CULTURE DE CELLULE

Auteur: BADIA MANAUT EVA.
Année: 2003.
Université: BARCELONA [www.ub.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA.

Résumé: Dans le développement et prgresiÃÂ frais de l'athérosclérose exerce un rôle fondamental des facteurs environnementaux comme dieto, à l'exercice fÃÂsico, hÃÂ ¡bito tabÃÂ ¡quico et de la consommation alcohol.Precisamente ce ÃÂ septième dernière a été perçue comme un facteur de protection de apariciÃÂ ³ n et le développement de la arteroesclerosis quand Consommation modérée (jusqu'à 40 g d'alcool à dÃÂa dans les hommes et 20 grammes pour les femmes). Dans un premier temps cet effet protecteur de l'alcool est atribuyÃÂ ³ une effets sur le profil lipÃÂdico (croissance colesterol - hdl) et hémostase (reducciÃÂ accusations de agregabilidad plaquettes). Toutefois, mÃÂ ¡l récemment a été montré dans divers emplois que l'alcool peut altérer la réponse inflammatoire qui se produit dans la paroi artérielle pendant formaciÃÂ ³ n de la plaque aterme.Es precidamente ce point, le thème centrale de la thèse de doctorat, qui a été soumis Par la suite de rapports publiés.

Auteur: REBOREDA PRIETO ANTONIO.
Année: 2003.
Université: VIGO [www.uvigo.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Résumé: Ce document démontre l'origine intrinsèque de l'activité rythmique et les neurones des noyaux de la colonne dorsale et caractérisé les mécanismes qui donnent lieu. À cette fin, nous avons développé une culture de la primaire et le secteur a enregistré la électrophysiologiques activité isolée de toute activité synaptique en utilisant la technique de "patch-clamp". Plupart des neurones feu de l'action à court potentiels de groupes (grappes) séparées par le silence s'étend Dans lequel apparaît une oscillation subumbral (OS), spontanément ou quand ils sont légèrement despolarizadas. La fréquence de l'OS (11,4 + -1,2 Hz) est fortement corrélé à la fréquence de leur potentiel d'action dans le groupe (12,5 + - 1,3 Hz), ce qui indique que le système d'exploitation détermine la fréquence des potentiels d'action. La fréquence de l'OS et de la fréquence des potentiels d'action montrent également un certain degré de corrélation avec la fréquence des grappes (1,2 + -0,1 Hz) qui indique l'existence d'un facteur qui croise les trois types de fréquence. La fréquence de l'OS et de la fréquence de potentiel d'action sont tributaires de la tension et la fréquence des grappes ne l'est pas. Le système d'exploitation est généré par un flux constant de Na + (Ina p) sensible à la TTX et le riluzole. Enregistrement des canaux individuels, il est établi que le courant est causé par salves d'ouvertures de sodium canal transitoire qui perdent leur l'inactivation. Les cellules M actuels montrent également impliquées dans la génération de l'OS. TEA, Ba2 + et linopirdina d'influence significative sur le système d'exploitation ou de verrouillage (TEA), ou la réduction de leur fréquence (Ba2 + et linopiridina), et empêchent la circulation M rampes de tension. Autres bloqueurs (Cd2 +, 4 - AP, apamina et Cs +), qui affectent les flux impliqués dans des activités génératrices de rythmique dans d'autres cellules (flux de Ca2 +, K + Ca2 + dependientes et Ih) n'a pas affecté de façon significative le système d'exploitation ou les flux M. Curieusement, le Cd2 + et 4 - AP perturber l'activité en rafales. L'application de Cd2 + dans la fixation de tension nous permet d'exclure de la participation et de flux de Ca2 + seuil bas (TI) dans la génération des rythmes d'activité dans les cellules en culture. Ces cellules n'expriment pas l'augmentation du débit. L'étude de l'activité en grappes montre que durant la grappe est l'activation d'un mécanisme qui ne dépend pas du nombre de potentiel d'action précédents et le groupe est en mesure de maintenir l'unité dans le silicium pour 1 s environ et qui est touché par Cd2 + et 4 - AP. L'OS et les grappes peuvent affecter la transmission de l'information somatosensorial. L'OS peut filtrer les entrées favorisant certaines fréquences et de l'activité synaptique en grappes peut transformer les apports en produits rythmique tonique pour le thalamus. Ce mécanisme pourrait jouer un rôle important dans la synchronisation des neurones populations dans le NCD.

Auteur: BOSCH PITA MIGUEL.
Année: 2004.
Université: BARCELONA [www.ub.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA.

Résumé: Les recherches actuelles dans le domaine des cellules souches offre de nouvelles possibilités de traitement pour des maladies incurables du système nerveux, comme c'est le cas avec la maladie de Huntington. Il s'agit d'une maladie héréditaire caractérisée par une dégénérescence sélective des neurones GABAérgicas noyau Estriado. Dans cette thèse, nous avons étudié les mécanismes de survie des cellules souches dans la culture et les facteurs impliqués dans la différenciation vers sélective phénotype GABAérgico. Nous avons développé un protocole in vitro, une différenciation fondée sur l'ajout séquentiel de l'acide rétinoïque (RA) et le chlorure de potassium (KCI). RA favorise la survie des cellules et induit un phénotype neuronaux. Le traitement par KCI sélectivement induit le phénotype GABAérgico. La transplantation de ces cellules avant diferenciadas in vitro, dans le cerveau de rat adulte et un modèle excitotóxico de la maladie de Huntington preuve d'un bon degré de différenciation, de survie et de l'intégration fonctionnelle. Les cellules montrent une survie à long terme, maintenir le phénotype neuronaux GABérgico et d'élaborer des processus neuríticos associés à des contacts éventuels avant et après le sinápticos. Ces résultats soutiennent la possibilité de développer des thérapies cellulaires basées sur la différenciation des cellules souches pour traiter les maladies neurodegnerativas.

Auteur: PUERTOLLANO VACAS MARIA ANGELES.
Année: 2004.
Université: JAÉN [www.ujaen.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS EXPERIMENTALES.
Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS EXPERIMENTALES.

Résumé: Des études pilotes ont montré une augmentation de la prévalence de la tuberculose dans Esquimales du Groenland, tandis qu'une réduction de l'incidence de maladies inflammatoires a également été observée. À l'heure actuelle, ont découvert les raisons pour lesquelles ces événements se produisent, et que la consommation d'aliments riches en acides gras polyinsaturés de la série n-3 (commun dans le régime alimentaire de cette population) dérivé de l'huile de poisson diminue la résistance immunitaire face à des maladies infectieuses. Pour des raisons évidentes, de la modification de la résistance à une infection bactérienne a été testé sur des modèles animaux, dans lesquels l'administration d'un régime riche en huile de poisson augmente le nombre de bactéries viables obtenues de la rate des animaux, et réduit sensiblement la survie de la Animal au cours d'une infection causée par la croissance des pathogènes intracellulaires Listeria monocytogenes. Le présent travail de recherche, nous avons utilisé des souris Balb / c nourris lipídicas régimes alimentaires. Ces souris ont été divisées en quatre groupes expérimentaux: groupe, je nourris avec un régime riche en huile d'olive (AO), groupe II nourris avec un régime riche en huile de poisson (AP), groupe III nourris avec un régime riche en huile de noix de coco (BC) et enfin la Groupe IV nourris avec un régime alimentaire pauvre en 1ipidos (régime témoin). Mis fin à la période d'alimentation lipídicas alimentation des souris ont été infectées avec une souche virulente de L. Monocytogenes. Racine et donc les résultats établi que l'huile de poisson composé principalement des acides gras polyinsaturés de la série n-3 est le plus immunosuppresseur, et donc sur les animaux nourris avec ce régime alimentaire ont montré une plus grande susceptibilité à l'infection par L. Monocytogenes, tandis que l'huile d'olive composée principalement de gras monoinsaturés acides de la série n-9 exerce également un effet suppressif des fonctions immunitaires, mais à un degré moindre que celle promue par de l'huile de poisson. Cette propriété fait de la résistance immunitaire des animaux nourris avec de l'huile d'olive est légèrement supérieure à celle manifestée par les animaux nourris avec de l'huile de poisson. Les propriétés immunomodulatrices de certains 1ipidos présents dans l'alimentation, surtout de l'huile de poisson et l'huile d'olive réduit la survie des souris, et d'augmenter le recouvrement des bactéries viables de la rate, ainsi que de modifier l'activité bactéricide des cellules péritonéale face à une infection expérimentale Induite par L. Monocytogenes. En outre, l'administration de régimes alimentaires contenant de l'huile d'olive ou d'huile de poisson augmente la formation de l'anion superoxyde, avant et après l'infection avec L. Monocytogenes. Dans notre étude montre également que l'administration de régimes alimentaires contenant l'huile d'olive ou d'huile de poisson augmente certains paramètres apoptotiques comme la fragmentation de l'ADN ou de l'activité caspasa-3. Toutefois, l'infection expérimentale de ces cellules avec L. Monocytogenes ne produit pas de synergie dans l'induction de l'apoptose.

Auteur: TÁRREGA MOULARDE CÉLINE.
Année: 2005.
Université: VALENCIA [www.uv.es].
Lieu de l'exposition: CENTRO DE INVESTIGACIÓN PRINCIPE FELIPE.
Lieu de préparation: CENTRO DE INVESTIGACIÓN PRINCIPE FELIPE.

Résumé: Le MAP kinases sont partie du grand groupe de kinases intracellulaires impliqués dans la signalisation cellulaire. Ils les kinases de serinas / treoninas impliquées dans la génération d'une réponse adaptée aux changements survenant dans l'environnement cellulaire. Dans ce travail, réalisé par mutagenèse des MAP kinases mammifères ERK2, nous avons abordées: 1) l'identification de mutations hyperactif de ERK2 basée sur la description préalable gain de fonction des mutations de ce gène chez Saccharomyces cerevisiae et Drosophila melanogaster, et 2), L'étude comparative de l'interaction physique et fonctionnelle de ERK2 leurs activateurs (surtout MEK1) et ses phosphatases inactivadoras (en particulier PTP - SL, STEP et MKP - 3), fondé sur l'identification préalable d'un terrain d'ancrage et caractéristiques similaires dans les différents types de Régulateurs et des substrats de la kinase MAP. Avec ces objectifs, on a analysé l'activité kinase de ERK2 (sauvages et mutantes) in vitro, les procès ont été menés dans TPS - abattre, les études de la levure double-hybride et double analyse d'immunofluorescence, ainsi que les divers types de tests et de la kinase phosphatases. Nous avons caractérisé les résidus Asp319 parmi les déchets de ERK2 sur lui et nous avons identifié certains hyperactivité dans ERK2 une rainure d'ancrage composé, au moins quatre éléments structurels (la boucle L16, la boucle L11, le noeud coulant L5 et hélice électronique) . La gorge est beaucoup plus spécifiques et sensibles à la reconnaissance de ERK2 par leurs inactivadores que leurs activateurs. Nos résultats indiquent la possibilité de moduler l'activité de ERK2, sans affecter directement son activité enzymatique de molécules spécifiques à rejoindre la rainure d'ancrage.

Auteur: FABRA PASTOR MARIA MERCEDES.
Année: 2005.
Université: BARCELONA [www.ub.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE BIOLOGÍA (UNIVERSIDAD DE BARCELONA).

Auteur: VACA SÁNCHEZ MARIA PILAR.
Année: 2005.
Université: MIGUEL HERNÁNDEZ DE ELCHE [www.umh.es].
Lieu de l'exposition: INSTITUTO DE BIOINGENIERIA.
Lieu de préparation: INSTITUTO DE BIOINGENIERIA.

Résumé: Le diabète sucré est une maladie métabolique causé par une auto-destruction ou mauvaise selon les cellules bêta du pancréas responsables de la production et la sécrétion de l'insuline. À l'heure actuelle, des alternatives thérapeutiques, des injections quotidiennes d'insuline ou de la transplantation d'îlots pancréatiques, ont de multiples inconvénients. Trocales les cellules d'origine embryonnaire du fait de leur grande prolifération et la capacité de se différencier en tous les types de cellules du corps, sont présentés comme une source potentielle de cellules bêta pour le développement de thérapies cellulaires pour le diabète. Dans ce papier, nous montrons que par un système de sélection de lignage et de l'ajout de protéines exprimées au cours de l'embryogenèse facteurs du pancréas jour e16.5, en favorisant la différenciation des cellules souches d'origine embryonnaire des cellules sécrétant de l'insuline. Cette souris des cellules souches embryonnaires de la ligne D3 ont été transfectées avec constrcutro géo-réglementée par le promoteur de l'insuline humaine et rejoint le gène de résistance sous higromicina travail fosfoglicerato kinase promoteur. Après le protocole de différenciation et de sélection, les cellules obtenues ont diminué le taux de prolifération, avait une haute expression de l'insuline et Pdx-1 et coespresaban avec l'insuline, l'ancre Péptido-Cy Glut2 à un pourcentage élevé. Il a également montré une sécrétion d'insuline et de peptide C réglementée par le glucose et autres sécrétagogues comme le tolbutamide. Quand transplanté sur les animaux diabétiques ont pu normaliser la glycémie pendant 6 semaines. Avec tout cela dans le présent document propose un protocole de différenciation en mesure d'obtenir un pourcentage élevé de cellules sécrétant l'insuline dans une profession réglementée et d'autres caractéristiques de la cellule. Dans le même temps, une batterie de techniques nécessaires à une caractérisation de phénotype obtenu. Toutefois, l'identification des facteurs libérés au cours du développement du pancréas peut être un outil essentiel pour obtenir des cellules bêta de cellules souches embryonnaires.

Auteur: GALLOT ESCOBAL NATALIA.
Année: 2005.
Université: PAÍS VASCO [www.ehu.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS.

Résumé: Le H2O2 est une composante importante des micro-inflammatoires, générée par l'interaction entre les cellules tumorales et les tissus normaux stromales envahis par le cancer. Dans le mélanome a été proposé que le stress oxydatif élevé micro pourraient contribuer à endommager les tissus adjacents et de favoriser la progression tumorale. La présente étude a été porté à l'étude du développement des métastases MB16 fonction du contenu intracellulaire de glutathion et de déterminer le rôle de H2O2 dans ses machines microbascular adhésion, par le biais d'un schéma de colonisation par des cellules hépatiques de mélanome B16, qui provient de l'interaction moléculaire VLA - 4/VCAM-1. De même, nous avons identifié des sous-populations de cellules avec différents MB16 activité fonctionnelle de la integrina VLA-4 et étudié ses capacités métastatique, avec une attention particulière à leur impact sur les mécanismes de migration et de la proangiogénica endothéliales périvasculaires myofibroblasts en réponse à H2O2. Enfin, le projet s'est concentré sur l'évaluation de l'effet de blocage de VLA-4, avec un antagoniste spécifique synthétiques, et le stress oxydatif, avec un antioxydant naturel-resveratrol-, sur l'introduction et le développement de métastases MB16 cellule. Les résultats montrent que H2O2 stimulé adhesividad de MB16, avec une faible teneur en glutathion intracellulaire, le foie sinusoïdale endothéliale par le biais d'un mécanisme de régulation de l'activation de ces integrina VLA-4. En outre, elle a identifié un sous-groupe de MB16 cellulaire avec VLA-4 en état constitutivement active qui, à son tour, était responsable du développement des métastases et la capacité proangiogénica et estromagénica en réponse à H2O. "Enfin démontré que le traitement avec un antagoniste de VLA-4 et resveratrol réduit à l'introduction et au développement de métastases par le biais de son effet inhibiteur sur la rétention des cellules tumorales circulant microvasculaire. Finalement, les résultats ont conclu que la integrina VLA-4 réglemente les effets prometastáticos attirés par le H2O2 pendant le foie propagation du mélanome B16. Etude de synthèse des molécules antagonistes de VLA-4 peuvent être d'un grand recours pour tenter de réaliser de nouveaux progrès dans la lutte contre le cancer de la peau.

Auteur: CANTÓN SERRANO IRENE.
Année: 2005.
Université: PAÍS VASCO [www.ehu.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGÍA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGÍA.

Auteur: SOLAUM AGUIRRE MIREN SORNE.
Année: 2005.
Université: PAÍS VASCO [www.ehu.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA.
Lieu de préparation: DTP. BIOLOGÍA CELULAR E HISTOLOGÍA. FACULTAD DE MEDICINA.

Résumé: Cette étude visait à étudier l'activité fonctionnelle du colon carcinoma murins 51B au cours de l'interaction avec les cellules endothéliales sinusoïdales dans le foie, des facteurs tels que proinflamatorios LPS, ainsi que l'effet d'une antiangigénico naturel est le Endostaatina dans le développement des métastases pilote dit carcinome Du colon. Les résultats obtenus dans cette étude montrent que l'ESS encourage CC-51B portant le nombre de membres, la migration et la prolifération de la tumeur et de l'action de l'conditionné moyen de ESH de CC-21B actif à la fois sur la translocation nucléaire de Nfkappa B, selon l'expression de TNF-alpha par cancer du côlon. Tout ceci a conduit à l'ERM ESH augmentation de métastases hépatiques produites par le CC-51B. En outre, cette étude caractérise l'influence des endotoxines bactériennes dans la capacité de CC-51B pour produire des métastases. LPS activé pour CC-51B, rejoignant directement à la cellule tumorale, en augmentant le développement de métastases hépatiques en augmentant le respect des ESH, la migration et la prolifération, une association de molécules d'adhésion VCAM-1 ou VLA-4 sur exprimées par l'action du LPS TNF-alpha et que des anticorps spécifiques inhibé l'augmentation du nombre de membres causées par LPS. Además el LPS estimulo la production de TNF-tumorale alfa, VÍA NF-kappaB, así como la expresión de votre récepteur, d'engager como mediador del efecto del prometastático LPS, siendo tanto activador du facteur de transcripción kappaB, comme inductance de metástasis, puisque Lorsqu'ils sont utilisés directement trouvé que cela a produit une augmentation significative de la même chose. Le VEGF est un autre facteur qui a contribué à l'activation de CC, soit directement sur la tumeur ou indirectement à faciliter l'action des TNF-alpha en augmentant l'expression de votre autoradio. Enfin, l'analyse de l'effet de endostatina comme anti-angiogénico dans ce modèle expérimental, a montré que les souris recevant endostatina retardé le développement des métastases. Historlógico L'analyse a montré que le volume des métastases ont diminué en raison d'un plus petit nombre de grandes et petites métastases chez des souris traitées, mais le endostatina pas donné suite à l'apparition de très petites métastases. Utilisation de la cytométrie en flux a montré que la liaison de endostatina était spécifique à l'ESS par rapport à d'autres types de cellules du foie et sinusoide cellules tumorales elles-mêmes.

Auteur: EGUIZABAL ARGAIZ CRISTINA.
Année: 2005.
Université: PAÍS VASCO [www.ehu.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGIA.
Lieu de préparation: UNIVERSIDAD DEL PAIS VASCO.

Résumé: Les cellules germinales primordiales (PGCs) sont les précurseurs des cellules de la lignée germinale, car de nombreux facteurs contribuent à leur prolifération, à la fois in vivo et in vitro. Certains de ces facteurs peut jouer son rôle de mitogens (par exemple FGFb, SF, FRSK, RA et TNF-A), tandis que d'autres participent allongement de la survie des cellules (par exemple, IL-4, IL-6, IL-11, SF et FRV). La cytokine interleukine-2 (IL-2), est un élément essentiel dans le développement de la réponse immunitaire, car elle constitue le principal facteur de la croissance et la différenciation des lymphocytes T et B En outre, il a été montré que l'IL-2 en Le testicule adulte est capable de moduler la fonction des cellules de Leydig, inhibant la production de testostérone. Cependant, le rôle que pourrait jouer sur PGCs il n'est pas encore sûr. Pour s'acquitter de sa tâche, l'IL-2 se lie à des récepteurs spécifiques (RIL-2), qui sont composés d'au moins trois sous-unités (alpha, bêta et gamma). Dans cet article, nous avons étudié, d'une part, l'expression de l'IL-2 * System / RIL-2 et isolées PGCs à différents stades du développement embryonnaire et, d'autre part, l'implication de l'IL-2 dans la prolifération cellulaire dans les cultures en PGCs vitro. Nos résultats montrent que les PGCs exprime la fonction complexe récepteur de l'IL-2, mais ne produisent pas d'IL-2. En outre, l'IL-2 est capable d'augmenter la prolifération des PGCs, à travers paracrines et autocrines pas. Par conséquent, il semble probable que le système de l'IL-2 participe activement à la prolifération des PGCs in vivo au cours des processus de migration et la colonisation de la pointe vers la même gonadales.

Auteur: EGILEGOR IRAGORRI EIDER.
Année: 2005.
Université: PAÍS VASCO [www.ehu.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE ODONTOLOGÍA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS Y TECNOLOGÍA.

Résumé: Le carcinome spinocellulaire sont rechute accéléré la progression des tumeurs, qui s'est étendue à télécommande organes associés à un plus mauvais pronostic. Ces dernières années, il a mis en évidence l'importance de la tumeur dans la régulation de la micro-propagation du cancer et de ses métastases. Dans un carcinome murins de 212 variantes de PAM et PAM LY-2 implication du microenvironnement tumoral sur la croissance et la progression métastatique est médiée par un mécanisme dépendant de l'activation de NFkB, les caractéristiques qui distinguent principalement cellulaires variantes trouvé constitutivement active dans la variante GPA LY -2, Lui donnant un caractère plus agressif et métastatique sécrètent des niveaux élevés de cytokines proinflammatoires et proangiogénicas que IL-1alfa, IL-6, KC et GM-CSF. Afin d'identifier les médiateurs moléculaires comportement proangigoénico et réglementé pour des métastases hépatiques micro-facteurs dans les deux variantes du carcinome des cellules GPA, ce projet a soulevé les objectifs suivants: Premièrement, PAM variantes ont été comparées à l'égard de certaines molécules connues progression tumorale, en regardant les Même temps, sa répartition de la population et les agents proinflamatorios répondu. Deuxièmement, un modèle de métastases hépatiques expérimentales variantes de PAM pour identifier la structure de leurs métastases hépatiques et histologiques stromales composants qui intègrent son soutien. Troisièmement, la comparaison des réponses au cours de l'interaction fonctionnelle entre les variantes PAM et micro facteurs solubles dérivés de la sinusoïdale cellules endothéliales et hépatiques étoile formant le stroma tumoral in vivo. Enfin, en comparant leurs profils grâce à la sécrétion d'une différence de l'analyse protéomique (2D-PAGE) et une étude protéomique d'expression pour la détection et l'identification par spectrométrie de masse MALDI-TOF type de molécules sécrétées d'une manière spécifique par chacune des variantes d'un carcinome AMP.

Auteur: SANJUAN PLÁ ALEJANDRA.
Année: 2006.
Université: VALENCIA [www.uv.es].
Lieu de l'exposition: ESCUELA UNIVERSITARIA DE ENFERMERIA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE FARMACIA.

Résumé: Cette thèse étudie le rôle des espèces réactives de l'oxygène (ROS) à l'origine mitochondriale de la cellule adaptation aux faibles concentrations d'oxygène. Concrètement, l'activation du facteur de transcription régulation de l'expression des gènes principalement en réponse à l'hypoxie: la soi-disant «facteur inductible par l'hypoxie-1 (HIF-1). Utiliser un roman antioxydant spécifique des mitochondries (MitoQ) a montré que les mitochondries ROS sont nécessaires à la stabilisation de la sous-unité, l'un des deux sous-unités des protéines qui composent HIF-1. Toutefois, comme l'oxyde nitrique (NO) pourraient moduler le rôle des mitochondries ROS dans la stabilisation de HIF-1, ce travail suggère que NO dérivé d'une éventuelle nouvelle nitric oxide synthase mitochondriale protéine pourrait être utile d'aborder les deux médiateurs de la connexion sur la signalisation routière HIF -1. Des études préliminaires de caractérisation de cette nouvelle protéine chez l'homme montrent que a une expression ubiquitaire et qui est située dans les mitochondries, mais sa fonction demeure inconnue. En outre, étant donné l'importance de ROS mitocodriales dans le développement de nombreuses maladies, et cette thèse est effectuée avant la caractérisation d'une nouvelle molécule (MitoL) avec le potentiel d'agir comme antioxydant mitochondrial et explore la contribution potentielle des ROS dysfonctionnement mitochondrial dans le domaine respiratoire Par modification de la chaîne d'assemblage de son terminal enzyme cytochrome c oxydase (COX). Ce modèle est utilisé dans une cellule après silencing in vitro une protéine impliquée dans la biogenèse de la COX (SURF1) en utilisant l'interférence ARN.

Auteur: FERRERO GUTIERREZ AMAYA.
Année: 2006.
Université: OVIEDO [www.uniovi.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA.

Résumé: La contamination des aliments avec des composés toxiques provenant des algues marines origine est un phénomène fréquent qui est associé à des épisodes de prolifération d'algues microscopiques, mais le risque potentiel pour la santé humaine en raison de la présence de ces toxines dans les mollusques ne sont pas encore élucidés. Comme l'objectif de la thèse, a été soulevée à étudier les effets au niveau du système nerveux central, à l'exposition des biotoxines marines d'algues origine alimentaire, ont été utilisées pour cette cultures primaires de neurones et des cellules gliales du cerveau de rat comme système expérimental. La première partie du travail s'est concentrée sur l'étude de l'acide okadaico, chef du groupe dit des toxines de type DSP (Diarrhetic Shellfish Poisoning) pour avoir causé une caractéristique du syndrome de diarrhée après avoir mangé des mollusques contaminés, et l'inhibiteur de deux proteín phosphatases général mammifères : Proteín phosphatase 1 et proteín phosphatase 2A. Okadaico acide abaisse neuronales et gliales la fois la viabilité par le biais de mécanismes qui impliquent une dégénérescence paramètres caractéristiques de l'apoptose (fragmentation de l'ADN, la condensation de la chromatine et la fragmentation, l'activation des caspases) et modifie divers types de proteín kinases cellulaires, parmi eux comprend MAP kinases (ERK 1 / 2 , P38 MAP kinase, Jun kinase), proteín kinases cycline dépendantes et fosfo-inositol-3-kinase. De même, l'exposition à l'acide okadaico accru la vulnérabilité des cellules gliales oxydatif de dommages au cerveau, qui se caractérise par une augmentation de la formation de radicaux libres et par l'altération de systèmes enzymatiques antioxydants catalase et Glutathion Peroxidasa bien que dans le non-système enzymatique glutathion . Les expériences réalisées avec les cultures mixtes neurogliales contribué à établir pour la première fois l'implication de proteín phosphatases, notamment proteín phosphatase 2A, dans l'activité de neuroprotectora les cellules gliales du système nerveux central contre les dommages oxydatifs. Enfin, ont été réalisées des études comparatives sur les effets de l'acide okadaico neural et des substances chimiques de même nature: l'acide 19-iso-okadaico et dinofisistoxina-2. Ces études ont permis d'obtenir pour la première fois des données sur l'action biologique de ces toxines et de l'appui de son classement dans le groupe DSP en fonction de leur mécanisme d'action. Les résultats indiquent que les cultures primaires de neurones du cervelet sont un système expérimental approprié pour l'étude du mécanisme d'action de ces toxines, y compris pour l'élaboration de son pouvoir par rapport à l'acide toxique okadaico, chef du groupe.

Auteur: ZAFRA LÓPEZ DELIA.
Année: 2006.
Université: BARCELONA [www.ub.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE BIOLOGÍA E INSTITUO DE INVESTIGAICÓN BIOMÉDICA (IRB).

Résumé: Il existe de nombreuses études sur les effets des tungstato de sodium antidiabétiques dans différents modèles animaux de type 1 diabète et le type 2. Toutefois, avant le début de cette thèse n'a pas été enquêté sur le mécanisme d'action au niveau moléculaire de ce composé. Parce que les modèles animaux étudiés les tungstato de sodium exerce ses effets sur la même portion d'insuline sur les tissus, notre hypothèse de travail était que le tungstato de sodium pourrait être agissant sur l'un des composants de la cascade de signalisation de cette hormone. Grâce à l'analyse de la phosphorylation par Western Blot tests et activité kinase indique que le traitement par tungstato de sodium, à la fois dans les cellules CHOIR (un modèle idéal pour l'étude des cascades de signalisation de l'insuline) et de cultures primaires d'hépatocytes (d'un système plus proche de la physiologiques) , Activé par Ras / Raf / MEK / ERK par le biais d'un mécanisme indépendant de la phosphorylation du récepteur de l'insuline. Cette activation des mitogenic chemin conduit à la phosphorylation de GSK3 indépendant activation de la voie de la PL3K-PDK1-PKB/Akt mais dépendant ERK et probablement p90rsk. De plus, comme la fois sensible à la PKC protéines G toxine pertúsica sont impliqués dans le mécanisme d'action de tungstato, puisque l'inhibition de cette protéine bloque les effets des tungstato sur l'activation des mitogenic itinéraire. Dans les cultures d'hépatocytes primaires fois l'activation de ERK1 / 2 comme les protéines G sont nécessaires à la stimulation de la synthèse de glycogène observée en réponse à tungstato dans ces cellules. Enfin, le traitement des diabétiques des rats par l'injection estreptozotocina avec tungstato standardise la phosphorylation de certaines protéines dans la cascade de signalisation de l'insuline, ainsi que l'expression de certaines protéines dont les niveaux sont altérées par le diabète. En conclusion, ces données indiquent que tungstato de sodium pourrait être un bon candidat pour le traitement du diabète.

Auteur: BEDIA GIRBÉS CARMEN.
Année: 2006.
Université: BARCELONA [www.ub.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE QUÍMICA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE QUÍMICA.

Résumé: Le esfingolípidos sont une famille de composés lipidiques importantes structurelles et fonctionnelles de la cellule. La céramide, esfingolípido central dans le métabolisme du reste de esfingolípidos, est un second messager cellulaire et sa fonction principale est de l'induction de l'apoptose. La dégradation de céramide travers ceramidasas et de sphingosine kinases mène à l'autre esfingolípido d'une grande importance, esfingosina - 1 - fosfato, qui possède des propriétés prolfierativas et mitogéncias, ils restent totalement opposés au rôle de céramide. Le esfingosina - 1 - fosfato peuvent à leur tour être dégradée par une enzyme esfingosina - 1 - fosfato liasa. Par conséquent, la ceramidasas et esfingosina - 1 - fosfato liasa sont d'une grande importance et les enzymes qui régulent reóstato ceramida/esfingosina-1-fosfato, qui peuvent déterminer la survie de la cellule. Afin de déterminer l'activité de ces enzymes et ont une méthode efficace de trouver de nouveaux inhibiteurs de l'enzyme entre les bibliothèques esfingolípidos des analogues, ont été conçus et synthétisés certains substrats fluorogéncios. Ces supports sont conçus à l'action après avoir subi l'enzyme, conduisant à une instabilité aldéhyde de souffrir bêta de l'élimination umbeliferona libération, qui est fluorescent. Suite à cette idée et exigences structurelles de ces enzymes pour leurs substrats, ont été conçus et synthétisés les deux substrats fluorogénicos. De ce nombre, une méthodologie a été mise au point pour le dépistage de masse des bibliothèques de molécules synthétisées dans notre groupe, comme d'éventuels inhibiteurs de l'enzyme. Ces méthodes, qui a eu lieu sur les plaques 96 puits, d'abord mis au point in vitro en utilisant comme source d'enzymes homogenados de foie de rat. Ultérieurement, ces essais ont été appliqués sur les cultures cellulaires. Dans le cas de ceramidasas, il y avait une méthode particulière pour déterminer l'activité de ceramidasa acide utilisant les cellules sobreexpresaban cette enzyme. Dans le cas de esfingosina - 1 - fosfato liasa, est une méthode valable pour déterminer son activité en utilisant différentes lignées cellulaires. Ultérieurement, ces méthodes ont été utilisées pour le dépistage de masse de bibliothèques de composés, y compris instamment prié de bons candidats. L'une des molécules testées dans des essais dans des cellules intactes a montré un certain toxicité est profondément étudié par la preuve de la biologie cellulaire.

Auteur: GIRAL ARNAL HÉCTOR.
Année: 2006.
Université: ZARAGOZA [www.unizar.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE VETERINARIA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE VETERINARIA.

Résumé: Les principaux physiologiques expression de MAP17 se concentre sur la partie proximale des tubules du rein contourage. Il n'a pas encore été possible de déterminer la fonction physiologique de cette protéine, bien que des études récentes ont mis en MAP17 dans la régulation du transporteur de phosphate du rein, NaPi - IIa. Cette implication dans le contrôle de l'activité du convoyeur est liée à la formation de complexes macromoléculaires par l'interaction avec les protéines ADS, les membres de la famille NHERF (NHERF1 - 4). Ces quatre protéines interagissent avec les deux MAP17 avec NaPi - IIa, à travers une question de l'ADS contraignant domaines carboxyle situé dans la fin des deux protéines. Le coexpresión de MAP17 avec des protéines NHERF3 (ou NHERF4) dans la lignée cellulaire OK, induit un processus d'internalisation des phosphates du transporteur membranaire apicale à l'appareil de Golgi, ce qui provoque une diminution de l'activité de transport de phosphate. Cet effet n'a pas eu lieu avec des protéines NHERF1 et 2. Le travail réalisé sur cette thèse destinés à être un prolongement des études qui sont liés à des protéines ADS et MAP17 avec régulation de transporteur de phosphate, NaPi - IIa, dans les tubules rénaux. Pour cette raison, nous étudions les interactions possibles entre MAP17 et ADS autres protéines qui sont exprimées dans la partie proximale des tubules: PIST / CAL et Shank2E. Nous avons déterminé que les deux protéines ADS interaccionaban avec MAP17 grâce in vitro, des techniques biochimiques. En outre, nous notons que la collaboration expresión de Shank2E avec MAP17 induit un changement dans le schéma d'expression de la protéine ADS, qui semble maintenant à l'appareil de Golgi. La protéine ADS PIST, en revanche, semble également interagir avec le convoyeur NaPi - IIa. Depuis la collaboration expresión de deux protéines, PIST et NaPi - IIa sur OK dans les cellules, a également abouti à l'expression du transporteur dans l'appareil de Golgi. Il est fort probable que la surexpression de la protéine PIST induite par le "rapt" transporteur exprimé de novo et, semblable à ce qui se passe avec le canal chlorure CFTR. Pour essayer de minimiser ces effets de la surexpression de la protéine dans la lignée cellulaire OK, nous avons décidé d'identifier des séquences de gènes endogènes dans cette lignée cellulaire. Les gènes clonés nous avons été associés à la convoyeur NaPi - IIa: MAP17, NHERF1, NHERF3, NHERF4, PIST et AKAP10. Elle a également obtenu d'autres séquences partielles de gènes endogènes cellule OK notamment: Shank2E, ezrina, SGLT1, SGLT2 et NHE2. Nous obtenons un anticorps capable d'identifier une protéine endogène MAP17 cellules OK. Avec l'aide de cet anticorps a été déterminé que l'expression de MAP17 dans lignée cellulaire WOK (Warnock OK) a été affectée par des conditions telles que le degré de confluence des cellules et la concentration de Sérum de veau foetal dans le milieu de culture. Il a été constaté que le transporteur de phosphate endogène NaPi4, a également été touché de la même façon par ces facteurs. Enfin, des différences importantes ont été trouvées quand il a étudié les lignées cellulaires que nous avons appelé WOK et NOK. Les deux lignes provenant de la ligne isolée par le groupe Koyama en 1978, mais les cellules WOK correspondent aux cellules qui ont été étudiés en tant que modèle de la partie proximale des tubules, alors que le NOK cellules ont été obtenues à partir des banques de tissus de l'ATCC (American Type de culture cellulaire ). Ces deux lignées cellulaires ont montré des différences marquées, tant morphologique, génétique et fonctionnel. Les différences étaient plus importantes: L'absence d'expression des ARNm des gènes NHERF4 et PTH1R en NOK lignée cellulaire, ainsi que d'une manière significative une diminution de l'expression des transporteurs NaPi4 et NHE3; Une activité de transport de phosphate réduite dans les cellules par rapport aux cellules WOK NOK, qui a été Liés à des différences dans l'expression du 8 transpo 4b7 rtador NaPi4 entre les deux lignées cellulaires. L'incapacité des cellules NOK à produire un effet inhibiteur sur le transport de phosphate dans la réponse au traitement à l'hormone parathyroïdienne (PTH), qui est corrélée avec l'absence d'expression du récepteur PTH1R dans les cellules NOK. Tous ces témoignages indiquent que la lignée cellulaire WOK semble être un modèle acceptable pour l'étude de la relation fonctionnelle entre les protéines NHERF, MAP17 et convoyeur NaPi4, tout NOK cellules ne sont pas une lignée cellulaire adaptée à cette fin.

Auteur: MARTÍNEZ OCAÑA VERÓNICA.
Année: 2006.
Université: BARCELONA [www.ub.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE FARMACIA.
Lieu de préparation: FACULTAT DE FARMÀCIA - UNIVERSITAT DE BARCELONA.

Résumé: Ce travail s'inscrit dans le cadre d'un projet de recherche axé sur la recherche et la synthèse de nouveaux tensioactifs dérivés d'acides aminés. Les agents de surface sont des composés chimiques en raison de ses propriétés physico-chimiques et la peau peut provoquer une irritation des yeux. Par conséquent, il est intéressant de développer de nouveaux composés qui sont plus biocompatibles surfactants qu'ils utilisent actuellement. En outre, les tests de Draize, basée sur l'utilisation d'animaux, sont les seuls acceptés et les méthodes nécessaires pour évaluer officiellement l'une irritation cutanée et oculaire préalable à la commercialisation de nouveaux composés. Toutefois, en raison de problèmes sociaux, éthiques et scientifiques, il est nécessaire de disposer de méthodes qui permettent de remplacer l'expérimentation animale dans les tests toxicologiques. Pour cette raison, a étudié l'effet potentiel d'absorption cutanée et irritant à l'oeil tensioactifs issus de différents acides aminés en utilisant diverses méthodes alternatives à l'expérimentation animale basés sur des modèles cellulaires et organotípicos. Pour évaluer les irritations oculaires a été utilisé, en premier lieu, hémolyse de l'essai fondée sur un modèle cellulaire. L'essai existant tensioactifs dérivés d'acides aminés sont menso irritants commerciaux œil qui tensioactifs utilisés comme référence. En outre, il semble que le fardeau de surfactant détermine ses tissus biologiques, de sorte que les anioniques a un plus grand effet sur les protéines et sur les membranes cationiques. Il a aussi été évaluée par une irritation des yeux essai HET - CAM - CAM et le SCT qui sont fondés sur un modèle organotípico, la membrane corioalantoidea oeuf poule. Aux fins de comparaison a également été faite à l'épreuve Draice yeux de certains des composés. Les résultats des essais in vivo ont montré que la membrane corioalantoidea oeuf poule est un modèle trop sensible aux agents de surface, et il est écarté de son utilisation pour l'évaluation de ce type de composés. Pour évaluer l'd'irritation cutanée a été utilisé dans la culture des lignées de cellules unique (fibroblastes 3T3, fibroblastes 3T6, kératinocytes NCTC2544, kératinocytes HaCaT) et ont analysé divers marqueurs de l'irritation. Tout d'abord, il évalué la cytotoxicité induite par les composés d'essai de captage neutre rouge et en réduisant le tétrazolium sel et calculé les concentrations de surfactant qui inhibée par environ 50% de la viabilité cellulaire (Cl50, inhibitrice de concentration 50). Selon les résultats du test, a proposé un modèle de prévision de la ligne de fibroblastes 3T3, de sorte que les composés d'un Cl50 moins de 50 µ g / ml d'irritants potentiels élevés, composés d'un Cl50 entre 50 et 100 µ g / ml sont modérés et Irritantes composés d'un Cl50 plus de 100 µ g / ml, présente un faible potentiel irritantes. Il a aussi étudié la production et la libération des interleuceina 1 Alpha, un médiateur proinflamatorio, en ligne avec les kératinocytes NCTC 2544. Selon les résultats issus de tensioactifs acides aminés ont une plus faible capacité à induire neosíntesis de cytokines surfactants que, par conséquent, ont moins de capacité de déclencher une réponse inflammatoire. Cependant, l'implication de ce marqueur de l'intensité des réactions inflammatoires ne sait pas très bien ce que devrait utilizares avec d'autres marqueurs. Enfin, il a analysé l'accumulation intracellulaire de lipides neutres comme un possible marqueur de l'irritation. La plupart des cellules de mammifères emballé neutre gouttelettes de lipides sous forme de sphériques intracelul 8 en ares. Pa. 732 prions pour que ces être neutre lipides jouent un rôle très important dans la réparation de la membrane quand il subit une forme d'agression, par conséquent, est proposé comme un marqueur potentiel. Il a étudié l'accumulation de lipides neutres dans la lignée cellulaire de kératinocytes NCTC 2544 suite au traitement avec différents agents de surface. Pour la détection des lipides neutres a été utilisé la couleur rouge de nilo qui est spécifique et neutre lipides analyse a été effectuée en utilisant citofluorometría et microscopie par fluorescence. Les agents de surface augmente avec la fluorescence induite par un profil de concentration dépendante. En outre, l'augmentation de la fluorescence a été détecté avant vu des augmentations de lactate-déshydrogénase activité dans le milieu de la culture, d'un marqueur de dommages à la membrane. Ce fait implique que l'accumulation de lipides neutres est un marqueur qui indique dommages à la membrane avant la mort des cellules. Enfin, aux fins de comparaison a été conduit également des essais de Draize dermique avec certains des composés. L'essai existant tensioactifs dérivés d'acides aminés ont été classés comme légèrement irritant. En outre, les résultats ont montré que les tests in vitro sont plus sensibles et peuvent détecter les petites différences dans le potentiel de composés irritants, surtout quand il s'agit de composés ayant un potentiel irritants légers et modérés.

Auteur: DURAN PRADO MARIO.
Année: 2006.
Université: CÓRDOBA [www.uco.es].
Lieu de l'exposition: CAMPUS RABANALES.
Lieu de préparation: CAMPUS DE RABANALES.

Résumé: Dans cette thèse de doctorat porte sur l'étude des récepteurs somatostatinta porcs (sst) et de nouveaux tronqué isoformes de sst5 humains et porcins, en essayant d'établir leur lien éventuel avec la normale et pathologique processus cellulaires. Premièrement, il a été cloné porcs récepteurs exprimés dans l'hypophyse, psst1, psst2, psst3 et psst5A, le plus important impliqué dans le contrôle de la sécrétion de l'hormone de croissance (GH). Ultérieurement transfectaron dans les modèles cellulaires hétérologues composé leur capacité à réguler le niveau de l'AMP que le libre cytosolique de calcium dans leur réponse à des ligands, de la somatostatine (SRIF) et cortistatina (TSA). En outre, grâce à l'étude de l'interaction physique FRET, il a été observé que psst existent sous la forme dimérica et oligomérica peut également heterodimerizar de façon sélective. L'un de ces récepteurs, psst2 montré un profil pharmacologique et fonctionnelle typique sst2, mais certaines caractéristiques uniques en termes homodimerización / dissociation et internalisation en réponse à SRIF. Au cours de la caractérisation des psst, il a été cloné tronqué Deux isoformes de psst5 appelé psst5B et psst5C, 6 et 3 domaines transmembranaires (DTMs), à la fois fonctionnels et qui répondent sélectivement à SRIF et de la TSA. Ces récepteurs sont situés principalement dans l'accumulation intracellulaire et colocalizan avec isoformes pas déçus, pour modifier la situation typique de cette dernière dans la membrane plasmique quand coexpresan dans différents modèles cellulaires. Deux isoformes ont été clonés tronqué le sst5 humain similaire à la porc, appelé hsst5B et hsst5C, 5 et 4 DTMs respectivement. Ils comportent de la même manière analogue à leurs porcheries en termes fonctionnels, la localisation subcellulaire et de l'interaction physique avec hsst pas tronqué, et sont également présents dans Pituitary tumeurs et des tumeurs du sein, où coexpresan avec d'autres hsst. Son contransfección avec isoformes pas tronquée hsst2 et hsst5 abouti à l'interruption de leur capacité fonctionnelle, ce qui réduit la capacité de médiation augmentation du niveau de la libre cytosolique de calcium en réponse à SRIF et CST.