MYCOLOGY

Auteur: ORTONEDA PEDROLA MONTSERRAT.
Année: 2003.
Université: ROVIRA I VIRGILI [www.urv.cat].
Lieu de l'exposition: MEDICINA.
Lieu de préparation: FACULTAT DE MEDICINA, UNIVERSITAT ROVIRA I VIRGILI.

Résumé: Le nombre d'infections graves causées par des champignons a augmenté de manière significative au cours des dernières années, en particulier chez causé par la prétendue champignons opportunistes. Ces derniers ont tendance à causer des infections chez les patients souffrant d'autres maladies de base, tels que la leucémie, le sida, le cancer, ou qui ont reçu une solide greffes d'organes ou de moelle osseuse. La liste des espèces de champignons opportunistes impliqués dans des infections graves est de plus en plus longtemps, et des stratégies pour faire face à ces infections demeurent très limitées. Les trois genres filamenteux opportunistes qui ont été étudiés dans cette thèse, Fusarium Scedosporium i Paecilomyces au sein de ce groupe sont des champignons opportunistes. Bien que seulement causant de graves chez les patients immunodéprimés, le taux de mortalité de ces infections est proche de 100%. Amphotéricine B est depuis de nombreuses années, et il l'est toujours aujourd'hui, les drogues les plus couramment utilisés pour traiter les infections systémiques, mais il a des problèmes de toxicité significative. Au cours des dernières années ont mis au point d'autres formulations de cette drogue, qui présente moins de problèmes en termes de toxicité. L'objectif principal de cette thèse était d'évaluer l'efficacité de l'une des nouvelles formulations de l'amphotéricine B, établi liposómico dans des modèles animaux d'infection par le diffusées. Afin de comparer les différents traitements, en premier lieu, ont dû élaborer des modèles animaux d'infection pour chacune des champignons étudiés (à l'aide de la souris), qui sont reproductibles et qui permet de simuler l'homme fongique. Une fois mis au point des modèles animaux comparant l'efficacité des deux formulations de l'amphotéricine B dans le traitement des infections causées par les champignons étudiés. Cela a été évaluée en comparant les temps de survie (MST) des différents groupes en utilisant les méthodes statistiques. Il a également comparé le montant de champignon présentes dans les différents organes de la souris, qui ont été tués lorsque le traitement terminé. Une partie de l'amphotéricine B, qui est, comme nous l'avons dit, la drogue la plus communément utilisée pour lutter contre les infections opportunistes provoquées par les champignons, il existe d'autres agents antifongiques, mais se sont avérés inefficaces, du moins in vitro, et les résultats cliniques sont très rares. C'est pourquoi nous avons voulu évaluer l'effet synergique potentiel de certaines combinaisons de antifongique in vitro,. En résumé, les principales conclusions tirées de ces études sont les suivants: 1, - ont été établis des modèles d'infection chez les souris diffusées par les espèces suivantes: Paecilomyces variotii, P.lilacinus, P.javanicus, Fusarium verticillioides. Scedosporiium prolificans, S.apiospermum dans immunocompétents et immunodéprimés souris. 2 - Nous avons évalué l'efficacité de ces deux antifongiques formulations de l'amphotéricine B (desoxicolato et formulation liposomale) dans les différents modèles expérimentaux de l'infection développée dans la première phase de ces études. Chez les souris infectées par P.variotti, les deux formulations étaient aussi efficaces à faibles doses, mais l'administration de l'amphotéricine B liposomale à 10 mg / kg, a abouti à une diminution sensible de la présence du champignon dans certains organes. La faible dose d'amphotéricine B liposomale a soulevé la TMS de souris infectées par F.verticillioides. Des doses élevées aussi fait baisser sensiblement la présence du champignon dans divers organes. Chez les souris infectées S.prolificans, il ya eu une augmentation des TMS, qui a été la plus évidente à la plus forte dose liposomale de l'amphotéricine B. L'administration du facteur de stimulation des colonies de granulocytes avec la thérapie antifongique n'a pas amélioré les résultats. 3, a été évaluée in vitro de l'activité de neuf des combinaisons de antifongiques contre diverses espèces du genre Fusarium et Paecilomyces. Les combinaisons qui sont comportés de façon synergique pour un plus grand nombre de souches de Fusarium a été de ravuco 8 nazol conjointement 299 mbinado la fois avec l'amphotericin B comme la terbinafine, et le second combiné avec le voriconazole. Les combinaisons qui sont comportés de façon synergique pour un plus grand nombre de souches ont été Paecilomyces tous combiné à la terbinafine azolés.

Auteur: LÓPEZ ERRASQUÍN ELENA.
Année: 2004.
Université: COMPLUTENSE DE MADRID [www.ucm.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Lieu de préparation: FAC. BIOLOGIA.

Résumé: Dans ce travail, ont été isolés par DDRT-PCR (differential display) de deux gènes codeurs transporteurs ABC (fvabc) et MFS (fvmfs), qui ont montré une expression induit une souche de Fusarium verticillioides fumonisines produit par rapport à un autre non-producteur. La séquence de ces gènes a été prorogé par RACE (amplification rapide des extrémités d'ADNc) pour la caractérisation de la séquence génomique et de codification des marchandises ainsi que la séquence d'acides aminés déduite. Il a également eu la présence de deux gènes, ainsi que le transporteur de cluster de biosynthèse fumonisines codée par le gène fum19 dans différents isolats F.verticillioides producteurs et non producteurs fumonisines et les différentes espèces du genre Fusarium, dont le complexe d'espèces Gibberella Fujikuroi, le nombre d'exemplaires qui étaient dans le génome et de la prairie de similitude entre les séquences. Les résultats ont montré que les transporteurs fvabc et fvmfs trouvée dans le génome de toutes les souches testées, à la fois producteurs et non producteurs. Pour la cotnrario, efum19 ne pouvaient être détectées dans les isolats producteurs. Dans tous les cas, étaient en un seul exemplaire dans le génome. Il a également réalisé une analyse phylogénétique, y compris les séquences des autres gènes dans la GenBank. Enfin, il a été analysé en temps réel par RT-PCR l'expression des gènes dans différents isolats F.verticillioides producteurs et les producteurs des fumonisines pas en mesure d'induire la production de fmonisinas et dans une position de contrôle, ainsi que dans la présence de différents toxiques Composés. Les résultats suggèrent une implication des deux transporteurs ABC à l'expulsion de la toxine, FVABC et de l'incidence de la résistance à de multiples drogues.

Auteur: BRENA ALONSO SONIA.
Année: 2004.
Université: PAÍS VASCO [www.ehu.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGÍA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE MEDICINA.

Résumé: Les membres du genre Candida, en particulier Ce micro-organisme, se comportent comme des agents pathogènes opportunistes, qui sont souvent isolés dans le tube digestif et de reproduction des individus sains. Dans certains facteurs prédisposants, Candida spec. Peut être transformée en un agent pathogène capable de provoquer une variété d'infections et systématique de la surface. Notre groupe a mis au point un anticorps monoclonal AMc C7, comparativement à une manoproteínade C.albicans présenté antifongiques et antitumorale activités, diminue adhisión Cell C.albicans de lignées cellulaires, les composites hybrides et résines utilisés dans la restauration dentaire, et des diminutions filamentation de C.albicans . Le manoproteína reconnus par le MAB C7 est également reconnu par le sécrétoire IgA dans la salive, qui est présenté comme un antigène especialinterés qui pourraient présenter un intérêt dans la pathogenèse de C.alvicans. L'identification de ces antigènes de haut poids moléculaire et la caractérisation du mécanisme d'action de AMc C7 à travers l'analyse microaarays ont été les cibles de cette recherche. Utilisant des techniques telles que l'analyse par séquençage de protéines - MALDI TOF et CLHP-UV Trampa Iónica, a été atteint d'identifier les protéines que Als3p. Cette protéine appartient à une famille de protéines C.albicans, Als famille, qui se compose de 9 tissus de l'hôte et différents substrats, qui représentent un rôle très important dans la pathogenèse du champignon. Il a été récemment montré que la fonctionnalité Lam olécula réside dans la partie N terminale de ces protéines. Dans ce document, nous avons démontré que le AMc C7 reconnaît une fraction de la fin aminés de la protéine Als3p, cette reconnaissance peut être liée à l'inhibition de l'activité de l'adhésion de C.albicans présentant cette AMc. Il a été aussi étudier la distribution des protéines similaires à l'Als, dans différentes espèces du genre Candida et d'autres liés aux femmes. En outre, l'analyse de microdamiers réponse C.albicans traitement avec AMc C7 aidé à identifier 79 gènes qui sont exprimés différemment dans les cellules traitées. Le modèle de l'expression de gènes codant des protéines impliquées dans le métabolisme du fer et le métabolisme de l'énergie a permis d'être un modèle pour l'action des anticorps, qui est engagé candidacida pourrait être causée par une carence en fer conduit à l'cellules traitées.

Auteur: RAMOS MARTINEZ MARIA BRISA.
Année: 2004.
Université: SALAMANCA [www.usal.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE BIOLOGIA.
Lieu de préparation: MICROBIOLOGIA Y GENETICA.

Auteur: BÁRCENA ASENSIO MARÍA CARMEN.
Année: 2004.
Université: ZARAGOZA [www.unizar.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE VETERINARIA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE VETERINARIA.

Résumé: Notre travail se concentre sur les éléments studio des dermatophytoses chez les animaux de la région autonome d'Aragon. Nous examinons les cheveux de 485 échantillons d'animaux suspectés de dermatophytoses (chiens, chats, les vaches, ovjeas, des chèvres, des chevaux et des lapins). Les lésions sont situées dans la région de la tête, le visage et les oreilles. Les dermatophytes isolats ont été trichophyton verrucosum (79,5%), Microsporum canis (61%), Trichophyton Mentagrophytes (58%) Trichophyton Equinum (50%) Microsporum Gypseum (27%) et Microsporum Persicolor (2%). Microsporum et Trichophyton Mentagrophytes Canis, sont les deux espèces les plus communément Microsporun Canis, à la fois chez les chiens (94%) et les chats (97%). L'âge (inférieur ou égal à 1 an) est un facteur statistiquement significative, ce qui influe sur l'apparence des dermatophytoses lso des animaux de compagnie. Dans les animaux, et en particulier le caractère masculin est obsdrva une plus grande prévalence de demratofitosis étant admeás estadíticamente signifciatio chat en espèces. Les espèces de Trichophyton géneor sont responsables de l'demratofitosis de la production animale dans les régions rurales. Trichophyton verrucosum dans les espèces bovine, ovine et carpina, Trichophyton equinum dans chevaux et trichophyton metagrophytes dans le lapin. Le champignon saprofítico plus fréquemment aisaldo dans tous epseices dans estuido appartient au genre alternarienne.

Auteur: GARCÍA SÁNCHEZ DANIA.
Année: 2005.
Université: ROVIRA I VIRGILI [www.urv.cat].
Lieu de l'exposition: FACULTAT DE MEDICINA I CIÈNCIES DE LA SALUT.
Lieu de préparation: FACULTAT DE MEDICINA I CIÈNCIES DE LA SALUT.

Résumé: Champignons ascomicetos a représenté 75% des espèces de champignons décrites jusqu'ici, toutefois étapes sexuelle ou teleomorfos ont été peu étudiés car ils ont été en mesure de récupérer seulement en culture pure de 10% de l'espèce. La principale difficulté dans l'étude de ces organismes est que l'Etat est tenu d'interrompre le temps de latence des ascosporas. À cette fin, appliquer des méthodes différentes de l'isolement et de l'activation ascoporas. Ils presisamnete méthodes de l'étude qui permettra de déterminer nos connaissances sur ce groupe d'organismes. La classification des ascomicetos, jusqu'à il ya quelques années reposait uniquement sur des critères morphologiques. Il est actuellement disponible méthodes plus objectifs, y compris l'inférence de relations phylogénétiques de séquences d'ADN ribosomique. Ces méthodes ont permis de proposer des systèmes de classification de plus naturel. Toutefois, la classification des ascomicetes il ya encore beaucoup de questions taxonomiques. La raison en est que de nombreux groupes dans les démarcations entre les taxons sont basées uniquement sur les caractères morphologiques, et ces relations ont tendance à avoir peu de rapport avec la phylogénie obtenue à partir de séquences d'ADN ribosomique. Nous avons mis l'accent sur l'étude du genre Neurospora et Gelasinospora et genres confinés à la famille Coniochaetaceae où des problèmes persistent plusieurs taxonomiques. Nous avons soulevé fr objectifs principaux: le 1er Contribuer à la connaissance taxonomique des membres de la classe Sordariomycetes. 2 ème déterminer les relations phylogénétiques entre les sexes Gelasinospora et Neurospora. 3 Géographie déterminer la phylogénie moléculaire de la famille Coniochaetaceae. Les principaux résultats sont ventilés comme suit: Une nouvelle espèce de Syspastospora des sols tropicaux. D. Garcia, AM Stchigel et J. Guarro. 2002. Mycologia 94: 862-865. - Il est proposé que les nouvelles espèces Syspastospora tropicalis sol ascomycetes de l'Espagne. XIII. Deux nouvelles espèces de Apiosordaria. D. Garcia, AM Stchigel et J. Guarro. 2003. Mycologia 95: 134-140. - Il existe des propositions pour de nouvelles espèces: Apiosordaria hispanica Apiosordaria globosa Une nouvelle espèce de Poroconiochaeta depuis le sol russe. D. Garcia, AM Stchigel et J. Guarro. 2003. Mycologia 95: 525-529. - Il est proposé que les nouvelles espèces Poroconiochaeta tetraspora - Propose une nouvelle combinaison de sexe Poroconiochaeta: Poroconiochaeta savoryi (= Thielavia savoryi) Deux nouvelles espèces de Sphaerodes de l'espagnol sols. D. Garcia, AM Stchigel et J. Guarro. 2004. Etudes en Mycologie 50: 63-68. - Deux nouvelles espèces: Sphaerodes quadrangularis Sphaerodes tenuissima - Trois nouvelles combinaisons de sexe Sphaerodes: Sphaerodes ellipsospora (= Microthecium ellipsosporium) Sphaerodes lévite (= Microthecium levitum) Sphaerodes singaporensis (= Microthecium singaporensis) Coronatomyces cubensis gène. Et. Sp. Novembre, un nouveau ascomycète du sol cubain. D. Garcia, AM Stchigel, J. Cano, et J. Guarro. 2004. Etudes en Mycologie 50: 143-148. Le projet genre nouveau Coronatomyces ordre Sordariales et des espèces nouvelles Coronatomyces cubensis Une synthèse et de nouveau circonscription de Neurospora (syn. Gelasinospora) basée sur ultrastuctural et 28S ADNr données sur les séquences. D. Garcia, AM Stchigel, J. Cano, J. Guarro et DL Hawksworth. 2004. Mycological Research 108: 1119-1142. - Il est proposé de réduire synonymies sexe Gelasinospora avec Neurospora. - Redescribe genre Neurospora sont proposées trente-six nouvelles combinaisons de sexe Neurospora. - Deux nouvelles espèces du genre Neurospora: Neurospora nigeriensis Neurospora uniporata - Non inclus dans le genre Neurospora espèces Gelasinospora amorphoporcta. Il suggère le nouveau genre 8 ou Pseudo 636 neurospora pour reubicarla dans la famille Sordariaceae et de la nouvelle combinaison Pseudoneurospora amorphoporcata. Une approche moléculaire à la taxonomie des Coniochaetaceae. D. Garcia, AM Stchigel, J. Cano, M. Calduch, DL Hawksworth et J. Guarro. (Acceptée sa publication au Mycological Research) - Il est proposé de réduire synonymies les genres Coniochaetidium, Ephemeroascus et Poroconiochaeta avec Coniochaeta - redescribe sexe Coniochaeta neuf combinaisons sont proposés pour le nouveau genre Coniochaeta - Exclut le sexe Coniochaeta espèces Coniochaeta emodensis et Coniochaeta nodulisporioides sont proposées des genres Nouveau Pseudorosellinia (P. emodensis) et Coniocessia (Coniocessia nodulisporioides) se réinstaller dans le but Xylariales. - Exclut le sexe Coniolaria ordre Coniochaetales, il est proposé le nouveau genre Novaxylaria se réinstaller dans le but Xylariales.

Auteur: ORTEGA FEBRERO NÉSTOR.
Année: 2005.
Université: LEÓN [www.unileon.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS Y AMBIENTALES.
Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGÍCAS Y AMBIENTALES.

Résumé: Ce rapport décrit le développement d'un système de mutagenèse "dirigée" stable transposicional utilisant le système formé par les tranposón Tan1 et de l'élément mobile Vader Aspergillus awamori ATCC 22342. Les deux forment un seul système, dans lequel Tan1 siégeant en fournissant transposasa mesure de mobiliser Vader. Cette caractéristique, ainsi que le projet d'opération du système décrit dans le brevet américain 5985570, ont été utilisées dans la préparation de la mutagenèse système décrit dans le présent rapport. De cette opération, on a observé toutes les constructions décrites dans le présent rapport, d'abord par le biais d'un "double" de transposition dans lequel les éléments «Vader» et Tan1 être inclus dans deux plasmides. Dans le processus, elles emploient résistance fleomicina première et higromicina plus tard. La fonctionnalité de ce système a été démontrée effectuer interruption du gène pyrG au Niger et A. A dans le gène et A. Nidulans. Plus tard, avec le vecteur pIRFN a été menée l'élaboration d'un système transposicional "unique" avec l'utilisation de gènes de résistance-sible fleomicina comme le seul marqueur de sélection. Par cette construction, ont été obtenus gène mutant wA dans A. Nidulans. Hph le gène conférant une résistance à higromicina B est utilisé dans la construction du vecteur pHVFN qui a élaboré avec des plasmides pHVT2-Ry pHVT2-F. Avec ces constructions, a été l'interruption du gène tan1, évitant ainsi l'élément Vader continuer transponiéndose incontrôlable et la stabilisation de génotype mutant obtenu que les souches fongiques utilisées dans les transformations ont déjà découvert l'absence de tranposones décrites dans le présent rapport. Par conséquent, il a été en mesure d'obtenir un système de mutagenèse fonctionnel et stable avec les éléments décrits dans le genre Aspergillus, atteignant ainsi l'objectif principal est proposée dans le présent rapport. L'expression du gène tan1, tout en n'étant pas élevé, si elle est maintenue constante par la suite d'établir un modèle terme (au moins pour l'intervalle de temps mis à l'essai) et d'être transcrits à partir de leur taille. Ce mode d'expression a également été observé lorsque le gène est exprimé tan1 promoteur du gène gpdA A. Nidulans. Dans les deux cas, ce schéma d'expression semble être suffisant pour atteindre l'interruption par un seul gène transformation, le pourcentage variant de mutants obtenus à partir de 9% de façon homologue (A. niger), à 3,2, 2,7% ou 5,1% dans un hétérologue ( A. nidulans). Comme projets d'avenir, le but est de vérifier et d'étudier la faisabilité de ce système transposicional dans d'autres espèces du genre Aspergillus champignon Acremonium extérieur tels que chrysogenum, Trichoderma harzianum, Penicillum chrysogenum ou Penicillum roquefortti dans laquelle elle n'a trouvé aucune forme native de transposons décrites . C'est sans doute ce qui nécessitera la construction de nouveaux bâtiments dans lesquels le gène tan1 s'exprime apartir lui-même promoteur de l'espèce en question, bien que, dans un premier temps, est destiné à démontrer la viabilité du système en utilisant des constructions telles que vecteur pIRFN.

Auteur: GÓMEZ LÓPEZ ALICIA.
Année: 2005.
Université: COMPLUTENSE DE MADRID [www.ucm.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE FARMACIA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE FARMACIA.

Résumé: Ce document décrit l'élaboration et la normalisation de deux techniques pour la quantification des composants fongiques comme des alternatives aux méthodes traditionnelles de détermination de l'infection fongique, compter viable ou la détermination du poids sec du mycélium, et son application aux études de sensibilité aux antifongiques. Les molécules de chitine, un polymère de N-acétyl-D-glucosamine présent sur le mur, et de l'ergostérol, composante spécifique de la membrane des champignons, peuvent être quantifiés grâce à des techniques chromatographiques espectrofotométricas ou in vitro et dans des échantillons de tissus et de montrer une corrélation positive avec La masse de mycélium. Par conséquent, les techniques pourraient être utilisées pour mener des études de sensibilité avec plusieurs espèces de champignons. Les résultats montrent une fiabilité pour chacune de ces techniques sont supérieures à la référence de méthodes utilisées jusqu'ici, toutefois, en raison de sa complexité, il ne semble pas susceptible d'avoir un rôle de première ligne de soins, mais pourraient être utilisés dans des études de recherche, qui remplace les courbes Conventionnel ou colonie de mort comme méthode d'évaluation de la réponse au traitement dans les modèles animaux de l'infection.

Auteur: ABRUSCI BERNAL CONCEPCIÓN.
Année: 2005.
Université: COMPLUTENSE DE MADRID [www.ucm.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Résumé: Au travail pour l'étude de la biodégradation des matériaux constitutifs de films réalisés par des bactéries et des champignons "ont isolé les micro-organismes, bactéries et champignons, dans des échantillons de films provenant des archives de Barcelone, Madrid et Gran Canaria. Ces échantillons ont été fournis par l'espagnol Cinémathèque suivant un protocole établi. Nous avons isolé et identifié 14 souches de bactéries du genre Staphylococcus (5 espèces), et de Bacillus (5 espèces), Sphyngomonas, Kokuria et Pasteurella et, le 17 souches de champignons filamenteux et levdura, Aspergillus (4 especies9. Penicillium (7 espèces) Et Alternaria, Cladosporium, Mucor, Phoma et Trichoderma. Viscosimétrias grâce à des mesures, a mené une étude de la biodégradation de la gélatine photographique dissous par les bactéries gelatinasa positif, la mise en ordre de l'efficacité de la biodégradation à 37, 30, 20 et 4Â ° C génère seulement Quatre bactérie Bacillus ont été efficaces dans l'échelle de temps de trois mois. Toutefois, tous les champignons biodegradaron gélatine, 25Â ° C en heures et 4Â ° C en quelques semaines. Ont également été étudiées et la gélatine émulsions photographiques à l'état solide, grâce à des techniques Quimioluminiscencia (QL) et Induite par Laser spectroscopy of Fragmentation (LIBS), avec la dernière technique a été identifié métaux présents dans la composition stratigraphique du film. Émission du QL augmente considérablement échantillons biodegradas due à l'oxydation des matériaux qui produisent des espèces réactives de l'oxygène (ROS), fondé en metalismo Microbienne. Enfin, par des mesures indirectes d'impédance et de l'évaluation de CO2, a été étudié la biodégradation des émulsions photographiques et options (triacétate de cellulose, polietilén téréphtalate, additifs), les bactéries et les champignons identifiés dans ce travail. A été en mesure d'établir un ordre de l'efficacité de Biodégradation des micro-organismes.

Auteur: CALERO RUEDA OLGA.
Année: 2005.
Université: COMPLUTENSE DE MADRID [www.ucm.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.
Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.

Résumé: Cet article décrit un nouveau esteasa fongiques cultures produites dans le liquide champignon Ophiostoma piceae. Les préparations enzymatiques négociés jusqu'ici, même si elles sont efficaces de contrôle biologique de la hauteur dans les conifères ne pas produire de bons résultats dans les bois de feuillus. Ce fait a incité la recherche d'une enzyme capable de décomposer les composés impliqués dans la formation de dépôts dans ces usines. Des études préliminaires ont montré l'activité enzymatique du champignon O.piceae sur les esters de p-nitrophénol et oleato de colesterilo. Ce dernier a été choisi comme modèle d'esters de stérols présents dans le bois amovible Eucalyptus globulus, principalement en Espagne types utilisés pour la fabrication de la pâte. Au départ, plusieurs activités enzymatiques ont été étudiés en utilisant un moyen de référence contenant du glucose comme source de carbone et de l'huile d'olive comme inducteur. Dans ces conditions, purifié et caractérisé une seule enzyme. Il a montré une grande affinité sur les triglycérides et les esters de stérols. La dégradation de ces mélanges complexes de composés, présents dans l'industrie des pâtes et papiers amovible de différentes espèces de plantes, a démontré le potentiel d'application de l'estérase dans le contrôle biologique de la hauteur en feuillus et de conifères. La détermination de l'extrémité N-terminale des protéines et peptides interne, le résultat de l'hydrolyse de même, a contribué à obtenir une sonde spécifique de l'ADN. Ainsi, il a été en mesure d'effectuer le séquençage du gène esteasa de O.piceae. La comparaison avec les gènes d'autres estérases montré l'homologie d'environ 40% avec codifier les lipases Candida rugosa et Geotrichum candidum. A partir de ces études, ils ont pu identifier les déchets impliquées dans la catalyse de l'enzyme. Le modèle structurel de l'estérase, construit à partir des structures cristalográficas de lipases CRL1 et CRL3 de C.rugosa autorisés à couvrir l'enzyme de la famille des alpha / beta hidrolasas et d'identifier quelques-uns des acides aminés responsables de leur spécificité de substrat.

Auteur: ALCOVER DÍAZ FCO. JAVIER.
Année: 2005.
Université: PAÍS VASCO [www.ehu.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE FARMACIA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE FARMACIA DE VITORIA (UPV-EHU).

Résumé: La poussière et les acariens Dermatophagoides pteronyssinus Dermatophagoides farinae, ainsi que les espèces de champignon Alternaria alternata, Aspergillus fumigatus, Cladosporium herbarum et Openicillim notatum, sont les principaux agents biologiques associés à l'apparition et / ou l'aggravation des maladies allergiques dans l'environnement domestique habituel dans génétiquement Les personnes vulnérables. En raison de l'important problème médical, ainsi que le changement apparent de la qualité de vie des individus atopiques que ces agents de cause, il met en évidence la nécessité d'un système qui, idéalement avec un composé simple, supprimer, dans tous les allergènes charge de l'intérieur, ces agents , Et n'est pas toxique pour les humains et les animaux de compagnie. Avec ces considérations, les objectifs de cette étude étaient les suivants: pour étudier l'effet fongicide et acaricide trois huiles essentielles: l'arbre à thé, de citron et de persil. Sélectionnez un composé simple, soit une combinaison d'autre agent pour utilisation comme domestiques acaricida-fungicida.

Auteur: RODRÍGUEZ SÁNCHEZ ENRIQUE.
Année: 2005.
Université: COMPLUTENSE DE MADRID [www.ucm.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.
Lieu de préparation: FCULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.

Résumé: La pourriture blanche champignons sont un groupe intéressant avec beaucoup de potentiel de la biotechnologie des organismes en raison de leur capacité de dégrader les polymères lignine et les composés aromatiques structurellement apparentées. Ce potentiel est basée principalement dans le système extracellulaire impliquée dans la dégradation de la lignine, qui est composé de différents types d'enzymes (peroxidases et oxidasas extracellulaire) et de composés à faible masse moléculaire. Ce travail a été réalisé l'étude de la capacité de la pourriture blanche champignons du genre Pleurotus pour transformer et mineralizar aromatiques 2,4-diclorofenol, composés organochlorés naturels phénoliques et le benzo (a) pyrène, hydrocarbures aromatiques policíclico Nature non phénoliques. Ces composés aromatiques sont associés à des problèmes de pollution dans les écosystèmes terrestres. Les résultats présentés dans cette thèse montrent que les champignons du genre Pleurotus sont capables de trans-former et mineralizar ces composés, ce qui confirme son potentiel d'application dans les stratégies de bioremédiation. Des études antérieures ont montré un doute sur l'implication de ligninoliticas enzymes de dégradation de ce type de polluants de l'environnement par des champignons du genre Pleurotus. Cependant, des études in vitro réalisées dans cette thèse avec des enzymes ligninolíticas laccase peroxydase et polyvalent purifié du champignon Pleurotus eryngii, ainsi que la détection de ces activités durant le processus de transformation dans la culture, ce qui suggère leur implication dans la dégradation de 2,4 - diclorfenol et le benzo ( A) pyrène et de confirmer les résultats obtenus avec d'autres basidiomicetos de la pourriture blanche. Enfin, il a mené une approche moléculaire à l'étude des activités ligninolíticas sécrétée par le champignon P.eryngii. À cet égard ont été identifiés, clonés et secuenciando deux nouveaux gènes dans ce champignon laques. En complément de l'caracterizaicón moléculaire a décrit les modèles structurels de enzximas codées par ces gènes. Enfin, il a développé un système d'expression hétérologue de l'un de ces gènes, aportándose de nouvelles données sur la caractérisation biochimique et cinétique de l'enzyme exprimé, ainsi que d'un outil dans l'étude des propriétés catalytiques de lacasas.

Auteur: GÓMEZ TORIBIO VÍCTOR.
Année: 2005.
Université: COMPLUTENSE DE MADRID [www.ucm.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.
Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.

Résumé: La pourriture blanche champignons sont un intéressant groupe d'organismes avec une grande capacité de dégrader la lignine. Ce polymère aromatique est très hétérogène et, avec la cellulose et les hémicelluloses, les parois cellulaires du bois. Pendant les deux dernières décennies ont été recensées de nombreuses enzymes impliqués dans cette dégradation, les deux oxidasas et fenoloxidaas extracellulaires et intracellulaires reductasas. Toutefois, en raison de la structure compacte de la lignine, sont composés de faible poids moléculaire qui commencent ligninolisis. Parmi eux, les radicaux libres d'oxygène sont un groupe de composés hautement oxydant capable de réagir avec la lignine et / ou de ses produits despolimerización. Pleurotus eryngii est capable de produire de telles travers des cycles aromatiques redoz des aldéhydes et quinones. Ce travail de recherche est étudié en détail la constitution, par P.eryngii des espèces réactives de l'oxygène par le biais des cycles d'oxydoréduction quinones dérivés de la lignine, en accordant une attention particulière pour les enzymes impliquées dans le processus, les synergies qui se produisent entre ces éléments peuvent favoriser ce mécanisme et La possibilité que ce processus peut être généré dans d'autres champignons de pourriture blanche. Tout d'abord, il a détecté la production d'espèces réactives de l'oxygène par oxydation metoxihidroquinonas par des enzymes ligninolíticas de P.eryngii, laccase peroxydase ou polyvalent. Ce mécanisme se compose d'monovalent hidroquionas par oxydation de l'enzyme, ou Mn3 +, suivie par autooxidación découlant de semiquinonas avec pour conséquence la production de radicaux O2, et dismutación eux, H2O2. Il a été démontré qu'il existe un lien direct entre le nombre de groupes metoxilo remplaçant le hidroquinonas, de l'efficacité de celle-ci par les enzymes d'oxydation et autooxidación de semiquinonas. Il a aussi été démontré pour la première fois, la production de radicaux OH dans les réactions d'oxydation metoxihidroquinonas par ces enzymes, menée en présence de complexes Fe3 +-EDTA. La génération de radical OH est faite de la réaction de Fenton a conduit la plupart du temps par semiquinona radicale et, dans une moindre mesure, par des radicaux O2. Essais avec P.eryngii ont montré que le champignon produit extracelularmente, continue et linéaire radicale O2, H2O2 et radicaux OH grâce à la "oxydoréduction cyclisme" trois benzoquinonas dérivés de la lignine et naphtoquinone. Les trois étapes de base de ce mécanisme, ce qui conduit principalement à la production de radicaux O2, sont les suivantes: 1-Réduction de la intracellulaire quinones hidroquinonas à travers une quinone réductase. 2, extracellulaire-oxydation des hidroquinonas à semiquinonas par des enzymes ligninolíticas. 3-Autooxidación de semiquinonas. Il a été démontré que, alors les radicaux O2 généré dans la réaction de ceux-ci sont transformés en H2O2 de trois manières différentes: dismutación, réduites de quelque hidroquinonas que la dérivée de ménadione, et à la réduction de Mn2 +, avec pour conséquence la production de l'agent ligninolítico Mn3 +. Enfin, la production de radicaux OH exige une action FE3 + comme catalyseur. Il a été constaté que la réduction de cet ion est non seulement impliqué radicaux semiquinona et O2, mais aussi une enzyme associée à la mycélium du champignon. Ce mécanisme cyclique d'activation de l'oxygène se caractérise par une exploitation soutenue pendant plusieurs heures, en présentant dans son ensemble faible spécificité de substrat et d'être plus efficaces en termes de production d'H2O2, le «cycle du redox aldéhydes aromatiques. La production d'espèces réactives de l'oxygène par P.eryngii en cycles d'oxydoréduction quinones peut être renforcée par la promotion de l'oxydation des hidroquinonas, et que cette réaction est de limiter les cycles d'incubation sous conditions étudiées. Nous avons atteint des niveaux plus élevés en augmentant la quantité de laccase incubation du mélange en ajoutant Mn2 +, qui catalyse l'oxydation des hidroquinonas superoxyde et de la remplacer par l'EDTA, utilisé comme un chélateur artificiel Fe3 + 8, ác 631 ido oxalique, qui s'oxyde directement complexes À hidroquinonas. La production d'acide oxalique par P.eryngii a aussi été démontré pour la première fois. De même, la stimulation de la production de H2O2 dans P.eryngii voie "du vélo d'oxydoréduction aldéhydes aromatiques, elle augmente la production de radicaux OH au cours des cycles d'oxydoréduction quinones. L'action simultanée des cycles des deux types de composés montre que toutes les enzymes impliquées (laccase, peroxydase polyvalent, arille-oxydase alcool, aldéhyde réductase et quinone réductase) peut coopérer à la génération d'espèces réactives de l'oxygène extracellulaire. Enfin, la démonstration de l'existence de l ' "oxydoréduction cyclisme de quinones dans d'autres champignons de pourriture blanche, en plus de P.eryngii, pointant à l'examen en tant que mécanisme général de extracellulaire de la production d'espèces réactives de l'oxygène dans ces micro-organismes.

Auteur: JURADO GARCÍA-POSADA MIGUEL.
Année: 2005.
Université: COMPLUTENSE DE MADRID [www.ucm.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE BIOLÓGICAS.

Résumé: La contamination des céréales par des champignons produisant des toxines est un problème qui produit des pertes dans l'agriculture, l'élevage, d'affecter la santé des animaux, et constitue un problème de santé publique, comme les céréales partie de l'alimentation humaine de base. Le diagnostic de l'espèce fungícas impliqués est une exigence de base pour le contrôle de ce problème. Cette thèse a mis au point une méthode d'identification spécifique, à travers la mise en œuvre de la technique PCR, les principales espèces produisant des toxines de Fusarium dans les céréales: F.graminearu, F.culmorum, F.poae, F.sporotrichioides F. Equiseti et F.proliferatum. Il a également mis au point un protocole qui permet ainsi d'intégrer le diagnostic en utilisant l'ADN extrait de matériel végétal directement, sans la nécessité préalable de l'isolement du champignon. Les amorces ont été conçues à partir de la copie de plusieurs séquences du génome, ce qui accroît la sensibilité de l'essai à l'égard de la seule copie de séquences, comme cela a été démontré. Cette thèse a mené une vaste étude épidémiologique dans le blé, l'orge et le maïs de différentes origines en Espagne, ainsi que des échantillons de importés pour la distribution et la fréquence des principales espèces de Fusarium dans les céréales. Il a également été tenu de la présence d'autres espèces de champignons qui produisent des mycotoxines. Les espèces de Fusarium plus important dans le blé espagnol étaient F.graminearum F.culmorum F.sambucinum et F.equiseti et, dans le cas du maïs F.verticillioides et F.proliferatum. D'autres espèces si important dans l'orge et le blé espagnol étaient P.purpurogenum, Altemaria altermata et A.niger var.niger. Nous avons mené des études de la variabilité génétique dans les isolats fongiques obtenues grâce à l'analyse du gène allongement facteur, qui ont montré une plus grande variabilité dans F.equiseti, suivie par F.avenaceum, F.graminearum et F.sambucinum. Dans le cas de F.verticillioides et F.proliferatum a construit une phylogénie incluant des isolats de différents hôtes et origines géographiques mondiales. Les résultats de ces essais nous permettent de conclure que F.proiferatum est plus variable F.verticilioides, et probablement présente un degré d'adaptation à différents hôtes. En outre, il a mis au point et évalué une méthode permettant de déterminer en temps réel par RT-PCR l'expression des gènes fum1 dans F.proliferatum liées à la biosynthèse des fumonisines, un groupe de mycotoxines cancérigènes activité, qui a permis une évaluation en moins de temps À l'traditionnellement utilisée, la production de cette toxine dans les différents isolats, ce qui dénote une grande variabilité intraspécifique. Les résultats obtenus dans cette thèse fournit une information utile pour la mise en oeuvre de mesures de contrôle encaminadosas à réduire la présence de mycotoxines dans les céréales.

Auteur: MURCIA FLORES LAURA.
Année: 2006.
Université: MURCIA [www.um.es].
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE BIOLOGIA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE BIOLOGIA.

Résumé: Mucor circinelloides est un champignon filamenteux qui a plusieurs réponses à la lumière bleue, y compris l'induction de la biosynthèse des carotènes. Le gène crgA, un gène induit par la lumière, agit comme un régulateur négatif de la carotenogénesis dans ce champignon, comme la suppression complète de ce gène dans la souche sauvage conduit à une sobreacumulación carotènes dans champignons frayer en termes de lumière et de ténèbres. L'effet répresseur de crgA sur la biosynthèse des carotènes est effectuée par le contrôle de l'expression des gènes carotenogénicos structurelles. La comparaison entre la séquence d'acides aminés de CrgA avec séquences stockées dans les bases de données suggère que la traduction de CrgA pourrait commencer dans un codon GUG situé 201 pb en amont du codon d'AOU initialement proposé comme point de départ pour la traduction de crgA. Pour déterminer si cette codon d'GUG est à l'origine de CrgA avoir été causé par mutagenèse dirigée, le remplacement AOU les codons GUG et située à l'extrémité 5 'crgA. Ces allèles mutants ont été utilisés pour transformer la course nul à crgA, et l'effet de ces allèles sur carotenogénesis comparaison avec causés après l'introduction de l'allèle sauvage. Les résultats ont confirmé que codon GUG est le codon d'début de la traduction crgA. La séquence d'acides aminés déduite du gène crgA montre structurelles importantes régions différentes: un domaine RING - doigt un signal de localisation nucléaire, et s'étend sur une riche glutaminas domaine isoprenilación. Le domaine RING - doigt et la première tranche de poliglutaminas sont essentielles pour la régulation de la synthèse des carotènes par CrgA sur M. Circinelloides. Toutefois, la démonstration que la traduction de la protéine CrgA commence au codon GUG a confirmé la présence d'un domaine RING - doigt en outre, a récemment identifié un domaine LON. Afin de caractériser le rôle de carotenogénesis de nouveaux domaines identifiés par mutagenèse dirigée allèles mutants ont été obtenus de crgA modifié résidus conservés dans ces moyens et ces allèles ont été utilisés pour transformer les mutants nuls pour crgA. Les résultats ont montré que les deux domaines sont essentiels pour le bon fonctionnement de CrgA comme régulateur de carotenogénesis. Elle a également procédé à l'étude des protéines CrgA, grâce à la production d'anticorps polyclonaux spécifiquement dirigés contre la protéine CrgA. Nos résultats indiquent que cette protéine s'accumule principalement à la lumière, en dépit de l'exercice de sa fonction réglementaire du carotenogénesis dans l'obscurité. De même, il a été démontré que CrgA subit des changements après la traduccionales, étant présents dans le mycélium comme N - glicosilada. En outre, les niveaux de la protéine CrgA sur M. Circinelloides sont extrêmement faibles. Faibles niveaux de CrgA ne sont pas dus uniquement à l'utilisation d'une initiation codon d'vraisemblablement inefficaces, comme le remplacement du codon d'GUG par le codon d'AOU ne produit pas une augmentation significative du montant de CrgA. L'analyse de la stabilité et de compléter les versions tronquées de CrgA dans la levure suggère que la protéine est instable et cette instabilité est médiatisée par la présence d'au moins le premier domaine - RING doigt. Aussi, cette analyse donne à penser que l'instabilité est associée à la dégradation dans le protéasome de levure. Les caractéristiques structurelles de la protéine CrgA suggèrent que appartient à la famille des ligasas de ubiquitina E3, et qui pourrait réguler carotenogénesis en se liant aux protéines impliquées dans la réponse à la lumière, à son ubiquitinación et la dégradation ultérieure dans le protéasome. Afin d'identifier ces protéines, nous avons utilisé la levure de deux hybrides, isolé plusieurs gènes codant des protéines de M. Circinell 8 oides qu'on 57b et d'interagir avec CrgA. Parmi les protéines identifiées est un homologue de la kinase nucléosidiques diphopshate impliqués dans la réponse à la lumière dans N. Crassa. Le gène isolé est nommé ndkA. Pour confirmer l'interaction des protéines CrgA et NdkA tests ont été réalisés in vitro de protéines chalutage. Nos résultats indiquent que CrgA interagit avec NdkA, suggérant qu'il pourrait réglementer la fonction de cette protéine impliquée dans la réponse à la lumière dans N. Crassa. En outre, CrgA agissant comme un promoteur pour l'expression de NdkA, comme l'absence de CrgA conduit à une baisse des niveaux de messager et de protéines ndkA. Ce résultat montre que CrgA peut agir comme un activateur de gènes et d'autres comme répresseur.