GENIE GENETIQUE

Auteur: FERNÁNDEZ RODRÍGUEZ MATILDE.
Année: 2003.
Université: GRANADA.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS.
Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS.

Résumé: Le enterocina AS-48 est un peptide produit par circulaire enterococcus faecalis, qui montre un large spectre d'action contre de nombreuses bactéries pathogènes transmises par les aliments et alterantes d'entre eux. Ce rapport a été mené à la caractérisation de la région génétique responsable de l'AS-48 caractères cloné dans pAM401, composé de gènes comme 48ABCC1DD1EFGH-qui, comme-48A est le gène structurel. La qualification des produits codés par les quatre derniers gènes, obtenidamediante analyse phénotypique des mutants d'insertion avec transposoón Tn5 et des logiciels d'application pour le haut niveau de fiabilité, a révélé que les gènes comme 48EFGH-codifier un convoyeur de type ABC impliqués dans l'auto versus AS-48. Dans ce système de transport a mis en évidence le rôle des As-48G, qui lient les domaines de l'ATP et des protéines As-48EH présentant quatre domaines d'expansion à membrane, alors que la protéine As-48F pourrait accroître l'efficacité du convoyeur. L'analyse de la transcription dans la région-48 effectués par Northern blot avec les résultats issus de complémentation des études trans-gènes comme 48ABC dans pAM36e menée, a conduit à conclure que la région-48 est structuré en deux opérons expression constitutive (Comme 48ABC-et comme-48C1DD1EFGH), bien que les promoteurs présents régie interne permettant l'expression de gènes comme 48BC-et-48EFGH. La région-48 a été cloné dans des bactéries vecteurs propres de ácidoláctico (plL253-81 et pEM76-81), mais aucune de la nouvelle construction a gagné égalé l'efficacité de pAM401-81 dans l'expression et la résistance à l'AS-48. Le transfert de la région-48 souches d'intérêt biotechnologique a été fait avec succès dans Lactococcus, Lactobacillus et E.faecium. Les deux premiers ont montré qu'une faible expression de la résistance, alors que toutes les souches de E.faecium exprimer le caractère traitées avec la même efficacité à la souche sauvage,. Faecalis S-48. Ce résultat est d'un grand intérêt appliqué à celle-ci isole de l'alimentation, le manque de facteurs de virulence, dans un proche avenir peuvent être utilisés pour obtenir des aliments fermentés, qui sont appliquées sans aucune difficulté.

Auteur: JARA RAMÍREZ MÓNICA.
Année: 2004.
Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
Lieu de l'exposition: CIENCIAS.
Lieu de préparation: ESCUELA DE POSTGRADO.

Résumé: Des études antérieures réalisées dans notre laboratoire ont analysé le contenu de regulón LexA de Gamma Proteobacteria (Erill et coll., 2003). Dans la même optique, le présent travail vise à étendre la description de cette regulón autres familles domaine Bactéries: Geobacter sulfurreducens, en tant que représentant du groupe Desulfuromonas, appartenant à la branche de l'Delta Proteobacteria: Fusobacterium nucleatum, Embranchement Fusobacteria; appartenant à des micro-organismes Classe de Alpha Proteobacteria et les bactéries Gram positif. Tout d'abord, elle a entrepris d'identifier les boîtes syndicat de LexA de micro-organismes G.sulfurreducens et F.nucleatum, qui a été cloné et secuenciaron leurs gènes lexA. Après sobreexpresar et purifier les protéines respectives étaient de tester retard électrophorèse et empreinte, qui a identifié deux raisons pour la reliure à LexA: GGTT N2 C N4 G N3 APC G.sulfurreducens et TGTATC N12 TACA à F.nucleatum. Ensuite, nous avons étudié la distribution de 'in silico les raisons décrites dans chaque génome. Dans les deux cas, le seul gène, une partie de lexA, qui s'est avéré être sous le contrôle de la protéine LexA les fagnes dinB. En G.sulfurreducens gène recA, en plus de ne pas posséder la raison LexA et de ne pas s'engager dans ce type de protéine, a présenté une constitutifs d'expression par rapport aux dommages de l'ADN. En revanche, le gène recA de F.nucleatum est inductible par des lésions sur l'ADN mais il n'est pas réglementée directement par lexA. Une fois décrites ces deux micro-organismes abordé l'étude des microorganismes appartenant à la classe des Proteobacteria Alfa et les bactéries Gram positif. Depuis les boîtes LexA de ces micro-organismes savait déjà, était de rechercher les raisons dans leurs génomes. Une fois analysés les résultats biocomputaiconales, dans chaque cas était de valider ces résultats expérimentalement choix d'une micro-organismes comme représentants. Dans le cas de Proteobacteria Alfa a été choisi pour Sinorhizobium meliloti, et comme Gram positif bactérie Bacillus subtilis en ont été élus. Dans les deux microorganismes données expérimentales ont coïncidé entièrement obtenus dans le 'in silico. L'ensemble des résultats a montré qu'il existe une grande variabilité dans le contenu de regulón LexA dans le Dominion bactéries. Cela suggère l'existence d'un important transfert de gènes horizontaux dans le domaine de bactéries dans ce qui se réfère à cette regulón.

Auteur: CALLÉN MORÉU ELSA.
Année: 2004.
Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
Lieu de l'exposition: ESCUELA DE POSTGRADO.
Lieu de préparation: ESCUELA DE POSTGRADO.

Résumé: Anémie de Fanconi (FA) est une maladie génétique autosomique récessive dans la nature et se caractérise par une de graves malformations à la naissance, de la moelle échec et une forte propension à acquérir des tumeurs solides et la leucémie myéloïde aiguë. La FA cellules, possèdent une grande instabilité chromosomique spontanée et induite par deux agents de inducteurs liens croisés. Parmi ses autres caractéristiques cellulaires réactivité aux dommages oxydatifs, les échecs dans le cycle cellulaire, l'apoptose des niveaux élevés de régulation de la transcription et pauvres telomeric dysfonctionnement. Jusqu'à présent, il a été décrit qu'il ya 12 gènes qui peuvent provoquer différentes maladies, mais pas la totalité d'entre eux ont été clonés et caractérisés. Parmi eux, FNACE est le plus fréquemment trouvé muté dans la population et présente un large spectre de mutations, de grandes suppressions d'être l'un des principaux. Une meilleure compréhension de la biologie de cette maladie nous permettra d'avoir une vue plus complète de la réparation adaño dans l'ADN en réponse à des agents spécifiques ainsi que d'une meilleure compréhension des interactions moléculaires qui existent entre les différents syndromes génétiques et ont un diagnostic indiscutable Et la valeur thérapeutique. Dans cette thèse ont été soulevées quatre objectifs principaux et généraux, qui sont: Pour établir les liens potentiels entre l'característics hématologiques maladie et de certaines des caractéristiques cellulaires telles que le raccourcissement telomérico et numériques ou structurelles anomalies chromosomiques. * Caractériser génétiquement les personnes touchées par l'anémie de Fanconi espagnol. * Explorer le rôle de la FA voie de la biologie et de l'entretien telomérico. * Pour l'étude de la biologie moléculaire du FA itinéraire en réponse à des dommages génomiques. Avec les études réalisées, il ya eu un raccourcissement telomérico accélérée dans les patients Fanconi accompagnée d'une augmentation du nombre de fragments extrateloméricos et des fusions, bien que cet excès fusions terminaux survient indépendamment de la présence de TRF2 dans telómero. En outre, cette diminution n'est pas directement lié à la gravité de la maladie à sang. Si elle se rapporte, mais avec le sang fréquence de la maladie chromosomique bris spontanés. En outre, il a été étudié de façon exhaustive et caractérisé la population de Fanconi espagnol, avec un accent particulier sur les porteurs de mutations dans le gène FNACE et de la population tzigane, de posséder plus fréquemment porteurs de mutations dans le monde FNACE. Un point important tirées de ces études est la participation de l'histoire H2AX sein de l'itinéraire de Fanconi en réponse à la irradicación avec UV-C.

Auteur: MORALES GERMAN MÓNICA.
Année: 2004.
Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
Lieu de l'exposition: ESCOLA DE POSTGRAU.
Lieu de préparation: ESCUELA DE POSTGRADO.

Résumé: Les melons (Cucumis mélo L.) est un légume d'une grande importance économique dans laquelle il existe de nombreux programmes d'amélioration génétique. L'un des objectifs de ces programmes a été l'incorporation de la résistance génétique par rapport à des agents pathogènes qui causent des pertes économiques importantes dans cette culture. Le virus de taches nécrotiques de melon (MNSV) est un Carmovirus endémique à la famille de Cucurbits cultivés sous serre. La seule résistance décrit jusqu'ici comparativement à MNSV est conférée par le gène nsv du melon récessif. Cette résistance est efficace par rapport à la grande majorité des isolats connus du virus. On en sait peu sur le mécanisme de la résistance de l'interaction MNSV / nsv. Ainsi, l'étude de cette résistance par le biais du clonage du gène nsv nous permettra de comprendre la stratégie utilisée par le virus pour infecter l'usine et cette information peut être utilisée pour contrôler ce virus. On en sait peu sur le mécanisme de la résistance de l'interaction MNSV / nsv. Ainsi, l'étude de cette résistance par le biais du clonage du gène nsv nous permettra de comprendre la stratégie utilisée par le virus pour infecter l'usine et cette information peut être utilisée pour une meilleure maîtrise de ce virus. Le principal objectif de ce travail a été le clonage du gène nsv travers clonage positionnel stratégie. Premièrement, le gène nsv a été cartographié dans le groupe ligamiento 11 de la génétique plan de melon généré dans notre laboratoire. Ensuite, une population de 69 LDHs a été utilisée pour obtenir des marqueurs AFLP et RADPs lié à la gène nsv grâce à la stratégie de "Bullked Segregant Analysis." Haute résolution Deux cartes génétiques ont été construites en deux populations différentes, un F2 de 408 personnes Et BC1 de 2727 individus. Les marqueurs flanqueantes et que cosegregaban avec le premier gène de la population LDHs ont été convertis en marqueurs PCr à être utilisé facilement dans ces vastes populations. En outre, deux gènes de la BAC de melon, générés à partir d'un génotype résistant MNSV et un autre d'un objet, ont été examinées avec ces marqueurs et a obtenu un physique carte de la région du gène nsv travers chromosomiques marcher. La population F2 marqueurs flanqueantes gène 1L3 et 5B3sp6 étaient séparés par 4 recombinés, alors que la population BC1 marqueurs flanqueantes étaient 1L3 et 10O16sp6 à 20 le nombre de recombinaison entre eux. La relation physique à distance / distance génétique dans cette région du génome de melon a été estimée à 228 Kbit / cM, relation optimale pour mener à bien le clonage positionnel du gène. Enfin, elle est parvenue à identifier le BAC 1-21-10 contenant physiquement gène nsv. L'existence de microsintenia dans laires région du gène nsv avec une région du génome d'Arabidopsis a permis l'identification d'un gène candidat pour nsv pour rapidement. Nous avons identifié le facteur d'initiation de la traduction 4E (eIF4E) comme candidat à nsv, qui avait déjà été identifié comme responsable de la résistance aux potyvirus poivron, les pois et la laitue. Le développement d'un marqueur PCR de eIF4E de melon confirmé qu'il cosegregaba avec le gène nsv dans les populations F2 et BC1. 365 NSV et l'histidine dans les deux génotypes sensibles. Probablement, cette mutation dans la eIF4E est responsable de la résistance dans PI161375.

Auteur: CALERO NIETO FERNANDO JOSE.
Année: 2004.
Université: CÓRDOBA.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS.
Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS.

Résumé: F. Oxysporum infection secret pendant de nombreuses enzymes extracellulaires qui sont responsables de la dégradation de l'usine mur de leur plante hôte. Un groupe important de ces enzymes est le complexe xilanolítico qui est responsable de degradarel polímerode xilanoque apareceen fraction hemicelulósicade mur végétal. Il a foxlnR isolé le gène qui code une protéine qui contient un domaine de fixation à l'ADN du type de binúcleo zinc. Ce gène a une transcription basale que transitoirement induite en présence d'une source de carbone comme induisant xilano de son d'avoine, et qui sont l'objet de répressions, en présence de la répression des sources de carbone, tels que le glucose. La transcription de foxlnR pas affecté par le pH quantitative de l'environnement, bien que son induction se produit à des moments différents en fonction du pH de la croissance du champignon. Le inactivaciónde foxlnR entraîne une incapacité à produire de l'hydrolyse xilano halo de couleur solide dans le milieu et la baisse d'activité en termes d'induire xylanase en milieu liquide. Contrairement à ce qui se passe à l'état sauvage dans la souche mutante du gène déficient foxlnR gènes xy12, xy13, xy14, xyl5 Et xyl6 pas augmenter leur transcription en termes d'induction. Ces données indicanqueel produit de gène foxlnR siégeant en tant reguladortranscripcional complexe xilanolítico. Contrairement à ce qui se passe dans les espèces du genre Aspergillus, la surexpression du gène foxlnR n'implique pas une augmentation de l'expression de gènes xy13, xyl4 Et xyl5 dans F. Oxysporum mais, au contraire, il diminue alors que son induction commence plus tôt. Le produit du gène foxlnR exerce son effet en se liant directement à la rivière 5'GGCTAA 3 'présence dans la région promotorade les genèses tructurales, velues a demostradoen ce travail dans le cas des gènes xy14. Il propose un mécanisme de régulation des gènes qui composent le complexe impliquant xilanolítico les performances du produit du gène foxlnR, de complejoHapy / s protéines / scapaces reconnaissant le rôle répresseur secuenciacon AGAA. Cette étude démontre pour la première fois l'implication de gènes qui composent le système xilanolítico depuis altérer les niveaux de foxlnR gène provoque une perturbation du comportement patotípico F. Oxysporumf. Sp. Lycopersici.

Auteur: JOVER GIL SARA.
Année: 2004.
Université: MIGUEL HERNÁNDEZ DE ELCHE.
Lieu de l'exposition: UNIVERSIDAD MIGUEL HERNANDEZ.
Lieu de préparation: UNIVERSIDAD MIGUEL HERNANDEZ.

Résumé: À faire des contributions à l'élaboration de l'analyse causale des feuilles de plantes, nous avons obtenu et étudié différentes souches mutantes d'Arabidopsis thaliana présentant des altérations de la morphologie des feuilles, que nous avons appelée incurvata (icu) et la rotonde (rhum). Les limbes de la multiplication végétative des mutants étaient icu recurva directement dans le faisceau, au lieu d'être presque niveau que celui de la circulation des souches, suggérant que certains processus associés à la spécification ou le maintien de dorsoventralidad feuille est modifiée. Les feuilles du rhum des mutants sont plus larges et arrondies à l'état sauvage, ce qui est une indication de la perturbation de la division ou à l'expansion des cellules qui contribuent à l'organogenèse feuille. Nous avons caractérisé la génétique et moléculaire 9 récessif des mutations appartenant à des groupes de'complementación ICU8, ICU9 et ICU15 établir, au moyen de clonage positionnel qui sont nouveaux allèles hipomorfos ou aucun des gènes HYPONASTIC LEA VES1 (HYL 1), ARGONAUTE1 (AGO1) et HUA Notre allèles hen1 et hyl1 seraient nuls et causé phénotypes similaires à ceux décrits précédemment. Les allèles ag01 - 51 et ag01 - 52 sont hipomorfos et causant radialización et adaxialización partielle ou totale végétatif quelques feuilles. Laisse pas radializadas de ces mutants ag01 montrer une transition entre la tige et les limbes beaucoup plus progressive que celle observée dans la forme sauvage. En outre, les cellules de l'épiderme de peciolos de mutants ag01 - 51 et ag01 - 52 montrer les caractéristiques morphologiques caractéristiques de la limbe. Ces résultats indiquent l'implication du gène AGO1 dans le cahier des charges et / ou le maintien de dorsoventralidad et proximodistalidad de la lame. Nous caractérisé la génétique moléculaire et de deux allèles insercionales, récessive et probablement zéro (icu4 - 3 et icu4 - 4), et deux au large, semidominantes et de prendre fonction (icu4 - 1 et icu4 - 2) gène ICU4, qui a indiqué que l'analyse des prises de position encode ATHS - 15, un facteur de transcription de la famille Homeodomain / Leucine Zipper 111 (HD - Zip 111). Allèles icu4 - 3 et icu4 - 4 ne cause aucun phénotype mutants, suggérant que le gène ICU4 et un autre membre de sa famille sont fonctionnellement redondantes esprit. Les allèles icu4 - 1 et icu4 - 2 sont porteurs d'une mutation dans une séquence complémentaire à celle des microARN miR165 et miR166, et entraîner une augmentation de la concentration des ARNm de gènes ICU4 qui est particulièrement évidente dans les feuilles. Les mutants icu4 - 1 et icu4 - 2 présenté végétatif courbure des feuilles, retardé la floraison et la transition entre les mineurs et les adultes des feuilles et des aberrations dans le développement des racines et des tiges, ainsi qu'une insensibilité à modérée ABA yal NaCl pendant la germination. Ces résultats indiquent que ICU4 est négativement régulée par un microARN et en participant au développement des racines et des tiges canaux vasculaires, dans le rôle de meristemos et à l'établissement des feuilles de polarité. Nous avons procédé à une analyse de l'expression des gènes chez les plantes ag01-51/ag01-51 et icu4-1/icu4-1 par hybridation sur Micro-damiers validée par RT-PCR quantitatif, nous avons identifié les gènes, directement ou indirectement, réglementée par AGO1 et ICU4. Il est intéressant de noter que, parmi les gènes dérégulés dans mutante icu4 - 1 sont certains impliqués dans les réponses au stress et dans le métabolisme et la signalisation de certaines hormones, dont l'ABA. Nous avons réalisé deux allèles mutants de synergie entre plusieurs des gènes AGO1, HEN1, HYL 1, HASTY (HST), et ICU 8 4 cette collaboration 4ab nfirman génétiquement que la relation fonctionnelle est supposé entre les quatre premiers, qui sont les composants ou prouvée Probables des machines dans la voie de microARN ainsi que ICU4, qui est une cible d'un microARN. Nous caractérisé la génétique moléculaire et de deux des mutants ron2, qui se sont avérés être porteurs de nouveaux allèles récessifs et hipomorfos gène LEUNIG (LUG), qui encode un correpresor transcription qui a été décrit pour la première fois son implication dans le développement de la fleur. Nos résultats montrent que RON2 (LUG) est impliqué dans le contrôle de la taille et la forme des feuilles, car elle participe au processus d'expansion cellulaire n'est pas polaire, éventuellement au moyen de la régulation transcriptionnelle des gènes liés à la croissance.

Auteur: Gómez Mateo Jorge.
Année: 2004.
Université: MURCIA.
Lieu de l'exposition: Facultad de biología.
Lieu de préparation: Facultad de Biología.

Résumé: Mucor circinelloides est un champignon filamenteux qui présente une large distribution. Il appartient à la classe Zygomycetes, caractérisée par une reproduction sexuée par la fusion gametangios soumettre champignons engendrent généralement cenocíticos et produire des spores aflageladas et immobiles. La lumière est imlpicada dans la régulation de nombreux processus métaboliques et le développement de nombreux organismes différents. Dans les champignons, la lumière est impliquée dans la régulation de nombreux processus, les grandes études sur le contrôle de l'expression des gènes par la lumière ont été menées dans la ascomiceto Neurospora crassa, une agence qui a caractérisé ce processus plus profondément au niveau moléculaire dans zigomicetos Phycomyces blakesleeanus et Mucor circinelloides. La souche de champignons sauvages frayer Mucor circinelloides présente blanc jaunâtre dans le noir, dans une période difficile jaune à être éclairée due à l'induction de la synthèse de b carotène. La suppression complète du gène crgA à cet acabit élimine le besoin de la lumière pour la synthèse des carotènes de champignons frai conduisant à une sobreacumulación tant en termes de lumière et de ténèbres. Le fait que les mutants nuls continuer à répondre à la lumière indique, toutefois, qu'il doit y avoir d'autres gènes impliqués dans l'induction de l'expression d de genescarotenogénicos par la lumière. Le principal objectif de cette thèse est donc identifier d'autres gènes impliqués dans la régulation de la synthèse des carotènes de la lumière. Parmi les candidats seront considérés comme des gènes des homologues crgA, s'adressant à ses homologues de gènes et la caractérisation des gènes WC - 1 et WC - 2 N. Crassa et sa caractérisation. Par l'analyse de séquences a montré qu'il existe un chevauchement de la région du génome de M. Circinelloides où le gène crgA. Dans la copie de la duplication a été identifié analysé le gène crgB, qui code une protéine qui a une structure similaire aux domaines de la protéine CrgA. L'expression du gène crgB est limitée par crgA et inductibles par la lumière, avec un motif d'accumulation caractéristique de réaction rapide messager gènes, et cela inclut fotoadaptación. La région du promoteur du gène crgB ont été identifiés et les séquences répétées palindromic trouvés dans d'autres gènes régulée par la lumière de M. Circinelloides et qui pourraient être impliqués dans la régulation de gènes crgB par la lumière. Des expériences ont été menées interruption et silencieux gène crgB, ce qui suggère que le gène crgB joue un rôle essentiel dans M. Circinelloides. Par l'exploration d'une genoteca ADN génomique de la souche sauvage de Mucor circinelloides avec des sondes de gènes WC - 1 et WC - 2, a cloné le gène tzf - 1, ce chiffre avec des caractéristiques d'une protéine facteur de transcription due à la présence de zinc deux domaines doigt Et dont le discours est totalement dépendant de la gène crgA. Par l'amplification par PCR avec des amorces correspondant à la région de conserver la LOV domaine de fototropinas plante, également présente dans la protéine WC - 1 de Neurospora crassa a été cloné ADNc fragment d'un gène mwc - 1a ce chiffre avec une protéine de haute homologie à la Protéine codée par le gène WC - 1 N. Crassa. L'expression de mwc - 1a est légèrement réprimés par la lumière, est le gène crgA nécessaires à l'expression dans l'obscurité. Dans les expériences silencieux de l'expression des gènes mwc - 1a ont été isolés transformants pas en mesure de répondre à la lumière. L'analyse de ces transformants indique que le gène mwc - 1a n'est pas impliqué dans le contrôle de l'carotenogénesis par la lumière, ainsi que toute homologie avec des gènes de mwc - 1a est responsable de ce contrôle.

Auteur: BURILLO SANZ SERGIO.
Année: 2005.
Université: ALICANTE.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS.
Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS.

Résumé: La capacité des cyanobactéries d'adapter ses fonctions et le métabolisme à l'évolution de l'état de l'environnement dépend de composants cellulaires qui sont en grande partie inconnus. L'objectif de cette thèse a été de contribuer à la connaissance des réseaux pertinents de l'interaction entre les éléments impliqués dans la transduction du signal de stress azote, ainsi que d'établir des interconnexions entre la réglementation spécifique de l'azote et de la pénurie des réponses globales à des situations de stress, qui est de limiter l'azote Des inducteurs efficaces. Il a abordé la recherche d'interactions entre les protéines d'intérêt (NtcA, NblS, NbIR, NrtC et IIP) du ps Synechococcus PCC 7942 et ont été construits et analysés pour trouver des banques de gènes des protéines qui interaccinan avec RP dans le système de double hybride de levure. La N - acetil glutamate de la kinase (NAGK) et de la protéine a été appelé PipX ( "PII interactin protéine X") ont été identifiées par cette méthode. Les interactions entre PII - NAGK et PII - PipX, à la fois roman ont été par la suite validés avec différentes approches expérimentales ont indiqué que le premier est conservé dans les organismes qui effectuent la photosynthèse oxigénica et la deuxième en cyanobactéries. PipX interagit avec NtcA, qui relie les deux principaux régulateurs du métabolisme de l'azote dans les cyanobactéries. L'analyse bioinformatique et la co-évolution des interactions NblS - SipA respectivement appâts et proies sur les bulletins de vote dans la construction de gènes dans ces travaux suggèrent la possibilité de conservation delà correspondant interaction dans les cyanobactéries.

Auteur: Abellán Martínez María.
Année: 2005.
Université: MURCIA.
Lieu de l'exposition: Facultad de Biología. Universidad de Murcia.
Lieu de préparation: Facultad de Biología. Universidad de Murcia.

Résumé: Le gène carD de Myxococcus xanthus est impliqué dans la régulation de deux processus indépendants de cette bactérie, carotenogénesis et pluricellulaires développement, et est également impliqué dans le contrôle sur le 1% des gènes qui sont exprimés au cours de la croissance végétative. Parmi elles, ddvA, dont l'expression, à très haute tension dans la nature, a été annulé en arrière-plan mutante carD. Afin de trouver de nouveaux produits de gènes associés à CarD, nous avons identifié un certain nombre de mutations, mutations sud, qui éliminent l'effet des mutations carD sur l'expression de ddvA, et non sur les processus carotenogénesis et pluricellulaires développement. Dans ce document, nous avons examiné deux de ces mutations, la mutation Sud - 2 et la mutation Sud - 5 avant le clonage de la même par complémentation phénotypique. L'étude que les souches portant des mutations indiqué Sud et les souches porteuses de mutations et de la suppression du gène carD montre qu'aucun de ces exercices suppresseur des mutations en soi aucun effet sur les processus de carotenogénesis et le développement des pluricellulaires ou de l'expression de ddvA, et ils Sont en mesure d'éliminer les effets de la suppression des carD sur l'expression de ddvA avec la même efficacité avec laquelle l'effet d'éliminer les autres mutations carD. L'effet de la mutation Sud - 5 est compensée par l'introduction dans le génome de M. Xanthus un fragment de 6984 pb d'ADN, retrouvé sur une genoteca d'ADN chromosomique de M. Xanthus, causant une complémentarité évidente. Orf semble que les responsables de cette complémentarité en établissant une ATPase dans la classe AAA +, mais il semble y avoir aucune différence dans la séquence de ce gène et son promoteur entre la souche sauvage et la souche portant la mutation du Sud - 5. Pour étudier la relation entre cette mutation et orf suppresseurs de l'ATPase ont mené des expériences d'expression et de la surexpression de ce dernier orf montrant que le gène fournit un faible niveau d'expression et que son promoteur n'est pas réglementé par CarD ni Sud - 5, et Que l'effet observé n'est pas fait de l'augmentation des doses de l'ATPase. Testez le double hybride dans la levure n'ont pas identifié une interaction physique entre CarD et ATPase, mais ce dernier lui-même, compatible avec la structure oligomérica de AAA + protéines. La suppression du gène de l'ATPase n'affecte ni l'expression d'ddvA, à la fois l'absence et la présence d'une mutation carD de mutation Sud - 5 ou les deux, ni semble avoir aucun effet sur les processus de carotenogénesis et développement multicellulaire. L'effet suppressif de la mutation Sud - 2, qui après le traitement de diverses expériences, rétrocroisements et cotransducción semble lié à la qualité pour agir ddvA et d'une distance de 10 ko, compensée par l'introduction dans le génome de M. Xanthus un fragment de 4344 pb Situé à 10 ko en amont de ddvA, entraînant une complémentation apparente, qui est également observé avec toute subfragmento petits inclus dans la pièce originale. Toutefois, la séquence de cette portion de l'ADN d'une souche portant la mutation Sud - 2 ne présente pas de différences avec la même séquence de l'ADN fragment de la souche sauvage. Une telle complémentarité est également manifeste lorsque le fragment de 4344 pb ou à l'un des subfragmentos testé est intégré dans un site hétérologue génome de M. Xanthus. Néanmoins, il a mené une analyse de la qualité pour agir ddvA. L'emplacement des gènes ddvA aval et couplé traduccionalmente un gène qui détermine un possible facteur sigma Décompte SCD de la famille, ainsi que d'autres commentaires, a suggéré la possibilité que DdvA ils ont été un facteur de lutte sigma. La génération des fusions Comp 8 scripcio 572 tions lacZ gène et suppressions souches transportant deux gènes dans la cité a identifié deux régions situées en amont promoteur des gènes identifiés, qui sont réglementés par l'éventuel positifs et négatifs facteur sigma Décompte par DdvA. Les deux promoteurs sont aussi positivement réglementée par la protéine CarD. Il a également analysé la dépendance de CarD deux nouveaux partenaires potentiels facteur sigma Décompte ECF - facteur de lutte sigma M. Xanthus, de telles unités dans un cas, si elles sont déjà trois systèmes facteur sigma Décompte ECF - facteur de lutte sigma sur M. Xanthus réglementée Par les protéines CarD.

Auteur: TÍO BARRERA LAURA.
Année: 2005.
Université: BARCELONA.
Lieu de l'exposition: FACULTAT BIOLOGÍA.
Lieu de préparation: DEPARTAMENTO DE GENÉTICA - FACULTAD DE BIOLOGÍA - UNIVERSITAT DE BARCELONA.

Résumé: Le metaloproteínas sont un groupe de protéines qui se caractérisent principalement par la présence d'atomes métalliques que fonctionnelles. Ces ions métalliques sont essentiels pour une bonne structure, la stabilité et / ou la fonction des protéines. Près d'un tiers du total en protéines peuvent être considérées metaloproteínas et au sein de ce grand groupe, notamment metaloproteínas (MT). Ils montrent certaines caractéristiques qui le distinguent des autres metaloproteínas: * L'ion métallique est toujours coordonnés par des liens avec les protéines thiols le type de cisteínas présent S dans la chaîne polypeptidique (Cys). * Ils sont de petits poids moléculaire (environ 12 kDa). * Ils ont un pourcentage très élevé de Cys dans sa composition (environ un tiers du total des acides aminés), ce qui leur donne leur capacité élevée de métaux lourds chélateur. Chez les mammifères ont été isolés pour un maximum de quatre gènes codant pour metalotioneínas (isoformes NMTI, MTII, MTIII, MTIV). Ces gènes sont tous dans la même région chromosomique, qui constituent le "groupe metalotioneínas", qui est interprété comme le résultat de processus évolutifs de la duplication de gènes. Dans l'espèce humaine, certains famille (MTI) a encore un degré plus élevé de duplicité, le double subformas (MTIa, MTIb, etc), qui n'est pas connu au niveau mondial de signification fonctionnelle. En d'autres espèces de mammifères, comme la souris, a été décrite seulement l'existence d'un membre de chaque famille (MTI à MTIV). Il ya une grande similitude entre les différents TM isoformes de la même espèce: souris différences aminoacídicas variant entre 15 bis (MTI - MTII) et 27 bis (MTI - MTIV). Cette similitude est accentuée entre les mêmes protéines de différentes espèces (entre MTIV souris et l'homme il ya seulement 4 des substitutions de bis). Par contre, il ya de grandes différences dans le champ d'application des modes d'expression de ces isoformes. Alors que MTI et MTII résume ubiquitously, mais surtout dans le foie et les reins, après l'empoisonnement par les métaux, MTIII et MTIV ont une expression particulière, sintetizándose seulement dans le système nerveux et dans l'épithélium pavimenteux stratifié, respectivement. Tous MT sont exprimées simultanément dans decidual tissus. Dans le groupe de travail avait déjà étudié les capacités coordinativas de moustiquaires imprégnées d'insecticide et MTII, donc vu les différences dans la séquence et le mode d'expression présenté, il a été jugé approprié d'examiner également la MT4 et de comparer leurs résultats avec leurs prédécesseurs. Depuis la metalotioneínas chez les oiseaux d'insertion amonoacídica au même endroit que MTIV, et gardant à l'esprit que les études de l'évolution mis MTIV plus proche d'eux ne MTI est la capacité proposée étude coordinativa de ckMT (métallothionéine poulet) et de ses domaines, afin de déterminer si Ressemblait plus le comportement de MTV ou MTI. Le système de MT Drosophila melanogaste comprend 4 isoformes (MTO, MTN, ERM, BAT), qui est connu caractéristiques coordinativas des deux premières. Étant donné l'ignorance totale sur les interactions possibles de MT a été jugé opportun de l'étude de deux hybrides avec le MTO et d'une bibliothèque D.melanogaster adulte. Résumant les principales données de ce travail sont: * MT4 a préféré coordonner monovalents métaux. * CkMT comporte d'une façon similaire à la MT12 en présence de métaux divalents et MT4 en présence de métaux monovalents. * Cl - ions et S2 - semblent avoir un rôle important dans la stabilisation de certains MTs et selon le métal sont de coordination. Dans les deux expériences hybrides ont obtendio 17 des clones qui sont positifs: * Tioredoxina peroxydase: l'interaction a été constaté par un procès TPS déroulante. * Hmólog de la guanine -ment protéine de liaison. * Vhac39 alors que la séquence a été cloné dans une position qui ne correspondait pas à leur mode de lecture qui a généré une protéine aa n'entre dans aucune décrit jusqu'ici. Ce résultat est considéré comme négatif.

Auteur: LOPEZ PEREZ ANTONIO JOSE.
Année: 2005.
Université: MURCIA.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Lieu de préparation: UNIVERSIDAD DE MURCIA.

Résumé: Le rapport de recherche présenté porte sur deux objectifs principaux: 1 - Mettre au point un protocole pour la régénération des plants de vigne par embriogenesis somatiques. 2-Pour établir les paramètres de base pour la transformation de cellules embryogènes callosités grâce cocultivo avec agrobacteium tumefaciens. Les résultats ont permis au premier but d'établir un protocole pour la régénération des plants de vigne par embryogenèse somatique dans trois variétés de raisins de table (sans pépins cramoisi, et sugraone cadeau Marian). Le type de explanto (anthères ou des ovaires), de l'additif au milieu de culture de charbon activé et la morphologie des embryons somatiques différenciée de callus embryogènes sont les trois facteurs qui ont nui à l'efficacité du protocole de régénération. Une fois embryogènes callosités et le protocole établi par la régénération, s'est adressé à la transformation de cellules végétales en utilisant agrobacterium cramoisi les variétés sans pépins et sugraone. La mise en place d'une procédure avec un haut rendement de conversion a été divisé en trois phases: 1-Mise en place de la concentration de l'antibiotique kanamycine. Les expériences ont montré que les tripes embriogénicos pépins de cramoisi et sugraone montré sensibilité différente à la kanamycine. Alors que dans la variété de graines cramoisi est inhibé la différenciation des embryons à 20 mg / l kanamycine, dans la gamme sugraone a pris 50 mg / l. 2, - Influence des contraintes agrobacterium et de la densité de l'inoculum. Études de transformation a porté sur deux souches différentes de agrobacterium (EHA 105 et C58 (pMP90)). De même, les deux souches ont été utilisés à différentes densités d'inoculum (DO600 = 0,06 et 0,2). Dans tous les cas, la souche 105 EHA montré une plus grande efficacité et a montré que la densité de l'inoculum plus efficace était différente selon la variété (0,06 en cramoisi seedles et 0,2 en sugraone). 3-Effet de la méthode de culture. Des expériences menées à ce stade, de conclure que la culture de callus embryogènes après l'infection et cocultivo avec agrobacterium membrane sur le renforcement de l'efficacité du processus de transformation. La croissance callus embrogénico sur membrane permis de récupérer plus d'embryons transgéniques et finalement régénérer les plantes transgéniques et les pépins sugraone cramoisi.

Auteur: PORTA PELAYO JAVIER.
Année: 2005.
Université: MÁLAGA.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS.
Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS, UNIVERSIDAD DE MÁLAGA.

Résumé: S.senegalensis est une espèce à fort intérêt économique qui est au stade initial de leur récolte. Par conséquent, il existe un besoin pour des outils moléculaires pour étudier les caractéristiques génétiques de leurs animaux reproducteurs, ainsi que leur évolution au cours de générations successives de la culture. Les objectifs de ce travail sont: 1-Obtention demarcadores microsatellites pour l'espèce S.senegalensis. 2-Valoriser ces outils pour la caractérisation génétique des animaux reproducteurs d'une entreprise dans le secteur. 3-Étudier la variabilité génétique des différents acteurs de différents stocks de reproduction. 4-player Redéploiement capital social d'une société dans le secteur dans cinq réservoirs soumis à des estimateurs de la parenté, d'optimiser les ressources stock. 5, - Développement d'un outil automatique PCR multiple pour application à l'étude du pedigree de cette espèce. Les constatations et conclusions sont présentées ci-dessous. 1, - ont été isolées 15 loci microsatellitaires espèces Solea senegalensis et autres 3 Solea solea adapté à l'étude s.senegalensis, qui représentent un outil utile pour l'étude de la génétique des populations naturelles et cultivées. 2 - Le complets pour les 5 loci: AF441385, AF441387, AF441389, AF41390 et AYA426693 a montré des caractéristiques appropriées pour mener l'analyse génétique de pdigrí sous les conditions de culture. 3-pedigree études menées sur une période de mise au sein d'une entreprise, montrent que une femme et deux hommes ont été responsables de plus d'un million de descendants, ce qui donne une idée de la forte capacité de reproduction de cette espèce. 4 - Le groupe formé par les 8 loci: AF441385, AF441387, AF441388, AF441389, AF441390, AY426692, AY426693 et AF173849, se sont avérées utiles dans la caractérisation génétique de ces deux groupes de la maison cultivées et sauvages. Il a également fait ses preuves dans l'estimation des valeurs de la parenté en l'absence de données pedigrees. 5 - L'analyse génétique de plusieurs groupes d'éleveurs capturés dans la baie de Cadix montrer à des échantillons représentatifs d'une population sauvage homogène. La caractérisation génétique de cette population par le biais de 8 loci révélé de fortes valeurs de la variabilité génétique, avec un nombre moyen d'allèles par locus de 15,1 et un hetrocigosidad attendus 0,84. Ces valeurs sont de l'ordre de celles qui sont décrites dans diverses espèces marines. 6-L'analyse génétique de groupes d'individus nés en captivité et utilisé comme acteurs dans plusieurs installations consacrées à la culture du S.senegalensis montrent de la variabilité génétique des valeurs très inférieures à celles exposées par les individus de l'environnement naturel. Cette réduction drastique du niveau de variabilité est due à l'incorporation du stock reproducteur à un nombre élevé de personnes ayant des liens étroits de parenté. 7 - L'utilisation généralisée des individus nés en captivité, les forts effets de la dérive génétique et de sélection causée par des conditions artificielles de la cultivation-pratique, l'ignorance des relations de parenté entre individus, la haute capacité de reproduction et de la traite des animaux entre les installations, a abouti à une détérioration significative De la variation génétique dans une grande partie du stock des joueurs travaillent à l'opération dans l'enquête de cette nature. 8 - La perte significative de la variation génétique de ces domicile peuvent être cultivés stock nuisant à la capacité d'adaptation de ces groupes. En outre, l'inclusion dans l'élevage d'un grand nombre d'individus de graves goulets d'étranglement peuvent provoquer une augmentation substantielle du travail consanguinité dans les prochaines générations causant 8 Ndo efec 59 ter indésirables provenant de la toux homocigosis et donc impropre à la pose de fondations de l'avenir de la récolte de Cette espèce. 9 - L'utilisation de ces outils génétiques pour résoudre de nombreux doutes culture de cette espèce, et dans leur comportement reproducteur. Ces connaissances nous permettent d'effectuer un contrôle approfondi de la reproduction et, par conséquent, faire une bonne sélection de personnes qui sont utilisées comme lieux de reproduction, de manière à assurer la conservation des ressources génétiques existantes. 10, a été mis au point un outil automatisé pour l'analyse de 5 microsatellite loci grâce à de multiples méthodes de PCR. Cette méthode permet de réduire le temps et le coût de la technique, en minimisant la manipulation, et donc le risque d'erreur de manipulation. Pour effectuer une telle analyse est nécessaire, seule une petite quantité d'ADN obtenus par des méthodes non invasives. En outre, la normalisation des loci permet aux employés de comparer les résultats des différents laboratoires.

Auteur: RELAT PARDO JOANA.
Année: 2006.
Université: BARCELONA.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE FARMACIA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE BIOLOGÍA - UNIVERSITAT DE BARCELONA.

Résumé: L'augmentation des triglycérides et acil - CoAs peut se produire en cas d'obésité ou hypersécrétion d'insuline et leur accumulation dans les tissus périphériques tels que le muscle ou pancréatiques peuvent affecter l'absorption de glucose et de la fonctionnalité des cellules bêta, respectivement. Le contrôle des niveaux d'acides gras en début de l'obésité et le diabète de type2 serait, comme cela réduira hyperinsulinemia et de la résistance à l'insuline et associée éviter lipotoxicidad causé par l'accumulation de graisse sont métabolisés bêta est mitochondriale. Il s'agit d'un processus finement régulée qui présente un point critique à l'entrée des acides gras à la matrice mitochondriale. En raison de leur hydrophobie, les acides gras longs sont incapables de passer à travers la membrane mitochondriale et ont besoin d'un système de navette, le système de carnitine palmitoiitransferasa. Ce système se compose de trois enzymes qui catalysent la translocation de longue chaîne d'acides gras par le biais d'un mécanisme dépendant de carnitine. Il s'agit d'un système régi essentiellement par l'enzyme de carnitine palmitoiitransferasa1 (CPT1), qui catalyse la formation de tioésteres de acils CoA d'acides gras longs de carnitine, générant acilcarnitinas en dehors de la membrane mitochondriale. Le CPT1 est une protéine contrôlée transcriptionnelle niveau et le niveau alostérico par l'intermédiaire de son inhibiteur physiologique, malonil CoA. À l'étude des mécanismes de régulation transcriptionnelle des CPT1B ont été utilisées 380 pb région du promoteur du CPT1B humaine où ils avaient déjà été marquées d'un élément de réponse au récepteur activé par les proliférateurs de peroxysomes (PPAR), une réponse à des facteurs miogénicos de famille MyoD. Les résultats des expériences de transfection transitoire décrire un mécanisme de coopération et de synergie entre PPARalfa et MEF - 2c dans l'expression de CPT1D humaines, ainsi que d'un effet ransactivador différentiel entre PPARalfa et PPARdelta le promoteur étudié. Parallèlement a décrit l'implication d'un G / C réponse à des facteurs de la famille Sp dans le promoteur de l'activité basale étudiés. Parallèlement a décrit l'implication d'un G / Cde réponse à des facteurs delà Sp famille dans la base de l'activité de promoteur et le gène transactivation par PPARalfa, grâce à l'union du facteur de transcription Sp1 à l'ADN. Outre delas décrit interactions fonctionnelles ont été décrites in vitro de physique des interactions entre PPARalfa et MEF - 2C et entre PPARalfa et Sp1. L'étude de la régulation de l'activité enzymatique de CPT1 a été cloné et caractérisé l'enzyme CPT1B porc et ont généré des protéines quiméricas entre CPT1A rat et CPT1A porc, dans le but de localiser les régions de la protéine importante dans la détermination des constantes cinétiques de ces enzymes, en particulier Ceux qui peuvent influer sur la sensibilité malonil CoA de la protéine. D'après les résultats, il apparaît que la CPT1B porc caractéristiques cinétique venir à un isotipo A, bien qu'il représente une identité en acides aminés avec isotipos Par cette chimères entre CPT1A rat et CPT1A porc confirmer l'existence d'une position dominante positive et négative dominante dans le N - Terminal de la région de isotipo A du CPT1. Il conclut également que la région C terminale de CPT1 se comporte comme un seul domaine fonctionnel. Enfin, le document décrit un mécanisme indépendant malonil CoA dans l'activation du système par le CPT composé synthétique C75.

Auteur: TÉLLEZ BESOLI NOÈLIA.
Année: 2006.
Université: BARCELONA.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA.

Résumé: La transplantation d'îlots pancréatiques est une nouvelle thérapie pour le traitement de type 1 diabète. Des études antérieures dans notre groupe ont montré que durant les premiers jours après la transplantation d'îlots, où il ya une perte de plus de 60% de la masse initialement transplantées, il ya une augmentation de l'expression de IL - 1. L'antagoniste du récepteur de l'interleukine 1 (IL - 1Ra) est un antagoniste naturel que la concurrence avec les IL - 1, d'interagir avec les récepteurs de type 1, mais ne prend pas l'initiative de la transduction du signal. Les hypothèses sur lesquelles elle a fondé ce travail est que proinflamatoria cytokines, IL - 1, est impliquée dans la transplantation d'échec. Nomination de la surexpression de IL - 1Ra comme une stratégie visant à améliorer le pronostic de la greffe singénico des îlots pancréatiques. Ainsi, l'objectif général de cette étude est de déterminer si la surexpression de IL - 1Ra dans les îlots pancréaticos protège les cellules bêta des effets délétères de IL - 1 sur les îlots de culture et améliorent le pronostic de transplantation. Pendant toute la période d'étude ont été utilisés Lewis îlots de rats qui ont été infectées par le 6,26 X 106 pfu de adénovirus que codifié par la protéine fluorescente verte gène delà (Ad - GFP), la bêta galactosidasa (Ad - LacZ) ou par le atagonista récepteurs IL - 1 (Ad - IL - 1Ra). 48 h après l'infection, 100% des blocs ont été infectées et 30% de la cellule sinsulars exprimer le transgène. Les îlots ont été exposés à 50U/ml de IL - 1beta pendant 48h, après cette date ont été inclus dans la paraffine et traitées pour immunohistochimie. L'exposition des îlots proinflamatoria cytokines IL - 1 a conduit à une augmentation de l'apoptose inhibition de la réplication des cellules bêta qui ont été annulées par la surexpression de IL - 1Ra. Plus tard, des groupes de 500 îlots non infectée ou infectés par Adl - lL - 1Ra ont été transplantées sous la capsule location Lewis des rats diabétiques par injection simples estreptozotocina. Les greffes d'îlots ont été récupérés après 3, 10 ou 28 jours de la transplantation et ont été traitées pour immunohistochimie. Les greffes d'îlots sobreexpresaban 1Ra montré des niveaux élevés de l'apoptose (pour déterminer la technique de TUNEL) des cellules bêta, ce qui est inférieur greffes de contrôle à tout moment étudiées. La réplication des cellules bêta (Déterminé par incorporation de BrdU) a été seulement stimulé les greffes jour 10, bien que les îlots ont été dans des conditions d'hyperglycémie où il est prévu de stimulation delas réplication des cellules bêta. Au lieu de cela, les greffes d'îlots sobreexpresaban 1Ra montré des niveaux élevés de la prolifération des cellules beta stimulé le respect, qui sont normales dans un pancréas. Enfin, la surexpression de IL - 1Ra conduit à la récupération du corps des cellules bêta (déterminé par morphométrie) perdus dans les premiers jours après la transplantation d'îlots. Les effets positifs de la surexpression du IL - 1Ra sur la viabilité et la prolifération des cellules bêta de masse ont abouti à un meilleur pronostic de la transplantation d'îlots, et que 100% des animaux transplantés avec 800 îlots sobreexpresaban 1Ra récupéré le normoglicemia à 14 jours après la transplantation, cependant Seulement 40% de la transplantation d'îlots de contrôle revient au diabète. De ces resutlados conclu que IL - 1 est impliquée dans la transplantation de l'échec et doit jouer un rôle central, car seul bloc son acicón clairement améliorer le pronostic de la transplantation.