BIOTECHNOLOGIE

Auteur: SERRA HARTMANN XAVIER.
Année: 2004.
Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS.
Lieu de préparation: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Résumé: L'herpèsvirus bovin de type 1 (BoHV - 1) est un alphaherpesvirus qui est considérée comme la plus importante de l'agent étiologique de la boîte de bovins maladie respiratoire responsable de la hausse des pertes économiques dans l'industrie de l'élevage. La vaccination contre BoHV - 1, mais réduit l'infection et les signes cliniques dérivés, n'empêche pas après l'infection par le BoHV - 1 Pet. En conséquence, ces animaux pourraient devenir un foyer de l'infection latente. Contrôle BoHV - 1 passe par le développement de programmes d'éradication de sérologiques basées sur l'identification et l'abattage des animaux infectés. Dans la mise en œuvre de ces programmes sont administrés les vaccins marqueurs defectivas dans un ou plusieurs gènes qui produisent une réponse immunitaire différente de celle qui survient après l'infection par le BoHV - 1 pds. Ensemble, est actuellement testée différentiel test sérologique qui détecte la présence d'anticorps dirigés contre l'/ l glycoprotéine / absents l / s dans le vaccin marqueur chez les animaux infectés par le BoHV - 1 pds. Notre groupe de recherche a effectué le développement d'un vaccin vivant contre marqueur BoHV - 1 défectueux dans glicoproteían E (gE) (BoHV - 1 gE). Parallèlement à la construction de BoHV - 1 gE, s'est adressé à l'expression de recombinantes d'Escherichia coli de gE du BoHV - 1. L'expression de gE était nécessaire à la fois pour la dernière caractérisation du virus defectivo que pour le futur développement d'un test sérologique qui pemitiera différenciation entre les animaux vaccinés avec le virus BoHV - 1 gE et les animaux infectés par des souches BoHV - 1, il est toxique à E . Coli. Dans cette thèse, il a été déterminé que la séquence d'acides aminés de TRAPP gE du BoHV - 1 est responsable de la toxicité associée à l'expression du domaine extracellulaire de la glycoprotéine dans E.coli. La suppression partielle de TRAPP est condition suffisante pour le retour à la normale de croissance des cultures et de l'accumulation de la protéine exprimée. Il a été constaté également que la séquence TRAPP également toxique lorsqu'il est exprimé en protéines natives intégrées E.coli. La toxicité de TRAPP est due à la nature même de la séquence, et pas de réponse à un codon d'utilisation des étrangers à la E.coli ni à l'activation des princpales protéases de la bactérie. En outre, la toxicité delà séquence TRAPP corrélée à l'absence de cette séquence codant pour le polypeptide E.coli eux-mêmes. TRAPP la détermination a mené à l'identification de nombreux autres peptides, aussi peu entre ces protéines E.coli, et d'examiner la pertinence de ce fait possible, à l'expression heterológa protéines dans la bactérie. Aussi, par le biais de techniques de recombinaison homologue, qui a obtenu une souche de BoHV - 1 défectueux pour la séquence RAPPR de gE (BoHV - 1 RAPPR -). Nos résultats indiquent que la séquence TRAPP n'est pas indispensable pour le rôle de gE, c'est-à-dire la transmission directe entre les cellules BoHV - 1. Substitution delà séquence RAPPR, au contraire, elle engendre une petite modification de la configuration des prétendus virus de l'interaction avec les composants de la membrane cellulaire et la matrice extracellulaire. Enfin, dans ce travail expérimental et a également obtenu un panel d'anticorps monoclonaux contre gE du BoHV - 1 pour une utilisation dans un test sérologique différentiel de l'application conjointe de la vaccination avec BoHV - 1 gE. L'épreuve de conception, un test ELISA de blocage est sensible et spécifique pour la détection des anticorps contre 8 l'gE de 333 l BoHV - 1, et montre promesse comme une tentative de s'attaquer à l'élaboration d'un essai définitive.

Auteur: BETANCOR DUTRENIT LORENA.
Année: 2004.
Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS.
Lieu de préparation: INSTITUTO DE CATÁLISIS , CSIC..

Résumé: Le oxidasas ont un grand intérêt de la biotechnologie car ils sont capables de catalyser l'oxydation très spécifique de composés organiques légères sous conditions de réaction et l'utilisation de l'oxygène moléculaire comme agent oxydant. Cependant, ces enzymes sont instables parce qu'ils auraient à subir l'inactivation par dissociation des sous-unités, les distorsions de sa structure tridimensionnelle, la dissociation des cofacteurs ou modification chimique causée par le peroxyde d'hydrogène produit comme un sous-produit de la réaction d'oxydation. Le principal objectif de cette thèse est l'optimisation de biotransformations catalysées par oxidasas en préparant dérivés immobilisé hautement stabilisé. Pour atteindre cet objectif, nous avons essayé deux stratégies complémentaires: immobilisation covalente multipuntual et multisubunidades (pour éviter les distorsions de l'enzyme molécule ou dissociation des sous-unités) et coinmovilización de oxidas comme avec catalasas à éliminer in situ, le peroxyde d'hydrogène formé. Le biotrasnformaciones étudiés étaient les suivants: la préparation de l'acide cetoadipiI7 - aminocefalosporanico. De Cefalosporina C, en utilisant une préparation de D - aminoácido oxydase et la catalase coinmovilizadas, à la préparation d'acide glucónico utilisant un dérivé de glucose oxydase et la catalase coinmovilizadas et préparer fructooligosacátidos du saccharose utilisant un fructosiltransferasa (FST) immobilisé dans la présence de glucose oxydase est nécessaire pour supprimer Le glucose formé comme un sous-produit de la réaction, car cela a une efeto inhibiteur sur le TSF. Elle a produit une vaste gamme de produits dérivés immobilisés de catalasas d'origines différentes (bovins foie (BLC), Aspergillus niger, Micrococcus Iysodeikticus et Thermus thermophilus) à l'aide de différentes stratégies physico-chimiques. Dans tous les cas, ces enzymes stabilisé par immobilisation (avec des facteurs de stabilisation de 13, 30, 3 et 50 fois plus stable que les enzymes solubles. Adjonction, le DAAO de Trigonopsis Varié et de glucose oxidas à Aspergillus niger également immobilisé et stabilisé par adsorption de mère aminadas Puis intersection avec glutaraldéhyde. Immobilisé préparation de DAAO est 6800 fois plus stables que les enzymes solubles tandis que le facteur de stabilisation a atteint de GOX (une enzyme très robuste) a 96 en ce qui concerne les enzymes solubles. Avait aussi préparé un dérivé FST stabilisée et optimisée par À l'adsorption mère aminadas et ultérieures intersection avec glutaraldéhyde. Chaque biotransforrflaciones étudié, testé l'efficacité du couplage oxydase / la catalase par des stratégies différentes: par la disparition d'un produit composé de peroxyde d'hydrogène (comme dans le cas de préparation d'acide cetoadipil 7 - aminocefalosporanico), Disparition d'un effet inhibiteur du glucose sur l'action de la FST dans la préparation de la Fructoologosacáridos, par la capacité de GOX à oxyder complètement une solution de glucose 100 mM de qu'en l'absence de la catalase n'a pas été possible étant donné l'inactivation par le peroxyde subi par la GOX.

Auteur: CARRASCO CABEZAS BEGOÑA.
Année: 2004.
Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
Lieu de l'exposition: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGIA.
Lieu de préparation: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGIA.

Résumé: Characterization phase de l'après-guerre dans la recombinaison homologue Bacillus subtilis en. La recombinaison homologue est le processus par lequel le matériel génétique étant échangé entre les molécules d'ADN dont l'homologie de séquence montre. Les coupes dans le double chaîne de l'ADN dans des bactéries, principalement par recombinaison homologue de réparation alors qu'il joue un rôle mineur dans eucaryotes sont réparés par les homologues non syndiqués extrêmes. Dans ce processus, il est possible d'identifier trois phases: avant sinapsis, où il est traité pour générer l'ADN substrat ADNcs sur lesquels filamenta protéine RecA; les synapses, où RecA produit de la recherche d'homologie et de l'échange de chaînes et d'après sinapsis où est Les migrations de chaînes et de la formation et de la disposition des structures formées Holliday. In Bacillus subtilis, les gènes impliqués dans diverses recombinaison de recA ont été classés dans des groupes epistáticos: (recF, recL, recO, recR, recN) (addA addB) (recP, recH) (recU ruvA, ruvB, recD) (recS, recQ , RecJ) et (recG) avec différents susceptibilité aux agents qui endommagent l'ADN et le gène recA en place le centre relié à tous les groupes de codifier les plus importantes protéines dans la recombinaison. Les gènes inclus dans les groupes epistáticos et codent pour des protéines impliquées dans la phase préalable sináptica de recombinaison tandis que ceux codés par les gènes et les groupes impliqués dans l'après-guerre. During normal growth in the mutant genes classified into groups epistáticos and problems in the segregation of chromosomes with a 3-7% of cells anucleadas, large numbers of cells with nucleoides condensates and long spaces cytoplasm free DNA . Le complexe RuvAB avec helicasa RecG effectuer la migration de la fourche de réplication des dommages survenus à établir des structures et Holliday protéines RecU a été caractérisée dans la présente étude comme resolvasa découpe ces structures. On pense que, en l'absence de traitement des protéines intermédiaires formés lors du processus de résolution des structures de recombinaison Holliday est orientée vers la formation de molécules recombinantes (dimères de chromosomes dans la circulaire), ou bien, il ya cette résolution et les chromosomes sont regroupés. Nous avons isolé suppresseur de ces mutations que l'on trouve dans les gènes sms et subA. La protéine a Sms homologie avec RecA et Lon protéases mais il n'a pas encore été caractérisée. La protéine SubA n'a pas d'homologue dans E. Coli et de fonction jusqu'alors inconnue. En l'absence de gènes sms et subA est partiellement supprimé le phénotype de la réparation et de la ségrégation observée dans des groupes et des mutants. Sms protéines et SubA pourraient participer à la stabilisation des intermédiaires ramifiées produites au cours de la recombinaison. En l'absence de la protéine RecA supprimé défaut ségrégation, mais pas supprimé défaut de réparation de l'ADN de la mutante recU1 et recG. RecA effectue l'invasion de chaînes qui, en l'absence de cette protéine n'est pas formé Holliday structures qui sont le substrat RecU et RecG et de la résolution n'est pas dirigée vers la formation d'dímeros.En B. Subtilis il n'ya aucune séquence homologue de la protéine RuvC E . Coli et inconnus analogique conduite de la résolution des structures de Holliday. Il a été caractérisé protéines RecU comme reswolvasa majorité des structures de Holliday B. Subtilis. RecU lie la chaîne d'ADN simples (ADNcs) et la double chaîne (ADNcd) dans un processus indépendant dépendant de l'ATP et de magnésium. En outre lie plus efficacement les structures ramifiées de trois et de quatre branches (structures de Holliday) construit par hybridation des oligonucléotides et de l'efficacité de l'union diminue 40 fois dans le cas des fourches de réplication synthétique. RecU court ces est 8 tructura 33d s de Holliday dans une séquence déterminée, mais n'est pas capable de couper l'ADN linéaire ou superenrollado ce site reconnaissance. La coupe arrive à la même position dans les chaînes avec la même polarité.

Auteur: LOPEZ COBOLLO ROSA MARIA.
Année: 2005.
Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE CIENCIAS.
Lieu de préparation: FACULTAD DE CIENCIAS.

Résumé: Les plantes réagissent différemment aux basses températures. Une telle réaction est le processus d'acclimatation aux basses températures, qui est un processus d'adaptation qui permet d'améliorer ou de développer une plus grande tolérance à la congélation après déjà être soumis à des températures basses. Ce processus adaptatif, appelé acclimatation à basse température est très complexe et implique de nombreux changements physiologiques et biochimiques, pour la plupart contrôlés par des changements dans l'expression des gènes. On ne sait pas encore bien que les plantes perçoivent la baisse des températures plus basses et ce signal est transmis au lieu de la réponse adaptative. D'où l'importance d'identifier et de caractériser de nouveaux intermédiaires dans la réponse aux basses températures. Dans notre laboratoire isolé un ensemble de gènes dont l'expression est augmentée par une exposition à 4Â ° C à de faibles niveaux dans la plante modèle Arabidopsis thaliana. L'un d'eux, RCI1A, encode une protéine de la famille de 14-3-3, qui ont été impliqués dans la régulation de nombreux processus biologiques. Une autre d'entre eux, RCI5, encode une famille de monooxygénase FMO, qui n'est pas au courant de toutes les fonctions liées à la tolérance au stress chez les plantes. Dans cette thèse nous faisons face à une compréhension plus approfondie de ces deux gènes participation au processus d'acclimatation aux basses températures. Dans notre laboratoire a été décrit RCI1A augmente leur expression en réponse à basse température tout en maintenant reste encourageant. Encoder l'isoforme? La famille de la protéine 14-3-3. Dans cette thèse, tout d'abord, nous effectuons une fusion traducional entre promoteur RCI1A et dénonciateur GUS gène, qui nous a permis de démontrer que l'expression de ce gène provient des états très précoce de développement et dans toutes les instances internationales, de plus en plus seulement en réponse à froid , Et qui est réglementée au niveau transcriptionnel. D'examiner le rôle de RCI1A en réponse aux basses températures aislamos un mutant zéro en exprimant RCI1A. Cette mutante, rci1a - 1, qui présente une petite raison d'une petite cellule, et qui s'épanouit tôt ce qui concerne le génotype sauvage suggère que RCI1A a un rôle important dans le contrôle de la taille de cellule et le moment de la floraison d'Arabidopsis. Dans le même temps, il est plus tolérant à l'égard de gel sous contrôle tant que l'acclimatation. L'analyse moléculaire des mutants a montré que RCI1A réglemente partie de l'expression des gènes qui est activée en réponse aux basses températures, spécialement modulée négativement l'expression de CBF1 et CBF3. Depuis ce gène n'est pas réglementé par l'ABA ou facteurs CBFs, est un bon outil pour chercher des intermédiaires sur la voie de signalisation médiée par les basses températures. Par conséquent, nous avons isolé et caractérisé 7 mutants affectés dans exprimant RCI1A en réponse à 4Â ° C (drx). Ces résultats suggèrent que pourraient correspondre aux points de connexion en réponse à diverses liées au stress réponse acclimatation. En esta tesis hemos aussi Le caracterizado la expresión génica de RCI5, désactivez nuevo génération de Arabidopsis, inductible por temperaturas BAJAS y estrés salino. Une analyse détaillée de son discours, en fusionnant traducional promoteur RCI5 avec le gène GUS informateur, s'est révélée être préférentiellement induit dans les tissus vasculaires des feuilles et des fleurs en réponse à la fois le stress. RCI5 encode une protéine de la famille FMO. Dans le poisson a été identifié FMOs sont impliqués dans la synthèse de TMAO, un puissant osmoprotector. Par la purification de la protéine nous avons constaté que RCI5 est monooxygénase in vitro de la fonction. Et les plantes transgéniques sobreexpresando gènes nous ont permis de démontrer que RCI5 aussi est fonctionnel in vivo de. Les plantes 35S:: RCI5 preuve d'une plus grande tolérance à la congélation, à la fois sous le contrôle de l'acclimatation, et en réponse à sel de stress, ce qui implique une fonction de RCI5 en réponse à la fois le stress. RCI5 régule positivement 8 expr 458 esión des gènes qui font partie de regulón CBF/DREB1 et gènes impliqués dans l'élimination des ROS. Nous avons démontré l'existence de TMAO dans Arabidopsis, et que les niveaux de cette molécule s'accumuler en réponse à 4Â ° C et NaCl. Les résultats obtenus dans cette thèse ont démontré que le TMAO, est due en partie au moins à RCI5, et qui est une nouvelle molécule de signalisation qui active le gène d'expression qui est induite en réponse à basse température et la salinité de stress.

Auteur: Guinea Gutiérrez Bárbara.
Année: 2005.
Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
Lieu de l'exposition: Centro Nacional de Biotecnología.
Lieu de préparation: Centro Nacional de Biotecnología.

Résumé: PKL12 est une Ser / Thr kinases qui se trouve principalement dans le appareil de Golgi. Cependant, après traitements médicamenteux, comme brefeldina Ay nocodazol, PKL12 est trasloca le noyau. Dans ce compartiment subcellulaire PKL12 servant de sa propre autonomie transcription et la collaboration en tant que facteur de gène VEGF. Il semble que son activité kinase est indépendante de sa capacité de translocation vers le noyau. Aussi PKL12 est en mesure de coopérer avec les oncogènes comme v- Src et sa surexpression dans la cellule NIH/3T3 rend plus capable de former des poches de la transformation. En outre, nous avons isolé une nouvelle protéine, inmunorelacionada avec PKL12, que nous avons appelée comme PKL12 - grand frère (PKL12 - BB) et est sobreexpresada en tumeur lignes que CMT, ainsi que la leucémie infantile et carciomas adultes humains. Enfin, nous avons généré des modèles murins pour l'étude de la fonction biologique de PKL12 In vivo.

Auteur: Punzón Gau Ma. Isabel.
Année: 2005.
Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
Lieu de l'exposition: Centro Nacional de Biotecnología.
Lieu de préparation: Centro Nacional de Biotecnología.

Résumé: Conception d'une méthode de transgenèse subzonal embryon utilisant les vecteurs lentivirales en pure souche de souris C57BL / 6. Caractérisation de souris transgéniques ainsi que la ségrégation des lentivirus. Utilisant la technique d'obtention de souris transgéniques immunodéficience NOD / scid comme un modèle de xénogreffes humaines / morino, et exprimant biologiquement actives protéine humaine.

Auteur: Mateos Gil Álvaro.
Année: 2005.
Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
Lieu de l'exposition: Facultad de Ciencias.
Lieu de préparation: Príncipe Felipe.

Résumé: Dans cette thèse intitulée "Etude et supervisé l'application de méthodes d'analyse de l'expression des gènes modèles" a mené une étude sur l'application de méthodes d'apprentissage supervisé pour l'analyse des données de l'expression des gènes au niveau génomique. Les modes d'expression des gènes sont obtenus par la technique de microdamiers et sont constitués d'expression des valeurs de la plupart ou la totalité des gènes d'un génome au niveau de la transcription. Les méthodes d'apprentissage sont supervisées une série de techniques dans le domaine de l'apprentissage statistique et de l'intelligence artificielle. Grâce à ces méthodes peuvent être classées ensemble de données. La caractéristique essentielle de ces méthodes est définie à l'aide des informations de manière indépendante les données elles-mêmes, d'où le nom "contrôlé". Généralement, ces informations peuvent être appartenant à différentes classes des différents éléments présents dans l'ensemble de données. Grâce à un processus d'apprentissage par l'exemple dont la classe est connue, ce type de fonctions décisionnelles selon des méthodes qui peuvent être utilisées pour la classification des éléments de la classe inconnue. Dans cette thèse ont étudié les méthodes d'apprentissage et supervisé perceptrón perceptrón multicouche (deux types connus de réseau de neurones) et les machines à vecteur support (SVM). Le cas échéant, le combiné perceptrón et SVM avec une méthode appelée sans regroupement SOTA, afin de réduire la dimensionnalité des données d'origine. Application de méthodes supervisées énumérés données de l'expression des gènes, a effectué une étude de la fonction génique prévision de la levure Saccharomyces cerevisiae. Il a également été appliquée à la prévision de la classe phénotypique des échantillons de tumeur et sain. Enfin, il a utilisé une méthode de regroupement supervisé binational, appelé "algorithme de signature" pour l'étude de la structure modulaire de la transcription dans différents cancers.

Auteur: ESTRUCH LORENDEAU MARIA ILONA.
Année: 2005.
Université: AUTÓNOMA DE MADRID.
Lieu de l'exposition: INST. DE CERAM.Y VIDRIO, CSIC..
Lieu de préparation: INST. DE CATAL. Y PETROL. CSIC,.

Résumé: Pénicilline G acylase (CPA) catalyse le clivage du lien amide dans le benzylpenicillin (pénicilline G) chaîne latérale pour produire l'acide phénylacétique et 6 aminopenicillanic acide, la matière première pour la synthèse de plusieurs semi-synthétique antibiotiques. Cette enzyme peut également être utilisée pour catalyser la réaction inverse de semi synthèse des à lactamines antibiotiques. PGA de Escherichia coli est la plus largement utilisée et la synthèse d'enzymes hydrolytiques. Cette acylase est utilisé comme dérivé immobilisé sur de solides soutiens en vue d'assurer une bonne activité de la stabilité des propriétés dans des conditions d'exploitation. Toutefois, il a été signalé que les différents dérivés de la PGA immobilisé peuvent présenter différentes propriétés catalytiques. L'objectif principal de cette thèse Thèse est la préparation de produits dérivés immobilisé natifs et recombinants PGA synthétiques avec de bonnes propriétés pour le cinétiquement contrôlée synthèse d'un précurseur de Cephamandole. Cet objectif a été porté par trois sous-secteurs principaux objectifs: a. - Evaluation des propriétés de synthèse des différents produits dérivés du natif PGA. Différents produits dérivés a été établi a. - Avec différents orientation de l'enzyme sur l'appui, par les moyens -ba soutient avec différentes propriétés physiques, ch - en bloquant l'appui (après l'immobilisation de l'enzyme) avec différents ligands de petite taille. Ces produits dérivés ont été évalués quant à un paramètre essentiel dans la synthèse enzymatique: le rapport entre l'activité de synthèse et d'hydrolyse de l'immobilisation des enzymes. B. En utilisant un recombinante - PGA (Lys avec un certain nombre de groupes sur la face opposée à l'actif au centre), nous avons été en mesure d'immobiliser l'enzyme (par le biais de cette région) sur glyoxyl - d'agarose. Les propriétés de ces nouveaux dérivés synthétiques ont également été évaluées. C. - Une nouvelle mutante de la PGA a été conçu afin d'obtenir les meilleurs immobilisation et le meilleur synthétiques propriétés. Le cap du gène de E. coli ATCC 11105 a été gène mutant par PCR à ses 3 'fin, ce qui correspond à la fin de l'à chaîne. La surproduction de l'enzyme de recombinaison de clonage a été obtenu par le gène mutant cap gène dans le pET101/D-TOPO vecteur d'expression. Après la purification, la mutante a été immobilisés et les propriétés catalytiques de la liberté et de l'enzyme immobilisée ont été comparés avec ceux de l'enzyme de natif, dans le cinétiquement contrôlée d'un intermédiaire de synthèse de Cefamandol. L'introduction de cette nouvelle balise immobilisation améliore l'efficacité ainsi que les propriétés catalytiques de l'immobilisation des enzymes. En particulier, l'immobilisation des enzymes synthétiques muté propriétés montré beaucoup mieux que le natif de l'enzyme catalytique et maintenu son efficacité même après immobilisation.

Auteur: Vidal Conde Luis.
Année: 2005.
Université: AUTÓNOMA DE BARCELONA.
Lieu de l'exposition: Escuela Técnica Superior de Ingeniería (ETSE).
Lieu de préparation: Ingeniería Química.

Résumé: Utilisation aldolasas biocatalyseurs pour la formation de liens avec estereoquímica défini CC dépend essentiellement de la découverte de nouveaux aldolaas et de la capacité de disponerlas sur le marché pour pouvoir desmostrar pouvoir dans la synthèse de sintones chirale Ce document est une contribution au domaine de la synthèse asymétrique Basée sur l'utilisation d'enzymes par le clonage de nouveaux aldolasas naturelles, et le développement de procédés pour obtenir aldolasas recombinant dépendants DHAP, de la glycine et l'acétaldéhyde pour utilisation dans la synthèse de composés complexes avec deux nouveaux centres chiraux de estereoquímica définies et complémentaires. Enzymes objectif de ce travail sont les quatre aldolasas dépendants DHAP (ramnulosa 1-fosfato aldolasa, fuculosa 1-fosfato aldolasa, le fructose 1,6 bifosfato aldolasa, tagatosa 1,6 bifosfato aldolasa), deux aldolasas dépendant de glycine (threonine aldolasas) et aldolasas dépendants acétaldéhyde (desoxiribosa 1 - Fosfato aldolasa). Plus précisément, ce travail se résume en cinq points fondamentaux: Premièrement, nous avons cloné sept aldolasas procaryotes microbiennes provenant de diverses sources, essentiellement E. Coli, dans une plate-forme homogène, ce qui permet simple et polyvalent surexpression d'enzymes intracellulaires solubles comme la protéine de fusion à un Histidinas file d'attente. Deuxièmement, il a mis au point une stratégie globale pour la purification de donner le produit fonctionnel dans un nombre minimum de mesures à haute performance et de stabilité. Troisièmement, nous avons au point des méthodes pour la détermination des activités spécifiques aldolásicas tests basés sur espectrofotométricos enzymatique basée sur la réaction avec le substrat naturel de chacun. Quatrièmement, le système a été choisie pour produire ramnulosa 1-fosfato aldolasa (RhuA) comme un modèle pour la définition d'un processus reproductible à l'échelle de production, l'optimisation de base conditionné surexpression de protéines recombinantes dans E. coli. Cinquièmement, il a travaillé sur l'élaboration d'une stratégie pour la culture semi nécessaires à l'obtention de cellules haute densité de plantes, d'optimiser les critères pour l'induction de l'expression de la protéine recombinante pour maximiser la production et la productivité RhuA. Enfin, en utilisant les techniques de la biologie moléculaire, a travaillé sur l'amélioration de la plate-forme d'expression de renoncer à l'utilisation d'antibiotiques comme marqueurs de sélection, toujours penser à son application à l'échelle industrielle. Concrètement, il a desarrolado un plasmide d'une complémentation auxotrofía glycine pour permettre la croissance d'une bactérie E. Coli mutant médias identifiés sans l'utilisation d'antibiotiques. Ce nouveau système permettra à l'avenir de plus en plus pour concevoir des stratégies plus économiques pour la production de protéines recombinantes à un plus faible impact sur l'environnement

Auteur: ESNAOLA CAMPOS URKO.
Année: 2005.
Université: PAÍS VASCO.
Lieu de l'exposition: FACULTAD DE INFORMÁTICA.
Lieu de préparation: FACULTAD DE INFORMÁTICA.

Résumé: Cette thèse présente une nouvelle manière de l'interaction personne-machine, machine-machine basée sur un langage musical qui a été appelé «la langue musicale MiReLa '. Ces langues peuvent être générés par la plupart des instruments de musique, les téléphones portables et les assistants numériques personnels. Il peut être silvado. Il a fait un effort particulier à la conception d'un langage de ses phrases musicales sont faciles à être silvadas. Cette thèse présente également le réexamen d'une architecture distribuée qui permet d'intégrer facilement les différents aspects à prendre en considération dans le fonctionnement d'un robot mobile. Il a été nommé 'Association des Agents ». Il propose un moyen de créer des réseaux d'agents. Chaque agent ajoute de nouvelles capacités pour le robot. Cela utilise les capacités des acteurs déjà ajouté avant dans la mise en œuvre du réseau. La communication entre les joueurs est simple.

Auteur: Mir Llorente Mònica.
Année: 2006.
Université: ROVIRA I VIRGILI.
Lieu de l'exposition: Escuela Técnica Superior de Ingeniería Química.
Lieu de préparation: Escuela Técnica Superior de Ingeniería Química.

Résumé: Le travail effectué dans cette thèse décrit le développement de nouvelles plates-formes de biocapteurs électrochimiques pour obtenir des systèmes qui facilitent la détection d'un analyte, si nous avions besoin d'un pré-marquage de cet avoir soit d'ajouter les réactifs pour la détection. Cette plate-forme biosensórica aussi permettre la détection d'un large éventail d'analytes dans la même équipe, à faible coût. Pour éviter le marquage des échantillons d'ADN sont l'élaboration d'un système de circulation. Cette méthode d'auto-branding est basé sur le déplacement de molécules oligonucléotides muté et le marquage, qui, bien que contenant des mutations est capable de hibridar avec la sonde de reconnaissance immobilisé dans le biocapteur, j'ai donc quand elle est dans la présence de l'analyte raison que la sonde a une Plus grande affinité pour l'analyte que la molécule muté, l'analyte déplace oligonucléotide muté et marquage diminuyendo bien biocapteur signal, qui est proportionnelle à la concentration de l'analyte. Il a également effectué des différentes stratégies à développer un biocapteur électrochimique fondée sur les oligonucléotides (aptámeros) pour la détection de la protéine sans l'accord préalable de ce marquage analyte. Obtenir un système générique de gestion fondée sur les oligonucléotides, qui permet de détecter les acides nucléiques et des protéines. Elle a montré cinq configurations à base de biocapteurs électrochimiques aptámeros pour détecter la thrombine pas cochée.