CRYPTOSPORIDIUM DANS LES MOLLUSQUES BIVALVESAuteur:
GÓMEZ COUSO HIPÓLITO.
Année: 2005.
Université:
SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE FARMACIA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE FARMACIA.
Résumé: ETUDE DE LA POLLUTION NATURELLES Au cours de la période comprise entre octobre 2000 et septembre 2001, a enquêté sur la présence et la viabilité des oocystes de Cryptosoporidium spp., Dans 241 échantillons de mollusques bivalves destinés à la consommation humaine fournies par l'Unité de contrôle des mollusques institut d'aquaculture de l'Université de Santiago De Compostela. Grâce à une technique de PDI, qui a rejoint la coloration vitale fluorogénico iodure propidio ont été observés oocystes Cryptosporidium spp. Dans 83 échantillons (34,4% de la pollution). De ce nombre, 44 (53,0%) contenaient potentiellement viables oocystes. Vu l'origine des échantillons, la contamination a été détectée dans 69 des 203 échantillons prélevés sur la côte galleo (34,0% et 49,3% de la pollution de faisabilité ooquística) et dans 14 des 38 échantillons provenant d'autres pays de l'Union européenne (36,8% et 71,4 % De la pollution de faisabilité ooquística). Il a constaté l'absence de corrélation (2, p = 0,20) entre la pollution Cryptosporidium spp., Et le processus de purification à laquelle ils ont été soumis certains des échantillons (de un à plus de 14 jours). De même, il y avait une association significative (2, P = 0,85) entre les niveaux de contamination microbiologique et la contamination par Cryptosporidium spp., Détectés dans les mollusques bivalves analysés. Préalablement à la caractérisation moléculaire de la isolés Cryptosoporidium spp. A confirmé l'absence d'inhibiteurs de la technique PCR de l'ADN extrait de coquillages contaminés par de l'ADN et cryptosporidial. De plus, en utilisant 49 échantillons de mollusques bivalves choisis au hasard à partir de la 241 analysés précédemment, une association significative a été trouvée (test exact de Fisher, P = 0019) entre les résultats obtenus par les techniques de PCR et PDI. La combinaison des techniques de RFLP, clonage, séquençage de l'ADN pour déterminer l'existence d'C.parvum et C.hominis, espèce actuellement considérée comme responsable de la majorité des infections humaines. L'étude effectuée sur des échantillons de l'eau (7 rivières, les eaux usées traitées, 16 et 11 eaux d'égout non traitées) et 184 échantillons biologiques (moules M.galloprovincialis) collectés dans les estuaires 4 (Rias Baixas), les grandes zones de production de mollusques bivalves et de l'intérêt du tourisme, a montré un Large contamination de l'environnement par le Cryptosporidium et Giardia. PDI par la technique, il a été constaté la présence des oocystes de Cryptosporidium spp. Dans 5 échantillons d'eau de la rivière (71,4%), 8 eaux usées traitées (50,0%), 7 effluents bruts (63, 6%) et 42 échantillons biologiques (22,87%). De même, on a détecté des kystes de Giardia sp. Dans 6 échantillons de rivière (85,7%), 14 eaux traitées (84,5%), 10 les eaux usées brutes (90,9%) et 77 échantillons de moules (41,8%). Il y avait une grande variabilité entre les valeurs quantitatives pour les deux parasites et trouvé une prévalence de Giardia sp. Vs. Cryptosporidium spp. Non seulement dans le type d'échantillon analysé, mais aussi dans les concentrations détectées, sauf dans les échantillons biologiques que Cryptosporidium spp. Introduit des valeurs plus élevées de la concentration. Elle a montré une augmentation de la pollution tant enteroparásitos pousse les niveaux de contamination bactérienne, à la fois dans l'échantillon biologique dans la superficie cultivée. Toutefois, seulement trouvé une association statistiquement significative avec la présence de kystes de Giardia sp. (Test exact de Fisher, P = 0026, 2, P = 0008). La caractérisation moléculaire de la isolés Cryptosporidium spp. Dans les échantillons environnementaux et biologiques, a contribué à identifier le type C.muris comme polluant dans les trois échantillons de purifier les eaux usées: C.bailey dans un échantillon d'eaux usées brutes et delas C. parvum dans tous les échantillons biologiques sont positives par la technique de PCR (n = 26). ÉTUDE PILOTE D'UNE CONTAMINATION études de la pollution pilote a eu lieu dans les locaux de l'institut d'aquaculture de l'Université de Saint-Jacques de Compostelle pour la culture ym 8 antenimi 105b nt des mollusques bivalves. Nous avons utilisé des semences de deux espèces, O.edulis et T.decussatus, avec une taille de lave de 5-7 mm (environ 8 mois) qui ont été fournis par le Center for Cultures Mariños Ribadeo (Lugo) et le Centre d'expérimentation en aquaculture De Couso (A Coruna), appartenant au réseau des Centres de recherche Mariña du Ministère de la Pêche et des Affaires maritimes du gouvernement régional galicien. Les graines ont été maintenues au cours des études de réservoir de 60 litres avec la mer, à une température constante de 15 +-3Â ° C avec aération et contrôlées. La nourriture se composait d'un mélange composé également par cinq espèces de microalgues et de la pollution pilote a été menée avec différents isolats cooquistes purifié de C.parvum. Nous avons évalué la survie des oocystes de C.parvum capturé par les deux espèces de mollusques bivalves, comprobadose une forte diminution de la viabilité ooquística pendant les quatre premiers jours de l'étude (97% vs 30%). Depuis le jour quatre et jusqu'au 10 après-pollution, la perte de viabilité ooquística a été progressive, pour atteindre la dernière journée de l'épreuve des valeurs de 12% et 18% paralos oocystes retenu par les huîtres et les palourdes graines, respectivement. Inoculation intragástrica de sédiments provenant de semences de palourdes et d'huîtres, le jour 10 post-contaminación deux portées de souris nouveau-né Swiss CD-1, a montré que tous les animaux infectés ont été inoculés à sept jours après l'inoculation. De même, on a constaté le maintien de l'infectivité ooquística à 31 jours post-contamination. Par examens histologiques ont été étudiés transit des oocystes C.parvum des semences à travers la palourde T.decussatus. Au cours de l'essai de 10 jours, a été considéré oocystes dans l'intestin: de 24 heures ont été mesurées sur 10 oocystes 40x Champ microscopique et à plusieurs reprises au cours de l'expérience n'a été observée entre 5 et 10 oocystes (jours 2,4, 6,7 et 10 après-contaminación ). Les branchies ont également été décelées oocystes, à partir de 2 jusqu'à 8 jours post-contamination à la suite et toujours dans un certain nombre ne dépassant pas 5 oocystes 40x Champ microscopique. Dans ce tissu, les oocystes sont situés dans des espaces interfilamentarse que dans la muqueuse branchiale. Dans une moindre moyenne, les oocystes de C.parvum ont été retrouvés dans l'estomac, en utilisant des siphons et dans le hépatopancréas. À aucun moment de l'étude a été observé par les techniques utilisées, que le parasite sont internalisés par les cellules du mollusque, en conservant les oocystes libre ou mélangé avec du contenu de l'estomac et / ou branchiale épithélium intestinal sans passer à travers et / ou gastro-intestinaux. En outre, la libération de recouvrement des oocystes C.parvum de morts et vivants graines et leur capture par les graines d'une nature différente. Lorsque nous avons étudié la transmission des oocystes coexistant entre espèces vivantes, il a été observé chez les espèces bénéficiant d'une diminution du nombre de parasites et de maintenir la viabilité oocystes dans sa viabilité dans le genre de mollusque de réception jusqu'à sa disparition avant la fin de l'étude. Ayant constaté que les mollusques bivalves représentent une source potentielle d'infection humaine par le Cryptosporidium et les moules cuites à la vapeur est un plat typique, dans certains pays, enfin étudié, sur une base pilote, si ce mode de cuisson inactive les formes infectantes du parasite. Les résultats obtenus chez les souris nouveau-nés ont montré que l'utilisation de la vapeur n'est pas complètement éliminer la capacité des oocystes infectieux de C.parvum
