctionnelle de la similitude entre ces protéines hypothèse similaire dans la séquence. Application de l'analyse de séquences, le second principe de la Méthode de Descartes: "Diviser chacune des difficultés à envisager, dans ce cas, les séquences de protéines, dans tant de parties (domaines) que possible et nécessaire pour les aider à résoudre" [Descartes, 1637 ]. Nous appliquons une approche méthodologique à l'analyse des différentes séquences de protéines en vue d'identifier les domaines de lé à l'ordre, l'évaluation de leur conservation et de leur répartition entre les différentes familles de protéines. Avec le principal objectif de rationaliser et d'interpréter les similitudes en termes de séquences fonctionnelles communes, telles que les interactions avec d'autres protéines ou molécules, les mécanismes de réaction et / ou les chevauchements réglementation, et ainsi de suite. Nous avons identifié plusieurs domaines dans les protéines liées à plusieurs maladies humaines, en offrant sa façon de nouvelles idées pour aller plus loin dans la caractérisation pilote. SHORT AMYLOÏDOGÉNIQUE S'ÉTEND COMME DES DÉCLENCHEURS DE AMYLOÏDES FIBRIL FORMATION ET DES OBJECTIFS POUR LA CONCEPTION DE ANTIAMYLOID MANDATAIRESAuteur: Esteras Chopo Alexandra. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: Facultad de Ciencias. Lieu de préparation: EUROPEAN MOLECULAR BIOLOGY LABORATORY. Résumé: Dans certaines circonstances normalement protéines solubles perdent leur structure tridimensionnelle et déposé sous forme de matériel connu comme insolubles fibre amiloides.Este processus est associé à un certain nombre de maladies humaines telles que la maladie d'Alzheimer ou de Parkinson, connu Comme amiloidosis.Nuestra hypothèse est que ce sont les séquences de travail à court aminoaciados qui déterminent la amilogeneicidad un proteina.Para prouver cette hypothèse, nous avons procédé à la conversion d'une protéine non amiloidogenica dans une molécule capable de former des fibres amyloïdes grâce à l'insertion de hexapeptidos.Como Protéine modèle nous avons choisi le domaine SH3 de espectrina, qui ne forme pas de fibres amyloïdes sous aucune des conditions testées dans notre laboratorio.Como des fragments amyloïdes, nous avons sélectionné des séquences conçues de novo et dans le groupe, STVIIE hautement amiloidogenica in vitro, et un Série de mutants puntuales.Las les versions amiloidogenicas domaine SH3 sont aussi stables que les fibres de protéines d'origine mais qui sont dans une position dans laquelle le domaine original reste solubles. Par conséquent, la amiloigenicidad de ces protéines n'est pas due à une nouvelle déstabilisation due à l'insertion, mais les propriétés amiloidogenicas de la séquence insérée. Une stratégie possible pour le traitement de l'amylose est l'inversion du processus de formation de fibres amiloides.Puesto nous ont montré que les petites séquences sont responsables pour le début du processus de formation de fibres, notre proposition est que les molécules de pouvoir rejoindre le flux Bref amiloidogenica une protéine devrait être efficace pour empêcher la formation d'intermédiaires ou de démonter amyloïdes fibres maduras.Nuestra rapprochement pour le développement de ces molécules est l'utilisation de D - peptidos.Como première cible d'inhibition, nous avons sélectionné des séquences amiloidogenicas mieux caractérisé dans la Le groupe STVIIE, 1.LA mieux secuncia pour un D - inhibidor - 1 a été déterminée au moyen d'un peptidoteca positionnel de type D. L'effet de chacune D - aminoacido dans chaque position d'un poste D - hexapeptido linéaire dans l'inhibition de la 1 a été évaluée par le biais Dicroismo CIrcular et Microscopie Electronica.BAsados dans ce deconvolucion, ont été synthétisés et testés 32 D - peptidos séquence de la série contre 1. Dans cette étude, nous avons sélectionné une série de molécules dont la capacité inhibitrice contre la version amiloidogenica domaine SH3 portant la séquence 1,1 - SH était probada.Mas de 60% des molécules demostaron leur efficacité contre cette protéine qui confirme notre hypothèse de trabajo.Del détaillée Étude de 32 séquences aussi obtuivmos un ensemble de règles empiriques pour la conception d'inhibiteurs peptidicos de type D. Ces règles ont été validées expérimentalement avec la conception de potentese inhibiteurs contre secuenias amiloidogenicas court de peptidique ABeta amyloïde et les protéines TAU.Estos D - peptidos conçu Selon les règles empiriques sont également spécifiques à la séquence amyloïdes court pour lesquels ils ont été conçus. ÉTUDE BIOGÉOGRAPHIQUE SUR BRIÓFITOS EPIFITOS DU MAROCAuteur: DRAPER Y DÍAZ DE ATAURI ISABEL. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS. Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS. Résumé: Elle a mené une étude biogéographique sur briófitos epifitos des quatre principaux systèmes montñosos du Maroc. Floristique Les résultats obtenus ont été résumées dans le catalogue de brióftos epifitos, comprenant un total de 93 taxons appartenant à 22 familles. Dans ce catalogue a été inclus des données sur l'affinité des différents taxons étudiés par l'habitat, son écologie et sa distribution au Maroc. Les taxons plus abondantes et plus fréquemment trouvé dans fructification sont epifitos habituelles, qui constituent 32% du total. Les taxons indifférents et cortico - saxícolas, qui sont respectivement de 9% et 19% du total sont parfois aussi sont abondantes et largement diffusé par toutes les chaînes de montagnes, mais sont généralement moins frecentes. Les taxons de préférence, ne pas corticícolas, représentant 39% du total, ont tendance à être rares dans la strate epifitos et être limitées à la couche basale des arbres. Cette étude a contribué à la connaissance de la brioflora territoire étudié 13 premiers rendez-vous pour l'Afrique du Nord et les 6 premiers nominations au Maroc, en plus d'offrir de nombreux développements régionaux (7 pour le Rif, 7 pour le Moyen Atlas, 13 pour le Haut Atlas et 3 pour Antiatlas). En outre, certaines de ces localités prospectadas sont endroits représentent le type ou l'extension vers le Maroc domaine dstribución de taxon récemment proposé pour la science, comme c'est le cas avec Orthotrichum speciosum var. Brevisetum, O. Tortidontium et Zygodon catarinoi. L'analyse de la répartition des briófitos epifitos au Maroc a mis en évidence des différences importantes entre les systèmes de montagne étudiées, tant en termes de taux de colonisation des habitats epifítico et par rapport à la richesse en espèces et le nombre de taxons exclusifs. Les différentes représentation des différents taxons dans le territoire a identifié cinq types corológicos pour briófitos epifitos du Maroc: "taxons largement distribuée," "taxons du Rif", "taxons du Rif et le Moyen Atlas," ; "Taxons Atlas" et "taxons présence locale. "À la suite d'une analyse conjointe de l'organisation et la classification des localités ont été en mesure de décrire les cinq principaux types de collectivités brioepifíticas au Maroc:" communautés Frullania dilatata de alcornocales de Ouezzane "," communautés Fabronia pusilla de encinares Al Haddada "," Communautés Orthtorichum lyellii du Rif et le Moyen Atlas "," communautés Orthotrichum diaphanum des montagnes domaine Atlásico "et" communautés Orthtorichum philibertii de encinares de Oulmés. "Trois de ces communautés vivent dans des endroits uniques conditions écologiques, ce qui leur donne une composition floristiques sur le territoire d'étude. Les deux autres sont au contraire largement distribués par le Maroc et remplacé progressivement en fonction de l'humidité. Enfin, il a fait une proposition des domaines présentant un intérêt particulier pour la préservation de briófitos epifitos. Cette proposition est fondée sur les critères de la richesse des espèces, le nombre d'espèces rares, uniques de la flore et de la représentativité régionale de la flore. Il propose 17 domaines de préoccupation particulière, 8 dans le Rif, 6 dans le Moyen Atlas 2, dans le Haut Atlas et l'autre dans le Antiatlas. Ces domaines couvrent les aspects les plus importants du territoire et l'on estime que leur protection permettrait d'assurer un minimum de rétention de briófitos epifitos Marocains. TROPHOBLASTE PLACENTAIRE DE L'INFECTION PAR LE VIRUS DE L'IMMUNODÉFICIENCE HUMAINE (VIH - 1): EFFET DE LA PROGESTÉRONE.Auteur: DÍAZ MUÑOZ LAURA. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: HOSPITAL GREGORIO MARAÑÓN. Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS. Résumé: La transmission verticale du virus de l'immunodéficience humaine de type 1 (VIH - 1) est un grave problème dans le monde. Il a été estimé que près de 1600 enfants sont infectés chaque jour. La transmission du virus "dans l'utérus" a lieu principalement à travers le placenta encore inconnu bien que le mécanisme par lequel les cellules placentaires sont infectés par le VIH - 1, en plus de sa situation et de son origine. D'autre part, les cytokines et d'autres facteurs maternels, tels que la progestérone, seraient impliqués dans le développement et / ou à la réglementation du placenta et le fœtus comme dans la régulation de la réplication du VIH - 1. Ce rapport a cherché à s'attaquer à certains de ces facteurs. Premièrement, il a été constaté que le trophoblaste placentaire cellules trophoblaste lignées cellulaires sont susceptibles d'être infectées par différents isolats de VIH - 1, mais avec une très faible efficacité. Dans ces types de cellules expriment chimiokines récepteurs de surface, CXCR4 et CCR5, mais pas CD4 et le VIH - 1 semble que ne se produit pas par le biais de ces molécules. Il convient de noter que les anticorps contre B2 - integrinas et LFA - 1 sont en mesure de bloquer l'infection de lymphocytes T cellules du placenta. La surface expression de ICAM - 1, une molécule impliquée dans l'adhésion des lymphocytes à la barrière trophoblaste, est augmentée dans le placenta infecté par le VIH - 1 et le transfert de ces cellules à l'infection des lymphocytes T Pour ce faire, il est nécessaire de contacter la transmission cellulaire Est inhibée par des anticorps antipersonnel -- LFA - 1. Les résultats suggèrent que le trophoblaste placentaire cellules peuvent être infectés par le VIH - 1 au moyen d'un mécanisme avec la participation du contact entre les lymphocytes T dans le placenta. En outre, l'infection dans les cellules du placenta produit a augmenté l'expression de ICAM - 1 et de l'adhérence des leucocytes, un événement qui est tenu de transférer l'infection du VIH - 1. Cela pourrait en quelque sorte expliquer comment la transmission verticale se produit à travers la barrière placentaire. La progestérone est passé à l'interface fetoplacentaria pendant la grossesse. Jusqu'à présent, on ne connaît le rôle éventuel de cette hormone dans la transmission verticale du VIH - 1. Expériences in vitro ont donné lieu à une inhibition de la réplication du VIH - 1 dans les cellules trophoblaste et purifié trophoblaste lignées cellulaires, les concentrations que l'on retrouve dans le placenta d'interface. En outre, la progestérone qui inhibent la réplication pour début du post. Fait surprenant, la progestérone ne produit pas ou basale induite par l'inhibition de la transcription ou LTR facteur nucléaire Kappa B (NF-kB) dans ces cellules. Il faut ajouter à ce que la synthèse du TNF dans les cellules du placenta est induit par l'infection par le VIH - 1, ce qui se traduira par l'activation de la réplication virale, neutralisé par la lutte contre le TNF anticorps. La progestérone inhibe l'induction de la transcription TNF dues au virus ou gp120. Par conséquent, les résultats donnent à penser que la progestérone inhibe la réplication du VIH - 1 dans les cellules du placenta par la réduction des niveaux de TNF, qui sont nécessaires à une bonne réplication virale. Le mécanisme par lequel la progestérone inhibe la transcription du TNF devrait être étudiée de manière plus approfondie et ne semblent pas avoir lieu par l'inhibition de facteurs de transcription NF-kB, NF - AT ou AP - 1. STRUCTURE ET LA DYNAMIQUE DE LA TELOMERIC RÉGION SUR LE CHROMOSOME MEIÓTICOS SOURISAuteur: Viera Vicario Alberto. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: Facultad de Ciencias. Lieu de préparation: Facultad de Cencias, Dpto. Biología UAM. Résumé: D'un point de vue cytologique "telómero" est utilisée pour identifier la fin de la physique des chromosomes des organismes eucaryotes linéaire. Dans ce domaine, figure l'ADN chromosomique telomérico chez les mammifères se compose d'un nombre variable de répétitions en tandem dans la séquence TTAGGG, ainsi que diverses protéines spécifiques associées formant ce qu'on appelle le "complexe teloméricos." Dans cette thèse n'a pas essayé de l'aider Seule la connaissance de la structure, la composition et l'emplacement du complexe teloméricos au cours de la méiose, mais également fournir de nouvelles données sur les modifications morfofuncionales qu'ils ont connues au cours des deux divisions de méiotique. Le modèle expérimental a été utilisé en laboratoire souris (Mus musculus) en soumettant tous les chromosomes telocéntricos, c'est-à-dire à la fin de tous les chromosomes centromérico des complexes teloméricos proximale sont dans les régions de heterocromatina centromérica. Cette particularité est qu'il s'agit d'une sorte de choix pour que la conformation particulière au cours de la première division de méiotique être introduites régions centroméricas tels les chromosomes. Ainsi, en métaphase I, cinetocoros frères doivent être adressées à un seul pôle de cellules, de sorte que la présence du complexe teloméricos dans ces domaines seraient un obstacle estérico pour corriger broche microscopique de l'interaction avec cinetocoros. Il a cherché à identifier et à analyser les éventuelles différences dans la longueur des répétitions teloméricas dans les chromosomes condensés au cours des deux divisions de l'homme méiotique souris utilisant hybridation in situ fluorescente (FISH) d'une sonde telomeric (C3TA2) 3 péptidonucleica (PNA). Le reultados montrer l'hétérogénéité dans le nombre de répétitions de l'ADN telomérico entre différentes complément de chromosomes, les chromosomes homologues au sein et même à l'intérieur d'un seul chromosomique. De même, il ya beaucoup de protéines dont les fonctions décrites sont indispensables au bon fonctionnement et de la structure des télomères dans les chromosomes mitóticos. Par conséquent, il a été analysé par l'immunofluorescence son apparence, de l'emplacement et de la dynamique dans le complexe teloméricos pendant méiotique spermatocytes divisions de la souris. De plus, leur relation a été étudiée avec diverses protéines centrómero / Kinetochore, de protéines et de la composante latérale de la complexité sinaptonémico SYCP3. Les résultats montrent que le complexe teloméricos, contrairement à ce qui se produit au cours de la prophase I, ne sont pas situés à l'extrême físco de chromatides de chromosomes condensés. Par conséquent, la structure du chromosome meiótico doit changer de paquitene jusqu'en métaphase I, suggérant que le complexe teloméricos gamme jusqu'à leur réinstallation dans les chromosomes condensés. En outre, il a obsevado que le complexe proximale telomérico être inférieur à la cinetocoros de métaphase I jusqu'à anafase II. Il a également analysé la présence de la protéine RAD51D, un recombinasa qui a récemment été identifié dans le complexe teloméricos de somatiques ligne. Nos résultats montrent que RAD51D apparaît associée à la complexité teloméricos long de ces deux divisions de méiotique, et de proposer un modèle pour leur association avec eux. Il a été étudié pour la première fois en vertébrés la présence et l'emplacement des sous-unités du complexe condensina I pendant la méiose. Les résultats ont montré que cette protéine complexe apparaît dans le noyau de la prophase spermatocytes dans le I localizándose dans les nucléoles. De même, pour la première fois montre la répartition relative des complexes condensina I et cohesina en autocollants 8 omas de b5a souris le long de la méiose. En outre, il ya eu d'argent imprégnation de chromosomes meióticos condensat, dans le but d'afficher leur haches cromatídicos. Les résultats obtenus montrent que ces arbres sont diponen dans la région centrale du chromatides à la métaphase I, montrant un modèle de dsitribución très similaire au complexe condensina I. Comme l'aboutissement de cette étude a analysé la distribution des complexes teloméricos dans un génétiquement modifiés Modèle de souris, qui présente de graves altérations de la spermatogenèse, afin de la comparer avec celle de la souris contrôle. Ont été choisis pour cette souris knock-out pour la kinase dépendant ciclina CDK2, comme cette protéine, avec des implications importantes pour la régulation du cycle cellulaire, a été identifié dans le complexe teloméricos souris au cours de la prophase I. Si à ce jour on ne connaît pas le rôle de CDK2 dans le complexe teloméricos, méiose en son absence signifie que le complexe teloméricos pas adhérer à l'enveloppe nucléaire au cours de la prophase I. Il a également décelé l'existence de phénomènes non homologue des synapses et des fusions entre les différents bouts de chromosomes. Tous ces troubles culminera avec l'entrée en apotosis de spermatocytes, qui ne dépassent pas le contrôle strict point de paquitene sont éliminés, de sorte que ces personnes sont azoospermie. Enfin, nous discuterons de l'origine possible de la variabilité de la longueur de l'ADN telomérico dans la lignée germinale, de l'importance fonctionnelle de la relocalisation du complexe teloméricos dans les chromosomes meióticos condensats et des incidences possibles de RAD51D dans le maintien de la structure du complexe teloméricos. Il propose un modèle conciliateur de l'organisation et l'aménagement du complexe teloméricos dans le domaine de telómero dans cytologique des chromosomes meióticos condensats, qui collecte les données obtenues au cours de l'exécution de cette thèse. Il présente également un modèle sur la manière d'opérer les changements structurels subis par les chromosomes le long de la méiose mammifères en mettant particulièrement l'accent sur la distribution des axes cromatídicos et complexe teloméricos chaque stade meiótico. MUSCULUS MORBIDUS, E3 UBIQUITINE LIGASA DROSOPHILE, GÉNÈRE ARTRINA ET MAINTIENT L'INTÉGRITÉ DU SARCOMEREAuteur: Carrasco Rando Marta. Année: 2005. Université: AUTÓNOMA DE MADRID. Lieu de l'exposition: Centro de Biología Molecular Severo Ochoa. Lieu de préparation: Centro de Biología Molecular Severo Ochoa. Résumé: Les muscles de la drosophile et les vertébrés syncytical fibres sont formées par la fusion de myoblastes. Le processus de fusion est asymétrique et est précédée de la subdivision de mesodermo en sous-types de myoblastes: fondateurs et compétente fusion. Les fondateurs contenir les informations nécessaires à l'élaboration de différents muscles et spécifiques sont les seules en mesure d'achever miogénesis en l'absence de fusion. Les fusions sont attirés par les fondateurs d'être recrutés pour leurs modes spécifiques de l'expression des gènes par le biais du processus de fusion. Ainsi, outre les programmes de l'expression des gènes spécifiques du type de muscle, les fondateurs ont en commun un certain nombre de propriétés caractéristiques de la population, comme l'attrait de la fusion ou myoblastes compétents dans la formation des apodemas (les tendons). Pour étudier ces propriétés comme prévu, nous avons lancé la caractérisation fonctionnelle de l'expression des gènes limité aux diverses sous-populations. C'est le cas du gène CG17492, que nous nom musculus morbidus (mumo). Mumo codant pour une protéine E3 ubiquitín ligasa dont la fonction est essentielle pour miogénesis de Drosophila melanogaster. Ainsi, dans les embryons mutants pour mumo se déroule la formation initiale d'un muscle motif correct, en indiquant que ni la ségrégation, ni le cahier des charges des fondateurs myoblastes est altérée dans ces embryons. Toutefois, présenter les défauts de la différenciation, qui sont comptabilisées au début de défaillances dans le processus de fusion de la musculature somatique et morphologiques problèmes dans la musculature viscérale. En outre, l'activité contractiles qui se produit à la fin du développement embryonnaire a entraîné la déstabilisation de la bande de miofibrillas Z et de la suppression des fibres du tendon menant à mioesferas. Par conséquent, les données recueillies dans cette étude montrent que Mumo est nécessaire au bon maintien de l'intégrité de la bande larvaire Z dans les muscles, ainsi que pour stabiliser son ancrage dans l'épiderme. En outre, nous avons constaté que l'absence de la fonction mumo produit le même phénotype chez les adultes en fibres musculaires, qui s'accumule dans le banza Z. Toujours dans ces fibres, Mumo est nécessaire pour maintenir l'intégrité du sarcomere. Nous avons également montré que Mumo est E3 ubiquitín ligasa responsable de la synthèse de Artrina, une écurie de Actina mono- ubiquitinada qui fait partie de l'amende à incandescence des muscles de vol indirects. Cependant, nos données soutiennent l'idée que l'absence de production Artrina n'est pas le seul facteur responsable du phénotype observé, suggérant que ce soit Mumo agit sur d'autres supports, ou Mumo a de plus un support rôle structurel dans le sarcomere.
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