CULTURE DE TISSU

Auteur: CAÑADILLAS LÓPEZ M. SAGRARIO.
Année: 2004.
Université: CÓRDOBA [www.uco.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA.
Lieu de préparation: UNIDAD DE INVESTIGACIÓN HOSPITAL REINA SOFÍA , CÓRDOBA.

Résumé: Les parathyroïdes glandes constribuyen le bon fonctionnement de nombreux organes et types de cellules à travers laquelle ils exercent un contrôle sur le fonctionnement de la concentration de calcium (Ca2 +) dans une fourchette physiologique. La cellule paratiroídea est capable de détecter de légères modifications dans la concentration de Ca2 + extracellulaire, qui répond en modifiant la sécrétion de l'hormone parathyroïdienne (PTH). La capacité de la cellule à parathyroïde sens changements dans la concentration de Ca2 + est due à l'expression dans sa membrane des récepteurs de calcium (CaR). Le CaR appartient à la famille des récepteurs couplés aux protéines G (GPCRS): l'activation par contraignant à le ligand (Ca2 +) génère des signaux intracellulaires qui aboutissent à l'inverse de la réglementation PTH sécrétion et la prolifération des cellules, ainsi que dans la régulation de l'expression de certains Gènes. Par conséquent, le calcium agit comme un régulateur de la fonction parathyroïdienne, à la fois de sécrétion de l'hormone, et au niveau de l'expression des gènes, mais mécanismes intracellulaires impliqués dans la réponse cellulaire à la calicot ne sont pas connus avec précision. Le CaR de stimulation, éventuellement par le biais d'une augmentation de calcium intracellulaire (Cai), de l'actif la phospholipase A2 (PLA2), qui fait la synthèse des acides Araquidónico (AA). Nous savons pourquoi l'AA en agissant comme médiateur dans l'inhibition de la sécrétion de l'hormone parathyroïdienne (PTH) pour le calcium. Les données préliminaires de notre laboratoire a montré que la hausse de calcium extracellulaire régule l'expression des gènes des récepteurs de la vitamine D (VDR) dans les cellules parathyroïdes. Depuis le calcium activé par PLA2 - AA est possible que le AA réguler l'expression des gènes vdr depuis ce métabolite dans d'autres cellules est liée à expersión de certains gènes. En outre, il a été récemment démontré dans différents types de cellules, la capacité du CaR pour déclencher une cascade de MAPKS (protéine kinase activée par mitogenic). Cette étude a montré l'implication extracellulaire, conduisant à une inhibition de la sécrétion de PTH et le règlement positif de l'expression ARNmvdr.

Auteur: FLAMES BONILLA NURIA.
Année: 2004.
Université: MIGUEL HERNÁNDEZ DE ELCHE [www.umh.es].
Lieu de l'exposition: INSTITUTO DE NEUROCIENCIAS.
Lieu de préparation: INSTITUTO DE NEUROCIENCIAS.

Résumé: Le cortex cérébral est la région la plus complexe du cerveau de mamíferon. Nous pouvons groupe de neurones dans deux catégories principales: les neurones de projection, également appelée pyramidale neurones et les neurones interneuronas et de boucle locale. Les neurones de projection sont excitadoral (utilisé comme un neurotransmetteur du glutamate), au contraire, sont interneuronas inhibitrice (GABA utilisé). Pour un bon fonctionnement du cortex cérébral, il est nécessaire d'avoir une coordination entre le délicat activité des neurones et interneuronas de projection. Le interneuronas corticaux proviennent de l'extérieur du cortex cérébral, le subpallium, et parvenir à leur destination par le biais d'une longue migration tangentielle furante développement. Cette thèse décrit mecanísmos moléculaires impliqués dans l'orientation de cette migration. La plupart des interneuronas né dans une région appelée Eminence Ganglionar Medial et migrent dorsalemente la croûte. Nous avons découvert que, répulsifs signaux de la partie ventrale de telencéfalo coopérant avec les signaux corticaux attrayant pour guider interneuronas la croûte. L'analyse de la double souris mutantes aux protéines Slit1 et Slit2 montré que sa fonction n'est pas nécessaire que la répulsion de la partie ventrale interneuronas. Plusieurs expériences en embryologie expérimentale, et l'analyse de souris mutantes nous a permis d'affirmer que la protéine Neuregulina - 1 avec la signalisation par l'intermédiaire de son récepteur ErbB4, est responsable, au moins en partie de l'activité corticale attrayant.

Auteur: NAVAL MARINO MARIA DEL MAR.
Année: 2005.
Université: POLITÉCNICA DE VALENCIA [www.upv.es].
Lieu de l'exposition: UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE VALENCIA DEP. BIOTECNOLOGÍA.
Lieu de préparation: UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE VALENCIA.

Résumé: RÉSUMÉ: Parmi les maladies qui touchent de melon, Cucumis mélo L., causées par les virus causant de lourdes pertes de] la production. La lutte méthodes préventives sont inefficaces dans de nombreux cas, inexistants et phytosanitaires disponible] agriculteur. Par conséquent, le développement de nouveaux cultivars avec une résistance génétique est la meilleure stratégie de lutte. Dans ce contexte, le génie génétique est un outil précieux dans l'amélioration des programmes visant à l'introduction de la résistance aux maladies, en permettant l'utilisation de sources de variation extraespecífica et d'aborder les stratégies basées sur l'utilisation de la résistance provenant de l'agent pathogène. Dans le cadre de l'étiologie virale de la maladie, le dépistage du melon, causée par le virus de taches nécrotiques de melon (MNSY), causant de graves pertes. Afin d'ouvrir une nouvelle voie menant à des cultivars de melon avec résistance à la maladie, l'objectif central de cette thèse a été d'obtenir des plantes transgéniques de melon, cv. Arizo (type de Gaule) avec des séquences de gènes liés à la représentation] icasa, de protéines et de protéines couvrir circulation de ce virus. Bien que la transformation génétique est devenue une technique standard dans certains laboratoires, leur application dans des génotypes (par exemple, celles qui sont pertinentes du point de vue de l'amélioration) est loin d'être systématique, car il existe une forte dépendance de la réponse morfogénica In vitro, le respect de Génotype. Par conséquent, dans la première phase de ce projet ont été entrepris diverses études pour adapter la méthode de transformation par Agrobacterium (mis au point dans notre laboratoire dans les différents types de melon)] sélectionné génotype (cultivar Arizo type de Gaule). Plus précisément, on a étudié l'évolution de la structure polisomático dans les organes utilisées comme source d'explant (en savoir cotylédon, feuille, hypocotyle), la régénération de l'école primaire d'explants (cotylédon et feuilles) dans un milieu de culture avec différents équilibres hormonaux, et de la réaction après l'infection et Cultivo collaboration avec A. Tumefaciens. Dans ces essais ont été réalisés avant informateur GFP transfert de gènes, qui permet de suivre le cours du processus de transformation de manière directe, et le gène asnA de E. Coli, qui encode un asparagina synthétase et pourrait conférer une certaine plus grande tolérance à la salinité. Une fois adapté la méthode de traitement de la géno- type choisi, ont été menées à bien les transformations séquences génétiques des gènes de replicasa, de protéines et de protéines pont chiffre d'affaires MNSY. Suite à la caractérisation moléculaire, les plantes transgéniques ont été évaluées en utilisant un dosage biologique qui implique mécanique inoculation du virus et l'analyse ultérieure de l'infection. Il a été constaté qu'un pourcentage élevé des plantes transgéniques est resté en bonne santé, ou ont moins de blessures dans les cotylédons inoculés, relevant aussi, le pourcentage de plantes avec infection systémique.

Auteur: CASTELBLANQUE SORIANO LOURDES.
Année: 2005.
Université: POLITÉCNICA DE VALENCIA [www.upv.es].
Lieu de l'exposition: UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE VALENCIA BIOTECNOLOGÍA.
Lieu de préparation: UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE VALENCIA.

Résumé: RÉSUMÉ: Les plantes ornementales sont des produits de consommation pour lesquels il existe une demande en augmentation continue du yen qui apreéian surtout la nouveauté et de l'attractivité. De l'élevage de plantes ornementales se concentre sur deux personnages ont conduit au consommateur final (par exemple, les changements dans l'architecture de la plante, de l'adaptation aux nouveaux formats, de retarder la sénescence, de la modification de l'architecture, de la couleur, ftagancia et de la forme de la fleur, etc.) Ou caractères irigidos producteur (résistance aux parasites et aux maladies, de tolérance à différents types de stress abiotique, de l'adaptation à de nouveaux systèmes de production, etc.). La biotechnologie végétale met à notre disposition un certain nombre d'outils pour l'amélioration de ces plantes par des voies plus rapides que classiques. Notre groupe met en œuvre un programme visant à améliorer l'utilisation des plantes ornementales approches biotechnologiques et, dans ce contexte, relève de cette thèse de doctorat, dont l'objectif principal a été de l'application de diverses techniques pour la production et le développement de nouvelles variétés de plantes ornementales. Comme matériel de travail ont été élu trois espèces ornementales: Codiaeum variegatum, une plante d'intérieur attractif par ses feuilles en nuances de vert, jaune et rouge; Begonia Rex, qui est utilisé comme une plante d'intérieur et dont le principal attrait réside dans ses feuilles et spectaculaire Kalanchoe Blossfeldiana, un pot est très populaire en raison de son abondante. Il a mis au point un protocole pour la micropropagation Codiaeum variegatum, qui permet une production à grande échelle de diverses variétés. En outre, il a mis au point une méthode pour l'isolement et la culture de protoplastes de ce type à l'adresse des programmes d'amélioration basés sur l'hybridation somatique. Nous avons mis au point des méthodes efficaces et reproductibles pour l'obtention de plantes transgéniques Kalanchoe blossfeldiana et Begonia Rex travers cocultivo de explant.

Auteur: ALVAREZ FERNANDEZ RUBEN.
Année: 2005.
Université: OVIEDO [www.uniovi.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE BIOLOGIA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE BIOLOGIA.

Résumé: Il présente un système d 'Agrobacterium tumefaciens de transformation au moyen d'embryons de liège (de Quercus suber L.) matures sélectionnés. Nous avons étudié les paramètres qui influent sur l'efficacité de la transformation, qui hallándose: kanamycine à une concentration de 100 mg L - 1 est un agent de sélectivité adéquat, alors que le glufosinate d'ammonium (commerciaux Finale ®) n'est pas, malgré les chimères obtenues, la culture D'entre eux pendant au moins 3 mois en présence de 100 mg L - 1 de la kanamycine permet d'obtenir des embryons homogène. Parmi les trois souches de A. Tumefaciens testé (AGL1, LBA4404 et EHA105) AGL1 est le plus efficace. Parmi les combinaisons de la densité d'inoculum (A600nm = 0,25, 0,5 ou 1) et le temps cocultivo (2 ou 3 jours) ont testé, le mieux est A600nm = 1 et 2 jours cocultivo. En ce qui concerne le type de explanto inoculé, les agrégats embriogénicos fournir un traitement plus efficace des embryons isolés; outre, explantos inoculés après 20 jours de la sous-culture offrir le plus haut rendement. La lumière pendant cocultivo affecte l'efficacité de la transformation, ce qui est plus élevé lorsque explantos est cocultivan avec photopériode, claires ou foncées, qui au contraire, la température au cours cocultivo pas influencé de façon significative entre 22-26  ° C. Enfin, l'utilisation de mutants virGN54D pas Une augmentation significative de l'efficacité du AGL1. Il ya eu des lignées transgéniques embryogènes après l'inoculation de clones différents avec AGL1 pBINUbiGUSint, pBinUbiBar et pBIN19 - p35SsGFP. Les deux facteurs qui jouent un rôle important dans l'efficacité de la transformation sont les choix de la souche Agrobacterium (AGL1) et le moment de la collecte de explantos pour l'inoculation (20 jours après le dernier repiquage). Une fois mis en place le protocole de traitement est optimisé a obtenu un rendement de conversion (c'est-à-dire lignées transgéniques obtenues pour l'ensemble explantos inoculé) d'un maximum de 42%. Il a également crioconservado dans de l'azote liquide dix lignées transgéniques pour le gène bar, et tous ont continué d'exprimer une fois recouvrés.

Auteur: MUHIALDIN JANGI SH..
Année: 2005.
Université: PAÍS VASCO [www.ehu.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGÍA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA - UPV.

Résumé: Il a été décrit que l'histamine est une amine biogénica impliquée dans la prolifération de différentes tumeur et les cellules normales. Toutefois, dans certains cancers humains, comme dans des cellules T Leucémie aiguë (ALL) et le mélanome cutané, son effet n'a pas encore été élucidés. Dans le présent travail, nous avons étudié l'effet de l'histamine et de ses adversaires dans TOUS les lignées cellulaires, appelés CEM et Jurkat, et dans des lignées cellulaires Mélanome appelé A375, HS294T, HT144 et MJOI. Nous avons remarqué que le traitement in vitro avec l'histamine n'exerce pas d'effet sur les cellules leucímicas, mais accroît la prolifération des cellules humaines de mélanome. En outre, l'histamine endogène agit comme un facteur de survie et de stimulateur de la prolifération cellulaire, à la fois dans les cellules leucémiques dans le mélanome, puisque tous les antagonistes des récepteurs de l'histamine H1 utilisé dihphenidrmina, astémizole, la terfénadine et inhibé la prolifération cellulaire et induit la mort cellulaire par apoptose de façon significative. Toutefois, la viabilité des cellules après traitement comme normal de lymphocytes du sang périphérique, les mélanocytes et fibroblastes embryonnaires, est resté inchangé. Pour caractériser l'époque de la mort cellulaire induite par les antihistaminiques et les cellules tumorales, nous avons analysé les modifications morphologiques et biochimiques induites dans les cellules en réponse à ces composés. Les études morphologiques, effectuée par microscopie optique, à fluorescence et électronique à transmission, révélée dans les cellules traitées tous les processus cellulaires de l'apoptose, de la condensation cellulaire condensation de la chromatine et la fragmentation nucléaire. Nous avons également détecté des modifications biochimiques de l'apoptose, comme l'externalisation de la fosfatidlserina dans la membrane plasmique, la fragmentation de l'ADN, l'effondrement de la membrane mitochondriale, la libération des Citrogromo C au cytosol et de l'activation des caspases. L'apoptose induite par les antihistaminiques dépend caspases et caspase-2 est le facteur de régulation de l'initiation et la progression du processus apoptótico. La caspase-8 et les bénéficiaires de la mort cellulaire ne semble pas être impliqué dans ce processus. L'itinéraire mitochondrial processus apoptótico semble jouer un rôle important, comme nous l'avons vu dissipation de la membrane mitochondriale potentiel, l'activation de la caspase-9 et la libération de cytochrome C au cytosol. En outre, le réticulum endoplasmique semble également être impliqués, parce que nous avons montré que le traitement de cellules, de la terfénadine malnoma induit une augmentation de la concentration intracellulaire de Ca 2 + à la suite de l'épuisement de ses gisements dans le réticulum endoplasmique. Cette constatation a été confirmée par le traitement des cellules avec la néomycine, un inhibiteur de fosofolipasa C (PLC), les résultats ont montré que le traitement par néomycine empêché la libération de Ca2 + cytosol et à l'apoptose induite par la terfénadine. Avec ces résultats, nous concluons que l'histamine est un facteur dans la survie et la prolifération de lignées cellulaires humaines a étudié le mélanome et la leucémie. Les antagonistes des récepteurs de l'histamine H1 déclencher voie intrinsèque processus apoptótico dans les cellules tumorales mais pas dans les cellules normales que les lymphocytes vous, les fibroblastes et les mélanocytes. Au début du processus apoptótico induites par le traitement par la terfénadine, le calcium joue un rôle très important, et les dommages à la DAN est le premier changement structurel s'est produit. Le mécanisme apoptótico dépend de la caspase-2 et fosflipasa Cy mitochondrial route tant que le réticulum endoplasmique semblent être impliqués. Pris ensemble, nos résultats indiquent que les antagonistes de l'histamine H1 pourrait avoir un potentiel thérapeutique dans certaines pathologies néoplasiques.