BIOLOGIE MOLECULAIRE (3)

Auteur: HERNÁNDEZ LÓPEZ MARÍA JOSÉ.
Année: 2005.
Université: VALENCIA [www.uv.es].
Lieu de l'exposition: INSTITUTO DE AGROQUÍMICA Y TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS.
Lieu de préparation: INSTITUTO DE AGROQUÍMICA Y TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS.

Résumé: Ces dernières années, l'utilisation de la masse pour la boulangerie et la pâtisserie congelée a connu une augmentation marquée. Le callidad de ces produits est loin de celle obtenue avec les masses fraîches en raison de la sensibilité des souches commerciales de S. Ceremisiae le processus de gel et de la forte pression osmóticas. Dans le premier chapitre de cette thèse explore la possibilité d'utiliser des souches Torulaspora delbrueckii capable de fermenter une masse panaria et ayant caractéristiques intrinsèques de criorresistencia et osmotolerancia. Les résultats obtenus dans ce chapitre montrent que la souche de cette espèce, souche Pycc5321 montre une grande tolérance aux stress osmotique et ionique propose donc de cette souche comme un modèle pour l'étude de la tolérance au stress chez la levure cuisson. Dans le chapitre II décrit la production de ces outils moléculaires nécessaires pour être en mesure de travailler avec cette souche dans le laboratoire. Dans le chapitre III du présent document décrit l'isolement de la protéine Tdhog1 de cette souche, ainsi que la caractérisation de la route H0g, la principale route impliqués dans la résistance au stress osmotique EUS. Cerevisiae, dans cette espèce. Ce chapitre montre aussi l'isolement de gènes T. Delbrueckii TdENA1 et Tdcrz1, homologues, respectivement, un gène qui code pour Atp - 0sa Ena1 S. cerevisiae et qui encode pour un facteur de transcription, CRZI impliqués dans la régulation ENA1, et la caractérisation de Le trajet de Calcineurina - CRZ1p T. Delbrueckii.

Auteur: MARTÍNEZ BONO BÁRBARA.
Année: 2005.
Université: VALENCIA [www.uv.es].
Lieu de l'exposition: BIBLIOTECA CAMPUS DE BURJASSOT.
Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.

Résumé: La route des protéines kinases C dans Saccharomyces cerevisiae desemperia un rôle capital à jouer dans le contrôle de l'intégrité cellulaire, et en plus, il a été suggéré que participant à la coordination entre la croissance et la division cellulaire. Ce document a étudié le mécanisme moléculaire de la régulation de l'expression des gènes grâce à la médiation de PKC itinéraire, calqué sur le gène FKS1 codant pour la sous-unité catalytique de la glucane synthétase. Elle a été marquée minime que la séquence responsable de la réglementation grâce à la médiation de PKC route dans le gène FKS1 correspondent à une séquence de liaison du facteur Rlm1. Union a également été détectée in vivo de Rlm1 le promoteur de gènes FKS1 et que la capacité n'est pas réglée par voie PKC. D'autre part, j'ai constaté que le MAP kinases SIt2 la route PKC lie à l'ADN dans la zone située près de l'ATG gène FKS1. Il détecte que l'ARN polymérase II lie à la fois à IGT zone comme à la fin de la gène FKS1 quel que soit le rôle de la PKC itinéraire. D'autre part, il ya eu un changement après traduccional de protéines Paf1 (membre du complexe Paf1 C) dépendant SIt2, compatibles avec une éventuelle phosphorylation du Paf1 par SIt2. Nous notons que, bien que la route ne réglemente pas la capacité de vivre dans l'union gène FKS1 de Paf1 dans la région si elle apparaît IGT contrôlant le déplacement de Paf1 à 10 dans tout le gène FKS1. Cette thèse a fait une étude exhaustive de l'expression d'un mutant pkc1 - 8 sensibles à la chaleur, l'étude a identifié 65 gènes dont l'expression a été sensiblement modifié pour inactiver la fonction Pkc1. Dans la même veine, nous avons identifié des protéines associées au Pkc1 et Sit2 aide de la méthode de TAP purification de protéines. A souligner protéines Rpc34, Ssk22 et Apd 1 qui ont été détectés associés à Pkc1. Et les protéines Mot1, Sec31 et Kap123 associés à SIt2. Des études ont montré une relation entre le carioferina Kap123 la route PKC. Kap123 pourraient participer à la route PKC importée dans le noyau à l'une des protéines en aval dans la voie PKC. Il a également identifié un lien entre le gène voie PKC et cíclina Cln2, dans lequel la suppression du gène CLN2 supprime la croissance des défauts dans les mutants de la voie PKC, peut-être en raison du retard dans le processus gemación que supane l'inactivation l'cíclina Cln2.

Auteur: RODRÍGUEZ PIÑEIRO ANA M..
Année: 2005.
Université: VIGO [www.uvigo.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Résumé: Cancer colorectal (CRC) est l'une des tumeurs malignes les plus courantes. Toutefois, à l'heure actuelle, il n'ya pas de bons marqueurs tumoraux pour le diagnostic et le pronostic. Par conséquent, dans ce document, nous avons utilisé des méthodes proteómicas et biochimiques, dans le but de détecter les marqueurs tumoraux sériques utile. Tout d'abord, ils ont utilisé une méthode prefraccinamiento par chromatographie d'affinité grâce Concanavalina Dans son analyse de la fraction N - glicoproteínas, car ils ont de multiples changements dans la cancérogenèse. Utilisation de l'électrophorèse en deux dimensions, les protéines modèles ont été étudiés en utilisant trois différentes approches. Le premier a détecté 72 protéines ayant altéré les niveaux dans le CCS, 37 en plus. Parmi eux figuraient des protéines associées à l'apoptose (clusterina) et de la transduction du signal (GRL), d'un grand intérêt en tant que marqueurs potentiels pour le CRC. La seconde approche consiste à utiliser deux dimensions de protéines modèles comme outil de diagnostic. Utilisation de l'analyse en composantes principales et analyse discrimianate, pourrait établir un modèle d'expression différentielle, ce qui permet le diagnostic d'un individu. La troisième approche est la détection des changements dans la position relative des protéines dans des cartes en deux dimensions, qui reflètent les changements dans le point isoélectrique et la masse moléculaire. Grâce à l'analyse des déformations liées, des changements importants ont été détectés dans la position de N - glicoproteínas sérum de patients avec le CCS, permmitiendo également une discrimination entre les personnes en bonne santé et des patients, ainsi que la détection de la contribution de chaque protéine. Depuis protéines ayant altéré les niveaux sont choisis clusterina, afin d'étudier ses différentes formes sérum, et de comparer les niveaux de leur distribution et dans le sérum de personnes en bonne santé et les patients avec le CRC. Le plus remarquable est la découverte de la détection, exclusivement chez les patients, une forme de clusterina élué dans la première fraction de chromatographie (AF CLU), composé d'au moins 5 isoformes, d'une masse de 85 kDa et des sous-unités de 40 kDa. Son desglicosilación révélé qu'il s'agissait d'un N - glicoforma, probablement avec une aberrante de glycosylation. Par rapport à son utilité clinique, il a été déterminé que le clusterina totale sérum a un rendement plus élevé que le marqueur diagnostic à usage clinique. AEC. Le plus important était de trouver cliniques corrélation significative de la manière dont EF CLU avec métastases. Cette fraction clusterina se comporte comme un marqueur pronostique pour le RAC.

Auteur: ACOSTA COBACHO JUAN CARLOS.
Année: 2005.
Université: CANTABRIA [www.unican.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA.

Résumé: Au cours de la thèse de doctorat ont été créés lignes transfectantes stable de K562 avec inductible expression de p27. En ectopique induction de la p27 a été constaté que la protéine induit un arrêt prolifératif dans la phase G1 du cycle cellulaire, accompagné en inhibant l'activité des régulateurs de la phase G1. Aussi, il a été observé que p27 induit un processus de différenciation vers la lignée érythroïde spécifique. D'enquêter sur les interactions fonctionnelles de la protéine p27 et MYC a été créé lignes transfectantes stable de K562 avec une expression conditionnelle à la fois p27 et MYC. L'analyse de ces lignées cellulaires, il a été conclu que MYC est en mesure de bloquer la différenciation érythroïde induite par p27, dans un processus indépendant de son action sur le cycle cellulaire. En outre, il a été constaté que le blocus de différenciation grâce à la médiation de MYC se fait principalement par la répression de la clé dans le contrôle de tels gènes érythroïdes différenciation. En outre, il a été constaté que MYC eu un effet sur le cycle cellulaire dépend de la quantité de p27 dans ce système. Enfin, il a été constaté qu'il existait une relation inverse dans l'expression de MYC haute et basse p27 dans les lymphocytes B de patients atteints de leucémie lymphocytaire chronique.

Auteur: DANEL KORTAZAR ZABALA.
Année: 2005.
Université: CANTABRIA [www.unican.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA.

Résumé: Suite au décodage du génome humain, et le fait que chaque jour, il ya davantage de maladies résultant d'un repliement anormal des protéines (environ 50% des pathologies), est maintenant nécessaire de savoir comment plier polypeptidiques à développer son rôle. Un des modèles plus complexes - completos rabattable est le processus qui conduit à la formation de heterodímero de tubuline, sous-unité microtubules. Microtubules sont des polymères de tubuline, omniprésents dans toutes les principales fonctions variées dans la cellule, de la mitose (méiose), le transport et l'entretien cytoplasmique de l'architecture cellulaire. La fonctionnelle et structurelle des sous-unités des microtubules est heterodímero de alpha - bêta tubulina que, unis les uns avec les autres dans une forme linéaire de la protofilaments, treize d'entre eux des partenaires dans un cercle formant un microtúbulo. Microtubules sont des structures citosqueleto extrêmement dynamique, et précisément sur la capacité de ces dynamiques dans la cellule c. à table (tissu) dépendent de ses fonctions spécifiques. La synthèse de novo et de heterodímeros de Polypeptides d'alpha et bêta tubulina est un processus complexe qui commence par l'interaction de la synthèse des polypeptides nouvellement avec CST et prefoldina. Une fois libérés le polipeptidos de chaperonina sont traitées par les cofacteurs de la tubuline: TBCA, TBCB, TBCC, TBCD, TBCE et Arl2. Suite à l'association de tubulinas avec eux différentes formant des complexes, enfin, après l'hydrolyse du GTP, elle libère hterodímero de alpha - bêta tubulina responsable de la polymérisation en microscopique. A ce jour, le rôle de ces facteurs in vivo est pas connue, mais il est connu que ces proetinas sont nécessaires à la vie et que des mutations dans leurs gènes produit síndormes, certains d'entre eux très important. Des études récentes indiquent que, en plus d'être impliqué dans le repliement de la tubuline, ces cofacteurs peuvent être impliqués dans la dynamique microtubular, parce que quand ils sont sobreexpresados dans les cellules despolimeriza complètement citosqueleto microtubular. En effet, contrairement à ce qui a été pensée, tubulinas ne sont pas des protéines instables et heterodímeros pas dissocier ou sont associés à l'absence de cofacteurs de pliage. Ainsi, les cofacteurs de la tubuline pourrait avoir les missions de moduler in vivo de la dynamique en vue de promouvoir l'échange des sous-unités de la tubuline, par exemple, tubulinas avec différents postraduccionales isotipos ou différents. Les deux TBCE et TBCB rejoindre l'alpha - tubulina. Etudes long de cette thèse montrent que sobrexpresión de TBCB, comme celle de TBCE, est capable de despolimerizar microtubules de la cellule. Cette constatation fait partie de la force motrice dans les études de la thèse. Comprendre comment TBCB est capable de despolimerizar polymères tubuline quand études in vitro montrent que ne pas interagir avec la tubuline dans sa forme (comme heterodímero) est l'organe de l'enquête. D'un côté, cela montre que l'TBCB ne participant pas à la synthèse de novo et de la tubuline actif, et non sous forme de complexes avec heterodímeros de tubuline tubuline, même s'il est capable de se joindre à Alpha tubuline lors du processus de synthèse in vitro (c'est-à-dire TBCB recombinants étudié est fonctionnel ). Ces résultats conduisent les auteurs à la question de savoir si TBCB pourrait interacionar avec TBCE à s'unir et à découpler heterodímero de tubuline. Des expériences menées avec les deux cofacteurs produite et purifiée forme recombinante, incubées in vitro, seuls ou en diverses combinaisons de ceux-ci avec / sans tubuline enfin démontrer que TBCE et TBCB agir ensemble, amplificándose l'effet qu'elle produit TBCE seulement. Ces conclusions sont confirmées par des études in vivo collaboration transfección. Des études ultérieures à haute résolution de l'électrophorèse en gel de filtration accompagné d'dénaturant pas finalement démontrer que TBCE et de la tuberculose 8 CB interinstitutions 49e acionan physiquement avec un estequiometría 1:1, et à se tourner vers l'alpha tubuline. Enfin, cette thèse propose un modèle d'interaction entre les deux cofacteurs grâce à l'un de ses domaines, le domaine UBL part, mais les deux à la fois, en accord avec les modèles publiés structurelles, peuvent être considérés jusqu'à des zones structurelles qui encouragent l'interaction entre les deux protéines, qui À son tour, favoriserait la dissociation des dínero de la tubuline et de l'union de l'alpha tubuline complexe.

Auteur: RAMON PORTES EVA.
Année: 2005.
Université: POLITÉCNICA DE CATALUÑA [www.upc.edu].
Lieu de l'exposition: ETSEIB, EDIFICI H PLANTA 4 Campus SUD.
Lieu de préparation: ETSEIB, EDIFICI H PLANTA 4 Campus SUD.

Auteur: VAQUE DIEZ JOSE PEDRO.
Année: 2005.
Université: CANTABRIA [www.unican.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA.

Résumé: Cette étude a analysé les interférences fonctionnelles entre oncogènes Myc et Ras en deux modèles où l'activité cellulaire de Ras est antriproliferativa et de la distinction. Dans le premier modèle cellulaire, dérivés de la leucémie myéloïde chronique (cellulaire K562), il est montré que la surexpression de ces trois gènes des espèces sauvages et oncogènes Ras inhibe la croissance de cette lignée cellulaire. Ce résultat est cohérent avec l'absence de Ras mutations génétiques détectés dans la maladie. Le mécanisme implique l'activation de la protéine, la p21, un inhibiteur du cycle cellulaire. Cette étude montre que Ras activement la p21 grâce à l'activation RAF ERK - d'une manière indépendante de la p53. Le facteur de transcription oncogène Myc, il est capable d'inhiber l'activité de Ras sur l'activation de la p21 en un point situé entre le syndicat de Sp1 du promoteur de la p21 et l'activité kinase de ERK. Ce mécanisme est différent de tout autre mécanisme proposé pour expliquer comment Myc inhibe la transcription même s'ils ont été analysées et exclure d'autres options dans ce système. Enfin, il est montré que Myc revient arrêt prolifératif causés par Ras dans ces cellules. Le second modèle cellulaire (cellules UR61) diffère en réponse à l'activité de Ras. On a constaté que les cellules UR61 - Myc pas différent pour activer la route de Ras RAF - ERK. Myc dans ce système est capable d'inhiber la transcription du gène de c - Jun. Cette inhibition est responsable de l'absence de différenciation des cellules UR61 - Myc rapport aux cellules. Le fait que ce modèle n'a pas de protéines cellulaires Max (jugée indispensable à l'activité transcriptionnelle de Myc), cette étude donne un intérêt particulier, car elle montre la capacité de Myc à adhérer à l'ADN et de réglementer les processus d'une manière transcripcionales indépendant Max, inédit jusqu'en Ce travail. En outre, il a été démontré que l'inhibition de la différenciation Myc est découplée de possibles effets sur l'activation de la prolifération. Cette information est également de l'intérêt parce que de nombreux auteurs estiment que la capacité d'augmenter la prolifération est responsable d'inhiber processus de différenciation terminale Myc. Ce travail montre que la spécificité d'inhibition de la transcription des gènes impliqués dans la différenciation est utilisé par Myc pour inhiber la différenciation dans le modèle cellulaire UR61.

Auteur: SAURÍ PERIS ANA.
Année: 2005.
Université: VALENCIA [www.uv.es].
Lieu de l'exposition: BIBLIOTECA DEL CAMPUS DE BURJASSOT.
Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS - UNIVERSITAT DE VALÈNCIA.

Résumé: Le propagaci6n un infecci6n virale plantes cette médiation protéines codées par le virus connu sous le nom de protéine de mouvement (MP). Ces protéines lient le génome viral et à coopérer sans ordre précis, formant des complexes d'ARN - MP, qui est associé au réticulum endoplasmique (RE) pour être transportés à travers le cytosquelette vers plasmodesmos canaux membranosos interconnectant les cellules végétales. Une fois ces complexes atteint plasmodesmos, l'ARN est translocado aux cellules adjacentes au moyen d'un mécanisme est encore inconnu. La combinaison de ces complexes ARN - MP ER s'avère indispensable pour ce transport celula une celula ARN du virus a lieu. Ainsi, l'objectif central de cette thèse a été basée sur l'étude et la caractérisation de l'association de ces protéines dans la membrane de cette orgánulo. Le virus a fait l'objet d'étude du virus Moteado de l'œillet, qui encode deux députés, p7, une protéine soluble capable d'unir le génome viral et p9, présentant deux régions hidrof6bicas susceptibles d'interagir avec les membranes cellulaires. Tout d'abord, par des expériences de transcription / traduction in vitro, a montré que p9 est une protéine membranaire qui contient deux fragments de transmembranaires et adopte une orientation N-/C-terminal cytoplasmique. Deuxièmement, il a été caractérisé le mécanisme d'intégration de p9 dans les membranes cellulaires. Les résultats obtenus montrent que l'insertion de p9 se déroule de manière collaboration traduccional et dépend du PSR. Outre, le virus exploite la machinerie cellulaire responsable de l'intégration de la membrane cellulaire des protéines. Le complexe Sec61 et TRAM protéine impliquée dans le processus d'insertion p9 dans la membrane du RE. Enfin, il ya eu une étude topologique des déterminants de la protéine qui déterminent l'orientation de la protéine virale dans la membrane. Nous avons exploré une vaste gamme de paramètres, notamment la présence de résidus inculpés dans la séquence de la protéine, de l'hydrophobie transmembranaires de fragments, de la durée de domaine extramembranosos et / ou la présence de résidus aromatiques. Les résultats montrent que la protéine virale p9 Reporting topologique distribués à 10 tout au long de la séquence des protéines, de sorte que la possible émergence d'une mutation non conservatrice, très courante dans les génomes viraux, ne modifie pas l'orientation de la protéine dans sa membrane de yens définitive biologique Fonction.

Auteur: MARTÍNEZ JIMÉNEZ CELIA PILAR.
Année: 2005.
Université: VALENCIA [www.uv.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA DE LA UNIVERSITAT DE VALÈNCIA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA.

Résumé: À l'heure actuelle, a considérablement augmenté la demande pour les cellules du foie fonctionnel pour la prédiction du métabolisme et de la toxicité de nouveaux médicaments, ainsi que pour des applications cliniques telles que la thérapie cellulaire et l'étude des maladies du foie, de sorte que le développement de différents modèles de cellules humaines est devenue un enjeu important pour les deux Sciences fondamentales et appliquées. Toutefois, l'utilisation de modèles in vitro de l'homme a hépatocellulaire grave deventajas comme le sont les processus desdiferenciación et à la perte de phénotype hépatique. Première ont caractérisé différents hépatocytes humains à établir leur degré de desdiferenciación et de la perte de son phénotype. Deuxièmement, nous avons étudié les mécanismes moléculaires associés à ces processus desdiferenciación mettant l'accent sur les facteurs de transcription hépatique HNF4? C / EBP, et leur relation à la transcription de contrôle du cytochrome P450. Et, enfin, a étudié le rôle de coactivadores PGC1? Et SRC1 à maintenir le phénotype hépatique et dans la régulation du cytochrome P450. C / EBP a deux isoformes: LAP et LIP, participant d'une manière coordonnée dans le processus d'inflammation en régulant l'expression de CYP3A4 et jouant ainsi un rôle important dans la variabilité interindividuelle de l'expression de cette cytochromes. Après avoir étudié les mécanismes moléculaires impliqués dans la régulation transcriptionnelle CYP3A4, nous avons vu que le rôle du facteur de transcription hépatique HNF4? Elle est limitée par deux coactivadores clés dans le processus de régulation des gènes de gènes impliqués dans le maintien du phénotype foie sont PGC1 et SRC - 1. Ces coactivadores jouer un rôle crucial dans le maintien du rôle des facteurs de transcription étroitement liés au développement et la différenciation des cellules hépatiques comme dans le cas du facteur HNF4. Nous avons étudié comme PGC1 et, dans une moindre mesure SRC - 1, sont essentiels pour maintenir la fonctionnalité facteur HNF4 dans les gènes impliqués dans le métabolisme hépatique des composés endogènes, ainsi que les composés exogènes voudrais gènes du cytochrome P450 métabolisme xénobiotiques.

Auteur: TORRANO MOYA VERONICA.
Année: 2005.
Université: CANTABRIA [www.unican.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA.

Résumé: FCCT est un facteur de transcription décrit comme un répresseur de c- MYC. Dans sa structure sont dominés par les liant à l'ADN contenant du zinc doigt onze. FCCT nucléaire est une protéine exprimée ubícuamente et hautement conservée. Grâce à la combinaison de ses onze doigts de zinc, FCCT est capable de se joindre à différentes séquences d'ADN, sans aucune séquence consensus contraignant. Grâce à cette capacité multipotente liant à l'ADN, FCCT il est considéré comme un facteur de transcription polyvalents. Parmi les gènes sont régies par la FCCT au MYC oncogène, le gène de la Lysozyme poulet, le gène et gène APPB télomérase. FCCT contrôle un grand nombre de séquences isolant chromatine, est la seule protéine décrite cfapaz de s'associer à ces séquences. FCCT est modifié par la phosphorylation et de poly (ADP ribosil) tion. Des études antérieures dans ce travail indiquent la capacité du FCCT comme un inhibiteur de la croissance cellulaire. Et il ya econtrado perte heterocigosidad dans le lieu où cartographié le gène FCCT. Ils ont aussi des mutations ponctuelles ont été trouvées dans leurs doigts de zinc dans certaines tumeurs. Par conséquent, FCCT est un bon candidat gène suppresseur de tumeur. L'importance de la FCCT dans la régulation de la prolifération cellulaire a été décrit précédemment, mais son rôle éventuel dans la différenciation cellulaire a été moins étudiée. Les résultats préliminaires ont montré une expression différentielle et de la phosphorylation de FCCT au cours de la différenciation myéloïde. Un des objectifs de ce travail a été d'analyser le rôle de la FCCT dans la prolifération et la différenciation des cellules mielodies K562. Les résultats ont montré que la surexpression de FCCT cellules K562 conduit à un retard dans la croissance cellulaire, sans toutefois conduire à une augmentation de l'apoptose. Un des mécanismes proposés par FCCT qui pourrait arbitrer leurs effets est l'inhibition de MYC. Cette étude a montré que la FCCT est situé dans le nucléole de cellules K562 différenciées en neurones et d'après mitóticas. Il a été démontré que le domaine responsable de ce lieu est le domaine de la reliure de l'ADN, que la localisation est dynamique, dépendant ADNr transcription et la synthèse protéique. Il montre également que la localisation des nucléolaires FCCT inhibe transcrición nucléolaires par un mécanisme dépendant de l'activité de poly (ADP ribosil) polymérase.

Auteur: MASIÁ ADALID SUSANA.
Année: 2005.
Université: VALENCIA [www.uv.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA DE LA UNIVERSITAT DE VALÈNCIA.
Lieu de préparation: INSTITUTO DE BIOMEDICINA DE VALENCIA-CSIC.

Résumé: L'étude de l'action de l'acide rétinoïque (RA) dans les cellules de neuroblastome a deux pistes d'intérêt. Premièrement, le RA est une série qui joue un rôle central dans le développement embryonnaire et la production de divers organes et systèmes, y compris le système nerveux, et 10 il ya un intérêt scientifique dans la connaissance des mécanismes moléculaires par lesquels ces exercices actions. Deuxièmement, la RA et de ses dérivés synthétiques sont actuellement testées dans la thérapie néoplasiques, en raison de sa capacité à réguler la croissance, la différenciation et la survie cellulaire, les résultats cliniques très pertinentes, comme dans le cas du neuroblastome. Cependant, les mécanismes moléculaires par lesquels les RA exerce son action thérapeutique n'ont pas été clairement établies. L'objectif de cette thèse a été de déchiffrer les mécanismes moléculaires par lesquels les RA induit la différenciation des cellules neurales, en utilisant comme modèle des cellules de neuroblastome. Les résultats préliminaires indiquent que, dans les cellules de neuroblastome, la réponse à l'administration de la RA, non seulement se produit au niveau transcriptionnel, mais également conduit à l'activation de la signalisation de chemin de PI3K/AKT (López Carballo, G. 2002. J Biol Chem 277, 25297-25304). Cette activation est nécessaire pour l'induction de la différenciation par RA et pense qu'il occupe une place centrale dans le contrôle exercé par RA sur la croissance, la différenciation et la survie cellulaire, ce qui nous lIevado leurs personnages avec plus de détail. Grâce à l'étude de la mécanique aspects de l'activation de la voie de serializacion de PI3K/AKT par RA, nous avons déterminé que l'activation des voies PI3K/AKT et MAPK / ERK par RA se fait par un mécanisme non génomique elle n'exige pas de nouvelles ou de la transcription Gènes ou de la synthèse protéique. En outre, nous avons montré que cette activation n'est pas propre à cellules de neuroblastome, mais c'est un processus plus général. Il a établi la participation de l'activation des récepteurs nucléaires RAR dans la voie de la linéarisation de PI3K/AKT, et ce que nous avons caractérisé domaine des récepteurs RCD est involucrads de l'activation de la voie de PI3K/AKT. Nous avons également montré que la localisation intracellulaire de RAR joue un rôle important dans l'activation de la PI3K, et ont décrit l'interaction physique entre le récepteur et RAR composantes de la chaîne de transduction du signal PI3K/AKT et de l'union de la RA récepteur RAR réglemente Ces interactions. Enfin, nous avons analysé les conséquences de ces actions ne transcripcionales génomiques de RA dans les cellules de neuroblastome à l'aide de puces à ADN. Les résultats soulèvent un nouveau modèle de l'activation de la via PI3K/AKT par RA dans lequel la liaison de ligands de récepteurs nucléaires RAR joue un rôle central dans la régulation de la localisation intracellulaire du RCD et de l'interaction avec le RCD sous-unité de PI3K.

Auteur: MARTÍNEZ HERNÁNDEZ CRISTINA.
Année: 2005.
Université: POLITÉCNICA DE VALENCIA [www.upv.es].
Lieu de l'exposition: UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE VALENCIA.
Lieu de préparation: UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE VALENCIA.

Résumé: Il a été traditionnellement considéré - oxidación comme un processus essentiel pour la germination des semences, la mobilisation des lipides stockés dans l'usine et de fournir suffisamment d'énergie pour son développement. Toutefois, il est également intervenant dans le traitement des molécules complexes qui conduisent à des molécules simples, tels que les acides jasmónico (BOA) et salicylique (SA), avec un rôle important dans le développement de la plante et sur les réactions de défense contre une agression. Le présent travail a été effectué l'analyse moléculaire et fonctionnelle des gènes ACXs Arabidopsis thaliana,, responsable de la première étape de la oxidación. Sur les six gènes ACXs décrit, on a constaté que seulement ACX1 répond à la nature du stress biotique et abiotique, représentant un noeud d'activation en réponse à différents stress. En générant antisens lignées transgéniques pour AXC1 montré que ce gène code pour une protéine de la oxidación impliqués dans la synthèse de la BOA en réponse à la blessure d'Arabidopsis. Cette fonction ACX1 connecte - oxidación avec l'activation des réponses pour défendre la plante contre une large gamme de stress. Toutefois, le rôle de ACX1 n'est pas limitant pour l'activation des défenses ou dépendantes JA SA, depuis ADN-T lignes vide pour ACX1 déclencher une pleine expression des gènes marqueurs les deux voies de signalisation en réponse à des facteurs comme la blessure ou de stress inoculation avec des agents pathogènes biotrofos. Il a été également constaté que la réduction ou l'annulation de la transcription de ACX1 ne se traduise par des changements dans les processus de développement dans lequel la BOA ou - oxidación sont impliqués dans la germination, la transition vers la phase de reproduction ou de la sénescence, et il ne modifie la base de résistance Contre les agents pathogènes biotrofos. Toutefois, l'analyse transcriptómico, menée dans la présente étude suggère que la diminution de l'expression de ACX1 conduit à de nombreux changements moléculaires exprimées par la diminution de l'expression de nombreux gènes dont la fonction est liée directement ou indirectement à la défense. Par conséquent, les modifications dans la oxidación pas encore conduit à un phénotype facilement détectables peuvent jouer un rôle dans l'organisation de l'activation et de l'entretien des différentes réactions de défense des plantes en vertu de diverses situations de stress.

Auteur: AGORIO NORSTRÒM ASTRID MARÍA.
Année: 2005.
Université: POLITÉCNICA DE VALENCIA [www.upv.es].
Lieu de l'exposition: UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE VALENCIA.
Lieu de préparation: UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE VALENCIA.

Résumé: Le gène EP5C codifie une peroxydase extracellulaire cationiques et a été identifié avec Lycopersicon esculentum, qui a noté que sa transcription est induite dans les interactions pathogènes compatibles et incompatibles. Le H202 est la molécule de signalisation qui active la transcription des EP5C, tandis que d'autres molécules de signalisation en réponse à des agents pathogènes, tels que l'acide salicylique (SA), l'acide jasmónico (BOA), ou de l'éthylène (ET) ne le font pas. Devant ce constat, cet argument a été utilisé dans le gène EP5C comme marqueur pour étudier le tracé de la transduction du signal grâce à la médiation de H2O2 dans la réponse défensive contre les agents pathogènes. Pour remédier à cette étude, nous avons utilisé une stratégie de la biologie moléculaire complétés par des études de génétique inverse, et d'une stratégie de l'aide directe génétiques des mutants ocp (overrexpressor de cationiques peroxydase) qui activent la transcription du transgène pEP5C:: GUS de constitutivement chez Arabidopsis thaliana. Une analyse fonctionnelle du promoteur EPSC en A.thaliana était une zone protégée promoteur EP5C, 51 Anonyme, appelés R1 et nécessaires à l'activation de la transcription du gène par rapport à Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000 (PST DC3000) ou H2O2. A suivi un simple hybride dans la levure facteurs de transcription conduit à l'identification de A.thaliana qui se joignent R1, qui appartiennent à la famille R2R3 facteurs MYB ou de la famille WIP. Après la caractérisation de l'union de R1 de facteurs de transcription MYB46, MYB112 et WIP2 montré que les deux premiers des trois requis la guanine élément présent dans le cis- MBSII contenues dans A1 pour rejoindre ce dernier, au contraire, les études de résistance aux agents pathogènes Pst DC3000 noté Qu'aucun de ces trois facteurs est nécessaire pour la bonne mise en place des moyens de défense devant ce bactéries. . Dans une deuxième phase à étudier mutante ocp11 établi qu'elle est une mutation semidominante qui exprime constitutivement la transgen pEP5C:: GUS. Analyse de la résistance ont montré que ocp11 est hipersusceptible l'agent pathogène biotrofo Pst DC3000 fois compatibles et incompatibles interactions sensibles à la bactérie "non hôte" P.tabaci et hipersusceptible aux champignons necrotrofos Botrytis cinerea et Plectosphaerella cucumerina. Les études indiquent que les marqueurs moléculaires probablement inhibition de la résistance montre que les mutants ocp11 pas dépendre de la défenses des itinéraires classiques grâce à la médiation de SA ou JA / ET. Enfin clonó mutations ocp11, qui a aidé à cerner le gène OCP11 que le gène AGO4 et tourner la mutation ocp11 dans allèle ago4 - 2. Il a été démontré que les mutants ago4 - 2 ont réduit la méthylation des îles CpNpGp dans ellocus AtSN1, déduit une perte de la fonction de la protéine AGO4 dans mutante cet égard à la méthylation de AtSN1. Dans ce travail associe pour la première fois, les mutants ago4 impliquées dans la méthylation de l'ADN et les histones à la défense de la plante en face de bactéries et de champignons pathogènes.

Auteur: ORPINELL MERCADÉ MERITXELL.
Année: 2005.
Université: BARCELONA [www.ub.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAT DE BIOLOGÍA.
Lieu de préparation: FACULTAT DE BIOLOGIA.

Résumé: Ce projet porte sur la participation du gène DOR (diabète et obésité associés Gene) dans la physiopathologie du diabète de type 2 par une analyse de la biologie moléculaire (1) et cellulaire (2) de la protéine codée par ce gène. 1 - moléculaire Analyse de la structure de la distribution et de la fonction grâce à la caractérisation des interactions avec d'autres protéines. Selon une première preuve suggérant un rôle de DOR comme un régulateur transcriptionnel de l'activité, a été établi DOR potentiel d'interaction avec les protéines impliquées dans l'expression des gènes de mécanismes, tels que des récepteurs nucléaires d'hormones (TR, GR, PPAR), coactivadores (SRC - 1) , Histones acetilasas (CBP, p300), et desacetilasas (SirT1) grâce à des tests inmunoprecipitación protéines ou de la chromatine (ChlP). Il a aussi été décrit comme l'interaction des deux protéines citoplasmáticas précédemment identifiées par la technique des doubles hybrides dans le pain. L'analyse de l'interaction des DOR avec Translokina autorisé d'un éventuel mécanisme de régulation de la présente dans la traduction de DOR de base et de leurs niveaux d'expression et, par conséquent, ses activités de réglementation. Par ailleurs, l'interaction des DOR avec TXNIP permis une éventuelle implication de DOR dans les mécanismes responsables de maintenir le potentiel d'oxydoréduction au niveau cellulaire. 2 - La caractérisation de la structure de l'expression de protéines de cellules et de tissus DOR, à la fois endogènes comme ectopique, la Commission a identifié les mécanismes impliqués dans la localisation et l'expression de celui-ci, telles que la différenciation miogénica, l'activité transcriptionnelle, traduccional et proteasomal, de la stabilité citoesqueto, le État de la phosphorylation ainsi que l'état d'énergie ou potentiel d'oxydoréduction cellulaire.

Auteur: PUJADAS PUIGDOMÈNECH LLUÍS.
Année: 2005.
Université: BARCELONA [www.ub.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAT DE BIOLOGÍA DE LA UNIVERSITAT DE BARCELONA.
Lieu de préparation: FACULTAT DE MEDICINA - FACULTAT DE BIOLOGÍA.

Auteur: VALLS JORDANA ESTER.
Année: 2005.
Université: BARCELONA [www.ub.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAT DE BIOLOGÍA.
Lieu de préparation: FACULTAT DE BIOLOGÍA.

Auteur: MORENO GONÇALVES ANA BEATRIZ.
Année: 2005.
Université: BARCELONA [www.ub.es].
Lieu de l'exposition: IBMB-CSIC.
Lieu de préparation: IBMB-CSIC.

Résumé: Les plantes sont constamment soumises à différents stress environnemental. Champignons cause un grand nombre de maladies des plantes, étant responsables de grandes pertes économiques. Actuellement, le contrôle de ces maladies est réalisée grâce à l'utilisation de composés chimiques, avec pour conséquence une incidence négative sur l'environnement et sur la santé. Une alternative à la lutte chimique est d'obtenir des plantes transgéniques résistantes aux champignons. Au début, la plupart des transgènes utilisés à cet effet sont venus delas propres plantes (gènes AB). Actuellement, compte tenu de la réduction de l'efficacité de cette stratégie, travaillent à l'identification de gènes provenant d'autres organismes de défense, tels que les bactéries, les insectes, les animaux et même d'autres champignons. Dans le présent document, a évalué l'utilité de la protéine AFP (antifongique protéines), produit par le sol champignon Aspergillus gigantesus, d'agir comme agent antifongique contre les agents pathogènes des plantes, plus précisément géranium et le riz. La protéine AIA est une petite protéine avec une très basique et compact structure, qui est sécrété espace extracellulaire. Des études antérieures avaient montré son activité antifongique devant divers filopatógenos (La chaîne et coll, 1995; Vila et coll 2001). Ainsi, le premier objectif de cette thèse est d'étudier l'activité antifongique de cette protéine devant le champignon Botrytis cinerea. Ce champignon est responsable de la pourriture grise dans de nombreuses maladies des plantes, y compris les plantes ornementales. Nos résultats montrent que la protéine AFP présente une forte activité antifongique en face de différentes souches de Botrytis cinerea, qui freinaient le développement de higas que la germination de spores. Lorsqu'elle est utilisée en combinaison avec la protéine cecropina A lepidopteron, il existe un effet additif antifongique entre les deux, ce qui peut être utile pour le développement d'une stratégie de l'expression simultanée de ces deux gènes dans les plantes transgéniques. En outre, l'AFP inhibe la croissance de B.cinerea la fois in vitro et in vivo, géranium plantes. En outre, le champignon Magnaporthe grisea, qui est responsable de la maladie connue sous le nom de piriculariosis dans les plants de riz. L'activité antifongique de la protéine AFP aborder cette fitopatógeno avait déjà été décrite à la fois in vitro et in vivo (Vila et coll, 2001). Le présent document a mis au point une stratégie pour exprimer le gène afp inductible et de manière contrôlée, afin d'éviter les effets négatifs possibles de l'expression constitutive, à la fois métaboliques dépenses par la plante, et son acceptation par le consommateur final. Les résultats ont montré que le promoteur d'un gène PR maïs gène ZmPR4, est fonctionnel et induite par le champignon M.grisea dans les plants de riz. Ce promoteur est capable de contrôler l'expression des gènes afp et conférant une résistance à l'infection par le champignon Magnaporthe grisea, dans les plantes transgéniques. Leur utilisation est un atout supplémentaire car ce promoteur n'est pas actif dans les semences de riz de l'endosperme (organe destiné à la consommation), ce qui empêche le produit de trangén à s'accumuler dans les tissus. Enfin, étant donné le grand potentiel de la biotechnologie pour la gène afp application, il est nécessaire de déterminer son mécanisme d'action contre les champignons, ainsi que de son impact potentiel sur les cellules végétales ou animales. Dans la dernière partie de cette thèse ont été accomplis différentes études utilisant comme modèle le champignon M.grisea. Par microscopie confocale fluorescente utilisant différents systèmes de marquage, de la transmission et de la microscopie électronique, il a été observé que la protéine AIA est capable de former des pores dans la membrane du champignon. La protéine AFP pénètre la cellule du champignon et s'accumule dans le noyau. En outre, il appartient à interagir avec les acides nucléiques, soit d'ADN ou d'ARN. Ces résultats suggèrent que le mécanisme d'action de cette protéine est basé sur une combinaison d'activités: formation de pores de la membrane et l'interaction avec les acides nucléiques, ce qui conduit à la mort des cellules. Nous avons également tester les cellules végétales (protoplastes de riz) et humains (HeLa cellules), qui h 8 un permettre 3ae tido déterminer que la protéine AFP n'exerce aucun effet négatif significatif sur ces cellules. Globalement, les résultats de ce travail suggèrent que le gène afp est un bon candidat pour être utilisé comme un transgène géranium pour protéger les plantes et de riz de la maladie causée par le champignon Botrytis cinerea et Magnaporthe grisea, respectivement. Le promoteur du gène ZmPR4 représente également un bon choix à la tête de l'expression des gènes antifongiques dans les plants de riz transgénique.

Auteur: GAS PASCUAL ELISABET.
Année: 2005.
Université: BARCELONA [www.ub.es].
Lieu de l'exposition: CENTRO DE INVESTIGACIÓN Y DESARROLLO (CSIC).
Lieu de préparation: LABORATORI DE GENÉTICA MOLECULAR VEGETAL - INSTITU DE BIOLOGÍA MOLECULAR DE BARCELONA - CONSORCI CSIC-IRTA.

Résumé: Dans la plupart des céréales, des protéines de réserve majorité des semences sont appelés prolamins et s'accumulent dans l'endosperme. Les gènes codant des tissus spécifiques et sont présentées efficace de transcription, suggérant une étroite régulation des gènes. Dans le maïs, notre espèce modèle, prolamins sont appelés zeínas et s'accumulent dans certains dérivés IR vésicules appelées protéines organes, tandis que d'autres protéines de réserve comme globlulinas ou oleosinas qui s'accumulent dans l'aleurona et de l'embryon. L'intérêt de notre groupe se concentre sur gamma zeína, une protéine spécifique de réserve endosperme, qui est de 15% la teneur en protéines du grain, en dépit du fait que son gène (gamma Z) est présent dans seulement un ou deux exemplaires par génome haploïde. Le but de cette étude était de caractériser de nouveaux facteurs de transcription implacados dans l'expression de protéines spécifiques de réserve de semences, liées à l'évolution du grain, en particulier ceux qui sont impliqués dans l'expression des gènes gammaZ. Les objectifs spécifiques et les résultats sont brièvement exposés ci-après: 1 - la caractérisation fonctionnelle de PBF comme régulateur positif de gamma Z. PBF gène est un activateur transcriptionnel, dont le domaine est situé à l'activateur C-terminal sa région. Le PBF activité dépend de sa capacité à se liant à l'ADN. 2 - Nouveaux facteurs de transcription impliqués dans l'expression des gènes gammaZ: le clonage du gène GAMYB maïs et études inmunolcoalización. Caractérisation de la présente comme un facteur de transcription régulateur de gène gammaZ. ZmGAMYB codant pour un facteur de transcription de type Myb R2R3 qui se lie spécifiquement à la caisse AACA Z et le promoteur actif de gamma expression des gènes gammaZ de son auteur. ZmGAMYB est exprimé spécifiquement dans le développement du maïs endosperme, de la même manière qu'ils le font les autres organismes de réglementation de gamma gène facteur Z. La protéine s'accumule dans les couches superficielles de l'endosperme (aleurona et subaleurona). 3 - Nouveaux facteurs de transcription associés à l'expression de protéines de réserve des graines: le clonage du gène FUSCA3 maïs, les études inmunolocalización et à la caractérisation de ce facteur. ZmFISCA3 codant pour un facteur de transcription de type B3 qui exprime mayoritáriamente en développement de l'embryon. Le facteur de protéines s'accumulent en grand nombre dans la aleurona, ainsi que dans l'embryon, suggérant un rôle dans l'accumulation des réserves de ces deux substances dans les tissus. FUSCA3 rejoint les raisons RY - comme promoteur de gamma Z, de façon imprécise, et n'est pas en mesure d'activer l'expression de ce développeur.

Auteur: AGUILERA XIOL CRISTINA.
Année: 2005.
Université: BARCELONA [www.ub.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE FARMACIA.
Lieu de préparation: INSTITU DE RECERCA ONCOLOGICA -IDIBELL.

Résumé: L'objectif général soulevées dans cette thèse a été d'étudier les mécanismes qui régulent les voies NFkB et Notch et comment ces deux voies interagissent. Le premier chapitre montre que la 14-3-3 réglementer la voie classique de NFkB favorisant les exportations nucléaires p65/IkB Alpha après activation par le TNF-alpha. Nous montrons que p65 contient au moins deux domaines liant à 14-3-3 dont acides aminés 38-44 et 278-283, et mapamos le site de liaison de IkB Alpha à 14-3-3 en acides aminés 60 - 65. La mutation de ces domaines redistribués p65 et IkB Alpha dans le noyau de cellules suggérant que 14-3-3 est impliquée dans l'exportation de ces protéines dans le noyau. Le traitement par TNF-alpha favorise le recrutement de 14-3-3 et IkB Alpha des promoteurs des gènes cibles de NFkB et l'union de p65 à 14-3-3. En inhibant l'activité de NFkB avec un dominant négatif de 14-3-3, le complexe IkBalfa/p65 s'accumulent dans le noyau de cellules. Dans ces conditions, il est un élément constitutif de p65 à l'association de ses gènes cibles résultant d'une absence de réponse de ces gènes à l'activation induite par le TNF Alpha. Donc, nous avons montré que la 14-3-3 est nécessaire pour la bonne régulation de NFkB et de la manière qui facilite exportateurs nucléaires IkBalfa/p65. Le deuxième chapitre montre comment inhibiteur trajet de NFkB, IkB alpha joue un rôle dans la chromatine nucléaire associée gène cible de Notch comme hes1 i herp2, ce qui constituera un nouvel élément de l'itinéraire reliant les mécanismes de Notch et le NFkB. Nous proposons que IkB alpha est impliquée dans la répression transcriptionnelle recrutement éléments corepresores à des promoteurs. Nous montrons que IkB Alpha interagit avec des éléments repressors nucléaire HDACs. Par immunoprecipitaciones chromatine démontre que IkBalfa sont recrutés dans le promoteur de hes1 liaison avec HDAC1 et HDAC5. IkBalfa est libéré temporairement promoteur hes1 lorsque les cellules sont traitées avec TNFalfa, qui est corrélée avec une augmentation de l'acétylation des histones et l'activité transcriptionnelle du gène. La libération de IkBalfa de hes1 et sa transcription d'activation coïncide avec le recrutement de IKKalfa et IKKbeta dans ce promoteur. En outre, la libération de IkBalta de hes1 que l'augmentation de l'acétylation des histones induite TNFalfa sont affectés dans les fibroblastes déficients IKKalfa.

Auteur: NAPAL BELMONTE LAURA.
Année: 2005.
Université: BARCELONA [www.ub.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAT DE FARMACIA.
Lieu de préparation: UNVIERSITAT DE BARCELONA.